异种(猪)脱细胞真皮基质移植后炎症免疫反应的实验研究

目的：研究异种（猪）脱细腻真皮基质与薄自体皮复合移植后炎症反应的变化规律及对Th1/Th2细胞因子的影响。方法：将异种（猪）脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植于大鼠，分别于移植后1，2，3，4，8，12，16周取标本，采用组织学观察及RT-PCR技术动态检测异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植后炎症反应及Th1/Th2细胞因子的变化，同时以单纯薄自体皮移植作对照。结果：异种（猪）脱细胞真皮与薄自体皮复合移植后早期存在炎症反应，并随着创面愈合的进行而逐渐消失，Th2细胞因子的表达明显高于对照组。结论：异种（猪）脱细胞真皮基质仍具有一定的免疫原性，Th2细胞因子的高表达说明机体对异种（猪）脱细胞真皮基质的免疫反应主要以体液免疫为主，也可能是异种（猪）脱细胞真皮基质移植后未被排斥的原因之一。     

脱细胞异体真皮基质皮下移植后胶原的动态变化

目的　探讨脱细胞异体真皮基质 (ADM)移植后胶原的变化情况。方法　将异体ADM移植于SD鼠皮下 ,测定移植后ADM中胶原的含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原的比例。结果　异体ADM移植后胶原含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原比例无明显变化。结论　异体ADM是一种良好的软组织填充材料。     

应用脱细胞生物材料治疗消化道腹壁瘘1例

消化道腹壁外瘘是外科手术后远期的一个严重的并发症。其中消化道重建后的吻合口瘘占消化道腹壁瘘的40%～50%[1]。目前,大部分病人可以通过充分引流、控制感染、营养支持后等待自愈,而不是等待确定性手术[1-2]。我院2008年1月1例胃体癌行近端胃切除、远端胃和食管行端侧吻合,术后吻合口瘘并形成消化道腹壁外瘘,应用脱细胞生物材料(acellular tissue matrix,ACTM)治疗成功。报告如下。     

应用脱细胞生物材料修补腹壁疝11例报告

复旦大学附属华东医院从2007年3月起尝试应用一种新型的生物材料——脱细胞生物材料(acellular tissue matrix,ACTM)在手术区域细菌污染或感染及植入合成材料后深部感染的情况下完成腹壁疝修补11例,近期疗效满意。报告如下。     

FTY720介导淋巴细胞凋亡抑制小肠移植的移植物抗宿主免疫反应

目的 探讨免疫调节药物FTY720对小肠移植后急性移植物抗宿主病（GVHD）的治疗效果及其作用机制.方法 应用Wistar-Furth（WF）大鼠作为供体,WF和ACI大鼠的子代（F1）作为受体,同种异基因异位全小肠移植的技术方法建立GVHD的动物模型.移植受体分为实验组和对照组,每组6只.实验组从移植手术当日开始予以FTY720治疗,持续14 d;对照组在相同的时间段口服蒸馏水.术后第15天,提取受体靶器官肝脏、小肠及移植物小肠的淋巴细胞,应用免疫组织化学（免疫组化）TUNEL法和流式细胞仪检测两组淋巴细胞凋亡的变化.结果 对照组大鼠术后均死亡于GVHD,平均生存时间（16.0±1.7）d,实验组大鼠均长期成活超过100 d,两组差异具有统计学意义（P＜0.01）.免疫组化TUNEL法检测结果显示,实验组肝脏和移植物小肠黏膜的淋巴细胞凋亡比率均明显高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）.流式细胞技术分析结果显示,实验组大鼠移植物小肠黏膜内凋亡的淋巴细胞百分比为19.4%,明显高于对照组的11.8%（P＜0.05）;而肝脏凋亡的淋巴细胞百分比两组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 FTY720可能通过诱导淋巴细胞的凋亡,减少和抑制GVHD对靶器官的损害,改善移植大鼠的预后.     

