正常人活体角膜组织结构的共焦显微镜观察

目的 用共焦显微镜对正常人活体角膜各层组织结构进行观察和分析。方法 ６０例（１２０只眼）正常人角膜分为３组。Ａ组：５～１４岁,２０例（４０只眼）;Ｂ组：１５～４５岁,２２例（４４只眼）;Ｃ组４６～７０岁,１８例（３６只眼）。共焦显微镜检查的各层角膜图像均被记录,并对各层组织细胞形态、细胞密度及面积的结果进行分析。结果 各层角膜细胞的面积和密度与性别和眼别无差异,Ｂ组和Ｃ组之间无差异。角膜表层上皮细     

干眼患者眼睑刷上皮病变的共聚焦显微镜观察

目的 应用共聚焦显微镜观察眼睑刷区域的解剖结构,分析干眼患者眼睑刷上皮病变的特点。设计 前瞻性病例系列。研究对象 纳入2017年1月至9月北京同仁医院眼科门诊就诊的干眼患者90例和无干眼的正常对照79例。方法 用含有荧光素钠和丽丝胺绿的混合染色试纸对正常对照组和干眼组眼睑刷区域进行染色并对上皮病变情况进行分级,然后应用共聚焦显微镜对眼睑刷区域上皮病变深度、炎性细胞数量和上皮下血管数量进行观察,采集图片并分析。主要指标 眼睑刷染色分级,眼睑刷区域上皮病变深度、炎性细胞数量和上皮下血管数量。结果 对照组眼睑刷上皮病变者51例（64.5%）,干眼组眼睑刷上皮病变者86例（95.6%）（χ2=24.35,P<0.005）。在正常对照组中,共聚焦显微镜观察眼睑刷区域,上皮层病变深度为0 μm者16例（20.2%）,无点状高反光物质者26例（32.9%）,上皮层下血管数量正常者10例（12.6%）。干眼组中者,上皮层病变深度为0 μm者5例（5.5%）,无点状高反光物质者20例（22.2%）,上皮层下血管数量正常者19例（21.1%）。两组上、下睑眼睑刷上皮病变深度之间差异有统计学意义（t=2.35、2.20,P<0.05）。干眼组,上睑眼睑刷上皮病变深度、上皮层表面炎性细胞数量与角膜染色评分之间呈正相关（r=0.333、0.304,P<0.05）,上睑眼睑刷上皮病变深度与Schiemer I数值之间呈负相关（r=-0.272,P=0.050）,上下睑上皮层下血管数量与脂质层评分之间呈正相关（r=0.326、0.497,P<0.05）。下眼睑眼睑刷上皮病变深度与眼睑刷染色分级之间呈正相关（r=0.616,P=0.025）。结论 共聚焦显微镜可对干眼患者眼睑刷区域的组织形态进行活体、无创观察。干眼患者眼睑刷上皮病变程度与干眼严重程度显著相关。     

