锌对心理应激大鼠不同脑区金属硫蛋白亚型表达的影响

目的:观察不同锌摄入水平对心理应激大鼠不同脑区金属硫蛋白亚型表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为8组:正常对照组、对喂组、缺锌组和补锌组及其相应的应激组,分别给予正常、缺锌和补锌饲料,以缺锌动物当日的饲料摄入量作为对喂动物次日的给料量。动物喂饲1w后开始束缚应激,持续4w。分别以蛋白印迹法和RT-PCR测定海马、皮质、间脑和嗅球金属硫蛋白含量以及MT-1mRNA和MT-3mRNA的表达;并以ELISA法检测血浆IL-6和IL-1的含量。结果:缺锌动物的血锌含量明显降低,缺锌应激动物不同脑区金属硫蛋白及其亚型mRNA的表达均较缺锌动物明显升高,但其增加幅度低于其它应激组;而补锌应激动物的表达增加幅度最大。缺锌组和各应激组动物的血浆皮质醇、IL-1、IL-6水平出现显著升高。另外,金属硫蛋白在不同脑区的表达水平不同:海马>嗅球>皮质>间脑。结论:不同锌营养状况可影响心理应激动物不同脑区金属硫蛋白的表达,海马脑区表达水平较高可能与海马在应激反应中的重要作用相关联。糖皮质激素及IL-6、IL-1等细胞因子可能对金属硫蛋白的表达发挥了诱导作用。     

锌营养对大鼠应激反应及金属硫蛋白的影响

目的：在心理应激条件下，观察大鼠组织中金属硫蛋白（MT）水平的变化及其与锌营养状况的关系。方法：60只雄性Wistar大鼠随机分为6组：缺锌组（ZD）、喂对组（PF）、对照组（CT），以及相应的3个应激组（SZ、SP、SC）。以光－电刺激方法建立心理应激动物模型，观察应激对皮质醇激素、锌和金属硫蛋白的影响。结果：应激诱导动物脑和肝脏MT含量增加，而血浆锌出现不同程度下降。缺锌动物血锌浓度降低，肝脏和脑中金属硫蛋白的含量减少，而其整体应激反应强度增加。结论：维持良好的锌营养状况有助于诱导整体和脑组织产生应激蛋白，并提高机体对心理应激的适应能力。     

应激对大鼠海马金属硫蛋白亚型表达的影响

目的 :　观察应激对大鼠海马脑区金属硫蛋白亚型表达的影响。方法 :　以束缚为应激原建立心理应激动物模型。将动物随机分为四组 :正常对照组 (Ctr)、束缚 1 w组 (R1 )、束缚 2w组 (R2 )和束缚 4w组 (R4)。取动物脑和肝脏以镉饱和法测定金属硫蛋白含量 ,取海马组织提取总 RNA,以 RT- PCR检测金属硫蛋白亚型 MT- 1 m RNA和 MT- 3m RNA,并取血测定血浆皮质醇和 IL- 6水平。结果 :　束缚应激后 ,大鼠体重增长明显减慢 ,血浆皮质醇、IL- 6水平显著高于Ctr组 ;海马脑区两种亚型金属硫蛋白 m RNA的表达水平升高 ,脑和肝脏金属硫蛋白含量也明显增加。结论 :　束缚应激可影响海马金属硫蛋白的表达 ,使其在蛋白质水平和 m RNA水平均出现明显升高 ,其可能机制是 ,在应激条件下皮质醇和 IL- 6等因子的上调对这种应激蛋白的表达发挥了诱导作用     

锌缺乏对生长期雄性大鼠海马泛素C末端水解酶L1表达的影响

[目的]观察缺锌对生长期大鼠海马泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)表达的影响。[方法]将SD大鼠随机分为正常组、缺锌配喂组和缺锌组,正常组喂饲常锌饲料(32.5mg/kg),缺锌配喂组喂饲高锌饲料(73.5mg/kg),缺锌组喂饲缺锌饲料(1.2mg/kg)。饲养4周后处死动物,取海马组织,RT-PCR法检测UCH-L1mRNA的表达水平,Westernblot法检测UCH-L1蛋白的表达水平。[结果]与正常组和缺锌配喂组比较,缺锌大鼠海马中UCH-L1mRNA和蛋白的表达水平均显著下调。[结论]缺锌大鼠海马UCH-L1的表达异常,可能是缺锌导致认知损伤的重要机制之一。     

