蟾酥提取物中2种蟾蜍甾烯类成分兔体内药代动力学研究

目的:建立兔血浆中2种蟾蜍甾烯类化合物蟾毒灵及酯蟾毒配基的分析方法,探讨其在兔体内的药代动力学过程。方法:兔按0.35 mg.kg-1由耳缘静脉注射蟾酥提取物后分别于2,5,10,15,20,30,45,60,90 min心脏取血,采用乙腈沉蛋白与液液萃取相结合方法进行血浆样品预处理,以HPLC测定兔血浆中蟾毒灵及酯蟾毒配基的浓度,以Kinetica软件拟合药动学参数。结果:建立的HPLC方法,蟾毒灵、酯蟾毒配基均得到很好的分离,达到体内分析要求。经非房室模型拟合,得到了蟾毒灵、酯蟾毒配基在兔体内主要药动学参数。结论:建立的蟾毒灵、酯蟾毒配基血药浓度测定方法及所获得的药动学参数,可为中药蟾酥提取物的药代动力学研究提供参考。     

痧药蟾酥丸中蟾酥的药代动力学研究

目的:进行痧药蟾酥丸Beagle犬急毒药代动力学研究。方法:采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/TOF MS)建立Beagle犬血浆的代谢指纹谱,测定Beagle犬空白组血浆、对照品、给药组血浆总离子流图谱,并对给药血浆进行方法学验证和药代动力学研究。结果:建立了UPLC/TOF MS方法测定Beagle犬血浆中的蟾酥二烯内酯类化合物,成功地应用于Beagle犬灌胃给予蟾酥丸后血浆的药物动力学研究。结论:本实验为痧药蟾酥丸安全性评价提供了化学依据,为痧药蟾酥丸的临床应用提供参考。     

贯叶金丝桃中金丝桃苷在比格犬体内的药代动力学研究

目的:建立beagle犬血浆样品中金丝桃苷的HPLC含量测定方法,研究贯叶金丝桃提取物在beagle犬体内的药代动力学。方法:采用Dikma C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸(42∶58)为流动相,检测波长360 nm,流速1.0 mL.min-1,以普拉洛芬为内标,建立含量测定方法。选用6只健康beagle犬作为试验动物,口服贯叶金丝桃提取物胶囊后,分别于给药前和给药后0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24 h取血,通过HPLC测定金丝桃苷的含量,并采用Kinetica 4.4软件进行非房室模型拟合,计算药代动力学参数。结果:金丝桃苷线性范围为0.5～100 mg.L-1,日间、日内精密度<5.9%,在冷冻放置、冻融以及室温放置的条件下准确度均在91.23%～100.32%,回收率为89.95%～95.32%。金丝桃苷的主要药代动力学参数为Tmax=(2.17±0.41)h,Cmax=(13.88±1.26)mg.L-1,AUC0-24=(68.52±12.96)μg.h-1.mL-1,AUC0-∞=(96.69±30.94)μg.h-1.mL-1,MRT=(8.28±3.79)h。结论:建立了金丝桃苷beagle犬血药浓度的HPLC测定方法,操作方便,结果准确,可用于金丝桃苷的药代动力学研究。     

