甘草黄酮对MPTP帕金森病模型小鼠的神经保护效应及对小胶质细胞活化的影响

目的: 观察甘草黄酮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)小鼠多巴胺(DA)能神经元数量和黑质小胶质细胞活化的影响。方法: 制作MPTP小鼠PD模型,随机分为6组:空白组、模型组、左旋多巴组(1次/d ig给予40 mg·kg^-1左旋多巴,1次/d,连续7次)和10,20,30 mg·kg^-1甘草黄酮处理组(ig给予不同浓度的甘草黄酮,1次/d 连续7次)。采用行为学观察、免疫组织化学和免疫蛋白印迹法,观察PD模型小鼠的行为学表现、 DA能神经元数量、黑质致密部OX-6阳性细胞(活化的小胶质细胞)数量和腹侧中脑酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达水平。结果: 模型组小鼠出现PD典型行为学表现,黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量较对照组分别下降约62%和76%;同时黑质致密部OX-6阳性细胞数量大幅升高(P<0.01)。经过甘草黄酮处理后,小鼠行为表现、黑质致密部DA能神经元丢失和OX-6阳性细胞数量增加均较模型组改善,尤以30 mg·kg^-1甘草黄酮组最为明显。与对照组相比,30 mg·kg^-1甘草黄酮组小鼠黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量仅下降约36%和42%;而与模型组相比,黑质致密部OX-6阳性细胞数量下降明显(P<0.01)。与左旋多巴组相比,30 mg·kg^-1甘草黄酮组TH阳性神经元数量也明显增多(P<0.01),同时OX-6阳性细胞数量也显著减少(P<0.01)。结论: 甘草黄酮对MPTP帕金森病小鼠DA能神经元具有神经保护效应;可能与其抑制黑质内小胶质细胞活化有关。     

黄芪提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织血管新生的作用

目的:观察黄芪提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织血管新生的作用,并分析其可能作用机制。方法:采用冠状动脉左前降支结扎造模方法成功复制大鼠心肌梗死模型后,随机将大鼠分为模型组、黄芪提取物低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1·d^-1),另设假手术组,各组大鼠数量均为8只。黄芪提取物各治疗组给予上述对应的各药物剂量ig给药,模型组及假手术组大鼠ig给予20 mL·kg^-1·d^-1的生理盐水,连续饲养4周后采用苏木精-伊红(HE)染色,Masson染色,电镜法分析心肌梗死大鼠左心室心肌组织和血管病理学变化,免疫组化染色分析心肌组织中血管内皮生长因子(VEGF)及CD34蛋白的表达变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织结构紊乱,心肌细胞坏死严重,完整的微血管数量明显减少(P<0.05),胶原含量显著增加(P<0.01),内皮细胞缺失明显(P<0.05)。与模型组比较,黄芪提取物各组大鼠心肌组织结构相对规整,胶原含量明显下降(P<0.05),新生的血管数量明显增多(P<0.05),内皮细胞形态相对完整,数量也明显增多(P<0.05),VEGF及CD34蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:黄芪提取物可明显改善大鼠心肌梗死后心肌组织的紊乱状态,促进受损心肌组织中新生血管数量的增加。     

中药脑脊液保护神经元损伤的离体实验研究

目的:探求清脑益智方治疗血管性痴呆 /多发梗塞性痴呆的作用机理.方法:应用体外细胞培养的方法,观察中药对谷氨酸损伤神经元的影响.结果:清脑益智方可明显提高谷氨酸损伤后神经元的存活率(P<0.05);降低孵育液中LDH含量(P<0.05);提高细胞生存活力(MTT).结论:清脑益智方可能通过刺激星形胶质细胞分泌神经营养因子而起到对神经元的保护作用.     

