基质金属蛋白酶-2、9及其抑制剂-1在大肠腺癌中表达的研究

目的:探讨人大肠腺癌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学方法(SP)检测MMP-2、MMP-9和TIMP-1在30例大肠癌组织及相应切缘正常组织中的蛋白表达。结果:大肠癌组织中MMP-2、MMP-9及TIMP-1阳性表达明显高于正常切缘组织(P<0.05),并与肿瘤分化程度、浸润深度、Dukes分期以及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05);MMP-9和TIMP-1表达明显相关(r=0.4924,P<0.05)。结论:MMP2、MMP9、TIMP1的过度表达与大肠腺癌的侵袭、转移有密切关系,其联合检测有助于评估大肠腺癌恶性生物学行为及预后。     

RNAi沉默Skp2抑制胃癌细胞SGC7901侵袭作用的实验研究

目的研究RNA干扰(RNAi)沉默S期激酶相关蛋白2(Skp2)对胃癌细胞侵袭的影响。方法以胃癌细胞株SGC7901为实验对象,构建、并筛选出以Skp2基因为靶向的稳定表达载体,导入胃癌细胞,筛选获得稳定转染细胞株。采用侵袭实验检测侵袭能力的变化;明胶酶谱法观察基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9蛋白的活性;Western Blotting检测p27、p21、Sp1和Kazal基序逆向诱导半胱氨酸丰富蛋白(RECK)的表达。结果侵袭实验显示:与对照组相比,实验组侵袭能力显著下降,侵袭细胞数显著减少(P<0.05);明胶酶实验显示:实验组中MMP-2、MMP-9活性降低;Western Blotting显示:实验组细胞p21、p27和RECK蛋白表达显著增强,Sp1蛋白表达下调(P<0.05)。结论通过Skp2-shRNA特异性沉默Skp2基因可下调Sp1,增强RECK表达,降低胃癌细胞在体外的侵袭能力。     

人食管鳞癌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1、TIMP-2的表达

目的:探讨人食管鳞癌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1、TIMP-2的表达及其临床意义.方法:分别采用免疫组织化学和Western blot法检测41例食管鳞癌组织及相应正常食管组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1、TIMP-2的表达.结果:食管鳞癌组织中MMP-9阳性表达率与淋巴结转移及静脉侵袭有关(P＜0.05或0.01);鳞癌组织中MMP-9的阳性表达率(63.41%)高于正常组织的12.20%(P＜0.01);鳞癌组织中MMP-9的阳性表达率与蛋白相对表达量(3.02±0.56)均高于MMP-2(17.07%,2.26±0.51)、TIMP-1(39.02%,1.25±0.45)和TIMP-2(34.15%,1.31±0.44)(P＜0.05或0.01);鳞癌组织中MMP-9和TIMP-1的表达呈负相关(x2=29.3,P＜0.01).结论:MMP-9表达与食管鳞癌的侵袭转移有关,其机制可能与食管鳞癌组织中MMP/TIMP平衡失调有关;MMP-9与TIMP-1联合检测有助于食管鳞癌生物学行为的判断.     

食管鳞状细胞癌组织中KISS-1和MMP-9蛋白和mRNA的表达

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与食管鳞状细胞癌侵袭、转移的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例食管鳞状细胞癌及50例正常食管组织中KISS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与食管鳞状细胞癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性.结果:食管鳞状细胞癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率(61.0%)低于正常食管组织(82.0%)(χ2=5.877,P<0.05),并且其低表达与淋巴结转移密切相关(χ2=4.340,P<0.05).食管鳞状细胞癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率(72.0%)高于正常食管组织(52.0%)(χ2=4.244,P<0.05),并且其高表达与肿瘤的浸润、淋巴结转移及分化程度均相关(P均<0.05).食管鳞状细胞癌组织中KISS-1 mRNA的阳性表达率(56.0%)及表达水平(0.992±0.090)均低于正常食管组织(88.0%,1.075±0.181)(P<0.05),并且其低表达也与淋巴结转移密切相关(P<0.05).食管鳞状细胞癌组织中MMP-9 mRNA的阳性表达率(72.0%)及表达水平(1.030±0.153)均高于正常食管组织(44.0%,0.943±0.085)(P<0.05),并且其高表达与肿瘤的深层浸润和淋巴结转移密切相关(P<0.05).KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关(P<0.05).结论:KISS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与食管鳞状细胞癌的浸润、转移有关.二者有望成为判定食管鳞状细胞癌侵袭和转移能力的指标.     