激光共聚焦显微镜观察春季角结膜炎患者的角膜形态变化

目的 探讨应用活体激光共聚焦显微镜观察春季角结膜炎(VKC)患者的角膜形态变化.方法 观察型系列病例研究.选择2008年10月至2009年8月在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科就诊的26例双眼VKC患者,其中眼睑型13例、角膜缘型5例、混合型8例;另选择26名年龄、性别匹配的正常志愿者作为对照.使用活体激光共聚焦显微镜对患者右眼角膜进行检查,分别取中央角膜和上方周边部角膜为检查点,对所得图像进行记录和分析.利用内置细胞计数软件计算角膜各层组织的细胞密度,ImageJ软件分析神经密度、直径、分支数量及弯曲度.使用独立t检验比较VKC患者与正常人群角膜各层细胞密度的差异以及VKC患者周边与中央角膜细胞密度的差异;Fisher精确卡方检验比较VKC患者和对照组角膜上皮内郎格罕细胞浸润情况差异;方差分析比较VKC 3种亚型之间和不同病程之间各层细胞密度的差异;独立t检验和卡方检验分析VKC患者与正常人群之间的神经差异.结果 VKC患者的角膜形态学变化包括角膜上皮最表层的高亮多角形细胞缺失、上皮内和上皮下大量郎格罕细胞浸润及浅基质层内大量基质细胞活化.共焦显微镜下,角膜出现新生血管翳的患者表现为角膜上皮结膜化,基质内可见新生血管;合并圆锥角膜的患者,深基质内可见大量粗大的斜形或纵形暗纹.正常对照组的中央和周边部角膜上皮细胞密度分别为(6033.1±998.7)个/mm2和(6098.4±298.3)个/mm2,VKC患者分别为(5972.2±1148.2)个/mm2和(6178.5±318.9)个/mm2,差异无统计学意义(t=1.191,1.011;P=0.238,0.318);但VKC患者周边部上皮细胞密度显著高于中央部(t=2.249,P=0.03).正常对照组的中央和周边浅基质细胞密度分别(1001.4±125.3)个/mm2和(924.6±201.4)个/mm2,VKC患者分别为(1184.5±115.3)个/mm2和(1101.4±151.1)个/mm2,均显著高于正常对照(t=6.617,3.439;均P=0.001).正常对照与VKC患者中央角膜深基质层细胞密度分别为(537.7±42.6)个/mm2和(548.7±79.8)个/mm2,内皮细胞层细胞密度分别为(2985.7±401.2)个/mm2和(3021.5±383.3)个/mm2,两者比较均无明显差异(t=0.174,1.112;P=0.864,0.282).61.5%(16例)VKC患者的角膜上皮内发现郎格罕细胞浸润,显著高于正常人群(2例,7.7%)(x2=12.49,P=0.001).3种不同亚型VKC患者中,角膜缘型和混合型患者上皮内郎格罕细胞浸润情况较为严重.与正常对照组相比,VKC患者的上皮下神经密度和直径下降、弯曲度增加.结论 VKC主要累及角膜上皮层、上皮下神经及浅基质层.共焦显微镜对于VKC的分型诊断有一定辅助价值.

Abstract：

Objective To explore the morphological characteristics on cornea in patients with vernal keratoconjunctivitis(VKC)by the application of in vivo laser scanning confocal microscopy(LSCM).Methods The experimental design was retrospective observation case series(case control study).Twenty-six patients, each diagnosed as bilateral VKC, were enrolled in the study, among which 13 were tarsal form, 5 were bulbar form and the rest were mixed form. Nine patients had the clinical course less than one year, eight subjects longer than three years, and the rest between them. Another twenty-six healthy volunteers with matching age and gender were selected as normal control. All participants had their right eyes examined with the in vivo confocal microscopy ( HRT Ⅱ/RCM). Central cornea and superior peripheral cornea were chosen as the examination points. The images were recorded automatically and cellular density of each layer was analyzed by installed software. Software Image J was utilized to analyze the density, diameter, branch number and tortuosity of subbasal nerve fiber in VKC patients. Independent t test was performed to assess the differences on cellular density between VKC patients and normal control, as well as those between central and peripheral cornea in VKC patients. Fisher chi-square test was used to compare the infiltration rate of Langerhans cells in corneal epithelium between VKC patients and controls. ANOVA was applied to assess the differences in cellular density among three subtypes, as well as among different duration of VKC. Independent t-test and chi-square test were applied to analyze the parameters of subbasal nerve fiber. Results The morphological changes in cornea included the absence of superficial hyperreflective polygonal epithelial cells, infiltration of Langerhans cells in and(or) underneath corneal epithelium and activation of keratocytes in anterior stroma. Corneal epithelium conjunctivalization and stromal neovascularization could be identified in patients with corneal neovascular epithelium. Longitudinal or oblique dark striae could be found in the posterior stroma in patients with complicated keratoconus. The density of epithelial cells at central and peripheral cornea in healthy controls were (6033. 1 ± 998. 7) cells/mm2 and (6098. 4 ± 298. 3 ) cells/mm2, while that in VKC patients were (5972.2 ± 1148.2) cells/mm2 and (6178.5 ± 318.9) cells/mm2 respectively, the differences being no statistical significant between them (t = 1. 191 , 1. 011; P =0.238, 0. 318). However, it's found in VKC patients that cellular density at peripheral cornea was significantly higher than that at central area( t = 2. 249, P = 0. 03). The density of anterior stromal cells at central and peripheral cornea in healthy controls was (1001. 4 ± 125. 3) cells/mm2 and (924. 6 ± 201.4) cells/mm2, while that in VKC patients was (1184. 5 ± 115. 3 ) cells/mm2 and (1101.4 ± 151. 1) cells/mm2, the difference bearing no statistical significance(t =6. 617,3.439;P =0. 001). The density of posterior stromal cells in normal subjects and VKC patients was (537. 7 ± 42. 6) cells/mm2 and (548. 7 ± 79. 8) cells/mm2, that of endothelial cells was (2985. 7 ± 401. 2 ) cells/mm2 and (3021. 5 ± 383. 3) cells/mm2, respectively, neither difference had statistical significance (t = 0. 174, 1. 112; P = 0. 864, 0. 282 ) . Langerhans cell infiltration could be identified in 61.5% (16 cases) VKC patients, which was significantly higher than normal control (2 cases, 7. 7% ) (x2 = 12. 49, P = 0. 001 ). Furthermore, much intense Langerhans cells infiltration was found in bulbar form and mix form than tarsal form. (t = 6. 617, P = 0. 001). The density and diameter of subbasal nerve fiber in VKC patients decreased significantly than those in normal subjects, whereas the tortuosity increased significantly. Conclusions The morphological changes of cornea in VKC patients mainly involve corneal epithelium, subbasal nerve fiber and anterior stroma. In vivo LSCM is helpful in discriminating the subtypes of VKC.     

