神经疾病关联的长链非编码RNA的生物标记物作用

<正>转录组分析显示,只有1%~2%人类基因能编码蛋白质,其余约98%的大部分基因是非编码RNA(non-coding RNAs,ncRNAs)。ncRNA是一类不编码蛋白质但具有生物学功能的RNA分子,根据其长度可将其分为小非编码RNA[包括微小RNA(microRNAs,miRNA)、小干扰RNA(small interfering RNAs,siRNA)等]和长链非编码RNA(long non-cod-     

miRNA,siRNA,saRNA与基因表达调控

近年来的研究发现,生物体内存在着大量的非编码RNA(non-coding RNAs,ncRNA),它们在染色质修饰、基因转录、RNA剪接和mRNA翻译等多种水平上参与了基因表达的调控.ncRNA中的小分子RNA如miRNA能够识别特定的目标mRNA,通过与mRNAs 3'非翻译区结合,影响mRNA转录及蛋白质翻译;siRNA是RNA干扰的引发物,能够导致与dsRNA同源的mRNA降解,进而抑制相应基因表达;saRNA是目前最新发现的一种靶向目的 基因启动子区的在转录水平激活目的基因表达的dsRNA.miRNA、siRNA和saRNA在生成机制、作用途径等方面关系密切,既区别又相互联系,小分子RNA的研究将是今后分子生物学的研究热点之一.     

非编码RNA调控精子发生的研究进展

随着基因组学研究的发展,发现生物体基因组内存在大量不编码蛋白质的基因。这些基因的转录产物称为非编码RNA(Noncoding RNA,ncRNA)。以前认为ncRNA是基因组中无用的序列,但是研究表明ncRNA在很多生命活动中起到很重要的作用。按照转录产物的序列长短ncRNA分为短链非编码RNA(Small ncRNA)和长链非编码RNA(LncRNA)。精子发生包括精原细胞增殖,精母细胞减数分裂以及精子成熟等一系列受到精确调控的生理发育过程。精子发生需要相关基因的适时表达,并受到转录和转录后水平的调控。但是精子发生过程的调控机制目前还未完全研究清楚。最新研究发现在精子发生过程ncRNA起到很重要的作用,即使在成熟精子细胞中也有ncRNA的表达。表明ncRNA参与调控精子发生的过程,并且这些父源ncRNA可能在接下来的受精和胚胎发育中起到重要的调节作用。结合最新研究进展,本文综述了ncRNA在精子发生过程所起的作用,以期为精子发生过程中ncRNA的进一步研究提供参考。     

siRNA干扰铜绿假单胞菌MexA-MexB-OprM外排泵mexB基因表达的研究

目的 探讨RNA干扰技术对铜绿假单胞菌MexA-MexB-OprM外排泵mexB基因表达及有关功能的影响.方法 设计并合成4条小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)(siRNA1、siRNA2、siRNA3和siRNA4)序列,构建干扰RNA( short hair pin RNA,shRNA)表达载体,将带有siRNA质粒电转入PAO1和临床耐药株PAO3.应用E-test方法检测PAO1和PAO3抗生素MIC的变化.用半定量RT-PCR和定量PCR方法检测mexB的表达变化.结果 经酶切鉴定siRNA表达载体构建成功,并明显提高PAO和临床耐药株PAO3对抗生素的敏感性.RT-PCR结果显示干扰后的PAO1和临床耐药株PAO3 mexB基因表达明显下降(P＜0.05).结论 siRNA成功干扰MexA-MexB-OprM外排泵mexB基因的表达,提高铜绿假单胞菌对抗生素的敏感性,为临床上治疗铜绿假单胞菌感染,降低其耐药性提供了新的思路.     

siRNA给药途径的研究进展

RNA干扰（RNAi）通过在生物体细胞内导入外源性或内源性的双链RNA,使同源性mRNA降解、抑制特定基因表达而治疗某些基因异常所致的疾病,近年来已成为研究热点之一。文章就小分子干扰RNA（siRNA）的病毒载体给药、非病毒载体给药途径及优缺点做一综述。     

小干扰RNA的设计及原理

RNA干扰技术在人类基因功能研究、药物靶点鉴定等方面备受青睐,并且具有潜在的临床应用价值。但只有设计合理的小干扰RNA (siRNA)才能高效、特异地抑制靶基因表达。本文总结了siRNA序列的一般特点以及设计siRNA的方法和相应原理,并介绍了如何利用实验手段,验证RNA干扰的有效性及特异性。从而促进RNA干扰技术的广泛开展。     

环状RNA在肿瘤免疫中的研究进展

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)可以分为环状RNA(circular RNA,circRNA)和线性ncRNA.ncRNA存在于不同的细胞类型中,包括正常细胞、肿瘤细胞和免疫细胞等.目前已经发现线性ncRNA,如长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)和微RNA(m...     

RNA干扰技术中siRNA设计原则的研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是近年发展起来的一项新技术,与内源mRNA同源的小片段外源双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)导入细胞,导致特定基因表达沉默,其中约2l～23 nt的小干扰RNA(short interference RNA,siRNA)是RNAi的重要效应分子。RNA干扰技术的应用关键在于siRNA的合理设计和有效转运系统。该文主要叙述了siRNA的设计原则。     

siRNA在自身免疫病治疗中的研究进展

小干扰RNA(siRNA)是RNA干扰(RNAi)的主要介导者,其通过双链RNA(dsRNA)使同源基因沉默,是以核酸为基础最广泛使用于治疗疾病的基因沉默技术。现今,siRNA已被应用于诸多研究领域,在类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化等自身免疫病中的研究也日益增多。本文对siRNA的发现、siRNA介导的基因沉默机制以及siRNA在自身免疫性疾病治疗中的应用进行综述。     

靶向PCNA基因的小干扰RNA对鼻咽癌CNE2细胞周期的影响

目的： 研究小干扰RNA抑制PCNA基因表达后对鼻咽癌CNE2细胞株增殖及细胞周期的影响。方法: 利用体外合成法合成针对PCNA基因的小干扰RNA(siRNA)序列,应用脂质体转染鼻咽癌CNE-2细胞,实时定量PCR(real-time PCR) 和免疫组织化学法观察siRNA干扰后细胞中PCNA mRNA水平和PCNA蛋白表达,倒置相差显微镜观察转染前后CNE2细胞的生长变化,流式细胞仪检测siRNA干扰后的细胞周期。结果: 在siRNA转染CNE2细胞后,细胞增殖受到抑制,蛋白表达不同程度降低,对PCNA mRNA水平的抑制达98.5%,细胞周期在G0/G1停滞。结论: siRNA可在鼻咽癌中有效发挥RNA干扰效应,抑制PCNA mRNA及蛋白表达,降低PCNA活性,抑制鼻咽癌细胞增殖,为鼻咽癌基因治疗提供了新的方法。