戴氏虫草多糖诱导肿瘤细胞分化的研究

目的：观察戴氏虫草多糖（ CDP）对人红白血病K562细胞和人早幼粒白血病HL-60细胞分化的影响。方法：用1、10、100及1000 mg/L浓度的CDP分别处理K562细胞和HL-60细胞2 d,台盘蓝染色计数两种细胞的死活细胞数,同时检测CDP处理后K562细胞的血红蛋白的含量,观察200个HL-60细胞的分化情况。结果：在CDP作用下,K562细胞存活率增高,K562细胞内血红蛋白含量增加;HL60细胞形态向中幼,晚幼阶段方向分化,且其阳性细胞数与CDP的浓度有明显的量—效关系。结论：CDP可诱导K562细胞与HL60细胞分别向红细胞系和粒细胞系方向分化。     

环孢菌素A对HL-60和K562细胞增殖的影响

目的 探讨环孢菌素A对HL-60、K562细胞增殖的影响。方法 应用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）观察环孢菌素A对HL-60、K562细胞增殖的抑制率，应用电镜进行凋亡的检测。结果 癌细胞在环孢菌素A作用下，细胞增殖被阻遏，并呈现时间剂量效应关系。同时发现环孢菌素A能诱导HL-60、K562细胞凋亡。结论 环孢菌素A可以通过诱导细胞凋亡而抑制HL-60和K562细胞增殖。     

羊栖菜多糖对离体小鼠NK细胞活性和巨噬细胞功能的影响

目的观察羊栖菜多糖对离体小鼠NK细胞活性和巨噬细胞功能的影响。方法10、30、100mg/L浓度的羊栖菜多糖分别作用小鼠脾细胞6、12和18h,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性;10、30、100mg/L浓度的羊栖菜多糖分别作用小鼠腹腔巨噬细胞16、24和48h,测定其所分泌的一氧化氮（NO）量。结果10、30mg/L浓度组的羊栖菜多糖作用6、12h对离体小鼠NK细胞活性有明显的促进作用,以30mg/L浓度羊栖菜多糖作用组效果最为显著（P〈0.01）;10、30mg/L浓度组的羊栖菜多糖促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO作用更为明显,以10mg/L浓度组作用48h效果最为显著（P〈0.01）。结论羊栖菜多糖能明显增强离体小鼠NK细胞活性,促进巨噬细胞释放NO。     

刺五加多糖对人白血病K562细胞作用的研究

目的：研究刺五加多糖对体外培养人白血病K562细胞有无增殖抑制和凋亡诱导作用。方法：取培养至对数生长期的K562细胞（密度为5×10^4／mL和1×10^4／mL）分别接种于96孔培养板（100μL／孔）及50mL培养瓶（1．5mL／瓶）中。加入不同浓度的刺五加多糖作用24h后。用CCK-8法检测刺五加多糖对K562细胞增殖抑制作用；荧光显微镜检测细胞凋亡。结果：不同浓度刺五加多糖（0．405、0．810、1．620、2．430、3．240mg／mL）作用K562细胞24h．抑制率分别为16％、27％、48％、50％、55％；荧光显微镜下观察发现培养K562细胞中出现核固缩、凋亡小体。结论：刺五加多糖对体外培养K562细胞生长有明显的抑制作用．可诱导K562细胞凋亡。     

丹参酮ⅡA诱导白血病细胞分化前后端粒酶活性变化

目的 研究丹参酮ⅡA（TanⅡA）对HL-60和K562细胞的诱导分化作用和分化前后端粒酶活性变化。方法 将HL-60和K562与浓度为0.5μg/ml的TanⅡA分别培养5天或6天，进行形态学观察和NBT染色，并用PCR-TRAP方法检测药物作用前后细胞的端粒酶活性，同时设立ATRA阳性对照及0.01%DMSO空白对照。结果 TanⅡA抑制HL-60和K562细胞生长，TanⅡA作用5天，HL-60细胞生长抑制率为79.9%，TanⅡA还诱导细胞向终末细胞方向分化，HL-60经TanⅡA处理4天，分化率为72%；NBT试验阳性显示有白血病细胞分化。K562细胞经TanⅡA处理6天，分化细胞占76%，HL-60经TanⅡA处理5天、K562经TanⅡA处理6天端粒酶活性抑制率分别为30.8%，50.8%。结论 TanⅡA对HL-0和K562细胞具诱导分化作用，随着细胞的诱导分化，端粒酶活性明显下降。     

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法诱导HL-60、K562细胞凋亡及对Fas、FasL表达的影响