川芎赤芍配伍比例对阿魏酸在麻醉犬体内药代动力学的影响

目的:探索中药配伍比例对中药复方中的药效成分药代动力学特征的影响。方法:采用反相高效液相色谱法紫外检测阿魏酸血清药物浓度,3P87药代动力学软件拟合药代动力学模型,统计学处理采用t检验法。结果:川芎:赤芍1∶2和2∶1芎芍制剂给予麻醉犬灌胃5g·Kg- 1 后阿魏酸的药代动力学过程均符合一室开放模型,川芎∶赤芍1∶2和2∶1组的药动学参数分别为Ka =0 111±0. 0 35 (min- 1 )和0 .0 75±0 . 0 2 0 (min- 1 ) ,Ke=0 . 0 13±0 . 0 0 4 (min- 1 )和0 . 0 16±0 . 0 0 2 (min- 1 ) ,t1 2Ka=6 . 70 1±1 .92 6(min)和9. 735±2 . 377(min) ,t1 2Ke=6. 1 30 6±2 .3 5 31(min)和4. 4 2 5 4±5 .5 18(min) ,tpeak =2 4 . 915±5 . 30 7(min)和2 9 339±4. 10 1(min) ,cmax=5 5 7 .797±172 . 90 3(μg·L- 1 )和15 0 9 .5 18±2 75 . 813(μg·L- 1 ) ;两组间药动学参数Ka与t1 2Ka的差异具有显著统计学意义(P <0 . 0 5 )。结论:川芎赤芍配伍比例对阿魏酸的药动学特征具有显著影响,揭示中药配伍比例的差异有时会导致其中某一种成分的药代动力学特征的变化。     

HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中山楂叶提取物3种黄酮类成分及其药代动力学研究

[目的]建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定大鼠灌胃给予山楂叶提取物后牡荆素、牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素-2"-O-鼠李糖苷的药代动力学。[方法]大鼠给予山楂叶提取物(1、2、4 g/kg)后采集不同时间点血浆样品,经甲醇处理后,以乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,通过Agilent ZORBAX XDB-C_(18)(3.5μm,2.1×50 mm)色谱柱梯度洗脱,采用负离子电喷雾离子化源,多反应监测(MRM)模式进行测定。[结果]牡荆素、牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素-2"-O-鼠李糖苷分别在0.5~500.0 ng/mL(r=0.998)、1.0~1 000.0 ng/mL(r=0.999)、1.0~1 000.0ng/mL(r=0.998)范围内呈良好的线性关系,方法精密度、准确度、回收率和稳定性均符合生物样品的测定要求。[结论]本方法简便、快速、专属性强,可用于大鼠血浆中牡荆素、牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素-2"-O-鼠李糖苷的同时测定及其药动学研究。     

磷酸萘酚喹片在beagle犬体内的药代动力学研究

目的：研究磷酸萘酚喹片在beagle犬体内的药代动力学.方法：10只beagle犬单次口服500mg/kg,服药后0～216h间隔内定时采集血样,应用高效液相色谱-串联质谱仪联用测试样品浓度,梯形面积法计算药代动力学参数.结果：主要的药代动力学参数：Ke为（0.013＋0.004）h-1;t1/2为（54.32＋ 16.3）h,tmax为（3.55＋2.37）h,Cmax为（54.68＋19.18） μg·L-1,CL/F为（4.49＋1.8）L·h-1/kg）,AUC0-216和AUC分别为（1158.26±584.64） mg·h-1/L和（1277.29＋530.99） mg·h-1/L.结论：该方法灵敏度高、快速、简便、无杂质干扰,适合于磷酸萘酚喹浓度检测以及生物等效性研究.     

升麻苷H-2在大鼠体内的药代动力学及生物利用度

目的:研究升麻苷H-2在大鼠体内药代动力学特征及生物利用度。方法:建立大鼠血浆中升麻苷H-2的LC-MS-MS测定方法,考察大鼠静脉注射升麻苷H-2,灌胃升麻苷H-2和升麻提取物后升麻苷H-2的血药浓度变化,并用DAS 2.0药动学数据处理软件计算药动学参数。结果:(ESI-)离子化条件下多反应监测方式进行扫描,用于定量分析的离子反应分别为m/z 635.5→131.1(升麻苷H-2)和783.5→161.1(Rg3,内标),升麻苷H-2在0.5～500μg.L-1线性良好。平均回收率>87.0%,日内、日间RSD均<11%。大鼠静脉注射升麻苷H-2单体,t1/2为1.03 h,CL为691 mL.h-1.kg-1,灌胃升麻苷H-2和升麻提取物,Tmax分别为0.5,4.0 h,绝对生物利用度分别为21.2%,36.7%。结论:该方法灵敏、快速、准确,可用于大鼠血浆中升麻苷H-2的浓度测定及临床前药代动力学研究。比较升麻提取物和升麻苷H-2单体口服给药后的药代动力学参数和生物利用度,表明升麻提取液中的其他成分对升麻苷H-2有促进其吸收的作用,或升麻苷之间存在相互代谢转化,为升麻制剂研制和临床应用提供实验依据。     