肝细胞异体移植的免疫反应

成功的肝细胞移植有可能在急性肝功能衰竭肝再生阶段暂时维持肝功能。本文目的是说明肝细胞异体移植的免疫反应和估计肝脏缺血性损伤后,用异体肝组织碎块移植来维持肝功能的可能性。材料和方法采用成年杂种狗,做侧-侧门腔分流术后阻断吻合口近侧门静脉血流60分钟,造成肝脏缺血性损伤,再将异体肝组织碎块移植于脾脏内。移植肝从无血缘关系的狗获得,置于冰盐水后,用4℃肝素化     

脱细胞同种异体神经移植的进展

自1870年Philipeaux和Vulpain首次利用游离神经移植术修复舌下神经缺损以来，自体神经移植被认为是周围神经损伤的修复最佳选择，但白体神经材料存在来源有限，取材将给病人带来新的创伤，取材后可有供区麻木、瘢痕、神经瘤等并发症。异体神经移植及组织工程人工神经导管技术被认为是修复神经缺损新的发展方向，而单纯的异体神经移植也存在着受体免疫排异的问题。     

脱细胞同种异体神经移植的进展

自1870年Philipeaux和Vulpain首次利用游离神经移植术修复舌下神经缺损以来,自体神经移植被认为是周围神经缺损修复的金标准,但自体神经材料存在来源有限,取材将给病人带来新的创伤．取材后可有供区麻木、瘢痕、神经瘤等并发症。异体神经移植及组织工程人工神经导管技术被认为是修复神经缺损新的发展方向,而单纯的异体神经移植也存在着受体免疫排异的问题。[第一段]     

胰岛细胞移植后发生立即经血液介导的炎症反应的机制

在胰岛细胞移植的过程中,当其一接触受体血液即会引发立即经血液介导的炎症反应(IBMIR),使胰岛细胞迅速破坏失去分泌胰岛素的功能,笔者就IBMIR发生机制所涉及的问题,包括凝血系统的激活、补体系统的激活和抗体的作用、炎症介质和炎症细胞的浸润以及葡萄糖毒性的作用等作一综述。     

不同交联剂对脱细胞牛心包膜生物材料改性的实验研究

目的比较1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺[1-ethyl-3-(3-dinethylami-nopropyl)carbodimide,EDC]/N-羟基琥珀酸亚胺(N-hydroxysuccininide,NHS)和京尼平对脱细胞牛心包膜的交联效果,为选择最佳交联剂提供依据。方法取市售健康成年黄牛心包膜,采用高/低渗溶液法脱细胞,HE染色观察明确无细胞残留。将脱细胞牛心包膜分别采用EDC/NHS(EDC/NHS组)和京尼平(京尼平组)进行交联处理后,行扫描电镜、厚度、交联度、力学性能、变性温度测定和体外降解与细胞毒性实验,评价不同交联剂对脱细胞牛心包膜的改性效果。以单纯脱细胞牛心包膜(脱细胞组)、正常牛心包膜(空白对照组)作为对照。结果扫描电镜观察示,两交联组胶原纤维呈相对规则的网状结构,孔径为10~20μm。与脱细胞组及空白对照组相比,两交联组牛心包膜厚度、变性温度均显著增加(P0.05),但两组间比较差异无统计学意义(P0.05)。两交联组交联度比较差异亦无统计学意义(t=0.205,P=0.218)。各时间点两交联组降解率均显著低于空白对照组及脱细胞组(P0.05)。两交联组弹性模量和断裂应力均较脱细胞组显著下降(P0.05),且接近空白对照组(P0.05),而断裂伸长率均较空白对照组和脱细胞组显著增加(P0.05);以上指标EDC/NHS组和京尼平组间比较差异均无统计学意义(P0.05)。细胞培养3、5 d时京尼平组细胞毒性均为1级,而EDC/NHS组5 d时达2级。结论京尼平交联脱细胞牛心包膜后生物性能优于EDC/NHS。     

外科应激引起Th1/Th2细胞平衡移动提示对应于创伤程度的细胞介导免疫反应的下调和抗体介导免疫反应的上调

测定血清细胞因子、垂体激素、急性期蛋白等评价外科治疗中及治疗后机体所受的影响并不理想。近年来已认识到成功的免疫应答主要依靠type-1/type-2 T辅助细胞(Th1和Th2细胞)的激活并分泌不同的细胞因子,分别引起细胞介导和抗体介导的免疫反应。本研究旨在以人体免疫应答反应的变化来评价外科治疗对机体的影响及其在比较不同外科治疗方面的应用。采用43例有症状的胆石症患者,分别施以腹腔镜(LCE,25例)及常规胆囊切除术(CCE,     