三七总皂苷肠溶微丸和三七总皂苷对家兔动脉粥样硬化预防作用比较

目的: 比较三七总皂苷(panax notoginsenoside,PNS)肠溶微丸和三七总皂苷对家兔实验性动脉粥样硬化的预防作用。方法: 50只家兔随机分为空白对照组、动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型组、PNS原料药组、注射用血栓通(冻干)组和PNS肠溶微丸组,耳缘静脉注射牛血清白蛋白250 mg·kg^-1后(空白对照组除外),分别喂食普通饲料+生理盐水、高脂饲料+生理盐水、高脂饲料+PNS原料药(30 mg·kg^-1·d^-1,ig)、高脂饲料+血栓通(15 mg·kg^-1·d^-1,肌肉注射)和高脂饲料+PNS肠溶微丸(30 mg·kg^-1·d^-1,ig)。于12周末耳缘静脉取血测定血脂含量,摘取主动脉观察病理学改变。结果: 给药12周后,PNS原料药组、注射用血栓通(冻干)组和PNS肠溶微丸组能显著降低家兔总胆固醇(T-CHO),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平(P<0.01),升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平(P<0.01);注射用血栓通(冻干)组和PNS肠溶微丸组降低T-CHO,TG和LDL-C的效果优于PNS原料药组(P<0.01),升高HDL-C水平优于PNS原料药组(P<0.01);PNS肠溶微丸组降低LDL-C效果优于注射用血栓通(冻干)组(P<0.01)。主动脉病理结果表明:注射用血栓通(冻干)组和PNS肠溶微丸组均能减轻主动脉内膜病变程度(P<0.01),且两者差异没有统计学意义;PNS肠溶微丸组减轻主动脉内膜病变程度优于PNS原料药组(P<0.01)。结论: 三七总皂苷肠溶微丸和三七总皂苷原料药均能降低AS模型家兔的血脂水平和减轻主动脉内膜病变程度,且前者预防作用优于后者。     

黄连粗多糖协同小檗碱改善溃疡性结肠炎肠黏膜屏障损伤的作用

目的 考察黄连粗多糖与小檗碱在溃疡性结肠炎小鼠治疗中的协同作用。方法 采用雄性BALB/c小鼠30只随机分为5组,除正常组6只外,其余在小鼠日常饮水中给予5%葡聚糖硫酸钠建立结肠炎模型。建模成功后,每组分别进行灌胃给药4 d,每日1次,小檗碱组（100 mg·kg^-1 BBR）、小檗碱+低剂量粗多糖组（100 mg·kg^-1 BBR+22.8 mg·kg^-1 CCP）、小檗碱+高剂量粗多糖组（100 mg·kg^-1 BBR+45.6 mg·kg^-1 CCP）,模型组和正常组灌胃同体积生理盐水。实验结束后处死小鼠提取结肠,通过蛋白免疫印迹法检测小鼠结肠组织紧密连接闭锁连接蛋白-1（ZO-1）、紧密连接蛋白-1（Claudin-1）和闭合蛋白（Occludin）蛋白的表达。以正常组为对照,评价各治疗组模型小鼠疾病活动指数（DAI）评分、结肠长度、结肠组织形态和结肠紧密连接蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠ZO-1、Claudin-1和Occludin蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,小檗碱组Claudin-1蛋白表达无明显差异,ZO-1和Occludin蛋白表达显著升高（P<0.01）,黄连粗多糖联合小檗碱组Claudin-1、ZO-1和Occludin蛋白表达显著升高（P<0.01）;与小檗碱组比较,黄连粗多糖联合小檗碱组紧密连接蛋白表达明显强于小檗碱单独给药（P<0.05）。结论 黄连粗多糖协同小檗碱给药能有效改善溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜屏障损伤。     

黄豆苷元对抑郁模型小鼠行为及海马DG区病理形态学影响

目的: 探讨黄豆苷元的抗抑郁作用及其机制。方法: 昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组(3.0 mg·kg^-1, ig)、黄豆苷元低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1, ig),每组10只。给药组每日应激前1 h ig给药,共21 d。采用慢性不可预知性温和应激(CUMS)法建立抑郁小鼠模型,通过体重和旷场实验检测小鼠抑郁样行为;采用尼氏染色法检测海马DG区神经元病理形态学变化;TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果: 与正常组比较,模型组小鼠出现明显的行为学异常,表现为体重减少(P<0.01);旷场实验水平运动及垂直运动得分减少(P<0.01,P<0.05);尼氏染色显示海马DG区神经元形态不规则,细胞分层不清;TUNEL法显示神经元凋亡数量增加(P<0.01)。与模型组比较,氟西汀组及黄豆苷元低、中、高剂量组小鼠行为学异常均有明显改善,小鼠体重增加(P<0.01),旷场实验水平运动及垂直运动得分增加(P<0.01);海马DG区神经元损伤性变化减轻;神经元凋亡率减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论: 黄豆苷元可能通过减少神经元凋亡改善CUMS抑郁模型小鼠行为学异常,产生抗抑郁作用。     

