脯氨酰和天冬酰氨酰羟化酶对缺氧诱导因子的调节作用

缺氧诱导因子 (hypoxia induciblefactor,HIF)是哺乳动物缺氧反应的关键转录调节因子 ,参与多种链式反应和信号传导。HIF特异性的脯胺酰和天冬酰氨酰羟化酶介导了HIF蛋白氧依赖性的脯氨酸和天冬酰氨酸残基的羟化反应 ,在HIF降解和转录活性的调控过程中具有重要作用 ,各种羟化酶拮抗剂的研究也为治疗缺氧性疾病开辟了新领域。     

缺氧预适应小鼠中一氧化氮合酶与缺氧诱导因子-1的表达

目的　探讨缺氧预适应小鼠海马组织中内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)和缺氧诱导因子 1α的表达。　方法　HeLa细胞分为 :不缺氧 (H0 组 )、缺氧 1h(H1 组 )和缺氧 4h组 (H4组 ) ;小鼠分为 3组 :不缺氧 (M0 组 )、急性缺氧 1次 (M1 组 )和重复缺氧 4次组 (M4组 ) ,SDS PAGE和Western印迹法检测HIF 1α和eNOS的表达。　结果　H0 组HeLa细胞中未见HIF 1α ,H1 组出现少量HIF 1α ,H4组HIF 1α有所增加。M0 组小鼠海马中几乎检测不到HIF 1α ,可见eNOS ;M1 组可检测到较少的HIF 1α,eNOS无明显变化 ;M4组HIF 1α和eNOS水平均增高。　结论　慢性缺氧HeLa细胞中出现HIF 1α ,可作为检测HIF 1α的阳性对照 ;随着小鼠缺氧次数的增加 ,HIF 1α和eNOS的水平均升高 ,提示它们可能参与预适应的保护作用     

急性缺氧下肺动脉升压反应的研究——(一)阻断颈总动脉对肺血液动力学的影响

高山病与肺心病患者均有一个缺氧引起的肺动脉高压问题。国外有人报告,机体慢性缺氧可导致颈动脉体增大,化学感受器组织出现肿瘤样改变。并且据认为,这可能同高山病与肺心病患者化学感受器对缺氧的反应迟纯有关,迄今,后者对呼吸调节的影响已比较明确(即削弱机体对缺氧的通气增强反应,从而降低其适应低氧的能力),而对其在肺循环高压形成中的作用尚未见有人提及。本文对此作了初步探讨,主要结果如下:     

低氧诱导因子与产科疾病的关系

缺 氧时组织细胞和机体发生极为复杂的反应。机体产生低氧反应基因 (hypoxiaresponsivegenes ,HRG)以保持体内氧的平衡状态 ,是体内应激的一种适应机制[1] 。低氧诱导因子 1(hypoxia induciblefactor 1,HIF 1)是调节低氧状态下多种平衡的中心环节[2 ] 。1　HIF 1的结构和特点HIF 1是一种核转录因子 ,由HIF 1α、HIF 1β两个亚单位组成。HIF 1α是由 82 6个氨基酸组成的bHLH PAS(basishelix loop helix PAS)蛋白。BHLH主要是结合DNA ,PAS主要是识别PER、ARNT、SIM等蛋白质构成异二聚体。HIF 1α的氨基酸序列中 1 16 6…     

缺氧应激反应中活性氧与缺氧诱导因子-1的相互作用

在缺氧条件下,线粒体会产生大量的活性氧（ reactive oxygen species, ROS）,随即大量的活性氧将会诱导机体产生缺氧应激反应。缺氧诱导因子1（hypoxia inducible factor 1, HIF?1）是缺氧应激反应中的中枢调控因子。有研究表明, ROS主要通过抑制脯氨酸羟化酶家族（ prolyl hydroxylases, PHDs）的活性来抑制HIF?1α的泛素化降解,从而稳定HIF?1。而HIF?1蛋白水平的升高有助于机体应对缺氧微环境。最近研究还发现, REDD?1可以通过ROS对HIF?1产生负调控作用,从而抑制肿瘤的形成;秀丽线虫呼吸突变体的产生会导致ROS水平增加,从而增强HIF?1的活性,最终延长的线虫寿命;以及ROS、 HIF?1促进自噬的产生。因此,了解缺氧条件下ROS与HIF?1之间的相互作用关系,对于今后肿瘤、衰老和自噬的研究具有重要意义。     

低氧诱导因子在脑缺血中的双重作用

低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)是细胞内感受氧浓度并调节细胞对缺氧产生适应性反应的一种重要的转录因子.HIF是1992年Seme-nza等…在Hep3B细胞中第一次发现的.由于缺氧是很多疾病共同的病理生理基础,如肿瘤、缺血性心脑血管疾病等,因此HIF的发现引起了广泛的关注和深人的研究.在人体所有器官中,脑是对氧浓度变化最敏感的器官,不难推测HIF在神经系统疾病中特别是缺血性脑血管病中可能扮演重要的角色.研究发现,HIF在神经系统疾病中发挥双重作用,既可以促进神经细胞存活,也可以促进神经细胞凋亡.     