目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(PUVA)光化学疗法(UVA)诱导人白血病细胞HL-60、K562凋亡及对Fas、FasL表达的影响。方法以HL-60、K562细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标,观察PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL-60、K562细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者。电镜下观察经PUVA处理后的HL-60、K562细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可上调HL-60、K562细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者。结论PUVA可诱导白血病细胞HL-60、K562发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射。PUVA诱导HL-60、K562细胞凋亡的途径之一为上调细胞Fas基因表达水平,下调FasL基因表达水平。     

低分子多糖对小鼠移植性肿瘤抑制作用的研究

目的 探讨低分子多糖对小鼠移植性肿瘤抗癌作用的研究.方法 体内抑瘤试验,体外细胞毒试验,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验,NK细胞活性试验.结果 低分子多糖对小鼠移植性肿瘤的抑制率在30.31%～52.19%.对K562白血病细胞株半数抑制浓度IC50为20 μg/ml,对Hela宫颈癌细胞株半数抑制浓度IC50为23.4 μg/ml.并能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬百分率和吞噬指数.结论 低分子多糖对小鼠移植性肿瘤有一定的抑制作用.     

黄伞多糖的提取及对小鼠腹腔巨噬细胞的激活效应研究

目的　探讨黄伞多糖的提取方法及对小鼠腹腔巨噬细胞的激活作用。方法　采用水提醇沉的方法提取黄伞多糖 ,体外诱导培养小鼠腹腔巨噬细胞。用ELISA法检测培养上清中的细胞因子 ,Griess试剂检测其NO的含量 ;FACS检测巨噬细胞吞噬功能 ;MTT间接法观察巨噬细胞体外杀伤活性的变化。结果　黄伞多糖组巨噬细胞产生IL 1β及NO的水平明显高于PBS对照组 ,黄伞多糖组巨噬细胞吞噬功能、杀伤活性明显高于PBS对照组 ,两组间各项指标比较均有显著性差异 (均 P <0 0 5 )。结论　黄伞多糖能激活小鼠巨噬细胞 ,可增强巨噬细胞IL 1β及NO产生的水平 ,增强其吞噬功能及体外杀伤活性。     

铁树叶提取液对白血病细胞株K562、HL—60增殖抑制作用的实验研究

目的观察铁树叶在白血病细胞株K562及HL-60中的作用.方法细胞培养液中分别加入铁树叶(实验组1和实验组2)及P.B.S(对照组1和对照组2),观察集落细胞数、死活细胞计数及细胞蛋白质含量.实验组和对照组比较,死活细胞计数和细胞蛋白含量P值均＜0.05,集落细胞计数实验组抑制率50%.结果实验组和对照组比较,死活细胞计数和细胞蛋白含量P值均＜0.05,集落细胞计数实验组抑制率＞50%.结论铁树叶提取液对白血病细胞株K562及HL-60细胞的增殖有明显抑制作用.     

绞股蓝总皂甙对小鼠S180肉瘤及K562细胞的抑制作用

目的 绞股蓝总皂甙（GP）对小鼠S180肉瘤及K562细胞的抑制作用。方法 通过动物实验观察绞股蓝总皂甙对小鼠S180肉瘤生长状况，肿瘤坏死面积（TNA）与肿瘤总面积（TTA）和比率，瘤周瘤内免疫活性细胞浸润状况及荷瘤小鼠脾脏的影响，通过细胞培养观察绞股蓝总皂甙对K562细胞生长的抑制作用。结果 经重复实验证实，GP能显著抑制小鼠S180肉瘤的生长，TNA与TTA的比率显著增加，瘤周尤期是瘤内淋巴细胞，巨噬细胞浸润数量明显增加，荷瘤小鼠脾重增加，脾白髓数目增多，体积增大。同时证实，GP对K562细胞株具有明显的生长抑制作用。结论 GP的抑瘤作用主要是直接杀伤瘤细胞，免疫活性细胞也发挥了一定作用。     

莪术油对白血病细胞株的体外抑制作用

【目的】通过比较莪术油对白血病细胞株HL-60和K562抑制作用的敏感性,评估该药物用于治疗白血病的临床意义及价值。【方法】取HL-60、K562细胞传代接种于96孔板,同时每孔分别加入不同浓度的莪术油液100μL(终浓度分别为400、200、100、50mg/L);空白对照组加入100μL含体积分数为1％吐温80的RPMI-1640培养液。药物和细胞作用24、48、72 h后,每孔加入四氮唑化物(MTT)10μL(5g/L),37℃孵育后于570nm波长处用酶联免疫检测仪测其D值,计算细胞生长抑制率(R_1)。【结果】莪术油对HL-60、K562细胞的生长抑制作用随着作用时间的延长明显增加,24、48、72 h的抑制率之间差异有显著性(P<0.01);莪术油对HL-60、K562细胞的生长抑制作用随着药物浓度的增加而增加,400、200、100、50mg/L的抑制率比较有显著性差异(P<0.01)。但莪术油对HL-60、K562两种细胞的生长抑制作用比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】莪术油对HL-60、K562细胞的生长有抑制作用,且其抑制作用与药物浓度和作用时间相关。     