缺锌并补锌对大鼠睾丸及血清睾酮的影响

目的　为了解锌缺乏及补锌对大鼠睾丸的重量及血清睾酮的影响。　方法　将出生后断乳一周的SD大鼠随机分为缺锌组、配喂组、对照组、补锌组和高锌组五组 ,缺锌组、对照组和高锌组分别用缺锌饲料 (锌含量 <1mg/kg)、常锌饲料 (锌含量为 5 0mg/kg)和高锌饲料 (锌含量为 15 0mg/kg)喂养 8周 ,补锌组用缺锌饲料喂养三周后改用高锌饲料喂养五周 ,配喂组用常锌饲料喂养 ,给料量按缺锌组前一天实际进食量添加。 8周后处死 ,用极谱法测定血清中锌含量 ,用原子吸收分光光度法测定睾丸中锌含量 ,采用双抗体放射免疫分析法测定血清中睾酮的含量。　结果　缺锌组大鼠睾丸及血清中锌含量降低 ,睾丸重量减轻。血清中睾酮含量下降 ,缺锌大鼠补锌后可恢复正常。　结论　说明锌缺乏直接影响睾丸及血清中锌的水平 ,从而影响大鼠睾丸的发育及睾酮的分泌与合成。     

缺锌对大鼠脑组织和血液中乙酰胆碱和5—羟色胺含量的影响

目的：研究缺锌对大鼠脑组织和血液中乙酰胆碱（ACh)和5－羟色胺（5－HT）含量的影响。方法：采用85克左右的Wistar大鼠,随机均分为3组;缺锌组（ZD）,饲喂缺锌饲料,对喂组（PF）,饲喂加锌饲料,但饲喂量与ZD组一致;缺锌补锌组（ZS）,先饲喂缺锌饲料,21天以后改为加锌饲料,给料量与ZD组一致。结果：缺锌组血液中ACh明显升高;皮质中ACh与其他组差异无显性。血液中5－HT显升高,大脑皮质中5－HT显升高,结论：提示缺锌可影响脑组织和血液中乙酰胆碱和5－羟色胺的代谢。     

锌调控神经细胞生长抑素mRNA表达的研究

目的:探讨锌对神经细胞生长抑素mRNA表达的影响。方法:利用不同含量锌的饲料饲喂生长大鼠及用不同含量锌的培养基培养神经-肿瘤杂交细胞株LA-N-5及LA-N-5-2,采用放射性同位素标记的生长抑素基因探针与脑组织细胞总RNA进行点杂交法检测不同的锌处理对大脑皮层以及培养的细胞株生长抑素基因表达的影响。结果:饲料缺锌的大鼠大脑皮层神经细胞生长抑素基因的表达较对喂组明显降低,补锌后可逆转。同时富锌培养的细胞较正常含锌培养的细胞生长抑素基因的转录有增高趋势。结论:锌可以在转录水平上影响神经细胞生长抑素基因的表达。     

重度缺锌对生长期大鼠海马超微结构及神经递质和抗氧化能力的影响

目的观察重度缺锌对生长期大鼠海马超微结构、神经递质含量及抗氧化能力的影响。方法将Wistar大鼠30只随机分为足锌组(ZA)、对喂组(PF)和缺锌组(ZD),每组10只。ZA组和PF组喂饲足锌饲料(30 mg/kg),ZD组喂饲重度缺锌饲料(1.5 mg/kg)。饲养28d后,观察海马超微结构变化;测定海马和皮层去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)含量;检测全血、海马及皮层Ach含量;硫代巴比妥法检测血清、海马及皮层丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)。结果 ZD组大鼠海马CA3区超微结构严重受损;脑组织单胺类神经递质—NE、5-HT和DA含量不同程度升高;全血Ach含量显著升高,皮层Ach含量显著降低,海马Ach含量有下降趋势,但无显著性差异;血清、海马和皮层组织中MDA含量明显升高,而SOD活性、T-AOC水平显著下降。结论重度缺锌可导致大鼠海马CA3区超微结构严重受损,胆碱能及单胺类神经递质含量异常改变,抗氧化防御系统功能降低,这可能是缺锌导致认知损伤的作用机制之一。     