加味桔梗元参汤配合常规疗法改善慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉术后黏膜水肿及作用机制

目的 观察加味桔梗元参汤配合常规疗法对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉肺气郁闭证患者术后黏膜水肿的疗效，探讨其作用机制。方法 90例患者随机分为对照组和观察组，各45例。所有患者在鼻腔镜术后均给予常规抗感染疗法治疗，对照组同时给予鼻喷糠酸莫米松联合克拉霉素，观察组同时给予加味桔梗元参汤内服和鼻腔冲洗，疗程均为6周。观察两组治疗前后鼻腔鼻窦结局测试-20（SNOT-20），鼻内窥镜黏膜形态（Lund-Kennedy），患者生命质量评价量表（RQLQ），中医证状，血清及鼻分泌液中炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-1β（IL-1β），白细胞介素-5（IL-5），白细胞介素-17（IL-17）；血清蛋白水通道蛋白-1（AQP-1），水通道蛋白-3（AQP-3），水通道蛋白-5（AQP-5），纤维连接蛋白（Fn）。比较两组临床症状，安全性及随访12个月复发情况。结果 观察组总有效率97.73%（43/44），高于对照组的80.95%（34/42）（χ²=4.726，P<0.05）。随访至少12个月，观察组复发率4.65%（2/43），低于对照组的32.35%（11/34）（χ²=4.129，P<0.05）。与对照组治疗后比较，观察组SNOT-20，Lund-Kennedy，RQLQ，中医证状，TNF-α，IL-1β，IL-5，IL-17，AQP-5明显降低（P<0.05），AQP-1，AQP-3，Fn明显升高（P<0.05）。观察组不良反应发生率2.27%（1/44），低于对照组的57.14%（24/42）（χ²=5.243，P<0.05）。结论 加味桔梗元参汤可明显改善慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉肺气郁闭证患者术后黏膜水肿，其作用机制可能与调节血清及鼻分泌液中炎性因子水平有关。     

基于“心与小肠相表里”探讨松萝抗大鼠动脉粥样硬化及对回肠菌群的影响

目的 在 “心与小肠相表里”中医理论指导下,探讨松萝治疗动脉粥样硬化（AS）大鼠与回肠肠道菌群的关系。方法 48只SD大鼠随机分为正常组8只和造模组40只,采用高脂饲料联合腹腔注射维生素D₃建立AS模型。造模组大鼠随机分为5组,模型组、辛伐他汀组（4 mg·kg^-1）和松萝醇提物低（0.7 g·kg^-1）,中（1.4 g·kg^-1）,高剂量组（2.8 g·kg^-1）,每组8只。干预治疗4周后,收集各组大鼠血液、主动脉、回肠及回肠内容物。酶联免疫吸附法检测大鼠血清脂多糖（LPS）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-6（IL-6）的含量,苏木素-伊红（HE）染色法检测大鼠胸主动脉病理形态,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠回肠组织紧密连接蛋白闭锁小带蛋白-1（ZO-1）,闭合蛋白（Occludin）的蛋白表达,16S rRNA高通量测序技术检测各组大鼠回肠肠道菌群多样性和丰度的变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠主动脉斑块沉积明显,血清LPS,TNF-α,IL-6的含量均显著升高（P<0.01）,回肠组织ZO-1,Occludin的蛋白表达显著降低（P<0.01）。与模型组比较,松萝能明显改善模型大鼠主动脉的斑块沉积,降低血清LPS,TNF-α,IL-6的含量（P<0.05,P<0.01）,同时提高紧密连接蛋白ZO-1,Occludin的蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。与正常组比较,模型组变形菌门Proteobacteria和拟杆菌门Bacteroidetes的丰度发生显著变化,Bacteroidetes/厚壁菌门（Firmicutes）（B/F）明显降低（P<0.05）。Alpha和Beta多样性分析表示模型组肠道菌群物种总数较高,但丰度较低且分布不均（P<0.05,P<0.01）,且富集大量致病菌。与模型组比较,松萝醇提物可显著升高B/F值,改善模型大鼠回肠菌群结构的紊乱,降低致病菌、提高益生菌的相对丰度。结论 松萝对AS具有良好的治疗效果,其作用机制可能是与改善肠道菌群结构紊乱,增强肠黏膜屏障,降低血清LPS及炎症因子水平有关。     

