丁酸钠诱导BEL 7402人肝癌细胞恶性表型逆转的研究

该研究使用不同浓度丁酸钠处理BEL7402人肝癌细胞，结果发现丁酸钠能诱导人肝癌细胞恶性表型发生逆转，表现为细胞生长显著减慢、细胞分型指数和软琼脂集落形成率显著下降，逆转细胞的核质比例减少，形态近似正常细胞。其中2．5mmol／L，丁酸钠诱导BEL7402细胞恶性表型逆转最为明显，5mmol／L，以上则出现一定的毒性效应。     

AFP在肝细胞性肝癌手术前后对NK细胞活性的影响及意义

对３７例肝细胞性肝癌患者手术前、后ＮＫ细胞活性进行动态观察。结果表明，肝细胞性肝癌患者的ＮＫ细胞活性低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），ＡＦＰ阳性者低于ＡＦＰ阴性者（Ｐ＜０．０１）。术后他们的ＮＫ细胞活性进一步降低，且ＡＦＰ阳性者恢复较慢。提示ＡＦＰ对ＮＫ细胞活性有抑制作用，对肝细胞性肝癌患者（特别是ＡＦＰ阳性者），迅速提高术后机体ＮＫ细胞活性将有助于提高疗效。     

慢性乙型肝炎病人NK细胞细胞毒活性的研究

本文应用3H-TdR释放法检测22例慢性乙型肝炎病人外周血NK细胞细胞毒活性。并以24名正常人作对照。结果:慢活肝12例及慢迁肝10例的NK细胞毒活性(x±s),分别为48.1±20.9％及32.6±9.8％,和对照组23.1±19.5％比较,P值分别<0.002和<0.05。而慢活肝亦较慢迁肝组增高(P值<0.05)。上述结果提示,慢活肝和慢迁肝病人NK细胞活性均较正常人增高。而肝脏病变较重的慢活肝较病变较轻的慢迁肝增高。NK细胞活性和肝细胞损伤及损伤程度一致。NK细胞可能参与慢乙肝肝细胞的损伤机制。     

蛋白酶体抑制剂对人肝癌细胞BEL7402凋亡的影响

目的：探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对人肝癌细胞系BELT402体外增殖和凋亡的影响。方法：用MG-132处理体外培养的BEL7402细胞，采用MTT法测细胞的生长抑制率，Annexin V／PI法、电镜、DNA片段分析观察MG-132对细胞凋亡的诱导作用及比色法测半胱天冬酶cagpage-3活性的变化。结果：MG132可明显抑制BEL7402细胞体外增殖，随着MG132浓度的增加和处理时间延长，细胞凋亡率增加，电镜观察发现，经MG-132处理后的部分细胞具有凋亡细胞的典型形态特征，细胞DNA抽提电泳发现特征性凋亡梯状条带，caspase-3活性显著升高。结论：MD132可抑制人肝癌BEL7402细胞增殖并促进其凋亡。     

化疗对原发性肝癌患者NK细胞活性及血清sIL—2R含量的影响

对１１名健康人和１７例中、晚期原发性肝癌患者外周血自然杀伤细胞，ＩＬ－２活性及血清ｓＩＬ－２Ｒ含量进行测定。结果发现：肝癌患者ＮＫ细胞ＩＬ－２活性显著低于空，而ｓＩＬ－２Ｒ含量显著高于正常人。     

西咪替丁对过敏性紫癜NK细胞数量及其杀伤活性的影响

目的：测定西咪替丁对HSP患儿NK细胞数及杀伤活性的变化,探讨西咪替丁对天然免疫的调节作用。方法：用流式细胞技术检测外周血NK细胞数,用LDH改良释放法测NK杀伤活性。结果：在HSP患儿NK细胞数下降, 杀伤活性降低。西咪替丁治疗后NK细胞杀伤活性增加,而数量无改变。结论：西咪替丁能增加NK细胞的杀伤活性,而这种增强作用不是通过增加NK细胞数量,而是通过影响其周围微环境所致。     

化疗对原发性肝癌患者NK细胞活性及血清sIL－2R含量的影响

对１１名健康人和１７例中、晚期原发性肝癌患者外周血自然杀伤（ＮＫ）细胞，ＩＬ－２活性及牟清ｓＩＬ－２Ｒ含量进行测定。结果发现：肝癌患者ＮＫ细胞，ＩＬ－２活性显著低于正常人，而ｓＩＬ－２Ｒ含量显著高于正常人。化疗后第３天，患者ＮＫ细胞活性较化疗前进一步下降，１０天后回升；化疗有效者于化疗第１０天ｓＩＬ－２Ｒ含量较化疗前显著降低；在化疗前、后ＩＬ－２活性无变化。提示，肝癌患者ＮＫ细胞活性低下，化疗对ＮＫ细胞活性具有短暂的直接抑制作用，检测化疗前、后ｓＩＬ－２Ｒ的含量有利于对原发性肝癌患者疗效的判断。     

