血卟啉衍生物-激光杀伤恶性肿瘤的动物实验

近几年,应用光敏技术诊治恶性肿瘤,引起国内外的广泛重视。光敏技术是利用光敏剂,经光照射产生光动力效应杀伤细胞(亦称光敏效应)。血卟啉衍生物Hematopor-Phyrin—Derivative,HpD)是目前常用的光敏剂。光源采用复合光—白光或激光。此组合又称为血卟啉衍生物光动力治疗(简称HpD-PdT)。在载瘤(S_(180))小鼠尾静脉注入长春制血卟啉衍生物(16mg/kg)后隔72小时,用630um波长长春制染料激光器(382J/cm~2)照射,验证在此条件下杀伤动物恶性肿瘤的效应,结果显著。     

血卟啉衍生物光动力作用对DNA活性的影响

血卟啉衍生物光动力作用对ＤＮＡ活性的影响琦祖和，赵晓剑，王永俊，闫珺，沈珝琲（中国医学科学院，中国协和医科大学，基础医学研究所，北京１００００５）血卟啉衍生物（ＨＰＤ）光敏作用可用于肿瘤诊断及治疗［１］，已证实ＨＰＤ经光照后，产生以单线态氧为主的活性...     

血卟啉衍生物光动力对两株人鼻咽癌细胞杀伤实验的对比研究

目的 探讨血卟啉衍生物(HpD)光动力学效应(PDT)对体外培养人鼻咽癌细胞株CNE2和C666-1的生物作用.方法 向体外培养的CNE2和C666-1分别加入不同浓度的HpD(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0μg/m)孵育4 h,予波长为630nm的半导体激光进行照射,照射的功率密度为20mW/cm2,照射能量密度分别为2、5、10、20 J/cm2,继续孵育24h,用四唑盐比色法测定细胞存活率.结果 HpD-PDT能有效地杀伤体外培养的人鼻咽癌CNE2和C666-1细胞,其杀伤作用大小与HpD的浓度和激光剂量成正相关(P＜0.01).激光能量为20 J/cm2,HpD的浓度为2.5μg/ml或2.0μg/ml时,其杀伤CNE2、C666-1细胞的作用最明显;HpD-PDT对CNE2和C666-1的半数杀伤度分别为0.7μg/ml、1.2μg/ml,两者存在显著性差异(P＜0.05).相同HpD浓度、激光剂量条件下,C666-1细胞存活率显著高于CNE2(P＜0.05).结论 HpD-PDT对CNE2和C666-1细胞均有杀伤作用,但C666-1细胞对HpD-PDT的敏感性低于CNE2.     

单克隆抗体与血卟啉衍生物交联物的制备及其对胃癌靶细胞的杀伤作用

以碳二亚胺(EDCI)为连接剂,将血卟啉衍生物(HPD)与抗胃癌单克隆抗体18M(McAb18M)共价交联。经ELISA法测定及溶血试验表明,该交联物保留了McAb的反应特性及HPD的光故活性。体外试验表明,交联物对靶细胞的光动力杀伤效率提高了11.2倍,对非靶细胞的杀伤作用微弱,表明HPD—McAb具有特异杀伤作用。对游离HPD及交联HPD的吸收光谱,荧光激发光谱及发射光谱的分析比较表明,二者均有一定的差异。     

血卟啉衍生物光动力作用对DNA分子的损伤

从ＤＮＡ结构损伤探讨了血卟啉衍生物光动力作用杀伤细胞的机理。ＤＮＡ经ＨＰＤ＋光处理后，立即进行了电泳未见断链发生，但经在碱性溶液中加热处理后出现降解。这是由于碱基基因发生变化所致。引物延伸反应表明ＤＮＡ分子发生聚合。序列测定也出现错误序列，４种碱基Ａ、Ｇ、Ｃ、Ｔ均出现改变。以小鼠艾氏腹水癌ＤＮＡ为材料，经ＨＰＤ＋光处理后再分别用Ｂｇ１Ⅱ与ＢａｍＨⅠ降解，得到的片段比对照组变长。上述结果均说明ＨＰＤ     

激光—血卟啉衍生物与癌地龙合用对癌细胞的杀伤效应

用~3H脱氧胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)参入DNA合成的生化学方法和癌细胞形态学方法观察到,不同方法处理腹水型(H_(22))肝癌细胞,其杀伤率,A组(912-HpD-laser)为74.4％;B组(HpD-912)为59.7％;C组(laser)为20.4％;D组(912)为27.0％;E组为0％作为对照。A组与其它组相比,杀伤作用显著增强(P均<0.01)。又通过测定脂质过氧化代谢产物Schiff碱的量观察各组对癌细胞的杀伤作用。Schiff碱有荧光特性,荧光强度越大,Schiff碱含量越高,癌细胞死亡数越多,上述5组的荧光强度测定结果分别是84.6,41.6,45.1,61.1和35.2mm。A组显著高于其它各组(P均<0.01)。进一步用化学发光法证明,912-激光-血卟啉衍生物杀伤癌细胞过程中有过氧化氢产生。上述结果提示,912-激光-血卟啉衍生物杀伤癌细胞的作用与活性氧的生成及其介导的脂质过氧化有密切关系。     