活体共聚焦显微镜在干眼患者眼表形态观察中的应用

干眼症是最常见的眼部疾患之一。尽管在过去的几年中,与其相关的基础与临床研究获得了不少进展,但其病理生理机制仍不十分明确。活体共聚焦显微镜是一种非侵入性的眼部成像技术,它使得人们在细胞水平对眼表上皮细胞、免疫及炎症细胞、角膜神经、角膜基质细胞以及睑板腺结构进行观察成为可能。因此,它可以帮助人们更好地理解干眼症的发病机制以及病理生理,从而协助该病的诊断和治疗。使用共聚焦显微镜可对干眼相关的眼表结构作出评估,并对其改变进行量化,这样使得疾病在早期就能得到识别,可对患者进行分层治疗。此外,动态地观察眼表共聚焦图像的变化还可以对干眼症的临床治疗效果进行监测,利于及时调整治疗方案,并较为准确地评估预后。     

严重碱烧伤患者眼表形态的共焦显微镜观察

目的 探讨利用激光共焦显微镜观察严重碱烧伤患者眼表的形态结构.方法 系列病例研究.于2008年2月至11月期间在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院就诊的眼表碱烧伤患者中,选择39例Roper-Hall分度为Ⅲ度或Ⅳ度的患者,根据眼部受伤时间分组,A组(9例,12只眼)为受伤3个月以内,B组(8例,11只眼)为受伤3～6个月,C组(11例,14只眼)为受伤6～12个月,D组(11例,14只眼)为受伤12个月以上.使用激光共焦显微镜对其受伤角膜、角膜缘以及球结膜进行检查,各层图像均被记录,分析角膜各层细胞形态,角膜缘栅栏结构形态,角膜缘炎性细胞与树突状细胞密度,以及球结膜各层细胞形态.运用单因素方差分析对角膜缘炎性细胞与树突状细胞密度进行统计学分析,运用最小显著性差异分析组间差异.结果 A组的碱烧伤患者角膜上皮细胞体积增大,形态不一,细胞质高反光,细胞核低反光,有时可见部分细胞缺失;表层细胞下见大量高亮小圆的炎性细胞浸润,聚集成团;浅基质层水肿明显,难以分辨细胞形态;深基质层细胞呈激活态;内皮层模糊不清.随着病程的延长,表层上皮细胞仍表现为上述异常结构,D组碱烧伤患者中,此类异常细胞消失;表层细胞下炎性细胞减少,可见部分残存的角膜上皮基底层细胞,存在散在或成团分布的中高亮反光的结模样细胞生长,随着病程的延长,角膜上皮基底层细胞大面积消失,代之以卵圆形,体积较小,排列紧密,细胞核呈点状高反光的结模样细胞;B组碱烧伤患者浅基质层仍难以分辨细胞形态,深基质层细胞呈激活态,C组和D组的碱烧伤患者中,角膜基质被纤维组织所替代;内皮层始终模糊不清.碱烧伤患者角膜缘Vogt栅栏结构始终被破坏;角膜缘血管网密集;A～D组角膜缘炎性细胞密度分别为(4023±343)、(2975±246)、(2652±375)、(2679±299)个/mm~2,经统计学分析差异有统计学意义(F=40.001,P=O.000);角膜缘树突状细胞密度分别为(106±19)、(132±35)、(141±26)、(98±24)个/mm~2,经统计学分析差异有统计学意义(F=8.053,P=0.000).碱烧伤患者的结膜损伤面积较小时,A组与B组碱烧伤患者结膜上皮细胞形态较难分辨,结膜固有层可见大量炎性细胞浸润,杯状细胞难以见到;C组和D组的碱烧伤患者中,结膜上皮形态基本正常,结膜固有层仍有部分炎性细胞与树突状细胞浸润,部分患者可见残存的杯状细胞.而当结膜受到大面积损伤时,各组碱烧伤患者的结膜均表现为上皮大面积缺失,代之以条索状高反光的纤维组织.结论 在激光共焦显微镜下,不同病程的严重碱烧伤患者的眼表组织细胞形态存在一定差异,激光共焦显微镜是观察严重碱烧伤患者眼表形态的有效工具.     