改良的MTT比色法测定NK细胞杀伤活性

目的：为提高ＭＴＴ比色法检测自然杀伤（ＮＫ）细胞活性的稳定性。方法：用改良的ＭＴＴ比色法对ＮＫ细胞的杀伤活性进行了测定,同时与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法相比较。结果：改良的ＭＴＴ法在保留了简单、敏感,可重复及安全等特性的同时,其稳定性大大提高。相关性研究表明,改良的ＭＴＴ法与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法具有高度的相关性（γ＞０９４）。结论：改良的ＭＴＴ比色法在免疫学、肿瘤学及临床研究方面极具实用价值,便于推广应用     

维甲酸改变人肝癌细胞表面N－糖链的结构及其酶学机制

用３Ｈ－甘露糖标记７７２１人肝癌细胞表面糖蛋白的Ｎ－糖链，经提取和去唾液酸后，用ＣｏｎＡ和ＤＳＡ亲和柱顺序层析将３Ｈ－标记的Ｎ－糖链分成４个类型和天线数不同的组分来研究维甲酸（ＲＡ）对细胞表面Ｎ－糖链的影响。结果：１０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理细胞３～５ｄ后，可使Ｃ２Ｃ２二天线复杂型Ｎ－糖链增加，而高甘露糖型及三、四天线，特别是带有Ｃ２，６分支结构的复杂型Ｈ－糖链减少。用ＬＣＡ亲和柱还证明二天线糖链中的核心岩藻糖也减少。进一步发现上述改变的酶学机制是ＲＡ降低Ｎ－乙酰氨基萄葡糖转移酶Ｖ和α－１，６－核心岩藻糖转移酶的活力。结论：ＢＡ通过改变某些糖基转移酶活力而改变细胞表面糖链结构，这可能是ＲＡ使７７２１细胞诱导分化的机理之－。     

树突状细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞体外对自体肝癌细胞杀伤活性的研究

目的:探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对自体肝癌细胞杀伤活性.方法:从肝癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性.结果:DC激活的TIL具有很高的对自体肝癌细胞杀伤活性,杀伤率为(89.39±3.05)%,明显高于未经DC激活的TIL、CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率.结论:肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫.     

青蒿琥酯对NK细胞活性及ADCC活性的影响

体内实验表明，青蒿琥酯５０ｍｇ／ｋｇ及１００ｍｇ／ｋｇ（ｉ，ｐ，ｑｄ×６ｄ）能显抑制正常小鼠ＮＫ细胞活性和ＡＤＣＣ活性，体外试验表明，１．３０×１０＾－５～２．６０×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ青蒿琥酯能剂量依赖性抑制小鼠脾细胞ＮＫ活性，２．６０×１０＾－９～２．６０×１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ青蒿琥酯对小鼠脾细胞ＮＫ活性无显影响。     

羟基喜树碱对人肝癌BEL-7402细胞毒性的评价

目的 评价羟基喜树碱对人肝癌BEL-7402细胞的细胞毒性。方法 将羟基喜树碱以不同终浓度作用于人肝癌BEL-7402细胞。用MTT比色法观察其细胞毒性,荧光显微镜、透射电镜检测凋亡细胞的形态改变并记数凋亡指数,流式细胞仪定量分析细胞凋亡率。结果 羟基喜树碱以剂量依赖的方式抑制BEL-7402细胞的生长;荧光显微镜和透射电镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态学改变;流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰;以浓度为12.5、25、50、100、200μg/ml的羟基喜树碱处理48 h后,细胞凋亡率分别为(14.68±2.17)％、(21.24±3.76)％、 (31.54±4.58)％、(40.21±5.26)％和(48.35±6.70)％,与对照组(2.09±0.42)％比较差异均有极显著性意义(P<0.01)。结论 羟基喜树碱既能抑制人肝癌BEL-7402细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性。     

CD3AK细胞联合BCG对膀胱癌细胞的体外杀伤活性研究

目的探讨CD3AK细胞对膀胱癌细胞的体外杀伤活性,以及CD3AK细胞与BCG联合作用于膀胱癌细胞的效应.方法采用抗CD3单抗和IL-2共同刺激健康人外周血单个核细胞诱导出CD,AK细胞;以流式细胞仪测定细胞表型;用MTT法测定CD,AK以及CDaAK联合BCG对膀胱癌细胞系(T24)的杀伤活性.结果CD3AK细胞为异质细质细胞群,其细胞类型主要是CD8 细胞;在效靶比为10:1及20:1时,培养4 d的CD:,AK细胞BCG联合作用于T24细胞的杀伤率高于二者分别对T24细胞的杀伤率.结论CD3AK细胞是一种高效的抗肿瘤效应细胞,对膀胱癌细胞具有较强的杀伤作用;CD3AK细胞与BCG对膀胱细胞呈协同杀伤作用.CD3AK细胞在膀胱癌过继免疫治疗中具有重要的临床应用前景.     