脱细胞真皮复合移植修复肉芽创面

1999年 3月～ 2 0 0 0年 8月 ,共观察创面 5 3例。其中男性 2 7例 ,女性 2 6例 ;成人 41例 ,小儿 12例 ;创面存在时间 3周以上者 18例 ,3周以下者 35例 ;修复面积 12～ 2 5 0ｃｍ2 ,平均 (98± 76 )ｃｍ2 。术前 3ｄ开始准备创面 ,清除坏死组织、脓性分泌物 ,用双氧水、等渗盐水冲洗 ,内层覆盖抗生素纱布 ,再用高渗盐水湿敷包扎 ,每天更换 1次。待感染控制创面清洁 ,肉芽水肿消失后进行手术。根据创面具体情况进行清创。对 3周内基底纤维板尚未形成、或虽已形成但薄而不牢的肉芽创面 ,可采取刮除的方法。 3周以后的肉芽创面 ,已形成厚而硬的…     

移植肾T细胞介导的排斥反应的病理学

T细胞介导的排斥反应(TCMR)是器官移植排斥反应的主要效应机制之一, 也是最常见的急性排斥反应类型。2019年Banff移植病理学诊断标准(Banff标准)根据免疫损伤病变的特征将TCMR分为急性TCMR (aTCMR)和慢性活动性TCMR (caTCMR)。本文对TCMR的基本定义、移植肾Banff标准中TCMR病理学的研究历程和TCMR的基本病变及其诊断分级进行综述, 旨在为早期识别、诊断和治疗TCMR提供依据, 以预防其进展为caTCMR, 进而保障移植肾和受者的长期存活。     

脱细胞羊膜对兔同种异体跟腱移植后粘连的预防作用

目的 探讨脱细胞羊膜对兔同种异体跟腱移植后粘连的预防作用及其对跟腱愈合的影响. 方法 30只新西兰白兔随机分为2组(n=15):实验组在移植跟腱处包裹羊膜,对照组在移植跟腱处不包裹羊膜.术后2、4周切取移植跟腱行组织学观察;术后2、4、6周取外周血行流式细胞学检测,取移植跟腱行大体观察和生物力学检测,并测定羟脯氨酸含量. 结果 术后2、4周组织学观察显示实验组炎性反应和浸润范围均较对照组局限,胶原纤维排列较对照组致密且整齐.术后2、4、6周实验组CD4+、CD8 +T淋巴细胞计数及CD4+淋巴细胞与CD8+T淋巴细胞比值均低于对照组,实验组拉断粘连带功耗小于对照组,跟腱最大拉伸断裂强度及羟脯氨酸含量均大于对照组,以上指标比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 脱细胞羊膜可以有效预防肌腱粘连,促进肌腱愈合,并有一定的抗免疫排斥作用.     

异种或同种异体脱细胞真皮基质移植后免疫细胞分型的研究

目的　比较异种脱细胞真皮基质 (Xeno ADM)与同种异体脱细胞真皮基质 (Allo ADM)移植物免疫学反应的差异。　方法　选用健康小猪和健康自愿者的中厚皮 ,分别制成Xeno ADM和Aoll ADM后 ,与深度烧伤患者的断层超薄自体皮 (UTS)重叠 ,即时覆盖其切痂创面 ,相应设为Xeno组(2 6例 )和Aoll组 (10例 )。于另 8例深度烧伤患者切痂创面上移植单纯断层自体中厚皮 (TTS) ,设为对照组。采用免疫组化方法 ,于移植术后进行组织学观察 ,并检测外周血和移植物内免疫细胞分型情况。　结果　与对照组比较 :(1)移植术后 ,Xeno组和Allo组外周血免疫细胞分型情况无明显改变(P >0 .0 5 )。 (2 )Xeno组移植物局部长期存在炎症 免疫反应 ,其中 80 %以上为CD3+ CD4 + 和CD4 5RO+ 细胞 ,CD8+ 细胞、Vs8C+ 浆细胞、CD5 7+ 的自然杀伤细胞 (NK)相对较少 ;另可见嗜酸性粒细胞和CD6 8+ CD4 + 异物巨细胞反应 ,在发生排异反应前的Xeno ADM中尤为明显 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。Allo组仅在移植早期 (术后 8周以内 )有中度炎症 免疫反应。　结论　人体对脱细胞真皮基质的特异性免疫反应 ,可能是在单核 巨噬细胞参与下、以CD4 + T淋巴细胞介导的细胞免疫为主要表现 ;辅助性T细胞和巨噬细胞构成的异物巨细胞可能在其中起重要作用     