血卟啉衍生物光动力学疗法体外杀伤人喉癌细胞株Hep-2的实验研究

目的 :探讨使用血卟啉衍生物对喉癌细胞进行光动力学治疗的有效照光时间和有效药物使用量。方法 :使用波长 6 30nm的激光照射同血卟啉衍生物共同培养的喉癌Hep - 2细胞株 ,用MTT法评价不同的用药浓度(0 μg、5 μg、10 μg、5 0 μg、10 0 μg、2 0 0 μg ml)和不同的光照能量密度 (10J cm2 、2 0J cm2 、30J cm2 、4 0J cm2 、5 0J cm2 )细胞毒的作用。结果 :随着药物浓度的增加细胞的死亡率增加 ,但是在 5 0 μg ml以上增加不明显。随着光密度的增加细胞的死亡率增加 ,在 4 0J cm2 以后死亡率没有明显的增加。结论 :血卟啉衍生物在 6 30nm的激光照射下能够有效的在体外杀伤肿瘤细胞 ,其杀伤的最佳效果与用药浓度和照射能量有关     

血卟啉衍生物光动力学疗法体外杀伤人喉癌细胞株Hep-2的实验研究

目的 探讨使用血卟啉衍生物对喉癌细胞进行光动力学治疗的有效照光时间和有效药物使用量.方法 使用波长630 nm的激光照射同血卟啉衍生物共同培养的喉癌Hep-2细胞株,使用MTT法评价不同的用药浓度(0、5、10、50、100和200μg/mL)和不同的光照能量密度(10、20、30、40和50J/cm2)细胞毒的作用.结果 随着药物浓度的增加细胞的死亡率增加,但是在100μg/mL以上增加不明显.随着光密度的增加细胞的死亡率增加,在40 J/cm2以后死亡率没有明显的增加.结论 血卟啉衍生物在630 nm的激光照射下能够有效地在体外杀伤肿瘤细胞,其杀伤的最佳效果与用药浓度和照射能量有关.     

血卟啉衍生物结合高温对人肿瘤细胞的光动力效应

本文研究扬州血卟啉衍生物(Y-HpD)光敏结合高温对HeLa和Eca109细胞的作用。结果表明:①Y—HpD光敏前或后即刻加高温(42.5±0.5℃)对肿瘤细胞的损伤均高于两者分别单独作用;②细胞经光敏后1h再行高温处理,对细胞的损伤更为严重;③Y-HpD光敏即刻结合高温(43±0.5℃)处理HeLa和Eca109细胞,观察5天的存活曲线,第5天细胞存活数仅为对照组的10～20％。     

血卟啉衍生物光动力对两株人结肠癌细胞杀伤实验的对比研究

目的 探讨血卟啉衍生物(HpD)光动力学效应(PDT)对体外培养人结肠癌细胞株LoVo和CoLo205的生物作用.方法 在体外培养的LoVo和CoLo205细胞中分别加入不同浓度的HpD(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 μg/ml)孵育6 h,予波长为630 nm的半导体激光进行照射,照射的功率密度为20mW/cm2,照射能量密度分别为2、5、10、20J/cm2,继续孵育24 h,用四唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率.荧光分光光度计检测LoVo与CoLo205细胞内HpD荧光强度.结果 HpD-PDT对体外培养的人结肠癌LoVo和CoLo205细胞均有杀伤作用,两者无显著性差异(P＞0.05).其杀伤作用大小与HpD的浓度和激光剂量成正相关(P＜0.01).激光能量为20 J/cm2,HpD的浓度为2.5μg/ml时,其杀伤LoVo、CoLo205细胞的作用最明显;HpD-PDT对LoVo和CoLo205的半数杀伤度(IC50)分别为0.4 μg/ml、0.6 μg/ml,两者无显著性差异(P＞0.05).检测LoVo与CoLo205细胞内HpD荧光强度无显著性差异(P＞0.05).结论 HpD-PDT可有效杀伤体外培养的人结肠癌LoVo和CoLo205细胞,且对两种细胞的杀伤作用无明显差异.     

