宫颈癌组织及外周血耐药相关基因的表达及其相关性研究

目的 :探讨宫颈癌组织及外周血多药耐药MDR1基因、多药耐药相关蛋白MRP的表达及其相关性。方法 :逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 36例宫颈癌组织及外周血MDR1mRNA、MRPmR NA。结果 :宫颈癌组织及外周血MDR1的阳性表达率分别为 61 1%、5 8 3% ,两者之间明显相关 (rs′ =0 5 97,P <0 0 1)。而MRP的阳性表达率分别为 66 7%、77 8% ,两者之间无相关性。宫颈癌组织中MDR1和MRP的表达存在正相关 (rs′ =0 5 2 4 ,P <0 0 5 )。两者在低分化宫颈癌中阳性率均高于中、高分化者 (P <0 0 5 )。结论 :宫颈癌组织中MDR1和MRP的共表达可提示预后不良 ,外周血MDR1阳性可间接反应癌组织对化疗药物的耐受。     

人肿瘤坏死因子α逆转原发性肝癌耐药性体内外实验研究

目的:探讨外源性人肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝癌耐药细胞的逆转作用及对原位种植耐药动物模型抑瘤效应。方法:不同方法检测转染TNF-α后耐药细胞耐药指数及细胞对罗丹明潴留率和细胞P-gp蛋白的变化;建立耐药动物模型,计算肿瘤抑制率及检测肿植瘤的耐药蛋白表达和肝癌细胞凋亡指数的变化。结果:MTT结果显示,TNF-α耐药逆转率范围为21·3%~92·2%,其中对ADM、MMC和5-FU在逆转前后差异有统计学意义,P=0·0343;罗丹明(Rho123)试验显示,转染细胞内Rho123的积累明显增加,逆转前后细胞内荧光强度3h后达到高峰为2·47倍,差异有统计学意义,P=0·0093。细胞免疫组化结果显示,转染后细胞内P-gp蛋白表达量明显下降,吸光度值TNF组为(10·6±4·6)%,与ADM组(97·9±7·4)%相比,差异有统计学意义,P=0·0383。与亲本细胞HepG2组(8·6±2·3)%相比,差异无统计学意义,P=0·0573。体内试验显示,转染TNF-α基因的肝癌细胞种植的肿瘤生长明显减慢,移植瘤的体积和质量抑制率在转染TNF-α基因组(TNF组)分别为58%和57%,明显高于耐药细胞组(ADM组)的14%和18%,P=0·0287,接近于亲本细胞系HepG2种植肿瘤的57%和54%,P=0·0652。同时,Westernblot测定P-gp蛋白表达显示,转染组为(0·12±0·03)%,较耐药组的(0·95±0·26)%显著下降,P=0·0287;TUNEL法检测细胞凋亡指数,TNF组为21·9±2·1,与ADM组2·3±1·8相比,差异有统计学意义,P=0·0087;与HepG2组的23·7±2·9相比,差异无统计学意义,P=0·0587。结论:外源性TNF-α基因能在mRNA和蛋白水平有效逆转肝癌耐药细胞的耐药性,增加耐药肝癌细胞对化疗的敏感性,降低耐药性肝癌的致瘤性。     

MDRI基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测多药耐药基因MDR1 mRNA在卵巢癌组织中的表达及其临床应用价值。方法 选择卵巢癌组织30例、卵巢良性肿瘤组织30例、正常卵巢组织30例。采用RP－PCR复合定量技术检测卵巢癌组织中的耐药相关基因MDR1 mRNA的表达水平及分析其表达与临床化疗的相关性。结果 正常卵巢组织不表达MDR1基因;卵巢良性肿瘤组织MDR1基因表达率为10．0％;卵巢癌组织表达率为73．3％,其中高表达率占77．3％。卵巢癌组织中MDR1基因表达与卵巢良性肿瘤的比较,有非常显著性差异（P＜0．01）。卵巢癌术前化疗组MDR1基因表达率为83．3％;术前末化疗组MDR1基因表达率为58．3％,2组比较无显著性差异（P＞0．05）。定量分析表明化疗可以诱导MDR1基因表达水平增高,与非化疗组比较有非常显著性差异（P＜0．01）。结论 MDR1基因表达与卵巢癌有关。MDR1表达与卵巢癌化疗与否无关,但化疗可诱导MDR1基因表达水平增高。因此检测MDR1基因表达水平的变化可以预测继发耐药性。在判断卵巢癌临床用药时,检测MDR1耐药相关基因的表达情况可得到一定的耐药信息,对临床化疗方案的制定有较大的应用价值。     