化痰通络汤对脑缺血/再灌注大鼠“肠-脑”轴的干预作用

目的 基于“肠-脑”轴探讨化痰通络汤（HTTLD）对大鼠脑缺血再灌注后脑组织和肠道形态和功能的影响。方法 将60只SPF级雄性大鼠随机分为假手术组，模型组，HTTLD高、中、低剂量组（28.66，14.33，7.16 g·kg^-1），依达拉奉（4 g·kg^-1）+丁酸梭菌（5.0×10⁸ cfu·mL^-1）组，采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，灌胃给药HTTLD，神经功能缺损评分和2，3，5-氯化三苯四氮唑（TTC）染色法测定脑组织损伤，小肠推进率观察脑缺血再灌注对肠道动力的影响，十二指肠黏膜的病理形态学检测评价肠黏膜细胞损伤，酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清D-乳酸（D-LAC），二胺氧化酶（DAO），细菌内毒素（LPS）含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测十二指肠的闭合蛋白（Occludin），紧密连接蛋白-5（Claudin-5），闭锁小带蛋白-1（ZO-1）蛋白的表达。结果 脑缺血再灌注后，大鼠出现神经功能缺损症状，与假手术组比较，模型组神经功能缺损评分显著升高（P<0.01）；与模型组比较，HTTLD中、高剂量组能显著减少神经功能缺损症状，降低神经功能缺损评分（P<0.01）。与假手术组比较，模型组大鼠脑组织出现明显梗死灶，脑梗死率显著升高（P<0.01）；与模型组比较，各给药组脑梗死体积明显减少（P<0.01），以HTTLD高剂量组的效应最佳，且效应具有剂量依赖性。小肠推进率结果显示，与假手术组比较，模型组小肠推进率显著降低（P<0.01）；与模型组比较，各给药组能显著升高小肠推进率（P<0.01），以HTTLD高剂量效应最佳，且效应具有剂量依赖性。十二指肠黏膜组织病理学检测显示，脑缺血再灌注后十二指肠黏膜可见明显损伤，各给药组黏膜损伤情况明显减轻。与假手术组比较，模型组ZO-1，Occludin，Claudin-5蛋白表达均显著降低（P<0.01）；与模型组比较，HTTLD低、中、高剂量组能不同程度上调ZO-1，Occludin，Claudin-5蛋白表达（P<0.05，P<0.01），以高剂量组的效应最为显著。与假手术组比较，模型组血清D-LAC，DAO，LPS蛋白含量均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，各给药组D-LAC，DAO含量均明显降低（P<0.05，P<0.01），HTTLD中、高剂量组明显降低LPS含量（P<0.05，P<0.01），且HTTLD高剂量组的作用最明显。结论 脑缺血再灌注后，大鼠脑组织受损、出现神经功能障碍，同时肠道黏膜损伤、肠道蠕动减弱和肠道黏膜屏障破坏。HTTLD能减少脑组织和胃肠道黏膜损伤，减轻神经功能缺损症状，提高胃肠道动力、改善肠道屏障功能、减少肠道细菌代谢产物和毒物的释放，从而发挥对脑缺血再灌注后“脑-肠”轴损伤的保护作用。     

醒脑静不同制剂给大鼠鼻单向灌流后龙脑和麝香酮吸收比较研究

目的 比较醒脑静不同制剂给大鼠鼻单向灌流后其有效成分龙脑和麝香酮吸收特征。方法 采用大鼠在体鼻单向灌流模型,GC法测定灌流液中龙脑和麝香酮的量,比较醒脑静滴鼻液与醒脑静微乳中龙脑和麝香酮在大鼠鼻腔的吸收。结果醒脑静滴鼻液中龙脑吸收速率常数（K_a）为（1.00±0.02）min^?1,醒脑静微乳中龙脑K_a为（0.76±0.03）min^?1;醒脑静滴鼻液中麝香酮K_a为（0.76±0.02）min^?1,醒脑静微乳中麝香酮K_a为（0.58±0.10）min^?1。结论 醒脑静滴鼻液中龙脑和麝香酮在鼻腔的吸收均较醒脑静微乳快。     

