简易快速检测人轮状病毒

作者用抗轮状病毒血清致敏含A蛋白的葡萄球菌,与52份腹泻标本的10%粪便悬液作协同凝集,能在1—3分钟内出现清晰的凝集,为了对比同步作ELISA进行考核。一、方法(一)粪便悬液制作:用pH7.4PBS—吐温20将粪便稀释成10%的悬液,用力振摇30分钟后离心3000rpm30分。取上清-20℃贮存备用。(二)SPA诊断液制作:按常规法制作。     

沙眼衣原体间接血球凝集试验诊断液的研制及效果观察

本文用68mmol/L(2％)枸椽酸钠PH7.2PBS提取法,能获得纯度较好的沙眼衣原体抗原,用此抗原致敏绵羊红血球,制成血凝液做IHA其效价达1:20480,保存8～9个月其滴度不变。与鹦鹉热衣原体有属特异性,与其它8种病26个血清型和5份健康兔血清均不凝集,仅鸡支原体有1:4凝集,表明特异性较强。重复性好。劳教人员阳性1份 (2/18),精神病人阳性1份(1/104),病猪阳性3份(3/17),鼠血清35份全阴。     

麻疹血凝抑制试验试剂盒的研制与应用

为了解决麻疹血凝抑制(HI)试验中猴红细胞的保存与人血清中非特异性凝集物质吸收的难点,推广麻疹HI试验方法,研制了麻疹HI试验试剂盒,并用该试剂盒与经典HI试验方法平行检测353份待检血清,结果有322份血清两法检测的效价完全一致(91.2%),其余31份两法检测效价的差异为±2倍,即在HI试验允许误差范围内.两法检测效价的差异无显著的统计学意义 (P＞0.05).而且试剂盒不必用猴红细胞去吸收血清中的非特异性凝集物质,还可在4℃保存4个月以上.该试剂盒的研制与使用,可大大方便与促进麻疹血清流行病学工作的开展.     

应用间接过氧化物酶试验和酶联免疫吸附试验检测轮状病毒特异性抗体IgG

作者报告了一种简单的方法——间接过氧化物酶试验(IPA)检测血中轮状病毒抗体,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)作对照试验。 IPA的方法是:用轮状病毒SA-11株感染MA-104细胞,待细胞呈中度病变后,用胰酶消化下细胞层,经PBS洗涤2次,然后把含有10~6细胞/ml悬液滴加于玻片上,室温干燥,丙酮固定;滴加被检血清,至湿盒37℃45分钟,洗涤并干燥;加入抗人IgG     

深圳市1998～1999年流行性感冒病毒监测

流行性感冒 (流感 )是一种具有严重危害的病毒性急性呼吸道传染病。为及时准确地监测流感病毒变异株 ,探索变异规律 ,将 1998～ 1999年深圳市流感病毒监测结果报道如下。1.材料与方法 :每周分别从深圳市两家定点监测医院采集发热 38℃以上的类流感患者咽拭子标本 ,按常规处理后 ,置 - 70℃冰箱保存待进行病毒分离。病毒分离采用鸡胚双腔法和ＭＤＣＫ传代细胞两个接种途径。凝集血球用 1%人Ｏ型红细胞悬液。病毒鉴定用常量半加敏血凝抑制试验(ＨＩ)进行 ,抗体测定用微量半加敏血凝抑制试验进行 ,测定抗原为 :Ａ/京防 / 2 6 2 / 95 (Ｈ1Ｎ1)、…     

自动血液洗涤仪制备冰冻保存红细胞的方法评价

目的应用215型血液洗涤仪制备低温(-70℃)冰冻保存甘油化红细胞,冻存一定期限后再洗涤红细胞去甘油,检测冰冻和洗涤红细胞的质量指标,并与国家标准比较,评价制备方法和效果。方法随机取4℃保存10d内的红细胞悬液20袋,用215型血液洗涤仪制备甘油化红细胞,-70℃低温冰箱保存90d,然后取出于37℃水浴快速融化,用血液洗涤仪洗涤去甘油。结果冰冻洗涤去甘油红细胞平均红细胞回收率(83.68±4.21)%,游离血红蛋白浓度(0.34±0.12)g/L,体外溶血试验(31.56±14.66)%,残留白细胞(0.58±0.16)%,残留血小板0%,甘油残余量(6.66±1.19)g/L,细菌培养试验阴性,满足国标《全血及成分血质量标准》的要求。结论 215型血液洗涤机可自动制备低温冰冻长期保存红细胞和并洗涤红细胞去甘油,操作简单,快速并标准化,所获洗涤红细胞质量符合国家标准,值得推广应用。     