超高度近视眼角膜的共聚焦显微镜观察

目的利用共聚焦显微镜观察超高度近视眼角膜的超微结构改变。方法 前瞻性病例对照研究。选择拟行准分子激光原位角膜磨镶术（LASIK）的超高度近视患者54例（54眼）作为超高度近视组,屈光度－10.00～－17.00 D,平均（－13.27±3.24）D;同时选择中低度近视患者65例（65眼）,屈光度－1.00～－6.00 D,平均（－3.12±2.32）D作为对照组。于术前行共聚焦显微镜检查角膜上皮、前弹力层、前后基质、内皮细胞及角膜厚度。采用独立样本t检验对数据进行分析。结果 在共聚焦显微镜下超高度近视组6眼（11%）可以看到角膜前弹力层及后基质少量中等反光的点状沉积物,5眼（9%）可见异常基质内神经。角膜前基质细胞、后基质细胞、内皮细胞数及角膜厚度均较中低度近视组低,内皮细胞六角形细胞百分比较中低度近视组低,内皮细胞面积变异系数较中低度近视组高,差异有统计学意义（t=6.41、5.25、2.39、2.67、3.90、4.62,P<0.05）,上皮下神经丛神经纤维与中低度近视组相比,差异无统计学意义（t=0.88,P>0.05）。结论 超高度近视眼角膜与中低度近视眼相比,在超微结构上角膜细胞数减少,内皮细胞形态大小亦有不同,对于角膜功能的影响尚不清楚。     

共焦显微镜评价配戴角膜塑形镜对眼角膜组织的影响

目的利用角膜共焦显微镜对配戴角膜塑形镜的角膜组织形态进行分析,为临床合理配戴角膜塑形镜提供客观依据。方法佩戴角膜塑形镜的患者40例（40只眼）,佩戴框架眼镜且从未佩戴过隐形眼镜者10例做为对照。对照组为G1;G2为佩戴角膜塑形镜的时间长度为6个月至1年以内者;G3为1年至3年以内者;G4为3年至5年以内者;5年以上者为G5,每一组均为10例20只眼。采用Confoscan-4共聚焦显微镜扫描全角膜,记录角膜中央及角膜边缘Langerhans细胞、角膜上皮层、中央角膜厚度、角膜基质细胞及角膜内皮数。采用SPSS进行统计学分析。结果与对照组相比,随佩戴时间的延长,四组患者的角膜中央及角膜边缘Langerhans细胞的细胞密度均逐渐增多;角膜上皮层逐渐变薄;角膜全层厚度逐渐下降;后基质细胞密度降低;角膜内皮细胞数量无改变,但角膜多形性内皮细胞百分比逐渐降低,而异型性内皮细胞百分比逐渐升高。结论长期配戴角膜塑形镜所引起的角膜慢性缺氧可能是导致上述的角膜各层变化的主要原因,但5年后基本可以达到一个动态平衡的状态,这为指导患者用眼以及临床医师如何合理应用角膜塑形镜提供一个科学有效的依据。     