精神应激时锌的抗过氧化作用研究

在电击和束缚两种精神应激条件下，观察了缺锌和补锌大鼠体内过氧化反应和抗氧化系统的不同变化。结果表明缺锌动物受应激影响后体内过氧化物水平显著高于补锌组；其肝脏金属硫蛋白合成减少，而血液ＳＯＤ活性呈代偿性增强。提示在精神应激时保持良好的锌营养有利于减轻过氧化损伤。     

缺锌和补锌对烫伤大鼠血清和组织锌含量,含锌酶、激素、蛋白质的影响

目的 观察缺锌和补锌对烫伤大鼠体内锌、含锌酶、激素和蛋白质含量的影响。方法 雄性Sprague-Dawley大鼠112只，56只用含锌量正常（40μg/g）的饲料喂养，其余56只用含锌4μg/g的低锌饲料喂养，1周后各取8只大鼠，40μg/g锌喂养大鼠为正常对照组（NC组），4μg/g锌喂养的为缺锌对照组（DC组），处死后留取标本。其余大鼠15％深Ⅱ度烫伤，40μg/g锌喂养大鼠随机分为正常烫伤组（NB组，继续用含锌40μg/g饲料喂养）和烫伤补锌组（NH组，改用含锌80μg/g饲料喂养）；4μg/g锌喂养大鼠随机分成缺锌烫伤组（DB组，改用含锌10μg/g饲料喂养）和缺锌烫伤补锌组（DH组，改用含锌80μg/g的饲料喂养），各组24只大鼠。分别于烫伤后第1、3、7天，各组处死大鼠8只，留取标本检测血清、肝脏、骨骼和皮肤锌含量以及血清碱性磷酸酶（ALP）、生长激素（GH）和肝脏金属硫蛋白（MT）水平。结果 烫伤前缺锌大鼠血清、肝脏、骨骼和皮肤锌含量以及ALP、GH和肝脏MT水平均低于正常大鼠。烫伤后缺锌和正常大鼠的血清、骨骼锌含量及ALP下降，肝脏、烫伤皮肤锌、GH和肝MT呈上升趋势；补锌后血清、组织锌、ALP、GH、MT均明显上升，但缺锌大鼠的变化幅度小于正常大鼠。结论 机体缺锌不仅使血清、组织中锌含量下降，还影响含锌酶ALP、GH和肝脏MT的活性及功能。口饲补锌可以纠正缺锌状态，烫伤后应注意锌的补充。     

生长期缺锌对大鼠海马Egr家族基因表达影响

目的 研究锌缺乏对生长期大鼠海马Egr家族(Egr1、Egr2、Egr3、Egr4)基因表达的影响,探讨缺锌影响学习记忆的基因转录调节机制.方法 选取刚出生的Sprague-Dawley大鼠3窝,每窝1只母鼠、10只仔鼠,3窝母鼠与仔鼠体重相近,仔鼠雌雄各半;随机分为3组:缺锌组(ZD)、配饲组(PF)、对照组(ZA),实验期60 d;用实时荧光定量PCR检测大鼠海马Egr家族(Egr1、Egr2、Egr3、Egr4)mRNA的表达.结果 大鼠海马Egr1、Egr3、Egr4基因表达在3组大鼠间差异有统计学意义(F值分别为13.631,24.435,21.825,),ZD组(2.44×10~(-3),8.72×10~(-3),1.88×10~(-2))表达量低于PF组(3.13×10~(-3),1.60×10~(-2),2.68×10~(-2))、ZA组(3.96×10~(-3),1.92×10~(-2),3.53×10~(-2)),且PF组低于ZA组;海马Egr2基因表达在各组间差异无统计学意义.结论 缺锌使海马锌指蛋白Egr1、Egr3、Egr4基因表达下调,是影响海马学习记忆的机制之一.     

Metallothionein gene expression in rats: tissue-specific regulation by dietary copper and zinc