脱细胞异体生物材料治疗男性小儿后天性肛瘘32例体会

目的探讨脱细胞异体生物材料治疗男性小儿后天性肛瘘的临床疗效。方法对我院2008年6月至2009年12月采用脱细胞异体真皮基质治疗男性小儿肛瘘32例进行回顾性分析。结果成功率100%,内口愈合,无感染,无大便失禁,无复发。结论该方法治疗小儿肛瘘安全、成功率高、创伤小、患者痛苦少、复发率低,值得临床推广应用。     

胰岛移植后经血液介导的炎症反应

大量的研究表明，胰岛移植后的初期常伴有大量胰岛的丢失，这些现象被统称为原发性无功能，而与免疫因素无关。除了胰岛制备中内在的固有质量因素外，胰岛与肝脏微环境炎症因素之间的相互作用也是导致胰岛丢失的原因。另外，一个很少被重视的原因可能是新植入的胰岛与血流接触的瞬间所引发的反应，被称为立即经血液介导的炎症反应     

脱细胞真皮移植部位血管细胞黏附分子1的表达

目的探讨血管细胞黏附分子1（vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1）在脱细胞真皮移植部位的表达变化和意义。方法取近交系小型香猪15只建立猪实验模型,分别于每只猪脊背两侧制作6cm×6cm各3处6个创面。随机分为三组,每组5只。A组为对照组,猪刃厚自体皮移植;B组异体脱细胞真皮与猪刃厚自体皮复合移植;C组J-1型（人）脱细胞真皮与猪刃厚皮复合移植。分别于移植术后3、9、21及30d观察移植皮片成活情况和面积,于移植后3、6、9、12、21及30d各时间点取移植组织标本,流式细胞仪检测VCAM-1的表达变化。结果移植术后3d各组移植皮片基底分离;9dA组皮片转红润基底粘连较紧密,揭开皮片可见渗血,B、C组皮片颜色次之,基底粘连不紧密;21d,A、B、C组移植皮片成活面积分别为94%±12%、92%±9%和91%±11%;术后30d各组移植皮片均愈合良好。各组VCAM-1表达,移植术后3d无明显差别;6dA组表达明显高于B、C组有统计学意义（P〈0.05）;9、12dB、C组明显高于A组有统计学意义（P〈0.05）;30d,各组VCAM-1表达均低于3d有统计学意义（P〈0.01）。结论同种和异种真皮基质移植部位VCAM-1表达高峰迟滞于自体皮移植;提示VCAM-1表达可能与脱细胞真皮活化、血管再生有关。同种和异种真皮移植物VCAM-1表达无差别。     

脱细胞真皮移植部位血管细胞粘附分子-1的表达

目的 探讨血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)在脱细胞真皮移植部位的动态变化和作用.方法 建立猪试验模型,采用同种/异种脱细胞真皮基质,与猪自体薄皮片复合移植于猪创面,猪自体皮移植组作对照组,分别在移植后3、6、9、12、15、30天时相点取得移植组织标本.流式细胞仪(FCM)检测VCAM-1的表达变化.结果 移植术后3天各组VCAM-1表达无明显差别;对照组6天表达明显高于实验组(p＜0.05);9天～12天异种、异体脱细胞真皮基质组与自体皮移植组对照VCAM-1均高表达,具有显著差异性(p＜0.05～0.01);术后30天各组VCAM-1表达显著低于3天时相点(p＜0.01).结论 同种和异种真皮基质移植部位VCAM-1表达高峰迟滞于自体皮移植;VCAM-1表达可能与脱细胞真皮活化、血管再生有关,值得进一步研究.     

脱细胞肝素处理犬颈动脉的异种移植研究

目的：研究用去污剂-酶消化联合肝素结合处理法制备小口径异种移植血管.方法：犬颈动脉管壁经脱细胞后部分再行肝素结合处理,样本经组织学及电镜观察脱细胞效果,机械性能研究观察脱细胞对管壁弹性和强度的影响,甲苯胺蓝染色观察肝素结合效果和结合程度.将结合与未结合肝素的脱细胞血管同时植入16只兔双侧颈动脉,术后21 d B超观察移植血管的通畅情况.结果：犬颈动脉血管壁细胞被完全去除,细胞外基质保存完好,机械性能无明显破坏,肝素结合于管壁全层,植入兔颈动脉后两侧均无血管阻塞,而肝素结合组血栓形成少于未结合组.结论：去污剂-酶消化法联合肝素结合处理可以作为制备脱细胞小口径异种移植血管的新方法.