姬松茸粗多糖对急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60细胞增殖、凋亡及转录因子NF-κB活性的影响

目的：研究姬松茸粗多糖对急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60细胞增殖、凋亡及转录因子NF-κB活性的影响并探索其诱导凋亡机制。方法：培养HL-60细胞,用不同浓度（1,2,5,10 mg/mL）姬松茸粗多糖诱导48 h后,采用WST-1法测定细胞增殖抑制;流式细胞术测定凋亡;免疫荧光法测定NF-κB P65蛋白核转运。结果：经不同浓度姬松茸粗多糖作用后,HL-60细胞存活率分别为90.0%,77.5%,47.5%,17.5%,与对照组（99.0%）比有统计学意义（P〈0.05）;5 mg/mL姬松茸粗多糖诱导48 h后,HL-60细胞早期凋亡率为52.4%,较对照组（6.0%）明显增加（P〈0.05）;免疫荧光显示NF-κB核转运较对照组减少。结论：姬松茸粗多糖可抑制HL-60细胞增殖,呈浓度-依赖性;能诱导HL-60细胞凋亡;诱导凋亡的作用与抑制NF-κB通路异常激活相关。     

黄芪多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的调节作用研究

目的:研究黄芪多糖(APS)增强巨噬细胞的免疫作用,探讨其调节机体免疫功能的机理。方法:在体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中加入不同浓度的APS后,观察其对巨噬细胞一氧化氮(NO)合成及对肿瘤细胞杀伤活性的影响。结果:APS能促进巨噬细胞NO合成,并能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对黑色素瘤细胞的杀伤作用。结论:APS能增强小鼠腹腔巨噬细胞的免疫作用,可能是其抗肿瘤作用的机理之一。     

香菇多糖协同阿糖胞苷对HL-60白血病细胞增殖力的影响

目的：研究香菇多糖协同阿糖胞苷(Ara—c)对HL-60白血病细胞增殖力的影响。方法：观察HL-60细胞,分别经香菇多糖、Ara—c或香菇多糖协同Ara—c处理后,HL-60活性、抑制率及集落形成能力的变化,并与对照组(不含处理因素)比较。结果：香菇多糖协同Ara—c组HL-60细胞集落形成能力、增殖抑制率与其他三组比有显著差异,HL-60细胞活力与Ara—c组比无显著差异;香菇多糖组与对照组比各项指标均无显著差异。结论：香菇多糖能增强Ara—c对HL-60细胞的杀伤力。     

苦参碱对K562细胞增殖抑制与诱导分化的实验研究

目的：观察苦参碱对K562细胞的增殖抑制和诱导分化作用。方法：以K562细胞为实验对象,采用体外培养技术,通过细胞生长曲线、细胞形态、乳酸脱氢酶（LDH）活性测定方法观察苦参碱的作用。结果：浓度为0．2－0．3mg/ml的苦参碱对K562细胞有明显的增殖抑制与诱导分化作用,实验组细胞的数量,形态和生化代谢都发生了变化。结论：这一结果将对白血病的诱导分化治疗提供有力的实验依据。     

糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的表达与白血病细胞黏附和侵袭性的关系

目的 比较髓性白血病细胞K562、HL-60和THP-1黏附、迁移能力以及糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D (GPI-PLD)的表达,探讨GPI-PLD表达与不同白血病细胞黏附性、迁移性的关系.方法 采用黏附实验和体外穿膜实验比较3种不同白血病细胞的黏附性和侵袭性;半定量RT-PCR检测这些白血病细胞GPI-PLD和uPAR mRNA的表达水平;免疫印迹法检测细胞GPI-PLD的表达;流式细胞术检测细胞膜uPAR的表达.结果 THP-1细胞中GPI-PLD和uPAR的mRNA及蛋白质表达水平均明显高于K562和HL-60细胞.THP-1细胞对Fn的黏附率显著高于K562、HL-60细胞;THP-1与HL-60细胞体外穿膜侵袭能力显著高于K562细胞.结论 THP-1细胞较K562和HL-60细胞具有较高的黏附和侵袭能力,与其GPI-PLD和锚定蛋白uPAR表达有关.     