应用呼吸道病毒单克隆抗体快速诊断流感病毒性肺炎

我院于1994年11月～1995年1月应用呼吸道病毒单克隆抗体,对92例支气管肺炎患儿流感病毒抗原进行检测,其结果如下。1 资料与方法1.1 鼻咽部脱落细胞的采取用无菌导尿管抽取鼻咽部分泌物于2毫升PBS液中,经离心、洗涤、再离心后,取沉淀细胞涂片,每张玻片涂二点,每个园点直径4～6mm,用风扇吹干,丙酮固定,-30℃保存备用。     

非4℃条件延长红细胞保存有效期的探讨

目的探讨有效延长非4℃条件下红细胞保存有效期，提高战时血液保障能力。方法采集12名健康捐血者的血液各400ml并制备浓缩红细胞，每袋平均分成5袋，标记为联合组、新配方组、氨组、对照组和4℃组，各组分别添加新保存液及氨、新保存液、氨、SAGM保存液、SAGM保存液，前四组置室温保存，每天取样，4℃组放入4℃冰箱保存，在保存末期即35d取样，分别测定红细胞ATP等保存指标以4℃组ATP为临界ATP，观察各组达到临界ATP值的保存时间，确定各组保存有效期。取6袋浓缩红细胞，按照联合组标准添加保存液，室温保存12d后每袋平均分成4袋(组)并分别洗涤，离心前分别平衡0min、5min、10min和15min．监测残留NH4^ 和红细胞回收率。结果联合组、配方组、NH4^ 组和SAGM组的保存有效期分别为12、6、6和5d；若平衡5min，红细胞洗涤4次可有效去除残留NH4^ ，平衡时间达到10min或15min洗涤3次即可达到目的，洗涤3次和4次红细胞回收率分别达到88．5％和83．1％。结论联合配方是常温下较为理想的红细胞保存液，使用生理盐水洗涤可有效地清除血氨．     

甲型肝炎病毒在干燥和保存一个月的粪便中存活情况

为确定甲型肝炎病毒(HAV)在粪便悬液中,于干燥并在25℃和42%相对湿度下保存一个月后,是否仍具有传染性,作者将上述粪便标本溶解后给易感狨猴接种,然后观察其HAV感染情况。HAV接种物系取自1只实验感染的黑猩猩粪便,该动物曾接种1名急性甲型肝炎病人的粪便悬液。于接种后6天采集的猩猩粪便中,用固相放射免疫实验(SPRIA)检测     

供细胞表型分析及细胞检测的免疫毒理学样品的保存时间

在毒理学研究设计中,免疫毒理学样品数量大,一天之内只能完成有限的动物样品检测。为此,本文研究的目的(1)脾、胸腺经过不同方法的处理,在4℃条件,放置24h后进行表型分析,是否能得到较满意的结果。(2)4℃保存24h后,脾或胸腺细胞悬液是否仍可进行NK活性测定。脾和胸腺细胞表型分析采用流式细胞仪分析方法。分析前先将细胞进行不同的保存处理。(1)脾和胸腺细胞制备成悬液后,用福尔马林固定并于4℃保存过夜后,次日进行表型分析。(2)脾和胸腺细胞制备成悬液后,不经福尔马林固定,于4℃保存过夜。(3)4℃保存完整的脾和胸腺,次日后,进行表型分析。…     