龙胆苦苷在Beagle犬体内药代动力学研究

目的建立龙胆苦苷在 Beagle犬血清中的含量测定方法,研究龙胆苦苷在 Beagle犬体内的动力学规律.方法 建立快速敏感的高效液相色谱检测方法,使用外标法,以龙胆苦苷静脉注射给药, Beagle犬含药血清样品经液-液萃取后在 C18反相色谱柱上进行分离测定.结果 龙胆苦苷血药浓度在 0.1343～ 687.375 μ g· mL-1浓度范围内线性关系良好(R2=0.99993).方法回收率为 81.15 %～ 97.99 %,最低检测限为 0.1343 μ g· mL-1.结论龙胆苦苷在 Beagle犬体内的药动学过程表现为静脉内给药一房室模型,其中平均半衰期 t1/2 = 1.1324 h, 消除速率常数 Ke = 0.5811 h-1, 表观分布容 V=0.5316 L· kg-1,消除率 CL=0.3274 L· kg-1· h-1.提示龙胆苦苷在体内经历了迅速分布、消除过程,在体内不易蓄积.     

大鼠体内大承气汤蒽醌成分的药代动力学研究

目的:阐明大承气汤经灌胃给药后,5种游离蒽醌成分在大鼠体内的药代动力学特性。方法:大鼠灌胃给药大承气汤9g/kg后,采集血浆、尿液,采用HPLC法测定血浆中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的含量,并用DAS 2.0软件进行数据分析,计算药动学参数。结果:大鼠灌胃给予大承气汤后,血浆中检测到芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚,尿中检测到芦荟大黄素、大黄酸,血液和尿液均以芦荟大黄素和大黄酸含量最高。大鼠灌胃大承气汤后,血浆中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的T1/2(Ka)(h)依次是0.36、1.03、1.92、1.89、0.66;T1/2(Ke)(h)依次是0.31、1.17、2.33、2.19、0.81;Cmax(mg/L)依次是48.47、21.69、10.49、5.76、38.76;Tmax(h)依次是4、4、6、4、2;AUC0-t(mg.L-1.h-1)依次是85.73、66.73、65.91、41.84、96.40。结论:大承气汤中蒽醌类成分可以吸收进入体内,其中以芦荟大黄素和大黄酸为主;体内葸醌类成分以尿排泄为主。同时建立经灌胃大承气汤后大鼠血浆中5种游离蒽醌含量的测定方法,并阐明其药动学特性;为大承气汤的体内成分研究提供实验依据。     

不同配伍对川芎嗪体内药代动力学影响

目的:探讨川芎嗪单独给药、不同配伍给药在大鼠体内的代谢动力学规律。方法:32只SD大鼠,分为川芎嗪(30 mg.kg-1)组、川芎嗪+阿魏酸(30 mg.kg-1+50 mg.kg-1)组、川芎嗪+延胡索乙素(30 mg.kg-1+20 mg.kg-1)组、川芎嗪+阿魏酸+延胡索乙素(30 mg.kg-1+50 mg.kg-1+20 mg.kg-1)组,灌胃给药,采用高效液相色谱法测定各组大鼠血浆中川芎嗪的浓度,DAS 2.0程序计算药代动力学参数。结果:川芎嗪与阿魏酸配伍时,药时曲线下面积AUC0-t、达峰浓度Cmax和达峰时间Tmax与川芎嗪单独给药相比没有显著差异,但半衰期t1/2和平均驻留时间MRT0-t显著比川芎嗪单独给药时延长(P<0.05);川芎嗪与延胡索乙素配伍,及与阿魏酸、延胡索乙素同时配伍时AUC0-t,Cmax,Tmax与川芎嗪单独给药相比显著增大(P<0.05),而t1/2,MRT0-t与川芎嗪单独给药时相比无显著异。结论:阿魏酸可以延长川芎嗪在大鼠体内的作用时间,延胡索乙素能加快并增加川芎嗪在大鼠体内的吸收。     

