荧光定量PCR与ELISA法检测HBV-DNA结果分析

目的 :应用荧光定量PCR方法精确检测HBV -DNA的拷贝数 ,为临床判断病毒复制程度提供指标 ;对比分析荧光定量PCR方法和ELISA方法检测HBV -DNA的结果。方法 :用荧光定量PCR法检测 10 14例用ELISA法诊断为乙型肝炎病人的血清HBV -DNA拷贝数。结果 :10 14例病人中 ,病毒拷贝数≥ 1× 10 5的 4 99例 ,阳性率4 9.2 % ;HBeAg阳性患者的HBV -DNA拷贝数≥ 1× 10 5的阳性率显著高于HBeAg阴性患者。结论 :荧光定量PCR检测HBV病毒复制情况结果准确 ,对临床工作指导意义更大 ;HBeAg是一项重要指标。     

荧光定量PCR检测孕妇单纯疱疹病毒的感染

目的探讨荧光定量PCR技术(Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction, FQ-PCR)检测孕妇单纯疱疹病毒(HSV)感染的临床诊断价值.方法45例怀疑HSV-Ⅱ感染的孕妇用ELISA法检测血清HSV-ⅡIgM,同时用FQ-PCR检测血清及宫颈分泌物HSV DNA.结果该组孕妇血清HSV-ⅡIgM阳性率为20.0%,血清HSV DNA阳性率为33.3%,后者检出阳性率明显高于前者(P＜0.05).宫颈分泌物标本HSV DNA阳性率为40.0%,明显高于血清ELISA检测阳性率(P＜0.05),但与血清FQ-PCR检出阳性率无显著性差异(P＞0.05).结论荧光定量PCR检测孕妇HSV DNA感染可以提高诊断率及准确率.     

荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床价值

目的：探讨荧光定量PCR（ FQ-PCR）检测乙型肝炎病毒（ HBV）-DNA的临床意义。方法：采用FQ-PCR检测265例乙型肝炎（乙肝）患者和150名健康体检者的血清HBV-DNA,并将结果与酶联免疫吸附试验测定的乙肝血清标志物进行比较。结果：不同血清标志物模式的各组均可检出 HBV-DNA 阳性,其中 HBsAg、HBeAg、HBcAb 阳性组和 HBsAg、HBeAg 阳性组的HBV-DNA阳性率和病毒拷贝数均显著高于其他血清标志物模式组和对照组（P〈0.01）。 HBV所致不同疾病类型的HBV-DNA阳性率差异均无统计学意义（P〉0.05）,但急性乙肝病毒拷贝数均明显高于其他疾病（P〈0.01）。结论：FQ-PCR检测HBV-DNA可以直接反映是否存在HBV感染,判断病毒的复制能力和传染性,指导临床用药和观察疗效,具有重要的临床意义。     

荧光定量PCR检测HSV合并其他性传播感染结果与分析

目的探讨生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒(HSV)及其他性传播感染的发病率及特点。方法采集182例生殖器疱疹患者的损害部位的组织液或阴道分泌物,用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,检测单纯疱疹病毒、人乳头状瘤病毒、沙眼衣原体、解脲支原体等性传播病原体,梅毒、抗H IV采用血清学试验。结果182例生殖器疱疹患者中,HSV阳性116例(63.7%),在116例阳性HSV中有32例(27.6%)合并有其他性传播感染,其中合并人乳头状瘤病毒感染11例(9.5%),梅毒8例(6.9%),沙眼衣原体4例(3.4%),解脲支原体9例(7.8%)。结论HSV感染是生殖器疱疹的主要原因,并且容易合并其他性传播感染,应注意检查及治疗。     

荧光定量PCR法和ELISA检测儿童呼吸道感染病原体的意义

儿童呼吸道感染是儿童秋冬季节常见的疾病,临床症状以发热、咳嗽、流涕等为主,近年来除了常见的细菌与病毒感染以外,肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)和肺炎衣原体(chlamydiapliel pneumoniae,CP)也逐渐成为急性呼吸道感染的主要病原体.由于该两类病原体的分离培养方法复杂,所需时间长,不便于临床快速诊断[1],早期检测出病原体而成为临床诊断棘手的问题.目前大多数医院对该两类病原体的检测仍以血清学方法(如ELISA)为主.但近年来随着分子生物学技术的发展,聚合酶链(PCR)反应,尤其是荧光定量PCR技术的广泛使用[2],为病原体的检测提供了新的技术与手段.本研究拟同时采用ELISA和荧光定量PCR技术对儿童呼吸道感染病原体进行检测,比较2种方法对病原体检出的阳性率、一致性和优越性.     