高效价冷凝素导致的交叉配血困难及相关临床输血的探讨

目的及时判定以及正确处理交叉配血过程中存在的高效价冷凝素,指导临床对具有高效价冷凝素患者进行安全输血。方法分析3例患者血清存在的高效价冷凝素导致交叉配血困难及消除冷凝素影响交叉配血成功的试验过程。结果 3例患者在室温交叉配血均出现次管无凝集无溶血,主管无溶血有凝集。将主管放入37℃水浴箱温浴5min,1min内显微镜镜见:凝集完全散开。结论交叉配血中出现无溶血凝集,在37℃水浴可散开,考虑存在高效价冷凝素;用37℃生理盐水洗涤红细胞再配置悬液[1],交叉配血在环境温度为37℃条件下可顺利进行;存在高效价冷凝素的患者可输注预温过的血。     

用单克隆抗体酶免疫法检测粪便中轮状病毒

本文作者介绍一种单克隆酶免疫法检测新生儿、儿童及成人粪便中轮状病毒,并与多克隆酶免疫法进行了比较。方法:96孔聚苯氯乙烯微量板,各孔包被0.1ml兔抗SA-11抗体(pH7.0,0.01MPBS稀释),置37℃4小时,每孔包被后经1%牛血清白蛋白PBS 4℃过夜,防止非特异性结合。再用0.05% Tween20 PBS洗液洗3次后,各孔加粪便上清液0.05ml,37℃孵化1小时,再用洗液洗3次,每孔加0.05ml单克隆抗体(2μg/ml),置37℃1小时,洗3次后,各孔加过氧化酶标记羊抗鼠IgG(1μs/ml)0.05ml,置37℃1小时,再洗3次,加过氧化物酶底物0.1ml(邻苯二胺     

红细胞保存液混悬洗涤红细胞的制备及质量控制

目的探讨红细胞保存液(MAP)混悬洗涤红细胞的制备及其质量控制。方法选取已制备的MAP混悬洗涤的红细胞,将其置入4℃冰箱中保存,分别储存14、21、35 d后取样,检测其溶血率。于储存35 d测定上清液蛋白含量、血红蛋白含量,并进行无菌试验。结果 21 d溶血率与14 d比较差异有统计学意义(P<0.05);35 d溶血率与21 d比较差异有统计学意义(P<0.05);MAP洗涤红细胞在制备、洗涤中各项指标均符合国家质量标准。结论MAP混悬洗涤红细胞35 d后其质量控制符合《全血及成分血质量要求(GB18469-2012)》,但随着储存时间的延长,其溶血率会逐渐升高,建议临床使用在保存期21 d内的洗涤红细胞效果更佳。     

1998年襄樊市流感抗体水平调查

流感是一种世界性的呼吸道传染病 ,目前尚无有效的方法进行预防和控制。要较好地预测流感是否可能流行 ,掌握该地区人群相应抗体水平是十分重要的环节 ,流感新变种的出现 ,和流感大流行的发生、与人群免疫力有着十分密切的关系 ,有关人群流感抗体水平的系统资料 ,是预测流感大流行发生可能性的重要依据。1　材料与方法1.1　材料　 (1)病毒毒株 ,所用 3种不同型别的流感病毒 ,分别为 :甲 1 型 /京防 / 5 3/ 97;甲 3型 /京科 / 30 / 95 ;乙型 /鄂科 /2 / 97。 (2 )鸡红血球 (1岁龄公鸡 ) ,用 Alsever氏血球保存液置 4℃冰箱保存。(3)血清样品…     

改良固相免疫吸附血细胞吸附法检测EHF特异性IgM抗体

本文报告以丙酮醛和甲醛二次醛化的鹅红细胞代替新鲜鹅红细胞,用固相免疫吸附血细胞吸附试验(SPIHAd)检测流行性出血热(EHF)特异性IgM抗体。该法快速简便,结果稳定直观。与IgM捕获法ELISA相比,两者符合率为93%。经X~2分析,两种方法结果无显著差异。醛化红细胞在40℃保存1年,血凝高度不变,易于在基层推广使用。     