华蟾素注射液中总蟾毒配基类成分的含量测定

目的:建立华蟾素注射液中总蟾毒配基类成分的含量测定方法。方法与结果:采用紫外分光光度法测定了华蟾素注射液中总蟾毒配基类成分的含量。测定结果为酯蟾毒配基在6.4～32μg线性良好,其回归方程为Y=0.005 66X+0.027 6(r=0.999 9)。5批华蟾素注射液中总蟾毒配基类成分的含量4.62～5.80 mg.L-1。结论:方法简便,重复性好,可以作为华蟾素注射液中总蟾毒配基类成分含量测定的质控方法之一。     

HPLC测定血浆中硝苯地平浓度及在Beagle犬体内的应用

 目的建立血浆中硝苯地平浓度的HPLC分析方法,并用此法检测硝苯地平在Beagle犬体内的药物浓度。方法选择尼群地平为内标,血浆经无水乙醚-正己烷(3:1)提取,采用Hypersil BDS C₁₈(4．6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水(1:1) (1%磷酸调节pH至3．5)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,紫外检测波长为238 nm。2只Beagle犬服用硝苯地平30 mg后用此法检测其血药浓度。结果硝苯地平在2～200μg·L^-1线性关系良好(r=0．999 6),最低检测限为1μg·L^-1(S/N≥3)。提取回收率为77.6%～87.3%,相对回收率在90.5%～101.7%内;日内精密度RSD≤7.1%,日间精密度RSD≤2.5%。结论本方法简便、准确灵敏,重现性好,可用于硝苯地平的血药浓度分析及进行药动学和生物等效性实验研究。     

附子中乌头类生物碱在大鼠体内的药动学研究

 目的 建立微透析取样技术结合 RP-HPLC 分析方法同步研究附子中主要有效成分乌头碱、次乌头碱和新乌头碱在大鼠体内的药动学过程。 方法 大鼠十二指肠给予附子提取物 1 055 mg·kg^-1 ,颈静脉微透析采样, RP-HPLC 测定透析液中乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的含量,以回收率校正实际药物浓度,并用 3P97 程序计算药动学参数。 结果 透析液中乌头碱、次乌头碱和新乌头碱分别在 0.011 2 ～ 0.56 mg·L^-1 （ <> r =0.999 9 ） , 0.010 6~0.53 mg·L^-1 （ <> r =0.999 7 ） 和 0.011 4 ～ 0.57 mg·L^-1 （ <> r =0.999 8 ） 内线性关系良好,方法回收率在 93.12% 以上。乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的血药浓度 - 时间曲线均符合开放式二室模型。 结论 本实验建立的方法简便,专属灵敏, 可用于附子提取物中乌头类生物碱的药动学研究。     

UPLC-MS-MS法同时检测大鼠血浆中没食子酸和芍药苷的浓度及其药代动力学研究

目的：建立一种用于同时检测大鼠血浆中没食子酸和芍药苷的准确、灵敏的超高液相色谱-串联质谱分析方法,并研究没食子酸、芍药苷在大鼠体内的药代动力学。方法：大鼠静脉注射赤芍提取物后,采用乙腈沉淀血浆蛋白,通过BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）柱分离,0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.35 mL·min^-1,1 μL进样分析,采用电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,以多反应监测（MRM）方式进行负离子模式检测。用于定量分析的二级碎片离子分别为m/z 169.0→125.0（没食子酸）和m/z 525.1→449.1（芍药苷）。结果：没食子酸、芍药苷分别在0.056~41.2 mg·L和0.36~265.1 mg·L线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均<10.5%,低、中、高浓度下没食子酸的回收率分别为87.5%,103.3%,89.5%,芍药苷的回收率为88.5%,105.0%,107.4%。两种成分在大鼠体内的平均滞留时间均较短在 37 min以内。结论：方法快速、专属性强、灵敏度高,适用于赤芍提取物的临床前药代动力学研究。     