脑清喷鼻微乳治疗急性缺血性脑卒中100例随机对照临床研究

目的:观察脑清喷鼻微乳治疗急性缺血性脑卒中的临床疗效。方法:共100例急性缺血性脑卒中患者纳入研究,采用随机数字表法分为脑清喷鼻微乳组(治疗组)与空白安慰剂组(对照组)各50例。两组患者均采用常规基础治疗,治疗组予脑清喷鼻微乳喷鼻,2喷/次,3次/d;对照组予不含药物成分的微乳,2喷/次,3次/d。以美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、Fugl-Meyer运动功能评定量表、生活能力状态表、中风症状分级量化表及血液流变学检查评估两组患者治疗治疗前与治疗后7天、14天的愈显率及有效率。结果:治疗组总有效率93.33%,愈显率60.00%,其愈显率明显高于对照组的42.00%(P<0.05)。在NIHSS评分、Fugl-Meyer运动功能评定量表、日常生活能力量表积分、中医症候积分及血液流变学改善方面均明显优于对照组(P<0.05)。结论:脑清喷鼻微乳经鼻给药治疗急性缺血性脑卒中疗效肯定,可改善患者的神经功能状况,中医症状及血流变指标,提高其日常生活能力,为临床治疗提供依据。     

千叶素A对缺氧损伤下血脑屏障通透性的影响及其机制研究

目的 研究千叶素A对缺氧损伤下血脑屏障通透性的影响及其调控机制.方法 利用原代培养大鼠脑微血管内皮细胞(BMEC)建立体外血脑屏障模型,缺氧诱导损伤.荧光分光光度法检测千叶素A对BMEC异硫氰酸荧光素(FITC)-葡聚糖的荧光强度,观察其对体外血脑屏障模型通透性的影响;RT-PCR法检测千叶素A对BMEC紧密连接蛋白ZO-1、claudin-1基因表达的影响,Cell-Based ELISA法检测千叶素A对BMEC中ZO-1蛋白表达的影响.结果 缺氧使体外血脑屏障模型对FITC-葡聚糖的通透量明显增加,脑微血管内皮细胞ZO-1基因和蛋白表达下调;千叶素A能明显拮抗缺氧造成的上述损伤.结论 千叶素A对缺氧损伤体外血脑屏障具有保护作用,其机制与其影响ZO-1表达有关.     

桃红四物汤抗癫痫作用机制研究

目的研究桃红四物汤的抗癫痫作用机制。方法建立戊四氮(PTZ)点燃大鼠癫痫模型,随机分为对照组、模型组和桃红四物汤低、中、高剂量组。桃红四物汤剂量分别为0.7、1.4、2.1 g/kg,给药体积为10 m L/kg,每日ig给药1次,连续给药2周。给药第0、14天观察大鼠癫痫发作程度。给药结束处死大鼠,伊文思蓝(EB)法测定血脑屏障通透性,Western blotting法和免疫荧光法测定脑组织及不同部位3种紧密连接蛋白:闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Occludin蛋白表达水平。结果高、中、低剂量桃红四物汤可显著降低大鼠癫痫发作程度和血脑屏障通透性(P0.01)。低剂量桃红四物汤可显著升高大鼠脑组织皮层、海马及纹状体的MMP-9表达水平(P0.05);中、高剂量桃红四物汤可显著升高大鼠脑组织ZO-1、MMP-9、Occludin表达水平(P0.05、0.01)。结论桃红四物汤可显著减轻癫痫发作程度,作用机制可能与降低血脑屏障通透性及升高脑组织紧密连接蛋白表达水平有关。     

补阳还五汤对大鼠脑微血管内皮细胞氧糖剥夺再灌注损伤的保护作用

目的:建立体外血脑屏障模型,研究补阳还五汤对氧糖剥夺再灌注损伤状态下血脑屏障功能及紧密连接相关蛋白表达的影响。方法:分离培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,建立体外血脑屏障氧糖剥夺再灌注损伤模型,将细胞分为空白组、模型组、补阳还五汤提取液处理组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活性;采用转移小室(Transwell)检测牛血清白蛋白(BSA)的透过量;蛋白质印迹(Western blot)实验检测紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)和紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)的表达;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)检测紧密连接蛋白Occludin,ZO-1 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组细胞活力降低,BSA的透过率明显升高,Occludin,ZO-1蛋白及其mRNA的表达量明显降低(P0.05);与模型组比较,补阳还五汤预处理后细胞存活性明显升高,BSA的透过率降低,Occludin,ZO-1蛋白及其mRNA的表达量明显升高(P0.05)。结论:补阳还五汤能够降低氧糖剥夺再灌注处理对体外血脑屏障模型的损伤,上调紧密连接蛋白ZO-1,Occludin蛋白及其mRNA的表达量。     

