079 巴拉圭茶提取物抑制高度非酶促糖基化终产物比绿茶更有效

非酶促糖基化是高血糖引起的糖尿病并发症的一个重要分子基础。高度非酶促糖基化终产物（AGE）的蓄积与衰老、动脉粥样硬化，尤其是与长寿蛋白（胶原、晶状体和神经蛋白）有关。     

脂糖舒对糖尿病大鼠肾脏AGEs含量和抗氧化酶活性的影响

糖尿病肾病并发症的发生和发展与蛋白非酶糖基化和自由基引发的过氧化脂质损伤关系密切,长期高血糖能使蛋白质非酶糖基化反应显著增强,引起肾血管通透性增加、系膜增生、基底膜增厚,并在此过程中产生大量自由基,进而又引起多价不饱和脂肪酸过氧化,加重了肾组织的损伤.现将脂糖舒对糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织蛋白非酶糖基化产物(AGEs)含量和抗氧化酶活性影响的实验结果报道如下.     

西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化的抑制作用

目的研究西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化的影响。方法以牛血清白蛋白(BSA)质量浓度、葡萄糖质量浓度及温孵时间为3因素,采用3因素4水平正交设计,通过方差分析寻找体外非酶糖基化的最适反应体系,以此最适体系观察西红花酸对非酶糖基化的影响。结果糖基化蛋白产量与BSA质量浓度、葡萄糖质量浓度、温孵时间呈正相关;方差分析结果提示,5 g/L BSA、4.5 m g/mL葡萄糖及14 d的温孵时间为蛋白质体外非酶糖基化的最佳条件;荧光值测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE s)均表明西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化具有显著的抑制作用。结论西红花酸对体外蛋白质的非酶糖基化具有明显的抑制作用;这可能是西红花酸具有广泛的心血管药理活性及改善胰岛素抵抗的重要机制之一。     

糖尿病大鼠肾脏组织非酶糖基化与尿蛋白的相关性研究

目的：探讨肾脏组织非酶糖基化与DN发病的关系。方法：采用STZ糖尿病大鼠模型,测定其肾脏皮质中5-HMF释放量、AGEs荧光值及尿微量白蛋白、尿β2-微球蛋白含量,并进行相关性分析。结果：不同病程STZ-糖尿病大鼠,其血糖值、肾脏皮质5-HMF量、AGEs的荧光值含量及尿微量白蛋白、尿β2-微球蛋白均较正常对照组明显增高,且5-HMF释放量、AGEs荧光值随血糖增高而增高,尿微量白蛋白与AGEs荧光值呈正相关。结论：高糖环境下,肾脏组织蛋白非酶糖基化与糖尿病肾脏病变的发生有着重要的关系,尿微量白蛋白随肾脏组织非酶糖基化终产物AGEs的堆积而升高,提示防止肾脏组织蛋白糖基化终产物的形成是预防糖尿病肾脏损伤的关键。止消通脉宁具有降低血糖、抑制蛋白非酶糖基化、降低尿微量白蛋白的作用,是其防治糖尿病肾病的作用机制之一。     

苦瓜提取物抑制蛋白质的非酶糖基化

目的:研究苦瓜提取物对蛋白质非酶糖基化终末产物( AGE)生成的抑制作用.方法:体外蛋白质非酶糖基化反应系统中分别加入不同质量浓度的苦瓜提取物(0.01,0.1,1.0 g·L-1)或氮基胍(4 mmol·L-1),在不同时间分别测定蛋白质非酶糖化终末产物的生成量.制备糖尿病小鼠模型,以苦瓜提取物10,30 g·kg-1两个剂量连续ig 14 d,测定苦瓜提取物对糖尿病小鼠血糖以及心、肝、肾组织中AGE含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响.结果:在体外系统中,蛋白糖化产物的生成与孵育时间呈正相关,苦瓜提取物浓度依赖性抑制蛋白糖化终末产物的生成(P＜0.01).动物实验表明苦瓜提取物能抑制血糖升高(P ＜0.05,P＜0.01),改善糖尿病小鼠心、肝、肾组织中AGE含量(P ＜0.05,P＜0.01)、升高SOD活性(P ＜0.05,P＜0.01)和降低MDA含量(P＜0.05,P＜0.01),呈现剂量效果正相关.结论:苦瓜提取物体内体外均可有效抑制蛋白糖化终末产物的生成.     