荧光定量PCR检测HBV DNA及其与Pre-S1和HBeAg关系探讨

目的探讨慢性乙肝患者HBVDNA与血清标志物前S1抗原(Pre-S1)和HBeAg的相互关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应技术(FluorescencequantitativePCR,FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对931份HBV-M不同阳性模式及35份HBV-M全阴模式血清进行HBVDNA及其标志物检测。结果在931例不同阳性模式乙肝患者中,HBeAg阳性总检出率为20.7%,Pre-S1抗原阳性总检出率为30.2%,HBVDNA阳性总检出率为45.3%。在422例HBVDNA(+)乙肝患者中,Pre-S1抗原阳性检出率为57.3%,HBeAg阳性检出率为44.1%。在281例Pre-S1(+)乙肝患者中,HBVDNA阳性符合率达86.1%,在Pre-S1(-)组HBVDNA阳性率仅为27.7%。结论HBVDNA检测是反映HBV复制最直接的分子生物学指标;Pre-S1抗原和HBeAg是反映HBV复制的血清学指标,Pre-S1抗原甚至比HBeAg更灵敏地反映HBV复制。     

ELISA法检测HSVⅡ-Ag与HSVⅡ-Ab(IgG,IgM)在HSVⅡ感染上的应用研究

目的 分析ELISA法检测生殖器疱疹病毒抗原、抗体的敏感性和特异性。方法 同时对84例皮肤性病门诊病人用ELISA法进行生殖器疱疹病毒抗原、抗体检测。结果 HSV Ⅱ—Ag阳性率53．6％,HSVⅡ—Ab(IgG)阳性率42．9％,HSVⅡ—Ab(IgM)22．6％。结论 ELISA法检测HSVⅡ—Ag可应用于基层医院在生殖器疱疹上的辅助诊断,检测HSVⅡ—Ab(IgG,IgM)可应用于医疗事业单位健康体检;确诊患者的病程监测和疗效观察。     

FQ-PCR和ELISA法检测生殖器疱疹病毒抗原检测结果比较

本文对FQ-PCR和ELISA法检测生殖器疱疹病毒抗原的检测结果进行比较,为临床诊断治疗提供参考。分析邢台市第三医院皮肤性病科2015~2017年诊治的生殖器疱疹60例患者临床资料。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)和荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测样本中单纯疱疹病毒,检测结果不一致的样本采用单纯疱疹病毒通用引物分析。结果显示60例样本中FQ-PCR法检测阳性为46例,占76.7%,ELISA法检测阳性为48例,占80.0%,检测结果不一致样本为6例,占10.0%;1例FQ-PCR法阳性而ELISA法阴性样本经第二次检测后为阴性,3例ELISA法检测阳性而FQ-PCR法检测阴性样本经第二次检测后阳性为2例,阴性为1例;FQ-PCR法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为92.4%、96.3%、93.7%和94.5%,而ELISA法的上述指标分别为94.4%、96.3%、93.8%和95.8%。因此,ELISA法检测生殖器疱疹病毒抗原敏感性和特异性高,值得临床推广。     

乙肝EIisa（酶联免疫吸附试验）与荧光定量PCR检测结果比较与临床意义

乙肝E1isa检测HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗HBe，抗-HBc，其临床意义主要是如下几种：早期乙肝感染者，主系传染性，急性乙肝活动期，治疗恢复期，慢性携带者，免疫测定法比较简单，只能提供血清标本HBV的间接证据，而且敏感性低，只能达0．1μg／ml，而PCR法可检测到10^5Pg的HBV—DNA，能检测到乙肝病毒的感染程度及抗病毒药物治疗效果的评     

荧光定量PCR和ELISA法检测HBV标志物的结果分析

外周血中HBV—DNA的定性和定量是检测病毒复制最直接和可信的指标，尤其是荧光定量PCR技术在病毒含量检测，使得临床能更有效的监测患者的病情，如治疗效果、是否有耐药性发生等，并可依据病毒含量的变化合理解释病情转归。为进一步了解HBV—DNA检测的实用价值及临床意义，我们对1034份血清标本，同时用ELISA检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及应用荧光定量PCR技术检测HBV—DNA，其检测结果如下。     