益脑康胶囊对脑梗死大鼠溶栓后血脑屏障的保护作用及对ZO-1蛋白表达的影响

目的:观察益脑康胶囊(YC)配伍对急性脑梗死大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂rt-PA溶栓后血脑屏障通透性及紧密连接的附着蛋白(ZO-1)蛋白表达的影响.方法:将SD大鼠随机等分为假手术组、溶栓组、益脑康胶囊低剂量组(1 g·kg-1)、益脑康胶囊高剂量组(3 g·kg-1),连续口服3d.建立大鼠自体血栓栓塞大脑中动脉闭塞模型,采用分光光度计法及Western blot法分别检测大鼠脑组织伊文思蓝含量及ZO-1蛋白的表达.结果:与假手术组相比,各组脑内EB含量均显著增高,ZO-1蛋白水平明显降低;与溶栓组相比,YC低剂量组脑内EB含量差异不显著,高剂量组脑内EB含量显著下降,高、低剂量组ZO-1蛋白表达水平均显著增加;与YC低剂量组相比,高剂量组脑内EB含量显著下降,ZO-1蛋白表达水平显著增加.结论:益脑康胶囊可以减轻溶栓后血脑屏障破坏,可能与其上调ZO-1蛋白的表达有关.     

三七总皂苷对铝暴露脑微血管内皮细胞胞质紧密黏连蛋白1表达的影响

目的从血脑屏障的角度探讨三七总皂苷对铝暴露脑微血管内皮细胞胞质紧密黏连蛋白1（zonulaoccludens-1,ZO-1）表达的影响,初步揭示三七总皂苷抗老年痴呆的可能靶点及机制。方法采用脑微血管内皮细胞系Balb/c,以含20%胎牛血清和100 mg/L生长因子的DMEM培养基培养,随机分为正常组、模型组、铝螯合剂组及三七总皂苷低、中、高剂量组,经铝暴露24 h后,分别以荧光实时定量PCR和Western blot的方法测定ZO-1的基因转录和蛋白表达水平,观察不同剂量三七总皂苷对ZO-1表达的影响。结果与正常组相比,铝暴露24 h可使脑微血管内皮细胞ZO-1的转录及表达明显减少（P〈0.01）。与模型组比较,三七总皂苷高剂量组能显著增加ZO-1的基因转录水平（P〈0.05）,中、高剂量组能显著提高ZO-1的蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论三七总皂苷对铝暴露下的脑微血管内皮细胞具有一定的保护作用,可增加血脑屏障紧密连接主要组成蛋白ZO-1的表达。     

三焦祛湿方对膜性肾病小鼠肾组织ZO-1和synaptopodin蛋白表达的影响

[目的] 探讨三焦祛湿方对膜性肾病小鼠肾组织的保护作用以及对紧密连接蛋白ZO-1和骨架蛋白synaptopodin表达的影响。[方法] 将60只雌性Balb/c小鼠随机分为对照组10只和造模组50只。造模组预免疫2周后,开始正式免疫。给予尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）（6.5 mg/kg）,隔日1次,持续6周,复制膜性肾病小鼠模型。6周后,测造模组所有小鼠24 h尿蛋白定量（24 h-UTP）显示均为阳性,提示造模成功;并随机选取4只作肾脏病理,观察到基底膜增厚并伴有免疫复合物的沉积,证实膜性肾病小鼠模型建模成功。将造模组随机分为模型组10只、中药低剂量组10只、中药高剂量组10只和盐酸贝那普利组10只,开始灌胃。空白组和模型组给予0.2 mL生理盐水灌胃,三焦祛湿方高低剂量组以及盐酸贝那普利组分别给予相应药物治疗（中药低剂量组3.71 g/kg、中药高剂量组7.42 g/kg、盐酸贝那普利组1.3 mg/kg）,每日1次,持续4周。实验结束后,麻醉小鼠,腹主动脉取血,收集血液标本检测总胆固醇（TC）、血清白蛋白（Alb）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;光镜下观察肾组织病理形态;免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G（IgG）沉积情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织中ZO-1和synaptopodin的表达水平。[结果] 与空白组相比,模型组小鼠24 h-UTP、TC显著升高（P<0.05）,Alb显著降低（P<0.05）;与模型组相比,各治疗组小鼠24 h-UTP、TC显著降低（P<0.05）,Alb显著升高（P<0.05）;各治疗组组间比较,24 h-UTP、TC、Alb无显著性差异（P>0.05）。各组小鼠Scr、BUN相比无显著性差异（P>0.05）。与空白组相比,模型组小鼠肾组织ZO-1、synaptopodin的表达显著减少（P<0.05）;与模型组相比,各治疗组小鼠肾组织ZO-1、synaptopodin的表达显著升高（P<0.05）,各治疗组间ZO-1、synaptopodin的表达无显著性差异（P>0.05）。[结论] 三焦祛湿方对膜性肾病小鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与上调ZO-1和synaptopodin蛋白的表达量有关。     