某些中药有效成分对体外非酶促糖基化的抑制作用

目的探讨某些中药有效成分对非酶促糖基化(糖基化)反应的抑制作用。方法用荧光分光光度计测定某些中药成分在体外白蛋白糖基化系统的荧光值。结果阿魏酸、刺五加皂苷和大黄醇提物对糖基化有较好的抑制作用。以氨基胍作为参比,对高级糖化终末产物(AGEs)形成的相对抑制率分别为95.21%、94.75%、94.75%。结论某些中药是抑制糖尿病病人体内AGEs形成、防止并发症的候选药物。     

冬连胶囊对糖尿病大鼠蛋白非酶糖基化的影响

目的 观察冬连胶囊对蛋白非酶糖基化的干预作用.方法 采用小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,配合高脂饮食制备糖尿病大鼠模型,给药12周后观察冬连胶囊对大鼠血糖、糖化血清蛋白(GSP)、醛糖还原酶(AR)的影响.结果 较空白对照组,模型组血糖明显升高:冬连胶囊高剂量组和西药对照组大鼠血糖有下降趋势,较模型对照组有显著性差异(P＜0.05);冬连胶囊高、低剂量组和西药对照组均能降低大鼠GSP含量、抑制AR活性,较模型对照组有显著性差异(P＜0.01).结论 冬连胶囊对蛋白非酶糖基化反应有抑制作用.     

小檗碱对D-半乳糖诱导糖基化模型大鼠血糖、血脂和肝肾功能的影响

蛋白质非酶糖基化反应形成稳定的晚期糖基化终末产物(advanced glycation end-products,AGEs)可以通过交联形成大分子物质,这些物质可以沉积在肝脏和肾脏组织,从而导致这些器官组织病变损伤,此过程与糖尿病并发症的发生密切相关[1]。体外实验证明,小檗碱对蛋白非酶糖基化反应中的限速酶-醛糖还原酶的活性有抑制作用,并可降低血糖、改善糖尿病并发症等作用[2、3]。本实验通过D-半乳糖诱导糖基化模型大鼠,观察小檗碱抑制体内蛋白质糖基化反应,以及对糖基化状态发生的高血脂、高血糖、低胰岛素敏感指数和肝、肾功能损伤的保护作用。1材料与方…     

不同证型慢性非萎缩性胃炎患者唾液淀粉酶的活性、蛋白含量、比活力及其N-糖基化程度

目的分析不同证型慢性非萎缩性胃炎患者唾液淀粉酶(sAA)的活性、蛋白含量、比活力及其N-糖基化程度。方法 68例慢性非萎缩性胃炎患者按中医辨证分为脾气虚弱组(24例)、脾虚湿热组(33例)、肝胃不和组(11例),另设健康对照组(36名),采集各组酸刺激前后的唾液,检测sAA活性、蛋白含量、比活力及其N-糖基化程度,并分析sAA活性、蛋白含量的酸刺激前后比值。结果与本组酸刺激前比较,酸刺激后健康对照组sAA活性及蛋白含量均升高,sAA比活力均明显下降(P0.05)。与健康对照组比较,酸刺激后脾气虚弱组、脾虚湿热组sAA活性比值、蛋白含量比值1及糖基化缺失的例数均增高(P0.05),酸刺激前脾虚湿热组sAA比活力高于健康对照组(P0.05)。酸刺激后,健康对照组、脾虚湿热组、脾气虚弱组的sAA比活力均较酸刺激前明显下降(P0.05),但组间比较差异无统计学意义(P0.05)。肝胃不和组的各项分析指标与健康对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论慢性胃炎脾气虚弱证及脾虚湿热证sAA的活性、蛋白含量及N-糖基化程度发生异常改变,脾运化功能的强弱可在唾液蛋白质分泌中有较为客观的反映。     