缺氧诱导因子HIF-α在固有免疫细胞参与炎症相关疾病的调控作用

氧消耗过多或供给不足造成的低氧分压状态,即缺氧,是一种常见的病理状态,尤其在一些炎症发生的细胞组织中。缺氧状态下,机体通过各种机制激活缺氧诱导因子(Hypoxia inducible factor,HIF),HIF 入核后转录调控下游靶基因,使细胞适应缺氧应激。研究发现,HIF 在炎症中发挥重要的作用。本文综述了近年来关于缺氧诱导因子HIF-α在固有免疫细胞参与的炎症相关疾病中的调控作用及其机制的研究进展。     

敲降缺氧诱导因子的表达量对缺氧条件下肾癌细胞迁移能力的影响

目的探讨抑制缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)的表达对缺氧条件下的肾癌细胞活力、凋亡、迁移能力的影响及机制。方法实验分为5组:对照组(常氧条件)、缺氧组(未转染缺氧条件下细胞)、转染对照组(转染不含目的蛋白的siRNA)、siRNA-HIF1α组、siRNA-HIF2α组。应用MTT法观察细胞的活力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Transwell小室法分析细胞的迁移、侵袭能力变化,Western blot检测细胞中HIF1α/HIF2α、Cleaved Caspase-3、E-cadherin、Snail蛋白的表达量。结果缺氧显著降低细胞的凋亡率和Cleaved Caspase-3蛋白水平(P 0. 05),显著增加迁移、侵袭细胞数(P 0. 05)。与缺氧组相比,siRNA-HIF1α组细胞的凋亡率以及迁移能力的差异无统计学意义;但siRNA-HIF2α组细胞的凋亡率、Cleaved Caspase-3蛋白水平显著增加(P 0. 05),其迁移、侵袭细胞数显著降低(P 0. 05)。与对照组相比,抑制HIF1α和HIF2α的表达显著降低E-cadherin的表达(P 0. 05)、升高Snail的表达(P 0. 05);与缺氧组相比,siRNA-HIF1α组细胞中的E-cadherin、Snail的表达水平差异无统计学意义,siRNA-HIF2α组显著增加E-cadherin的表达水平(P 0. 05)、显著降低Snail的表达水平(P 0. 05)。结论敲降HIF2α的表达量抑制缺氧环境下肾癌细胞的活力、诱导肾癌细胞凋亡、降低肾癌细胞迁移能力,其作用机制可能与E-cadherin、Snail的表达量变化有关。     

缺氧诱导因子 1α在宫颈癌中的表达及其与临床病理因素的关系

目的:探讨在宫颈癌中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的表达及其与临床病理因素的关系.方法:应用免疫组织化学 S P方法检测77例宫颈癌(ICC)组织中 HIF 1α的表达情况;分析 HIF 1α阳性表达水平与是否有淋巴结转移、脉管浸润及肿瘤大小、临床分期等临床病例因素间的关联性.结果:HIF 1α蛋白在宫颈癌中表达阳性率为70.1%(54/77),在宫颈鳞癌中表达阳性率是77.4%(48/62),腺癌中阳性表达率为40.0%(6/15),差异有统计学意义(P<0.05);HIF 1α蛋白表达与淋巴结转移,脉管浸润及肿瘤大小等无关(P>0.05),而与临床期别、细胞分化程度及间质浸润有关(P<0.05).结论:HIF 1α表达水平与肿瘤细胞的去分化程度及间质浸润正相关.宫颈癌中 HIF 1α蛋白可能通过对靶基因的调控提高了肿瘤细胞恶性潜能,促进了宫颈癌的浸润转移.     