共聚焦显微镜观察圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期组织形态学变化

目的探讨进展期圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期共聚焦显微镜下的组织形态学改变。方法回顾性病例系列研究。应用共聚焦显微镜观察2017年9月至2019年3月于解放军总医院眼科行角膜胶原交联术的进展期圆锥角膜患者23例(32只眼), 其中男性15例(24只眼), 女性8例(8只眼);年龄(26±10)岁。所有患者于术前和术后1周、1个月、3个月应用共聚焦显微镜观察角膜组织结构改变、定量记录角膜上皮下神经纤维、基质细胞、内皮细胞密度和基质结构改变的深度并进行对比分析。不同时间的总体差异比较采用重复测量资料的方差分析或Friedman检验, 不同时间的差异的多重比较采用LSD-t检验或Bonferroni校正。结果角膜胶原交联术后1周, 角膜上皮细胞处于修复期, 表现为上皮基底细胞核增大、反射增强, 上皮下可见活化细胞, 浅基质肿胀呈海绵状, 深基质肿胀呈不均匀斑块状或条索状, 反射强。术后1个月, 上皮基底细胞恢复, 上皮下神经开始生长, 浅基质持续呈海绵状肿胀, 反射进一步增强, 深基质肿胀呈更粗大的斑块或条索样结构并持续至术后3个月。术前与术后3个月内, 角膜上皮下神经纤维密度差异有统计学意义(F=233.30, P<0.001), 术后1周、1个月、3个月角膜上皮下神经纤维密度分别为(0.51±0.31)、(3.65±2.21)、(8.50±4.02)mm/mm², 与术前的(14.60±2.57)mm/mm²相比均明显降低(均P<0.05);不同时间点角膜前部基质细胞密度比较, 差异有统计学意义(χ²=92.48, P<0.001), 术后1周、1个月、3个月角膜前部基质细胞密度分别为2.00(1.00, 5.75)、2.50(1.00, 5.75)、79.00(64.25, 94.00)个/mm², 与术前的347.00(345.00, 395.75)个/mm²相比均明显降低(均P<0.05)。术后3个月内角膜基质结构改变的深度范围为(400.56±86.12)μm:术后1周、1个月、3个月分别为(402.13±89.20)、(399.88±85.92)、(399.69±85.94)μm, 差异无统计学意义(F=0.80, P=0.455)。术前和术后不同时间角膜后部基质细胞密度[术前为(260.6±33.2)个/mm², 术后1周、1个月、3个月分别为(264.4±44.5)、(263.9±37.6)、(266.3±40.2)个/mm²]和内皮细胞密度[术前为(2 707.1±152.6)个/mm², 术后1周、1个月、3个月分别为(2 704.2±148.5)、(2 705.6±152.6)、(2 704.5±150.1)个/mm²]比较, 差异均无统计学意义(F=1.38, 1.01;P=0.259, 0.351)。结论圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期, 共聚焦显微镜下可见角膜上皮和上皮下神经的改变呈现损伤修复的过程;角膜浅基质呈均匀的蜂窝状肿胀, 深基质呈不均匀斑块状或条索状肿胀;术后早期角膜基质结构改变的深度相对稳定。     

Sjoegren综合征患者的角膜激光共焦显微镜活体观察

目的应用激光共焦显微镜观察Sjoegren综合征（SS）患者角膜各层的形态改变。方法应用激光共焦显微镜对15例（30眼）SS患者和15例（30眼）同龄正常对照组的角膜进行检查，获取角膜全层图像，并进行比较、分析。结果与对照组相比，SS组角膜上皮各层细胞密度均明显下降，并出现炎性细胞和树突状细胞浸润。角膜基质细胞呈多突起星状，细胞体积增大，胞核反光减弱，胞质反光增强，浅基质出现炎性细胞浸润。SS组较对照组角膜上皮下神经纤维变细，弯曲度变大，走行方向明显改变，部分神经纤维断裂。结论SS患者不仅角膜上皮、浅基质细胞、上皮下神经出现明显改变，且角膜基质细胞形态与角膜免疫状态均出现异常。     