中药复方干预非酶糖基化防治糖尿病肾病的研究进展

目的:选取有代表性的文献对非酶糖基化的终末产物(AGEs)导致糖尿病肾病的机制及中药复方干预进行综述。方法:通过数据库查阅近年的文献,并进行总结。结果:中药复方通过调控AGEs特殊受体蛋白表达、控制高血糖、降解AGEs、减少AGEs的生成、抗氧化、下调炎症反应等途径干预非酶糖基化及其终末产物的生成。结论:中药复方对防治糖尿病肾病具有重要意义。     

晶体蛋白非酶促糖基化的抑制与中药预防Wistar大鼠老年性白内障的研究

本文报道晶体蛋白非酶促糖基化的抑制与中药预防大鼠老年性白内障的实验研究结果。在体外研究系统中,以阿斯匹林(Aspirin)作为抑制剂,实验结果表明Aspirin可明显抑制糖基化作用,抑制率与Aspirin浓度和保温时间成正相关,20mMAspirin在保温第15天的最大抑制率为40％。糖基化水平降低,可防止硫氢基氧化并减少高分子蛋白聚合物的生成。体内实验,用抗衰老中药喂饲16月龄大鼠,连续6个月,比较药物组与对照组晶体蛋白糖基化水平与白内障发生率的关系。结果表明,药物组晶体蛋白糖基化水平较同龄对照组明显降低,肝脏超氧化物歧化酶活性较同龄对照组升高,上述二指标均与4月龄年轻大鼠相似。药物组白内障发生率较同龄对照组降低约50％,P<0.005。上述结果预示,用抗衰老中药预防与延缓大鼠老年性白内障的可能性。     

葛根等几种中药对蛋白质非酶糖基化反应的抑制作用

目的研究葛根、绿茶、吴茱萸、苦瓜、桑叶、玉米须等7种植物提取物及葛根素对体外蛋白质非酶糖基化反应的影响,同时测定葛根和葛根素的IC50。方法将牛血清白蛋白和果糖/葡萄糖在体外共同孵育建立体外蛋白非酶糖基化反应体系,并将反应液分成空白组,对照组和药物组,在37℃孵厢中孵育7d,检测波长430nm测定各组荧光值。结果葛根、绿茶、吴茱萸、桑叶、肉桂、玉米须、苦瓜7种植物提取物以及葛根素对体外孵育AGEs的形成抑制作用不同,其抑制率分别为85.4%,83.8%,66.3%,41.5%,36.4%,25.6%和8.6%,葛根及葛根素的IC50分别为45.45μg/ml和18.13μg/ml。结论这7种中药提取物对蛋白质非酶糖基化的抑制作用不同,其中绿茶和葛根提取物的抑制作用最强,而葛根素也具有蛋白质非酶糖基化的抑制作用,是葛根抗蛋白质的非酶糖基化一个主要活性成分。     

胎宝胶囊对不孕症患者子宫内膜线粒体修复酶调控作用的临床研究

目的探讨胎宝胶囊对不孕症的疗效及其对子宫内膜线粒体修复酶的调控作用。方法选择不孕症患者共30例,用胎宝胶囊进行治疗,并在治疗前后刮宫测定子宫内膜的8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶、胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶、3-甲基腺嘌呤DNA糖基化酶含量。结果经过胎宝胶囊治疗后,30例患者中怀孕20例,怀孕率高达66.7%;患者子宫内膜8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶、胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶、3-甲基腺嘌呤DNA糖基化酶含量与治疗前相比都有极显著差异(P<0.01)。结论胎宝胶囊可以提高子宫内膜线粒体修复酶的含量,从而促进受损的子宫内膜进行修复,并且对于不孕症治疗具有较高的疗效。     