缺氧诱导因子-1的研究与应用进展

缺氧诱导因子 1(HIF 1)是细胞在缺氧条件下产生的一个主要调控因子 ,近年来的研究发现 ,HIF 1与血管生成、炎症发生和脂肪形成过程密切相关 ,并对肿瘤、心血管疾病、炎症和肥胖症的治疗具有重要的指导意义     

缺氧诱导因子1研究进展

缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是由两个蛋白质亚基组成的二聚体转录因子,对缺氧具有特异感受性,它的表达受细胞内氧分压的严密调节。HIF-1参与体内许多缺氧反应性基因的转录调节,是机体缺氧应答反应中的关键作用因子。     

缺氧诱导因子-1α在结直肠腺癌中的表达及意义

目的　观察低氧培养条件下人结肠腺癌SW4 80细胞及人结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA、蛋白表达 ,探讨HIF 1α在结直肠腺癌中的表达及在肿瘤血管形成中的作用。方法　免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶法 (SP法 )检测SW4 80细胞及结直肠腺瘤、腺癌组织中HIF 1α、血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白表达 ;采用CD34标记血管内皮细胞计数微血管密度 (MVD)。用蛋白印迹法检测SW4 80细胞HIF 1α蛋白表达 ;原位杂交检测HIF 1αmRNA。结果　RT PCR结果显示 :低氧组SW4 80细胞HIF 1αmRNA表达显著升高 ,为常氧组的 2 33倍。低氧 genistein组HIF 1αmRNA表达为常氧组的 5 0 7%。原位杂交结果表明 :HIF 1αmRNA表达低氧组 (0 16 2 8± 0 0 0 85 )显著高于常氧组 (0 12 0 1± 0 0 0 38)和低氧 genistein组 (0 115 4± 0 0 0 5 6 ,P <0 0 5 )。免疫细胞化学染色显示 ,低氧组细胞HIF 1α、VEGF蛋白表达水平显著高于常氧组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )和低氧 genistein组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。蛋白印迹结果显示 :低氧组HIF 1α蛋白表达显著高于常氧组 ,为常氧组 3 5 4倍。低氧 genistein组HIF 1α蛋白约为常氧组的 5 8 9%。结直肠腺瘤和腺癌HIF 1αmRNA阳性表达率分别为 38 9% (7/     

钴引起的缺氧诱导因子活化在环孢素诱导的肾病中可减轻组织损伤和细胞凋亡

缺氧诱导因子(HIF)是一个调节细胞缺氧反应的转录因子。环孢素A(CsA)尽管在治疗器官移植方面有很多益处,但诱导慢性肾病发生的副作用,限制了它的临床应用。韩国科学家探讨了钴引起HIF的活化对CsA诱导的慢性肾病的影响及其相关机制。在动物实验中,给予大鼠0.05%的     

TRPV1阻断剂的研究进展

瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)是瞬时感受器电位（transient receptor potential,TRP)的非选择性阳离子通道蛋白家族成员之一，主要表达在初级传入感觉神经元上，是一种非选择性的阳离子通道。该受体可探测和整合诱发痛觉的化学和热刺激信号，主要有辣椒素（红辣椒的辛辣成分），伤害性热（>43℃）和质子等。它可将化学、机械和热刺激信号转化为动作电位，并将这些信息上传到中枢，最后使机体产生痛觉或不舒服的感受。近年来，TRPV1通道蛋白已成为开发新的镇痛药物的重要靶点。     

促红细胞生成素联合粒细胞集落刺激因子对大鼠缺氧心肌细胞的保护效应研究

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠缺氧心肌细胞的保护机制.方法 采用胰酶消化大鼠心肌细胞并传代,用150 μmol/L浓度的CoCl2处理心肌细胞,模拟缺氧条件.采用流式细胞仪检测不同EPO+ G-CSF浓度下心肌细胞的凋亡和坏死水平.筛选出最适浓度后,将实验组分为对照组、缺氧组、缺氧+ EPO组、缺氧+G-CSF组和缺氧+EPO+ G-CSF组,Western blot法检测乏氧诱导因子(HIF)-1α、P53、PARP蛋白的表达变化.结果 心肌细胞在10 U/mLEPO+200 ng/mL G-CSF培养下,心肌细胞凋亡和坏死水平最低,故认为是最适浓度(F=14.73、11.95,P ＜0.05).和对照组相比,HIF-1α、P53和PARP蛋白在各实验组中表达水平均升高,HIF-1α以缺氧组升高最显著(F=22.65,P＜0.05),P53以缺氧+EPO+ G-CSF组升高最显著(F =25.18,P＜0.05).除对照组外,PARP蛋白在实验组中呈现逐渐降低趋势(F=17.48,P＜0.05).结论 EPO-G-CSF能降低缺氧的心肌细胞凋亡、坏死和DNA损伤,其机制可能与HIF-1α、P53、PARP蛋白表达相关.     