共聚焦显微镜观察圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期组织形态学变化

目的探讨进展期圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期共聚焦显微镜下的组织形态学改变。方法回顾性病例系列研究。应用共聚焦显微镜观察2017年9月至2019年3月于解放军总医院眼科行角膜胶原交联术的进展期圆锥角膜患者23例(32只眼), 其中男性15例(24只眼), 女性8例(8只眼);年龄(26±10)岁。所有患者于术前和术后1周、1个月、3个月应用共聚焦显微镜观察角膜组织结构改变、定量记录角膜上皮下神经纤维、基质细胞、内皮细胞密度和基质结构改变的深度并进行对比分析。不同时间的总体差异比较采用重复测量资料的方差分析或Friedman检验, 不同时间的差异的多重比较采用LSD-t检验或Bonferroni校正。结果角膜胶原交联术后1周, 角膜上皮细胞处于修复期, 表现为上皮基底细胞核增大、反射增强, 上皮下可见活化细胞, 浅基质肿胀呈海绵状, 深基质肿胀呈不均匀斑块状或条索状, 反射强。术后1个月, 上皮基底细胞恢复, 上皮下神经开始生长, 浅基质持续呈海绵状肿胀, 反射进一步增强, 深基质肿胀呈更粗大的斑块或条索样结构并持续至术后3个月。术前与术后3个月内, 角膜上皮下神经纤维密度差异有统计学意义(F=233.30, P<0.001), 术后1周、1个月、3个月角膜上皮下神经纤维密度分别为(0.51±0.31)、(3.65±2.21)、(8.50±4.02)mm/mm², 与术前的(14.60±2.57)mm/mm²相比均明显降低(均P<0.05);不同时间点角膜前部基质细胞密度比较, 差异有统计学意义(χ²=92.48, P<0.001), 术后1周、1个月、3个月角膜前部基质细胞密度分别为2.00(1.00, 5.75)、2.50(1.00, 5.75)、79.00(64.25, 94.00)个/mm², 与术前的347.00(345.00, 395.75)个/mm²相比均明显降低(均P<0.05)。术后3个月内角膜基质结构改变的深度范围为(400.56±86.12)μm:术后1周、1个月、3个月分别为(402.13±89.20)、(399.88±85.92)、(399.69±85.94)μm, 差异无统计学意义(F=0.80, P=0.455)。术前和术后不同时间角膜后部基质细胞密度[术前为(260.6±33.2)个/mm², 术后1周、1个月、3个月分别为(264.4±44.5)、(263.9±37.6)、(266.3±40.2)个/mm²]和内皮细胞密度[术前为(2 707.1±152.6)个/mm², 术后1周、1个月、3个月分别为(2 704.2±148.5)、(2 705.6±152.6)、(2 704.5±150.1)个/mm²]比较, 差异均无统计学意义(F=1.38, 1.01;P=0.259, 0.351)。结论圆锥角膜行角膜胶原交联术后早期, 共聚焦显微镜下可见角膜上皮和上皮下神经的改变呈现损伤修复的过程;角膜浅基质呈均匀的蜂窝状肿胀, 深基质呈不均匀斑块状或条索状肿胀;术后早期角膜基质结构改变的深度相对稳定。     

激光共焦显微镜对正常人眼角膜缘和中央角膜的观察

目的应用激光共焦显微镜对正常人眼角膜缘和中央角膜的组织结构与细胞形态的观察和分析。方法选择15名正常人的28只眼接受常规裂隙灯显微镜和检眼镜检查后,作为正常健康眼入选本研究。使用激光共焦显微镜对其上、下方角膜缘和角膜中央区进行检查,各层角膜图像均被记录,观察组织结构和细胞形态,对细胞密度进行计数并分析。结果所获角膜缘和角膜中央各层平面图像(x,y轴)及纵向断层图像(z轴)均非常清晰,同时获取动态录像。上、下方角膜缘均呈现Vogt栅栏状结构,并动态观察到血细胞在血管内的流动。表层上皮细胞排列非常疏松,边界明亮,胞体发暗,上方和下方角膜缘表层上皮细胞平均密度分别为(812±297)个/mm2和(785±263)个/mm2,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。上皮下可见明亮的Langerhans细胞,形态不规则,呈树枝状,上方和下方角膜缘Langerhans细胞平均密度分别为(288±102)个/mm2和(254±127)/mm2,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。角膜中央表层上皮细胞排列疏松,边界发亮,胞体发暗,细胞平均密度为(1098±315)个/mm2,多于上方和下方角膜缘(P<0.05)。基底上皮细胞排列紧密。上皮下和前基质层可见反光强烈的神经纤维丛,旁边偶见明亮的Langerhans细胞,形态不规则,细胞密度难以计算。浅层的神经纤维细小、弯曲度大、多小分支,深层的神经纤维粗大、弯曲度小、少见分支。基质层暗背景下散在分布细长的基质细胞,边缘欠清,细胞核明亮呈纺锤形。内皮细胞为排列整齐的六边形细胞,胞体发亮,边界发暗。角膜中央全层、基质层、上皮层厚度分别为(543.0±62.9)、(462·0±69.5)、(59.9±11.2)μm。结论激光共焦显微镜不仅可以对角膜进行无创的、实时的、活体的检查,而且与传统的光学共焦显微镜相比,具有高清晰度、确切的深度定位、时间动态观察、纵向断层扫描等优势,更可提供理想的角膜缘图像,对角膜疾病尤其是角膜缘疾病的基础研究与临床诊断将更有价值。     