新痹痛灵抗炎作用及其机制

目的:研究新痹痛灵(New Bitongling,NBTL)的抗炎作用,揭示其抗炎作用及机制。方法:体内实验取30只SD雄性大鼠,随机分成模型组、阳性药布洛芬缓释胶囊组(0.054 g·kg-1)以及新痹痛灵高剂量组(11 g·kg-1,简称NBTLH)、低剂量组(2.75 g·kg-1,简称NBTLL);连续ig给药5 d,1次/d;末次给药1 h后,复制组胺致大鼠毛细血管通透性增加模型、采用尾静脉注射伊文斯蓝后提取皮肤中染料、测定提取液590 nm的吸光度反映毛细血管通透性;复制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型、采用容积测量法观察各组大鼠足跖肿胀度;体外实验以脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞分泌炎性因子复制炎症模型,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定各组细胞上清液中前列腺素E2(PGE2)含量。结果:与模型组比较,布洛芬缓释胶囊组,NBTLH,NBTLL组伊文斯蓝含量明显降低(P0.01);表明均能抑制大鼠毛细血管通透性增加;与模型组相比,在相同时间点,NBTLH组大鼠足跖肿胀度均降低(各时间点P0.05),NBTLL在各个时间点都有抑制趋势,但无显著性差异;与正常组比较,模型组的PGE2表达水平升高(P0.05);与模型组比较,NBTLH,NBTLL组PGE2表达水平显著降低(P0.05,P0.01)。结论:NBTL对炎症有明显抑制作用,其抗炎作用可能与抑制炎症组织PGE2的合成或分泌有关。     

耳聋左慈丸合通气散治疗慢性分泌性中耳炎的疗效及对血清水通道蛋白1及4水平的影响

目的:探讨耳聋左慈丸联合通气散加减味治疗慢性分泌性中耳炎(CSOM)肝肾阴虚证的疗效以及对血清水通道蛋白(AQP)~(-1)和AQP-4水平的影响。方法:慢性中耳炎患者共117例,参照数字表法随机分为治疗组58例和对照组59例;对照组给予盐酸头孢美特酯分散片治疗,500 mg/次,2次/d;枸地氯雷他定片,1片/次,1次/d;噻洛唑啉鼻腔滴鼻剂,2滴/次,2次/d。治疗组在对照组治疗的基础上给予耳聋左慈丸联合通气散加减治疗,1剂/d,常规水煎煮,分早晚2次内服;两组患者均给予4周治疗。比较两组中医症状积分和各频率下的骨导阈值;检测两组患者血清AQP~(-1)和AQP-4水平。结果:治疗组治疗后中医临床症状积分均明显低于对照组(P0.01);治疗组患者临床总有效率为89.61%,对照组为76.92%,治疗组总有效率高于对照组(P0.05);治疗组治疗后各频率(1,2,4,8 k Hz)骨导阈值均明显低于对照组(P0.01);治疗后治疗组血清AQP~(-1)和AQP-4水平均明显高于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论:耳聋左慈丸联合通气散加减治疗CSOM肝肾阴虚证可明显改善患者临床症状,降低骨导阈值,上调血清AQP~(-1)和AQP-4水平。