基质金属蛋白酶-9对大肠癌细胞肿瘤坏死因子受体1表达的影响

目的:研究基质金属蛋白酶9(MMP-9)对大肠癌细胞肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)表达的影响以及促进大肠癌侵袭和转移的可能途径. 方法:通过免疫荧光法研究TNFR1在大肠癌细胞SW1116中的表达;用MMP-9干预培养的大肠癌SW1116细胞,用流式细胞术检测MMP-9不同剂量和不同作用时间时TNFR1表达变化. 结果:①SW1116细胞表达TNFR1;②MMP-9对SW1116细胞表面TNFR1表达有下调作用,但有剂量和时间依赖性. 结论: MMP-9下调大肠癌细胞表面TNFR1的表达,可能与大肠癌侵袭转移密切相关.     

MicroRNA-122-5P通过靶向MMP-9抑制TPA诱导的SW480细胞侵袭迁移能力

目的:研究miR-122-5p对TPA诱导人结直肠癌SW480细胞MMP-9表达及侵袭迁移的影响。方法:利用生物信息学筛选结直肠癌差异基因，预测其靶基因miRNA。用TPA(100nM)处理SW480细胞，通过RT-qPCR、Western blot法检测基因和蛋白表达水平；明胶酶谱法检测MMP-9细胞外分泌情况；Transwell检测细胞侵袭和迁移能力。结果:MMP-9在结肠癌组织中高表达，筛选出上游靶基因miR-122-5P;TPA诱导MMP-9 mRNA表达呈时间依赖性上调(P<0.01),诱导miR-122-5p的表达下调(P<0.01);过表达miR-122-5p明显下调TPA诱导的MMP-9 mRNA和蛋白表达(P<0.05),且MMP-9胞外分泌减少，细胞的侵袭、迁移能力显著下降(P<0.01)。结论:miR-122-5p可能通过调控TPA诱导MMP-9的表达，进而抑制结直肠癌SW480细胞侵袭和迁移能力，为克服结直肠癌转移研究提供新的思路。     

皮肤鳞状细胞癌组织中CD147、MMP-9及TIMP-2蛋白的表达

目的:检测皮肤鳞状细胞癌(SCC)组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)蛋白的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测51例SCC,17例正常皮肤组织石蜡标本中CD147,MMP-9及TIMP-2蛋白的表达.结果:SCC组织中CD147,MMP-9蛋白的阳性表达率(65%和59%)明显高于正常皮肤(12%和18%,P<0.05),TIMP-2(37%)明显低于正常皮肤(76%,P<0.05).SCC组织中CD147的阳性表达率与MMP-9的阳性表达率呈正相关(r=0.466,P<0.05),与TIMP-2的阳性表达率呈负相关(r=-0.427,P<0.05).结论:在SCC的发生过程中CD147,MMP-9和TIMP-2起一定作用.     

乳腺癌组织中基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和E-cadherin的表达及临床病理意义

目的 探讨乳腺癌组织中基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和E-cadherin的表达水平及临床病理意义.方法 用免疫组化方法检测了该院72例乳腺癌组织中MMP-2、MMP-9以及E-cadherin的表达.结果 55.6%(40/72)的乳腺癌组织中MMP-2表达阳性,63.9%(46/72)MMP-9表达阳性,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);TNMⅢ、Ⅳ期患者MMP-2、MMP-9阳性分别为48.1%和83.3%,均明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.01);两种酶的表达均与Her-2表达相关(P<0.01).E-cadherin在正常乳腺组织中均为阳性表达,E-cadhefin表达阴性与临床分期和肿瘤的病理分级密切相关(P<0.05).结论 乳腺癌组织中MMP-2、MMP-9高表达及E-cadherin的表达下调可能参予乳腺癌的侵袭转移,联合检测三者在乳腺癌组织中的表达对推测乳腺癌的侵袭转移及预后有一定意义.     