胃癌中MGMT和EGFR表达及其意义

目的：探讨胃癌组织中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O^6-methylguanine—DNA—methyltransferase,MGMT）和表皮生长因子受体蛋白（epidermal growth factor receptor,EGFR）的表达情况及其临床意义。方法：采用SP免疫组织化学染色法检测69例胃癌标本中MGMT和EGFR的表达。结果：胃癌组织中MGMT和EGFR阳性率分别为52．17％（36／69）和59．42％（41／69）。MGMT和EGFR在淋巴结转移组阳性率明显高于无淋巴结转移组,差异显著（P〈0．05）。癌细胞浸润深组EGFR表达增高,癌细胞分化程度低组MGMT表达增高。MGMT和EGFR的表达存在低度正相关性（r=0．2723）。结论：检测MGMT和EGFR的表达对判断胃癌患者预后及制定相应的化疗方案有指导意义。     

胃癌中MGMT和EGFR表达及其意义

目的:探讨胃癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)和表皮生长因子受体蛋白(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达情况及其临床意义.方法:采用SP免疫组织化学染色法检测69例胃癌标本中MGMT和EGFR的表达.结果:胃癌组织中MGMT和EGFR阳性率分别为52.17%(36/69)和59.42%(41/69).MGMT和EGFR在淋巴结转移组阳性率明显高于无淋巴结转移组,差异显著(P＜0.05).癌细胞浸润深组EGFR表达增高,癌细胞分化程度低组MGMT表达增高.MGMT和EGFR的表达存在低度正相关性(r=0.2723).结论:检测MGMT和EGFR的表达对判断胃癌患者预后及制定相应的化疗方案有指导意义.     

肾盂输尿管癌MDR1、MRP、LRP基因的表达

目的探讨多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(MRP)和肺耐药蛋白基因(LRP)mRNA在肾孟输尿管癌中的表达及与临床、病理的关系.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测MDR1、MRP、LRP在40例肾盂输尿管癌组织及31例正常对照组织中的表达.结果病例组中MDR1表达的阳性率(37.5%)、表达水平(0.589±0.293),均高于对照组(分别为16.1%、0.346±0.125)(P＜0.05);LRP表达的阳性率(55.0%)、表达水平(0.750±0.318),均低于对照组(分别为77.4%、1.160±0.326)(P＜0.05);MRP的表达与对照组相比,差异无显著性(P＞0.05).MDR1在高分级肿瘤中表达升高(P＜0.05),LRP在高分级肿瘤中表达降低(P＜0.05).MDR1、MRP、LRP在肿瘤不同分期及生长方式之间,表达差异无显著性(P＞0.05).三种基因表达无相关性(P＞0.05).结论MDRi、MRP、LRP mRNA在原发性肾盂输尿管癌中均有表达,其中MDR1是高分级肿瘤的主要耐药指标,LRP可能在低分级的肿瘤中发挥更多的耐药作用.     

DNA修复基因MGMT表达不足与胃癌细胞增殖的关系

目的探讨DNA修复基因O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O^6-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT）异常表达与胃癌细胞增殖的关系及其临床意义。方法采用免疫组织化学PV系列二步法检测80例人胃癌组织和12例正常胃黏膜组织中MGMT和PCNA的蛋白表达。结果MGMT蛋白在胃癌中的阳性率为：52．50％，与正常胃黏膜组织中的阳性率（91．67％）相比，显著降低（P=0．012）。MGMT的蛋白表达与胃癌病人的分化程度（P=0．001）、TNM分期（P=0．023）以及淋巴结转移（P=0.001）均密切相关。在80例人胃癌组织中，MGMT和PCNA蛋白表达之间呈显著负相关（P=0．015，r=0．283）。结论MGMT的表达不足促进了胃癌细胞的增殖。     