益气养阴活血方对蛋白质非酶糖基化的作用

目的:观察益气养阴活血方蛋白质非酶糖基化的抑制作用。方法:①应用DL-甘油醛(dl-glyceraldehyde,GA)与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)体外糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGEs)生成体系,观察益气养阴活血方(太子参、生黄芪、山茱萸、生葛根、丹参和枳壳等)及其临床治疗患者血清对GA-BSA体系AGEs生成的影响;②应用流动注射法(FIA),观察益气养阴活血方临床治疗患者血清中AGEs水平的变化。结果:①益气养阴活血方(10mg生药/mL高剂量组)对GA-BSA体外AGEs生成有抑制作用(P0.05);②益气养阴活血方临床治疗患者血清中AGEs水平下降,与治疗前比较有显著差异(P0.05);③益气养阴活血方治疗后患者血清可抑制GA-BSA体外AGEs的生成,与治疗前比较有显著差异(P0.05)。结论:益气养阴活血方具有抑制蛋白非酶糖基化的作用,可能是其治疗糖尿病视网膜病变的机理之一。     

癫痫患者糖化血红蛋白（GHb）含量观察研究

糖化血红蛋白（GHb）是人体正常血红蛋白成分。糖基化是指通过非酶促作用将糖基加到蛋白质的氨基酸基团上。测定糖化蛋白可作为较长时间段的血糖浓度提供回顾性评估,而不受短期的糖浓度波动的影响。因此,糖化血红蛋白浓度主要用于评估血糖控制效果,并不用于糖尿病的诊断。本组对     

地菍黄酮类化合物对人血清白蛋白Maillard反应抑制作用的研究

人体内氨基酸及蛋白质发生非酶糖基化反应 (Maillard反应 ) ,反应的终产物AGE(advancedglycationendproducts)在糖尿病患者的肾组织、角膜蛋白、动脉粥样硬化的病变部位、老年痴呆症患者的硬脑膜内及人体皮肤中积蓄。研究表明 ,AGE与糖尿病肾脏合并症、糖尿病性白内障、动脉粥样硬化、老年性痴样症的发病及人体的老化相关〔1～ 5〕。由于蛋白质糖基化反应作为糖尿病合并症的发病机制学说已得到医学界的普遍认可 ,故AGE抑制剂的开发研究受到很大的重视。氨基胍作为糖尿病治疗物已开始应用于临床 ,其作用机理是阻碍蛋白质糖基化反应的进行…     

丹参多酚酸盐修复糖基化终产物引起的晚期EPCs功能障碍及其分子机制

目的观察丹参多酚酸盐对糖基化终产物(advanced glycation end products,AGE)引起的晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能障碍的修复作用,并探讨其中分子机制。方法密度梯度离心法分离脐血中单个核细胞,采用EGM-2-MV培养液培养晚期EPCs;利用牛血清白蛋白及葡萄糖制备晚期糖基化修饰的白蛋白(AGE modified bovine serum albumin,AGE-albumin)。实验分为单独加入200μg/mLAGE-albumin的AGE组;同时加入200μg/mLAGE-albumin及0.1μg/mL、1μg/mL、10μg/mL的丹参多酚酸盐低、中、高剂量组;加入200μg/mL未经修饰白蛋白的对照组。采用AnnexinV/PI双染法检测晚期EPCs凋亡;ECMatirx-gel检测晚期EPCs形成新生血管的能力。采用RT-PCR法检测细胞中糖基化终产物受体(the receptor for AGE,RAGE)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA水平;Western blot法检测RAGE、eNOS及蛋白激酶Akt的蛋白表达水平。结果与对照组比较,AGE组AnnexinV+/PI-细胞比例增加,在ECMatirx-gel上形成新生血管能力降低;晚期EPCs中ragemRNA及RAGE蛋白表达增加,enosmRNA及eNOS及Akt蛋白表达减少。丹参多酚酸盐1.0、10.0μg/mL组,与AGE组比较,晚期EPCs凋亡明显减少(P0.05,P0.01),在ECMatirx-gel上形成新生血管能力增加(P0.01),晚期EPCs中RAGE表达减少(P0.05,P0.01),eNOS、Akt表达增加(P0.05);与对照组比较,丹参多酚酸盐10μg/mL组对晚期EPCs凋亡及在ECMatirx-gel上形成新生血管能力,ragemRNA及RAGE,enosmRNA及eNOS,Akt蛋白表达,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 AGE使EPCs功能受损,表现为凋亡增加、迁移及体外形成新生血管的能力下降,丹参多酚酸盐可修复由AGE-albumin引起的EPCs功能损害。     