靶向抑制存活素基因对大肠癌细胞SW80侵袭和转移的实验研究

目的 构建靶向存活素(survivin)基因的短发夹干扰RNA(shRNA)表达载体,导入人大肠癌细胞SW480中,研究靶向抑制survivin基因对SW480细胞侵袭和转移的影响.方法 根据siRNA设计原则,在survivin序列中选取设计含19个核苷酸(19 nt)的靶序列,间以9个核苷酸的茎环序列,两端分别加上对应的酶切位点,形成shRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo中,获得靶向抑制survivin基因的sihNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo-survivin;采用Lipofectamine 2000TM转染试剂将干扰质粒pRNAT-U6.1/Neo-survivin导入到大肠癌细胞SW480中;用Western blotting从蛋白水平检测干扰效果;分别采用肿瘤侵袭粘附实验和明胶酶谱分析法检测pRNAT-U6.1/Neo-survivin对SW480细胞的侵袭和转移潜能的影响.结果 Survivin基因的蛋白表达均得到显著抑制;沉默SW480的survivin基因可以显著抑制SW480细胞的侵袭和转移潜能,而且survivin基因表达被抑制后,SW480细胞分泌基质金属蛋白酶明显减少.结论 Survivin基因可能在SW480的侵袭和转移潜能中起重要作用,沉默SW480的survivin基因可以显著抑制其侵袭、转移和基质金属蛋白酶分泌,因而survivin影响SW480的侵袭和转移可能与调控基质金属蛋白酶分泌密切相关.     

DDR1促进胰腺癌细胞AsPC-1的迁移及侵袭能力

目的 探讨盘状结构域受体1 (DDR1)对胰腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响.方法 利用qRT-PCR检测DDR1在胰腺癌旁组织及癌组织中的表达水平.通过脂质体转染DDR1表达质粒至胰腺癌细胞AsPC-1中,应用Western blot验证其转染效果.通过划痕实验及Transwell法检测转染DDR1表达质粒后细胞迁移及侵袭能力的变化情况.Western blot检测转染后基质金属蛋白酶2 (MMP2)和基质金属蛋白酶9 (MMP9)的表达水平.结果 与癌旁组织比较,胰腺癌组织的DDR1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05).转染质粒后,AsPC-1细胞DDR1蛋白表达量显著升高(P<0.05).应用划痕试验及Transwell试验结果显示,与对照组比较,AsPC-1/DDR1迁移力上调(51.11±11.51)%,侵袭力上调(77.25±10.64)%,差异均具有统计学意义(P<0.05).过表达DDR1后,AsPC-1细胞中MMP2和MMP9表达水平显著升高(P<0.05).结论 DDR1通过改变MMP2和MMP9的表达水平,促进胰腺癌细胞的迁移及侵袭,有望成为靶向治疗的新方向.     

经络腧穴理论的形成与发展

从<脉书·十一脉><黄帝内经>等文献人手,梳理了血气、经络、腧穴理论的形成与发展,简要介绍了四肢部的基本腧穴、躯体部要穴,以及腧穴配伍的基本要义.     

析议痰瘀同源、互结、同治

目的:探讨痰瘀相关,意在梳理痰瘀知识、并强调痰瘀相关的重要性。方法:通过多角度地分析、刍议"痰瘀同源"、"痰瘀互结"、"痰瘀同治"等痰瘀经典理论的方式论述痰瘀相关。结果:痰与瘀是中医界里重要的元素,痰与瘀互结是许多疾患共同的病机,痰瘀同治是常用治法。结论:痰瘀同源、互结、同治,不但在临床上有着实用的指导意义,又能与时俱进、在探究中创新。     

载脂蛋白的结构和功能与病毒病的预防和治疗

载脂蛋白（apo）是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alpha螺旋结构是其结合及转运脂质的结构基础。在HIV外壳结构中的一种糖蛋白（gP）也具有这种alpha螺旋结构。近年研究表明,载脂蛋白和由载脂蛋白组成的脂质体还具有抗肝炎病毒、抗HIV病毒、抗单纯疱疹和中和细菌内毒素的功能。以脂蛋白和载脂蛋白为主要成分构成的脂质体已成为运载抗病毒和抗肿瘤药物受体的靶向性载体。     