肺癌患者MDR1和MRP基因共同表达的研究

目的检测60例肺癌组织,10例正常肺组织中MDR4和MRP基因表达水平与临床化疗疗效的关系.方法采用RT-PCR方法.结果MDR1检出率:正常肺组织10%(1/10),肺癌组织30%(18/60),其中,鳞癌6.7%(4/60),腺癌20%(12/60),大细胞癌3.3%(2/60);MRP检出率:正常肺组织0%(0/10),肺癌组织73.3%(44/60),SCLC3.3%(2/60),鳞癌36.7%(22/60),腺癌26.7%(16/60),大细胞癌6.7%(4/60).MDR1和MRP基因虽过度表达,二者并无显著相关性(P＞0.05),且与病理分型及TNM分期均无明显相关性(P＞0.05);肿瘤组织与正常组织的MRP基因表达具有极显著性差异(P＜0.05),但MRP的表达与既往化疗无关,术前化疗组MDR1基因表达75%(6/8),略高于未经化疗组23%(12/52),虽无统计学意义(P＞0.005),但MDR1似有增高趋势;联合检测MDR1和MRP基因表达,能提高体外耐药敏感性符合率(83%).结论(1)肺癌MDR1是多种耐药机制共同作用的结果;(2)MRP基因表达似有分布规律:鳞癌＞腺癌＞大细胞癌＞SCLC;MDR1则为腺癌＞鳞癌＞大细胞癌＞SCLC;(3)MDR1可能与获得性耐药有关,而MRP却与自然耐药性有关;(4)联合检测MDR1和MRP基因表达,能更准确地预测化疗效果,为临床化疗方案的个体化设计提供理论依据.     

热效应对SGC7901/ADM细胞株耐药基因表达影响及生物学意义的研究

目的:了解热效应对胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM各种多药耐药基因的影响。方法:RT-PCR法检测在不同温度下,对不同药物组的人胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM和对照的人胃癌敏感细胞株SGC7901中多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)的mRNA表达。结果:胃癌敏感细胞株SGC7901未检出MDR1、MRP和LRP基因的mRNA,而胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM中MDR1增加的倍数最多,MRP次之,LRP无表达。高温43℃下,药物多柔比星(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、紫杉醇(TAX)和顺铂(DDP)组MDR1mRNA表达水平分别下降0.19(P=0.000 1)、0.13(P=0.012 1)、0.15(P=0.000 4)和0.12(P=0.000 4),与未加温组相比差异有统计学意义,P<0.05。高温后5-FU、TAX组MRP的mRNA表达水平均降低0.04(P值分别为0.013 4和0.019 6),而ADM、DDP组差异无统计学意义,P值分别为0.633 5和0.664 1。结论:高温的短期处理对MDR mRNA的表达有明显的抑制作用,对MRP则为部分抑制作用,LRP无表达。     

三维培养药敏实验测定的胃癌药物敏感性与多药耐药基因蛋白表达的关系

背景与目的：目前胃癌化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对药物的敏感性来指导临床治疗,以提高疗效,早已成为化疗界瞩目的问题。本研究通过三维培养药敏实验测定胃癌的药物敏感性,并通过测定多药耐药基因表达产物水平,分析两者之间的关系。方法：应用三维培养体外药敏实验技术,测定表阿霉素、顺铂、草酸铂、5-FU、泰素帝、伊立替康6种单药和5-FU＋表阿霉素＋顺铂、5-FU＋伊立替康、5-FU＋草酸铂、5-FU＋泰素帝＋顺铂4组联合用药对22例胃癌组织的抑制率,并计算敏感率;应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化法检测胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2基因蛋白的表达。结果：单药组中5-FU对胃癌组织的抑制率和敏感率最高,分别为29．8％和50．0％：联合用药组抑制率最高为5-FU＋泰素帝＋顺铂（59．8％）,敏感率最高为5-FU＋表阿霉素＋顺铂（77．3％）;联合用药组抑制率和敏感率均高于单药组（P〈0．05）。胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2 mRNA的阳性率分别为90．9％、54．5％、77．3％,MDR1、MRP1、ABCG2蛋白的阳性率分别为36．4％、54．5％、36．4％;多药耐药蛋白高表达与胃癌对表阿霉素的耐药有相关性（P〈0．05）。结论：胃癌组织中多药耐药基因MDR1、MRP1、ABCG2蛋白高表达与胃癌组织对表阿霉素的耐药有关。提示这三种耐药基因可能参与介导表阿霉素的耐药。     

HSV1-tk基因在肿瘤报告基因显像与治疗中的研究进展

自杀基因疗法是一种有潜在临床应用价值的肿瘤治疗策略。HSV1-tk基因兼具治疗基因和报告基因的功能,可用于基因显像、基因治疗及其疗效监测。近年来,无创伤性的肿瘤HSV1-tk基因显像发展很快,核素标记的显像底物有FIAU、FMAU、FHBG和FHPG等,使用的显像设备有PET、SPECT或γ照相机等,这些显像方法具有不同的敏感性和特异性,但均能监测动物体内表达HSV1-tk肿瘤部位的增殖情况和治疗效果,更复杂的HSV1-tk报告基因显像方案正在探索中。HSV1-tk基因治疗联合靶向治疗、放射治疗、药物治疗、免疫生物治疗、热疗及其他基因治疗具有疗效相加或协同效应,增强了对肿瘤的杀伤作用。     