激光共焦显微镜观察长期配戴软性角膜接触镜者的角膜缘改变

目的探讨应用激光共焦显微镜观察长期配戴软性角膜接触镜者角膜缘改变的情况。方法2004年10至11月及2006年5至10月期间在北京大学第一医院眼科接受屈光手术术前检查者和常规体检者中选取22例有屈光不正并配戴软性角膜接触镜10年以上者（22只眼,年龄23～50岁）作为长期戴镜组;另选取38例有屈光不正但未配戴角膜接触镜者（38只眼,年龄18～52岁）作为未戴镜对照组。常规裂隙灯显微镜检查后,用激光共焦显微镜对受检眼上、下方角膜缘进行检查,各层角膜缘图像均被记录,观察组织结构和细胞形态,对细胞密度进行计数并分析。结果全部受检眼所获角膜缘各层图像均比较清晰。长期戴镜组角膜缘上皮细胞排列欠整齐,大小欠一致：22只眼中均有细胞间强反光点或强反光线出现,其中16只眼可见细胞间微囊形成。而未戴镜组角膜缘上皮细胞排列整齐,大小一致;38只眼中均未见细胞间强反光点或强反光线及微囊形成。长期戴镜组上方和下方角膜缘上皮下郎格罕细胞平均密度均分别高于未戴镜组（P〈0．05）。长期戴镜组22只眼的角膜缘基质中均可见圆形高反光点,未戴镜组38只眼中均未见此改变。长期戴镜组上方和下方角膜缘前基质细胞、后基质细胞平均密度及角膜缘基质层平均厚度均分别低于未戴镜组（P〈0．05）。结论长期配戴软性角膜接触镜可导致角膜缘上皮细胞间微囊形成、上皮下郎格罕细胞平均密度增高、基质内沉积物微粒出现及基质细胞密度减少等角膜缘系列改变。（中华腰科杂志,2007,43：514-518）     

共聚焦显微镜在微小角膜异物诊断中的应用

目的探讨共聚焦显微镜在诊断直径≤1mm的微小角膜异物的临床效果。方法采用共聚焦显微镜对于微小角膜异物以及可疑角膜异物进行检查。结果检23例（23眼）,确诊22例。结论共聚焦显微镜,能明确诊断以及准确显示角膜异物所在部位,埘微小角膜异物的诊断和治疗具有较高的参考价值。     

配戴夜戴型角膜塑形镜两年后角膜激光共聚焦显微镜观察

目的利用激光共聚焦显微镜观察配戴夜戴型角膜塑形镜2年以上患者的角膜组织有无变化。方法回顾性病例研究。选择2009年1月至2012年12月于南京军区总院眼科就诊且配戴夜戴型角膜塑形镜2年的患者30例（60眼）作为戴镜组,未配戴任何形式角膜接触镜的角膜正常患者30例（60眼）作为对照组。对2组对象进行角膜中央部激光共聚焦显微镜观察（观察组摘镜2～3 h后）。数据采用独立样本t检验进行分析。结果配戴角膜塑形镜后角膜形态可发生明显变化,上皮至前基质层可见皱褶,上皮下神经丛疏密不均、扭曲,基质神经及内皮细胞形态正常。上皮下神经丛的分布比对照组稀疏,戴镜组的上皮细胞计数为（4818±148）cells/mm2,前基质细胞计数为（1345±154）cells/mm2,后基质细胞计数为（799±76）cells/mm2,内皮细胞计数为（3025±193）cells/mm2,与对照组相比2组差异无统计学意义。结论长期配戴夜戴型角膜塑形镜对上皮下神经丛数量及眼表形态有影响,对内皮细胞及基质细胞无明显影响。     