转基因小鼠技术与HIF-1α功能的研究

HIF 1α是介导机体低氧反应的主要基因之一 ,在多种细胞、组织低氧反应中有重要作用。已有许多有关HIF 1α结构、功能的分子、细胞水平的研究 ,但在整体动物水平用转基因小鼠技术等研究HIF 1α功能的工作近年来才逐渐开始。简要介绍HIF 1α的结构特点和与HIF 1α有关的转基因、基因敲除小鼠的研究进展     

蛋白激酶B通过调控低氧诱导因子-1表达干预人肝癌细胞系SMMC-7721增殖

目的研究与分析敲低蛋白激酶B(PKB/AKT)对低氧诱导因子-1(HIF-1)表达及肝癌细胞增殖的影响。方法随机将人肝癌细胞系SMMC-7721分设5组:空白对照(BC)组、阴性对照(siRNA-NC)组、HIF-1 siRNA转染(HIF1-siRNA)组、AKT siRNA转染(AKT-siRNA)组和HIF-1 AKT siRNA转染(HIF1-AKT-siRNA)组。用倒置荧光显微镜观察转染效率;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Western blot检测HIF-1蛋白的表达。结果转染效率均达到90%以上。与siRNA-NC组相比较,HIF1-siRNA组、AKT-siRNA组和HIF1-AKT-siRNA组的细胞增殖抑制率均升高,HIF-1蛋白表达水平均下降(P0.05);与HIF1-AKT-siRNA组比较,HIF1-siRNA组和AKT-siRNA组的细胞增殖抑制率均下降,HIF-1蛋白表达水平均升高(P0.05);与HIF1-siRNA组比较, AKT-siRNA组的细胞增殖抑制率下降,HIF-1蛋白表达水平升高(P0.05)。各组HIF-1蛋白表达水平与细胞增殖抑制率存在负相关关系(r=-0.874,P0.05)。结论敲低HIF-1、AKT表达均可抑制人肝癌细胞系SMMC-7721增殖;HIF-1可能是肝癌细胞增殖的主要决定因子, HIF-1表达水平下调可抑制肝癌细胞增殖;敲低AKT表达可降低HIF-1表达水平,并协同HIF-1低表达的抑肝癌细胞增殖作用。     

TIF在脑弥漫性轴索损伤中表达的意义

目的 探讨缺氧诱导因子（HIF）在脑弥漫性轴索损伤中表达的意义。方法 利用大鼠头颅瞬间侧向旋转模型造成弥漫性脑损伤，采用免疫组化法测定HIF－1α的表达，并用TUNEL和免疫组化双重标记法，以及双酶免疫组化法，研究HIF－1α表达与神经细胞凋亡的关系。结果 弥漫性轴索损伤后，HIF－1α在丘脑，海马和基底核区神经细胞中呈高表达，并可诱发c-myc和Fas基因表达，启动神经细胞凋亡。结论 HIF－1α可能是参与脑弥漫性轴索损伤后神经细胞凋亡的重要因素之一。     

一氧化碳对缺氧预适应小鼠缺氧诱导因子-1表达的影响

目的:探讨缺氧预适应小鼠中一氧化碳对缺氧诱导因子-1表达和缺氧耐受时间的影响。方法:小鼠腹腔注射生理盐水(NS)或氯化高铁血红素(hemin)后,进行重复缺氧4次实验,Western印迹法检测海马中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,并记录缺氧耐受时间。结果:缺氧1次和2次,注射NS和注射hemin小鼠海马中HIF-1α的水平基本相同,缺氧耐受时间相似。重复缺氧3次和4次,注射hemin小鼠海马中HIF-1α含量少于注射NS小鼠,缺氧耐受时间低于注射NS小鼠(P＜0.05)。结论:在缺氧预适应模型中,一氧化碳能减少海马中HIF-1α的表达,进而降低缺氧耐受时间。其机制可能为一氧化碳抑制血红素蛋白氧感受器的功能。     

类风湿性关节炎动物模型中HIF-1α的表达

类风湿性关节炎(RA)属自身免疫性疾病,其发病机制迄今没有完全阐明,临床上尚缺乏根治RA的方案和预防的措施.缺氧诱导因子-1(HIF-1)是近年来发现的一种机体适应缺氧的重要转录调节因子,由α和β两个亚基构成,其中β亚基为组成性表达.在缺氧条件下,HIF-1α蛋白及其靶基因表达增加.2003年Cramer等发现HIF-1α和髓系细胞介导的机体炎症反应密切相关.