嗜酸粒细胞促淋巴细胞活性及抗肿瘤的作用机制

目的：探讨嗜酸粒细胞（EOS）体外抗肿瘤及对淋巴细胞活性的影响,研究EOS在肿瘤免疫中的作用.方法：建立豚鼠I型超敏反应模型,应用Percoll液不连续密度梯度法分离豚鼠血液、腹腔液中EOS.放射免疫法检测豚鼠血清及EOS与淋巴细胞共同培养的上清液（SELC）中TNF-α,IL-4含量;MTT法分别测定EOS,SELC,EOS裂解液（LLE）对白血病K562细胞,乳腺癌MCF-7细胞增殖活性的影响.结果：豚鼠血液、腹腔液EOS（1×10^6,1×107,1×10^8/L）能够促进脾淋巴细胞增殖,刺激指数最高分别可达1.92,2.58.血清,SELC中IL-4,TNF-α含量明显增高（P〈0.05）;腹腔液SELC48hIL-4,TNF-α含量最高分别为（3.94±0.16）,（8.93±0.15）g/L;腹腔液EOS,SELC,LLE与K562,MCF-7细胞共同培养,能够抑制K562,MCF-7细胞的增殖,尤其SELC对K562增殖的抑制率最高可达59.28%.结论：EOS可以促进淋巴细胞的增殖活性,提高SELC中IL-4,TNF-α的含量.腹腔液EOS,SELC,LLE能够抑制肿瘤细胞的增殖.     

川楝素对K562细胞增殖和凋亡作用的影响

目的：探讨川楝素对人白血病K562细胞增殖和凋亡作用的影响.方法：MTT法检测川楝素对K562细胞和健康成人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）的增殖抑制率.瑞氏染色观察川楝素对K562细胞、PBMC形态的影响.透射电镜观察K562细胞超微结构改变.流式细胞术检测细胞凋亡率.琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA片段化现象.比色法检测Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9活性变化.免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-xl,Bax和Fas的表达.结果：川楝素对K562细胞有明显增殖抑制作用,呈时间和浓度依赖性（P〈0.01）,作用72h后IC50值为（52.13±0.82）nmol/L,而对PBMC几乎无影响.普通光镜下分别观察K562细胞和PBMC,K562细胞可见典型的凋亡形态学改变,PBMC形态无明显变化.超微结构显示K562细胞核染色质聚集,固缩,可见凋亡小体;以10,30,50nmol/L川楝素处理细胞72h后,K562细胞早期凋亡率分别为9.66%,26.06%,52.70%（P〈0.01）;琼脂糖凝胶电泳可见典型“梯状”条带;川楝素激活K562细胞Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9活性;凋亡相关蛋白Bcl-xl表达降低,Bax,Fas表达增强（P〈0.05）.结论：川楝素对K562细胞与PBMC之间具有选择抑制作用和诱导K562细胞凋亡的作用,可能通过线粒体途径和死亡受体途径双重机制介导.     

地塞米松对柔红霉素诱导K562细胞核因子kappa B活化及凋亡的影响

目的探讨地塞米松（DXM）对柔红霉素（DNR）诱导K562细胞核因子kappaB（NF—κB）活化及凋亡的影响。方法采用免疫组化二步法检测K562细胞的NF—κB活化,用流式细胞检测术检测K562细胞的凋亡率。结果DNR同时具有诱导K562细胞凋亡和NF—κB活化的作用;DXM50μg／L能显著抑制DNR诱导的K562细胞的NF—κB活化和增强DNR诱导的K562细胞凋亡,NF—κB活化抑制率为20．17％（P〈0．01）,细胞凋亡增强率为25．44％（P〈0．01）。结论DNR诱导K562细胞凋亡的同时激活NF—κB p65活化;DXM通过抑制NF—κB活化,增强其诱导K562细胞凋亡的作用。     

抗原致敏树突状细胞诱导CTL杀伤K562细胞体外实验研究

目的 研究体外负载K562细胞冻融抗原的树突状细胞（DC）诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的特异性杀伤作用。方法 联合应用细胞因子从外周血单个核细胞（PBMC）诱导培养出DC,在体外负载K562细胞冻融抗原。采用乳酸脱氢酶释放法,对比K562冻融抗原致敏DC组、未致敏DC组、淋巴细胞组、前列腺癌PC3冻融抗原致敏DC组分别激活的CTL对K562细胞的杀伤作用。结果 培养出具有典型特征的DC;在效靶比为10：1及20：1时。K562冻融抗原致敏DC组诱导的CTL对K562细胞的杀伤率分别为55．9％土22．0％、90．2％＋24．8％,均高于其他3组（p,0．05）。结论 K562细胞冻融抗原致敏DC可诱导激活CTL,具有明显杀伤K562细胞作用。并具有特异性。