FHIT基因与肿瘤

脆性组氨酸三联体(FHIT)基因是一种定位于人类染色体3p14.2上的抑癌基因,在多种器官中都有表达,其包含的脆性位点FRA3B,是基因组中最脆弱的部分.FHIT可促进细胞凋亡,抑制细胞增殖和细胞癌变.FHIT基因高度甲基化、基因缺失、FRA3B脆性位点的改变以及蛋白合成过程中的异常,可导致FHIT基因功能缺失,促进多种肿瘤的发生与发展.将野生型FHIT导入FHIT表达降低或表达缺失的肿瘤细胞中可促进肿瘤细胞凋亡.FHIT基因与其他基因联合治疗可能为肿瘤的治疗提供新的方向.     

MICA基因与肿瘤

主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)位于人第6号染色体的主要组织相容性复合物Ⅰ (MHC-Ⅰ)类区域中,该基因包含6个外显子,编码的蛋白分子结构域与经典的Ⅰ类分子α链相似,包括3个胞外结构域:α1、α2和α3,以及跨膜区和胞质区,但不含β2微球蛋白.MICA表达于内皮细胞、上皮细胞以及大多数上皮性肿瘤细胞表面,参与多种肿瘤细胞的分化、增殖和浸润过程.可溶性MICA (sMICA)可以作为部分恶性肿瘤的预后预测因子.MICA基因在多种恶性肿瘤的发病机制中具有重要作用,可能为恶性肿瘤防治带来新的思路.     

同源异位基因与血管生成的研究

同源异位基因作为组织分化调节基因 ,其与血管生成的关系已从多方面进行了研究 ,如HOXD3、HOXB3、HOXD10、PRX、HEX等。就现阶段的研究情况对HOX基因与血管生成之间的关系予以综述。     

MAL基因与肿瘤

MAL基因是一个在T细胞分化中晚期表达的基因。许多研究表明MAL基因在食管癌、胃癌、结肠癌、头颈部鳞癌等多种肿瘤组织中表达下调或缺失，与肿瘤的发生发展过程有关。MAL基因要作为临床诊断、判断预后及指导治疗的指标而得到应用，还需要进一步研究。     

MAL基因与肿瘤

MAL基因是一个在T细胞分化中晚期表达的基因.许多研究表明MAL基因在食管癌、胃癌、结肠癌、头颈部鳞癌等多种肿瘤组织中表达下调或缺失,与肿瘤的发生发展过程有关.MAL基因要作为临床诊断、判断预后及指导治疗的指标而得到应用,还需要进一步研究.     

ATM基因与肿瘤的发生

共济失调 -毛细血管扩张症 (ataxia telangiectasia ,A T)是一种较罕见的遗传病 ,由共济失调 -毛细血管扩张突变基因 (ataxia telangiectasiamutatedgene ,ATM基因 )突变所致。研究证实A T患者与基因携带者存在对辐射引起的DNA双链断裂修复的缺陷 ,而出现基因组的不稳定性 ,表现为对辐射的高度敏感和肿瘤易发倾向 ,ATM已被认为是细胞对DNA损伤反应的中枢调控因子 ,对其的深入研究将揭示ATM与肿瘤发生的关系 ,为肿瘤的防治提供全新的视点与思路     

RET 基因与肿瘤

RET 基因与人类多种肿瘤的发生密切相关，是一种重要的癌基因。RET 相关肿瘤的发病机制主要是 RET 基因突变和野生型 RET 基因的异常表达。激活的 RET 蛋白通过多种信号通路参与不同肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭，影响肿瘤的发生发展。     

尾型同源盒基因与肿瘤

 尾型同源盒基因（CDX）家族主要包括CDX1、CDX2 、CDX4，是同源盒基因（HOX）Para HOX家族中的一员，作为转录调节因子在胚胎发育造血系统形成、肠上皮组织发育等过程中起了重要的作用。CDX异常表达常与肿瘤发生密切相关。研究CDX与肿瘤发生的关系，对肿瘤诊断、治疗等有重要意义。     

尾型同源盒基因与肿瘤

尾型同源盒基因（CDX）家族主要包括CDX1、CDX2、CDX4，是同源盒基因（HOX）Para-HOX家族中的一员，作为转录调节因子在胚胎发育造血系统形成、肠上皮组织发育等过程中起了重要的作用。CDX异常表达常与肿瘤发生密切相关。研究CDX与肿瘤发生的关系，对肿瘤诊断、治疗等有重要意义。