树突状细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞体外对自体肝癌细胞杀伤活性的研究

目的探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对自体肝癌细胞杀伤活性.方法从肝癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性.结果DC激活的TIL具有很高的对自体肝癌细胞杀伤活性,杀伤率为(89.39±3.05)%,明显高于未经DC激活的TIL、CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率.结论肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫.     

小鼠免疫力对接种人类肝癌细胞系9724生长的影响

目的 探讨不同免疫力小鼠的免疫细胞对人类肝癌细胞系9724生长的影响及异种特异性细胞毒杀伤能力。方法 将培养后的人类肝癌细胞系接种到不同免疫力小鼠（免疫正常的BALB／c,B缺陷的CBA／N,T缺陷的BALB/c nude及T,B缺陷的C.B－17 SICD小鼠）右后臀皮下,观察其生长;取实验和相应的正常鼠脾细胞进行细胞毒杀伤试验。结果 BALB/c和CAB／N小鼠不成瘤;BALB/c nude和C.B－17 SCID小鼠100％成瘤;SCID免疫重建组用BALB/c外周淋巴细胞重建SCID（BALB/c－PBL－SCID）的不成瘤,用CAB／N外周淋巴细胞重建的SCID（CBA／N－PBL－SCID）成瘤,接种过瘤的BALB/c和CBA／N小鼠脾细胞对癌细胞有较强的细胞毒杀作用,对照组和nude,SCID小鼠无杀伤作用;SCID免疫重建有较小的杀伤作用。结论 T细胞在异种瘤移植排斥中起主要的免疫杀伤作用,这种排斥是异种特异笥的;肿瘤免疫需要综合性免疫作用。     

体外扩增人NK细胞及其对白血病细胞杀伤作用的研究

目的通过体外扩增人NK细胞的方法,探讨扩增后NK细胞对K562和HL60白血病细胞株的体外杀伤作用及机制。方法抽取5例健康志愿者外周血,分离单个核细胞（PBMC）,与基因修饰K562细胞共同培养,采用流式细胞仪检测NK细胞的表型,铬51释放法测定NK细胞对白血病细胞的杀伤率。结果基因修饰K562细胞在体外刺激NK细胞扩增202倍;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、HL60的杀伤率分别为77.1%、61.2%（效/靶比为8∶1）,扩增前NK细胞对K562、HL60杀伤率分别为39.0%、35.4%;扩增后NK细胞表面活化受体NKG2D、NKp30和NKp44表达增强;这些活化受体特异抗体能部分抑制扩增后NK细胞的抗白血病作用。结论基因修饰K562细胞刺激NK细胞有效扩增,扩增后NK细胞杀伤白血病细胞作用明显增强,扩增后NK细胞表面部分活化受体上调可能为扩增后NK细胞抑制白血病作用增强的分子机制,NK细胞治疗在白血病中有潜在的应用前景。     

肝癌细胞ConA相关糖蛋白质对NK和LAK细胞的影响

肝癌细胞ＣｏｎＡ相关糖蛋白质对ＮＫ和ＬＡＫ细胞的影响目前认为细胞间的识别，信息的传递及细胞恶变等都与细胞膜表面的糖蛋白质有关。近来的实验表明，细胞膜糖蛋白质在细胞恶变过程中普遍呈糖基化改变，其变化与肿瘤基因的活化相关，与肿瘤的转移和侵袭有关。糖链的改...     

放射线对肝癌细胞中端粒酶启动子活性的影响

目的:研究放射线对不同的肝癌细胞株中人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子活性的影响。方法:报告质粒phTERTp-Luc经脂质体METAFECTENE介导瞬时转染4种不同的肝癌细胞株后,给予2 Gyγ射线照射,观察照射组与非照射组中荧光素酶的表达。结果:瞬时转染4种不同的肝癌细胞株后,检测到照射可经hTERT启动子而诱导荧光素酶的表达增强,即hTERT启动子在2 Gy照射组中比在非照射组中具有更高的活性。结论:2Gyγ射线可以诱导肝癌细胞中hTERT启动子活性增强,有望用于增强肝癌细胞中hTERT启动子介导的靶向基因治疗,并为进一步深入研究奠定了基础。