蛋白非酶促糖化及其产物与慢性疾病的 关系及作用机制的研究进展

〔摘 要〕 蛋白非酶促糖化与人类慢性疾病及衰老有着密切的联系。人体内随时随地都在进行着蛋白质的非酶促糖化。 由于糖化形成的晚期糖化终末产物（AGEs）具有不可逆性，会在组织和血液中累积，并与受体作用，最后导致机体的损伤。 这一过程与糖尿病、阿尔茨海默病（AD）、心血管疾病等多种慢性疾病的发生发展有着密切的联系。因此研究蛋白非酶促 糖化及其产物对揭示疾病的发生发展机制有着重要意义。笔者就蛋白非酶促糖化的反应原理以及与糖尿病、AD、心血管疾 病的关系及其作用机制的进展进行综述。     

小叶女贞糖基转移酶基因的克隆和原核表达研究

根据前期小叶女贞转录组研究的结果,利用c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)从叶片中克隆到1条编码糖基转移酶的基因(xynz UGT)。该基因c DNA全长1 598 bp,由66 bp 5'-UTR,1 440 bp ORF,92 bp 3'-UTR组成,其中ORF编码1条含480个氨基酸残基的酶蛋白(xynz UGT),其相对分子质量和等电点分别为54 826.67 Da和5.82。利用生物信息学方法分析酶蛋白的结构,结果表明在一级结构中含有一段糖基转移酶高度保守的PSPG盒,在二级结构中含有α螺旋(38%)、β折叠片(12.1%)和无规蜷曲(49.9%),在三级结构中由肽链折叠形成2个正对的α/β/α类Rossmann折叠区域,并且两者之间夹着一个底物结合口袋。通过系统进化树分析发现,xynz UGT有可能催化酪醇等苯丙素类物质发生糖基化,进一步开展酶蛋白与酪醇的分子对接模拟实验,结果显示位于结合口袋的Gly138和Ser285通过氢键与酪醇发生相互作用。SDS-PAGE电泳分析表明,原核表达系统成功表达出相对分子质量为58 370.57 Da的xynz UGT重组蛋白,但它以非可溶性的包涵体形式存在。利用分子伴侣和酶蛋白共表达的方法,在一定程度上可促进酶蛋白的可溶性表达。以上研究结果为进一步开展体外酶促反应研究,并阐明酶的功能机制奠定了基础。     

柠檬酸刺激对脾虚患儿唾液淀粉酶、总蛋白、唾液流率及pH值的影响

目的比较柠檬酸刺激对脾虚及健康儿童唾液淀粉酶(s AA)、总蛋白、唾液流率及p H值的影响,为"脾主涎"提供依据。方法选择20例脾虚患儿,同期征集29名健康儿童,收集酸刺激前后唾液标本,测定并比较s AA活性及其含量、总蛋白含量、唾液流率及p H值。结果 (1)柠檬酸刺激能明显增加健康儿童的唾液流率、p H值、s AA活性、s AA比活及s AA含量(包括糖基化和非糖基化s AA含量)(P0.05),而只增加脾虚患儿的唾液流率、p H值及s AA糖基化水平(P0.05);(2)脾虚患儿及健康儿童酸刺激前后各唾液测定指标差异虽无统计学意义(P0.05),但脾虚患儿酸刺激前后除唾液流率及s AA糖基化水平比值升高外,各测定指标比值均较健康儿童低,两组酸刺激前后s AA活性比值、s AA比活比值及s AA糖基化水平比值比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论脾虚患儿对柠檬酸刺激的敏感性降低。