Regulation of metallothionein gene expression by dietary zinc and copper was examined in rat liver, kidney, intestine and brain using a 3 X 3 factorial design. Purified diets containing 5, 30 and 180 mg Zn/kg and 1, 6 and 36 mg Cu/kg were fed for 2 wk. Serum concentrations of copper and zinc were lower at the lowest intakes of either metal than at normal or supplemental levels. Kidney metallothionein levels were proportional to dietary zinc, being 50% less in the 5 mg Zn/kg group than in those fed the highest zinc intake. Metallothionein mRNA was measured by dot blot hybridization to a 32P-labeled oligonucleotide DNA probe representing the terminal 5' sequence of the metallothionein gene. In kidney the number of metallothionein mRNA molecules per cell increased four- to five-fold (from 4 to 29 molecules per cell) with increasing dietary zinc. A less pronounced effect on metallothionein mRNA was observed in response to dietary copper. At the lowest copper intake level and highest intake of zinc intestinal metallothionein mRNA was sevenfold greater than in any other group. Liver and brain did not respond appreciably to the dietary levels of copper and zinc that were fed. Chromatography showed that copper and zinc content of renal metallothionein was directly related to the dietary levels fed. In kidney, both metallothionein-1 and -2 genes were expressed.     

膳食补锌对胎盘及母鼠小肠金属硫蛋白MT-1和MT-2mRNA表达的影响

目的:探讨孕期膳食补锌对大鼠胎盘及小肠中MT-1和MT-2mRNA表达的影响。方法:18只SD孕鼠随机分为正常对照组(ZC)和补锌组(ZS)。两组进食常规饲料,ZC组(n=9)饮用去离子水,ZS组(n=9)饮用补锌水(含1.26mmol/L锌)。分别于孕9.5d和孕17.5d时,取血、胎盘和母鼠小肠。以原子吸收分光光度法测定血清锌浓度;以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定胎盘及小肠中MT-1和MT-2mRNA的表达。结果:孕9.5d和孕17.5d时,ZS组血清锌浓度均显著高于对照组。胎盘组织中MT-1和MT-2mRNA的表达均呈现出发育性改变趋势;ZS组各时间点MT-1和MT-2mRNA的表达均显著高于ZC组。ZS组母鼠小肠中,在孕9.5d时,ZS组和ZC组MT-1mRNA的表达无差异;孕17.5d时补锌组MT-1及各时间点MT-2的mRNA表达均显著增高。结论:膳食补充锌上调胎盘及母体小肠组织中MT-1和MT-2mRNA的表达。     

锌对生长期大鼠海马Uch-L1表达的调控作用

目的探讨锌对生长期大鼠海马Uch-L1表达水平的调控作用。方法雄性断乳Wistar大鼠36只,按体重随机分为对照组(ZA)、缺锌组(ZD)和缺锌对喂组(PF),ZD组喂饲含锌量1.5mg/kg的缺锌饲料,PF组和ZA组喂饲含锌量30mg/kg的足锌饲料,PF组摄食量与ZD组一致。喂饲4周后,测定血浆锌含量和碱性磷酸酶活性以评价机体锌状况,用避暗试验测定各组大鼠的学习记忆能力,采用Western blot和RT-PCR方法检测各组大鼠海马Uch-L1蛋白及其mRNA的表达水平。结果ZD组血浆锌含量及碱性磷酸酶活性均显著低于PF组和ZA组;ZD组大鼠在避暗试验中的进洞潜伏期显著低于PF组和ZA组;与PF组和ZA组相比,ZD组大鼠海马Uch-L1及其mRNA表达水平明显降低。结论缺锌可下调大鼠海马Uch-L1表达水平。     

Severe zinc deficiency: effects on the distribution of nine elements (potassium, phosphorus, sodium, magnesium, calcium, iron, zinc, copper and manganese) in regions of the rat brain

The effect of severe zinc deficiency on the distribution of nine elements (potassium, phosphorus, sodium, magnesium, calcium, iron, zinc, copper and manganese) in brain regions (olfactory lobes, right and left hippocampi, cerebellum and the rest of the brain) has been studied. After male rats (30 days old) were fed a zinc-deficient diet for 28 days, the zinc concentration of most brain parts was similar to zinc-adequate control values. Olfactory lobe zinc, on the other hand, was slightly depressed. However, the levels of other metals were dependent on zinc nutriture. Zinc deficiency caused an elevation in copper concentrations in most brain parts. Restriction of food intake caused a similar increase in brain copper but generally the effect was less than with zinc deficiency. Levels of calcium, manganese, sodium and potassium, in certain brain regions, also appeared to be altered by the zinc status of an animal. Of the minerals examined, only zinc and copper displayed asymmetrical distribution between the right and left hippocampus, and severe zinc deficiency did not affect lateral distribution of these trace metals in the hippocampus. The data suggest the hypothesis that changes in brain metal content, associated with zinc deficiency, contribute to the behavioral abnormalities that occur.