荧光定量PCR法检测生殖器疱疹病毒感染患者的结果及分析

目的：了解重庆地区疑有单纯疱疹病毒（HSV）感染患者的感染情况。方法：用荧光定量PCR法对422例疑有HSV感染的门诊患者进行检测。结果：（1）3个年龄段患者，即≤25岁，＞25岁并≤35岁，＞35岁的阳性率分别为27．93％（31／111）、23．65％（48／203）、15．74％（17／108），0．05＜P＜0．1，无差异。（2）男性患者和女性患者的阳性率分别为29．5％（41／139）和19．43％（55／238），P＜0．05，相差显著。（3）妇科、泌尿科、皮肤科就诊患者的阳性率分别为18．14％（41／226）、26．44％（23／87）、29．36％（32／109），P＜0．05，相差显著。结论：（1）重庆地区HSV感染率在男性患者和低龄人群（≤25岁）中发病率较高。（2）皮肤科患者的阳性率较其他两个科室为高。说明取标本的采取集部位十分重要。（3）FQ－PCR特异性高，灵敏度强，操作简单，时间短，结果客观准确，特别适宜于门诊患者快速检测诊断的需要。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学检测的探讨

目的探讨HBV感染者乙肝免疫学检测与HBV—DNA的关系,为合理治疗乙肝患者提供较准确的依据。方法用ELISA方法检测HBV感染者乙肝免疫学检测,用PCR方法检测HBV—DNA,并对结果进行分析。结果HBsAg（＋）HBe般（＋）HBcAb（＋）组（大三阳组）患者血清HBV—DNA检出率97．06％（66／68）,平均拷贝数为（2．15E＋07）mL;HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）组（小三阳组）患者血清HBV—DNA检出率为62．64％（57／91）,平均拷贝数为（2．47E＋04）mL;HBsAg（＋）HBcAh（＋）组血清HBV—DNA检出率为52．94％（18／34）,平均拷贝数为（6．39E＋04）mL。结论HBsAg和HBeAg阳性与HBV～DNA复制密切相关。乙肝免疫学检测和HBV—DNA检测将成为指导乙型肝炎防治的重要手段。     

实时荧光定量PCR鉴别检测单纯疱疹病毒方法的建立

目的:建立快捷、灵敏、特异的单纯疱疹病毒(HSV)的实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测及分型方法。方法:选择HSV1和HSV2的糖蛋白B基因设计一对通用引物和对应的探针组建2个FQ-PCR反应体系,应用克隆的质粒建立系列标准品制作标准曲线,进行重复性和敏感性试验,以其他种类的细菌、病毒、真菌进行特异性分析,并用于检测生殖器疱疹患者的HSV1和HSV2。结果:HSV1和HSV2两标准曲线的线性检测范围均为105到1011Copies/L,相关系数均大于0.99,其他种类的细菌、病毒、真菌均未出现特异性扩增;48例生殖器疱疹患者疱液中HSV1和HSV2的检出率分别为6.3%(3/48)和87.5%(42/48)。结论:实时FQ-PCR法鉴别检测HSV1和HSV2,具有快速、特异、灵敏、便捷的特点,有助于HSV感染的流行病学和病理机制的研究;生殖器疱疹患者以HSV2感染为主。     

PCR定量检测HBV—DNA与HBV标志物关系探讨

目的探讨PCR定量检测HBV-DNA拷贝数与乙肝病毒标志物常见模式的关系。方法对疑似乙型肝炎病毒患者428例采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量,酶联免疫吸附试验检测HBV-M。结果 92例HBsAg、HBeAg、抗HBc标志物均阳性的患者中,HBV-DNA定量拷贝数〉1.0×103/ml者有85例,平均拷贝数为1.42×107/ml;在12例HBsAg、HBeAg标志物阳性的标本中,HBVDNA阳性11例,平均拷贝数4.42×106/ml;在99例HBsAg、抗HBe、抗HBc标志物均阳性的标本中,HBV-DNA阳性者为39例,平均拷贝数为9.89×105/ml;而在207例HBV-M标志物全阴性的标本中,仍有4例检出HBV-DNA〉1.0×103/ml,平均拷贝数为9.54×103/ml。结论 在各种HBV标志物模式中,以HBeAg阳性者的病毒复制水平最高,而血清中未检出HBV-M者并不能排除HBV感染。     