准分子激光原位角膜磨镶术后弥漫性板层角膜炎的共焦显微镜观察

目的探讨准分子激光原位角膜磨镶术（LASIK）后弥漫性板层角膜炎（DLK）的临床病理学特征及发病机制。方法LASIK术后DLK患者30例（39只眼）（Ⅰ～Ⅳ期）,术后1、3、5、7d及1个月进行裂隙灯显微镜检查,术后3、7d及1个月进行共焦显微镜检查。结果Ⅰ期及Ⅱ期DLK的典型表现出现在术后3d,共焦显微镜观察所见：角膜板层切口前基质及层间可见大量直径12～20μm的圆形或卵圆形细胞,反光较强,散在分布或排列成行,细胞内可见偏心的高反光的核和低反光的细胞内结构。层间还可见大量直径8～12μm的圆形细胞,强反光,多聚集成簇或排列成行,细胞核形态不规则。术后7d上述细胞几乎消失。Ⅲ期DLK出现于术后3～5d,表现为前基质中的细胞浸润更浓密,层间无定形的高反光物质较明显。Ⅳ期DLK在术后5～7d出现明显的前基质结构模糊,高反光,角膜瓣全层皱褶,晚期形成大量高反光的瘢痕组织。结论LASIK术后弥漫性板层角膜炎是角膜瓣层间的炎性反应,主要病理学特征为角膜瓣层间的炎性细胞浸润,其发病是多种因素通过内源性途径和外源性途径共同作用的结果。     

应用共焦显微镜观察人角膜缘结构的变化

目的 探讨应用活体角膜共焦显微镜(CM)观察角膜缘干细胞(LSC)龛环境与角膜缘基底细胞群活力和数量在正常人群中的情况.方法 横断面研究.观察对象为2007年3至12月复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科选取的社区正常人志愿者120名,并用随机数字表法选择单眼的眼别,入选标准为无手术、外伤、感染及角膜接触镜配戴史,裂隙灯显微镜检查角膜透明,眼底镜检查无异常.按照年龄段进行分组,A组为0～岁,B组为20～岁,C组为40～岁,D组为60～79岁,每组30例.使用CM观察研究对象的角膜缘,记录图像并分析各组Vogt栅栏存在情况、计量角膜缘基底细胞大小,对LSC龛环境质量和细胞增殖活力进行评价.结果 各组角膜缘组织结构具有不同形态特点.A组29只眼存在Vogt栅栏,占96.7%;1只眼未查见Vogt栅栏,占3.3%.B组29只眼存在Vogt栅栏,占96.7%;1只眼未查见Vogt栅栏,占3.3%.C组21只眼存在Vogt栅栏,占70.0%;5只眼未查见Vogt栅栏,占16.7%;4只眼存在萎缩的Vgot栅栏,占13.3%.D组10只眼存在Vogt栅栏,占33.3%;17只眼未查见Vogt栅栏,占56.7%;3只眼存在萎缩的Vgot栅栏,占10.0%.A组角膜缘上皮基底细胞平均大小为(9.7±1.0)μm,B组为(10.7±1.5)μm,C组为(10.6±1.2)μm,D组为(12.2±1.4)μm.结论 在正常人群中,角膜缘LSC龛环境存在不同特点;同时,角膜缘基底细胞活力和数量也存在相应变化.     

共焦激光视网膜断层扫描在老年性黄斑变性检查中的应用

目的 观察共焦激光视网膜断层扫描在老年性黄斑变性(agedrelated macular degeneration, AMD)检查中的应用价值。 方法 应用德国海德堡共焦激光视网膜断层扫描仪(Heidelberg retinatomograph,HRT)对59例AMD患者的75只眼进行测量。其中渗出型AMD患者20例25只眼、萎缩型AMD患者16例25只眼、AMD玻璃疣患者23例25只眼。对比分析其扫描图像的Z轴面信号宽度、容积、最大深度的异同。 结果 渗出型AMD患眼黄斑部的Z轴面信号的宽度显著增宽，最大深度及容积大小与玻璃疣患眼比较，差异有显著性的意义(t值分别是2.787、4.487及3.054, P值分别是0.008、0.000及0.004);萎缩型AMD患眼黄斑部的Z轴面信号的宽度、最大深度及容积大小与玻璃疣患眼比较，差异有显著性的意义(t值分别是2.172、2.394及2.635, P值分别是0.041、0.020及0.015);渗出型AMD患眼黄斑部的容积显著大于萎缩型AMD患眼黄斑部容积(t=4.106, P=0)。 结论 渗出型AMD患眼黄斑部视网膜病变严重,HRT能够评价AMD患眼黄斑部视网膜病变的程度并监测其进展。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 262-265)