长春胺缓释微丸在Beagle犬体内的药动学特征

目的:制备长春胺缓释微丸并考察其在Beagle犬体内的药动学特征,为非p H依赖性释放的长春胺缓释制剂研发提供参考。方法:制备酒石酸丸芯,采用流化床混悬液上药法制备长春胺缓释微丸。Beagle犬随机分成2组,单剂量双周期交叉口服长春胺缓释微丸与普通片,采用HPLC测定血药浓度,流动相0.02 mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈(70∶30,用磷酸调节p H2.3),检测波长268 nm,比较各制剂的药动学参数。结果:长春胺缓释微丸与普通片在Beagle犬血浆中Cmax分别为(1 147.40±554.50),(1 506.10±327.44)μg·L-1;Tmax分别为(2.38±0.25),(1.63±0.25)h;MRT分别为(6.75±2.44),(3.19±0.73)h;AUC0-t分别为(4 766.76±1 740.26),(3 906.81±686.53)μg·h·L-1。长春胺缓释微丸较普通片的相对生物利用度122%,体内外相关性良好。结论:与普通片相比,长春胺缓释微丸在Beagle犬体内吸收较慢,平均滞留时间为普通片的2倍以上,生物利用度显著提高,说明该处方可实现药物在胃肠道中非p H依赖性释放。     

双氯芬酸钾缓释片在家犬体内的药动学及生物等效性研究

 目的对自制双氯芬酸钾缓释片和市售双氯芬酸钾普通片进行家犬体内的生物等效性评价。方法6条家犬按标准的2×2交叉试验方案设计,禁食12 h后空腹口服普通片剂(参比制剂)50 mg或缓释片剂(供试制剂)75 mg;采用RP-HPLC紫外检测法检测血浆中药物浓度,并计算相关的药动学参数,判定两制剂是否生物等效。结果参比制剂及供试制剂的主要药动学数据如下:t_max分别为(0.50±0.01)和(4.17±0.10)h;ρ_max分别为(4.96±1.06)和(1.37±0.11)mg·L^-1;AUC_0～∞分别为(9.09±0.89)和(12.86±0.70)mg·h·L^-1;t_1/2分别为(2.33±0.84)和(7.94±1.45)h。结论两种制剂的主要药动学参数ρ_max和AUC_0～∞经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,并计算90%置信区间,表明两种制剂为以AUC为评价指标的生物等效制剂,相对生物利用度为97.16%,供试制剂与参比制剂相比具有良好的缓释效果。     

盐酸左米那普仑缓释胶囊在比格犬体内药动学及生物等效性评价

目的比较盐酸左米那普仑缓释胶囊受试制剂与参比制剂在比格犬体内的药动学及生物等效性。方法采用开放、随机、双周期交叉的实验设计,建立高效液相色谱法测定盐酸左米那普仑在比格犬体内血药浓度,计算受试制剂和参比制剂的药动学参数并进行生物等效性评价。结果比格犬单次口服受试制剂(80 mg)和参比制剂(80 mg)后血浆中盐酸左米那普仑的ρmax分别为(394.06±18.22)和(384.88±25.65) ng·mL^-1,AUC0-72 h分别为(5 903.86±107.51)和(5 396.63±62.63)ng·h·mL^-1,AUC0-∞分别为(6 325.90±158.88)和(6 091.14±121.35) ng·h·mL^-1。以参比制剂为标准,受试制剂的相对生物利用度F0-72 h(%)和F0-∞(%)分别为109.40%和103.85%,ρmax、AUC0-72 h和AUC0-∞的90%置信区间分别为75.11%~129.61%、99.35%~119.44%和89.90%~117.78%。结论建立的RP-HPLC简单,快速,准确,可用于血浆中盐酸左米那普仑血药浓度的测定;经生物等效性评价分析可知,受试制剂和参比制剂生物等效。     