神经病学与神经解剖学优化整合的评价与分析

目的评价神经病学与神经解剖学优化整合教学法的教学效果,寻找存在的问题及解决对策,为今后的神经病学教学改革提供参考。方法采用问卷调查、访谈的方式,分析神经病学教改后的教学效果、对学生学习态度的影响、教学中存在的不足。结果教改班的教学效果、对学生学习态度的改善优于非教改班(P<0.01)。结论神经病学与神经解剖学优化整合的教学改革效果显著,达到了预期的目的。     

教考合一与教考分离的统一——医学基础课综合性考试模式初探

考试是检验教学效果的有效方法,是教学过程中不可缺少的环节。多年来,人们对考试改革不断进行探索,总结出不同的考试模式,例如教考合一与教考分离就是2种完全不同的考试模式。通过对比2种考试模式的优势与劣势,提出适合医学基础课的综合性考试模式。     

“医信融创”教育模式的构建与实践探索

从必要性、要求及实质3个角度梳理了“医信融创”教育的内涵,并在此基础上探索“医信融创”教育的模式。“医信融创”需要遵循由“融”到“创”的逻辑主线,通过“融行-融智-融心”的过程最后走向“创新”的目的。最后以山西医科大学的实践案例证明了“医信融创”教育的必然性和可行性。     

新生儿游泳对生长发育的影响研究

目的:探讨新生儿游泳的护理以及对生长发育的影响。方法:按照知情同意制度,选取125例实施游泳的新生儿为观察组,随机选取同期未游泳的新生儿为对照组(125例)。观察两组新生儿出生后42d头围、生长和体重的变化,比较两组生后7d、15d和28d的24h摄乳量。结果:42d后游泳组的婴儿头围、生长、体重增长明显,特别是体重增幅较大,两组统计学有明显差异;游泳组摄乳量从第7天开始均高于对照组,出生后28d更是明显增多,有显著统计学意义。结论:游泳有利于新生儿增加摄乳量,促进新生儿体格发育。     

躯体形式障碍患者医疗费用及相关因素

目的 了解消化科门诊躯体形式障碍诊疗费及相关因素.方法 对87例消化科门诊躯体形式障碍患者采用既往检查调查表(自编)、症状自评量表(SCL-90)进行评估.结果 患者既往检查总费用212-28652元(中位数为3792元),检查频率为5-82次,检查项目为3-11项,重复检查频率为3-72次,检查项目为血常规、彩超、X线、内窥镜、MRI、粪常规,重复度高的项目为彩超、内窥镜、X线、MRI.检查频度与病程、性别、年龄、文化程度有相关性,检查费用与检查频度呈正关(P<0.01).结论 消化科门诊躯体化障碍患者检查项目多,频度高,医疗花费多.     

解剖学与中医理论的隔阂与融合(上)

分析了解剖学与中医理论发展的历史关系。指出古代的解剖在构建了中医基础理论之后逐步走向式微,中医理论与解剖学之间的隔阂在近代达到顶峰。这种隔阂是一种历史性的结果,随着历史条件的改变,中医理论可以实现与解剖学的融合,从解剖脏器非对称特征中蕴含的阴阳规律具体论证了这一问题。在现代条件下,对解剖的反思和排斥已不具有积极意义,建立中医理论的形态学基础是中医理论发展的必然。     

解剖学与中医理论的隔阂与融合(下)

4 解剖脏器非对称特征中的阴阳规律显示出中医理论在新的历史条件下可以实现与解剖的融合 中医学认识解剖结构问题，当然要从自己的基本理论出发，最重要的首先是阴阳，同时要以确切的现代解剖内容为客观研究对象。就阴阳和解剖的关系这一具体问题而言，内脏基本结构的非对称性符合阴阳规律，中医理论在新的历史条件下可以实现与解剖的融合，从而为未来进一步的发展奠定新的基础。