血卟啉衍生物对癌细胞钠泵活性和糖酵解的光动力效应

血卟啉衍生物(YHpD)合并照光对S180瘤细胞摄取~(86)Rb,瘤细胞的钠泵活性及糖酵解具有明显的抑制作用,且抑制程度随YHpD剂量的增大而增强。瘤细胞的总ATP酶和(Na-K)-ATP酶活性对YHpD的光动力效应也较敏感.YHpD对Mg—ATP酶活性有轻度抑制作用。YHpD并用哇巴因,对瘤细胞摄取~(86)Rb的光动力效应比两种药物单独应用的抑制作用大。     

血卟啉衍生物对鼻咽癌放射治疗效应观察

为了从临床观察血卟啉衍生物（ＨＰＤ）对鼻咽癌是否有加强放疗效应的作用，作者选取病理确诊１～Ⅳａ期初诊鼻咽癌９８例，按Ｔ、Ｎ、Ｍ和性别配对分为ＨＰＤ加放射组（实验组）和单纯放射组（对照组），均采用５０钴γ射线连续常规分割放射治疗。从鼻咽间接镜检查和ＣＴ扫描检查分析鼻咽原发灶的消退情况来看，实验组全消率分别为１００％，６５．３％，对照组全消率分别为７３．５％，３２．７％，两组差别有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；颈部淋巴结转移灶，实验组全消率为９２．３％，明显高于对照组５９％（Ｐ＜０．０１）；计算ＨＰＤ的放射增敏比为１．４－１．５；两组急性放射反应和毒性反应无差别，说明血卟啉衍生物能提高鼻咽癌放疗的近期效应，配合放疗是安全的，远期疗效则有待观察。     

血卟啉衍生物对人鼻咽癌放射增敏的裸鼠实验

移植入鼻咽低分化鳞癌的ＢＡＬＢ／Ｃ系裸小鼠３２只，按随机区组分为４组：空白对照组，单纯血卟啉衍生物组，单纯放射组和血卟啉衍生物加放射组。实验结果：后３组的抑瘤率分别为－１０．４％，４５．２％，７１．５％；后２组的中瘤生长曲线均受到不同程度的抑制，血卟啉衍生物加放射组较单纯放射组抑制开始得早，程度要大，维持时间长；组织学检查显著卟啉 衍生物加放射组的肿瘤组织比单纯放射组可见程度和范围大的坏死区，纤维     

漏芦对抗血卟啉衍生物光氧化作用的研究

光卟啉(YHpD)合并照光使红细胞溶血度和红细胞膜脂质过氧化产物丙二醛含量大大增加,红细胞膜乙酰胆碱酯酶活力显著减低。体内给药,YHpD对小鼠皮肤产生明显光敏反应。漏芦水提取物在体外和体内试验中都明显对抗YHpD的光氧化作用,这种对抗作用与其对YHpD产生的单线态氧的清除有关。     

激光和血卟啉对肿瘤细胞的杀伤作用研究

[目的]研究激光和血卟啉对肿瘤细胞的杀伤特点.[方法]体外应用K562和MCF7细胞观察不同浓度血卟啉和不同激光强度对细胞的杀伤特点及其激光束杀伤细胞的分布特性;体外培养S180肉瘤细胞接种健康小鼠建立荷瘤小鼠模型,观察静脉注射血卟啉0.5和12h后激光照射对肿瘤的杀伤作用.[结果]在固定的血卟啉浓度或激光强度下,随着激光强度或血卟啉浓度的增加,对肿瘤细胞的杀伤作用成线性作用增强(R2=0.9967,R2=0.9994),其中杀伤作用=血卟啉浓度(μg/ml)×激光能量(J);激光束对细胞的杀伤作用存在明显的不均匀性;荷瘤小鼠在给药后0.5 h给与激光治疗效果好于给药后12h.[结论]血卟啉浓度和激光剂量对肿瘤的杀伤作用存在线性量效关系且激光束对细胞杀伤作用存在明显的不均匀性,该结果为制定最佳的临床治疗方案提供了依据.     

血卟啉衍生物PSD-007加激光照射对小鼠H_(22)肝癌细胞杀伤作用的电镜观察

观察小鼠H_(22)肝癌细胞经血卟啉衍生物PSD-007加激光照射后不同时间的超微结构改变。最早发现线粒体的变化;在15min时,线粒体嵴密集,基质电子密度增加,30min时线粒体开始肿胀内质网扩张6～120min时线粒体空化,内质网进一步扩张、细胞膜破裂,核周间隙增宽,异染色质轻度聚集;6～24h时胞质内几乎看不到完整的细胞器、核膜破裂,核质胞质掺杂,核固缩,碎裂,细胞解体死亡。