利用分子量印迹快速筛选活心丸中蟾蜍二烯酸内酯和二萜生物碱类化合物

目的：建立分子量印迹(MWI)质谱数据后处理策略,快速筛选超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)采集的活心丸中蟾蜍二烯酸内酯和二萜生物碱类化学成分。方法：基于文献和PubMed等数据库,分别构建源于蟾酥和附子的蟾蜍二烯酸内酯和二萜生物碱类化合物内部数据库,将m/z[M+H]⁺按整数部分和小数部分拆分,以±0.005为误差范围,建立已知化合物二维散点图。采用UPLC-Q-TOF-MS获取m/z 50～1000的MS¹和MS²数据,将采集到的MS¹质荷比分成整数部分和小数部分,绘制样品二维散点图,与已知化合物二维散点图匹配,筛选已知化合物。并结合预测分子式及MS²信息,推导筛选化合物的质谱裂解途径,鉴定筛选出的化合物的化学结构。结果：从活心丸中初步筛选并鉴定了蟾酥来源的47个蟾蜍二烯酸内酯类化合物及附子来源的33个二萜生物碱类化合物。结论：利用MWI的数据后处理策略实现了对活心丸中蟾蜍二烯酸内酯和二萜生物碱类化合物的快速鉴定,为活心丸的质量控制及临床用...     

人工海水浸泡致低体温比格犬体内左氧氟沙星的药动学研究

  目的 建立海水浸泡致低体温比格犬动物模型,研究并比较左氧氟沙星在低体温比格犬动物模型中及正常体温比格犬中的药动学。 方法 8 只比格犬随机分为 2 组,每组 4 只。组 1 为正常组,组 2 为低体温动物模型组。组 2 比格犬于海水池中浸泡 90 min 后移出。 2 组动物给药方案为：左氧氟沙星 25 mg·kg^-1 ,静脉输注, 60 min 输注完毕。采用 HPLC 测定左氧氟沙星血药浓度; 3P97 程序计算药动学参数; SPSS 程序进行统计学处理;同时连续监测实验动物体温。 结果 组 1 动物体温给药前及给药后 24 , 72 h 体温分别为（ 37.30± 0.38 ）,（ 37.10 ±0.26 ）和（ 37.18 ±0.17 ） ℃ ;组 2 动物海水浸泡前体温为（ 37.70±1.41 ） ℃ ,海水浸泡 45 , 90 min 、出水后 1 , 4 , 12 , 24 , 48 及 72 h 体温分别为（ 36.33±0.21 ）,（ 34.45±0.46 ）,（ 30.13±1.41 ）,（ 32.95±2.29 ）,（ 35.30±0.59 ）,（ 35.70±0.55 ）,（ 36.4±0.46 ）和（ 37.30±0.38 ） ℃ 。左氧氟沙星在 2 组动物中药动学呈二房室模型,组 1 和组 2 药动学参数分别为： <> ρ _max （ 30.05±1.75 ）和（ 44.56±11.63 ） mg·L^-1 , t _1/2β （ 8.23±0.65 ）和（ 13.69±1.78 ） h , AUC （ 247.00±14.10 ）和（ 389.79±103.14 ） mg·h·L^-1 , V c （ 7.47 ± 3.13 ）和（ 7.14 ± 2.53 ） L , CL _S （ 1.20±0.15 ）和（ 1.0±0.33 ） L·h^-1 。统计学处理结果显示,药动学参数 t _1/2β , AUC 组间具有显著性差异（ P <0.05 ）。 结论 海水浸泡致低体温条件下,左氧氟沙星在比格犬中的药动学特性发生显著变化,其消除半衰期较体温正常组延长,药 - 时曲线下面积增加。