3种稀释液制备的菌悬液存活时限比较

目的了解不同稀释液制备的试验菌菌悬液的存活时限,为微生物实验室的菌悬液制备及使用提供参考。方法参照2010年版《中国药典》微生物限度检查的菌悬液制备,用0.9%氯化钠溶液、0.1%蛋白胨水溶液、p H值为7的氯化钠-蛋白胨缓冲液作为稀释液,分别对6种试验菌制备成含菌数约100 cfu/ml的菌悬液,于4℃保存,并进行活菌计数。结果黑曲霉菌悬液和枯草芽孢杆菌的芽孢菌悬液在3种稀释液中3个月的活菌数相对稳定;白色念珠菌在p H值为7的氯化钠-蛋白胨缓冲液中1个月的活菌数相对稳定;大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌等在p H值为7的氯化钠-蛋白胨缓冲液中的稳定性优于另外2种稀释液。结论采用适宜的稀释液制备试验菌的菌悬液,可提高其稳定性,延长存活时限,从而提高工作效率,节约实验成本,更适应微生物实验室的工作需要。     

猴血球低温冷冻保存的研究

本文报告了应用含20%二甲基亚砜的蔗糖、明胶液做介质冷冻保存猴血球的研究结果。这种冷冻保存液可保护猴血球在低温冻结条件下不发生细胞破裂;在解冻后,对麻疹血凝素的敏感性不降低:在麻疹血凝抑制试验中与未冻存的新鲜猴血球有相同的效果。冷冻保存液中可加防腐剂,这对猴血球的冷冻保存及血清学应用效果无影响。
由于冻存血球在解冻后仍能在普通冰箱(或冰壶)中至少可保存2周,使供应远距离单位成为可能。     

国产邻苯二甲醛消毒效果的实验与临床研究

目的探讨国产邻苯二甲醛消毒灭菌效果及其在内镜消毒中的临床应用. 方法用悬液定量法检测其杀菌效果;用于纤维内镜临床使用中的消毒,观察其临床消毒效果. 结果在20～21℃条件下,以5 664 mg/L邻苯二甲醛对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用1、3 min,平均杀灭率分别为99.99%、100.00%;对枯草杆菌黑色变种芽胞作用60 min和90 min,平均杀灭率分别为99.94%和100.00%;用于胃肠镜消毒,浸泡5、10、15、20 min均无菌生长. 结论邻苯二甲醛消毒剂具有良好杀菌效果,用于纤维内镜消毒时间短、效果好,具有较好的临床使用前景.     

乙型流行性感冒杆菌感染的快速诊断

作为乙型流行性感冒杆菌(Hib)感染的快速诊断,作者应用胶乳凝集反应(LPA)、简化LPA与对流免疫电泳(CIE)三种方法在敏感性、特异性及实用价值等方面作了比较。(1)LPA 10%胶乳悬液1份加1:500稀释的全Hib抗血清80份,使抗体吸附于胶乳上,离心复悬2次,最后配成0.125%悬液     

肤阴洁杀菌性能的实验观察

洗必泰是一种低毒消毒剂,现广泛用于日常皮肤粘膜消毒和卫生保健,肤阴洁是以洗必泰配以中草药组成,我们在实验室对其杀菌效果进行了观察,现将结果报告如下. 1 方法 1.1 菌悬液制备试验前,分别将大肠杆菌(8099),金黄色葡萄球菌(ATCC6538),白色念珠菌(10231), 第3～14代划线接种于斜面培养基上,培养18～24h后取出,用磷酸盐缓冲液(pH 7.2～7. 4,简称PBS)洗下,制成菌悬液,置4℃冰箱中备用. 1.2 中和剂选择试验试验分6组.1组:消毒剂+菌悬液 ;2组:(消毒剂+菌悬液)+中和剂;3组:中和剂+菌悬液; 4组:中和产物+菌悬液;5组:菌悬液对照;6组:未接种培养基对照.结果以第1组不长菌或有远少于第2组菌数生长,第2组有菌生长,且菌数≥100 cfu*ml-1,第3、4、5组菌数相似且组间误差率≤10%,第6组无菌生长,可判为中和剂适宜. 1.3 杀菌试验试验为悬液定量杀菌法,试验时取5 ml消毒剂加0.1 ml菌悬液,混匀,作用至预定时间后取 0 .5 ml加入0.45 ml中和剂中,作用10 min后,取0.5 ml终样液于平皿中一式两份,倾注培养基后置恒温箱中培养48h后观察结果,计算杀灭率. 1.4 稳定性试验将消毒剂连同原包装置54℃恒温箱中14 d 后取出,于存放前后分别测定该消毒剂对大肠杆菌的杀灭效果.