荧光定量PCR法检测338例血清乙肝病毒DNA的结果分析

目的：用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA拷贝数，同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)，探讨HBV-DNA与HBV-M表现模式的关系。方法：采用FQ-PCR和ELISA分别检测338例血清标本。结果：132例HBsAg( )、HBeAg( )、抗-HBc( )，其HBV-DNA阳性为130例，定量结果对数值的均值为7．7l；119例HBsAg( )、抗-HBe( )、抗-HBc( )，其HBV-DNA阳性为65例，定量结果对数值的均值为4，86；16例抗-HBc( )，其HBV-DNA阳性为4例，定量结果对数值的均值为3．12；而2例HBV-M全阴的HBV-DNA也阴性。结论：FQ-PCR能快速、特异、准确地检测标本中的HBV-DNA，可真实反映HBV感染和复制状态，对乙型肝类的诊断、疗效观察及预后判断都具有较高的指导意义。     

实时荧光定量PCR法检测淋病奈瑟菌感染的效果

①目的 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术准确定量检测临床标本中淋病奈瑟菌基因，同时与金标准—细菌培养法比较其灵敏度和特异度，为临床淋病的诊疗提供依据。②方法 采集l73例病人临床标本，以PE5700全自动PCR扩增分析仪和淋病奈瑟菌实时荧光定量PCR检测试剂盒进行核酸检测。同时，用含PolyViteX的巧克力板对淋病奈瑟菌进行分离，用ATB Expression自动细菌鉴定仪及配套的APINH进行鉴定。③结果 173份临床标本中，荧光定量PCR法示47例淋病奈瑟菌阳性，阳性率为27．2％；细菌培养法示41例淋病奈瑟菌阳性，阳性率为23．7％。与细菌培养法相比，荧光定量PCR法的灵敏度为100％，特异度为95．5％，两者的符合率为96．5％。④结论 荧光定量PCR技术具有简便、快捷、灵敏度高、特异度高、定量准确等优点，在临床检测淋病奈瑟菌中具有良好的应用前景。     

应用荧光杂交定量PCR和ELISA法进行产前TORCH筛查比较及临床意义的研究

目的：比较荧光杂交定量PCR和ELISA法进行产前TORCH筛查的差异，探讨病原微生物拷贝数在临床诊治中的作用；方法：分别用荧光杂交定量PCR和ELISA IgM法筛查孕期血标本272例，其中包括妊娠早期102例，晚期170例；采集121例分娩孕妇及新生儿脐带血标本；222例不明原因流产标本，其中66例采集了新鲜自然流产脱膜和绒毛；结果：孕期筛查血CMV DNA和TOX DNA的阳性率分别为1．8％（5／272）和0．36％（1／272），其中妊娠早期CMV DNA的阳性率为2．9％（3／102），晚期为1．2％（2／170），不明原因流产，查出血清CMV感染22例，TOX4例，CMV DNA和TOX DNA的阳性率分别为9．9％（22／222）和1．8％（4／222）。脱膜和绒毛均感染3例，1例血清，脱膜感染但未采到绒毛标本。有2例是母血清中查到CMV，流产组织中未查到。查出血清，脱膜和绒毛均感染TOX1例，妊娠妇女外周血CMVDAN≥10^3有88％的发生流产；结论：荧光杂交定量PCR法不但具有较高的灵敏度和特异性而且可检测病毒负载量－拷贝数／ml，拷贝数越高发生流产的可能性愈高，应推荐作为妊娠初期筛查的首选方法。     

乙肝病毒 ELISA 定性及荧光定量 PCR联合检测的应用价值

目的：探讨乙肝病毒的ELISA定性检测与荧光定量 PCR联合检测在临床诊断中的应用价值。方法：选取2013年4月－2014年3月我院收治的乙肝患者71例为观察对象，使用ELISA定性方法与荧光定量PCR方法对患者的乙肝病毒前抗原（Pre‐S2）、乙肝病毒DNA及乙肝两对半进行定性、定量检测，比较不同两对半模式下的乙肝病毒检出情况。结果：61例HBsAg阳性患者中，Pre‐S2阳性48例，HBeAg阳性31例，HBV‐DNA阳性43例，Pre‐S2阳性率与 HBV‐DNA相似，二者均高于HBeAg。结论：将ELISA定性与PCR定量联合运用于乙肝病毒的临床检测中，可更清楚反映出 HBV的复制与传染性，需引起重视。