血管内皮细胞生长因子体外修饰骨髓基质干细胞关节镜下回植治疗兔股骨头坏死的研究

目的 检测rAAV-2-hVEGF-165转染骨髓基质干细胞后的基因表达,研究髓芯减压关节镜监视下hVEGF基因转染骨髓基质干细胞在治疗股骨头缺血性坏死中的作用及价值.方法 制备rAAV-2-hVEGF-165,将病毒以感染被率(MOI)为1×10~5v.g./cell转染兔骨髓基质干细胞,应用腺相关病毒介导绿荧光蛋白转染兔骨髓基质干细胞检测转染情况.应用RT-PCR和免疫印迹检测转染BMSCs外源hVEGF基因的转录与表达,得出最佳的转染时间.关节镜监视并对坏死骨清除后植入骨髓基质干细胞,术后2、4、8周分别对各组兔股骨头行X线分析,生物力学分析,切片血管计数并行免疫组化检查,观察疗效.结果 rAAV-2-hVEGF-165转染的兔骨髓基质干细胞可有效表达hVEGF-165,RT-PCR和免疫印迹检测可见转染MSCs中外源hVEGF基因的转录与表达.转染后48 h即可有表达,10 d时表达最强.免疫组化检测发现植入转染的骨髓基质干细胞2周后出现阳性表达,8周后强阳性表达.生物力学分析显示植入转染细胞组股骨头强度接近正常股骨头.结论 hVEGF-165基因转染的兔骨髓基质干细胞可有效表达具有生物活性的hVEGF-165蛋白.通过关节镜监视可以彻底清除死骨,使hVEGF-165基因修饰的骨髓基质干细胞准确的回植入股骨头坏死处,可使股骨头缺血性坏死的修复加强.回植入兔股骨头的hVEGF-165基因可有效表达.     

骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死研究进展

股骨头坏死是一种严重危害人类健康的常见疾病,早期有效治疗可以防止股骨头进一步病变,带来巨大的社会效益和经济效益。骨髓间充质干细胞（BM—MSCs）具有良好的多向分化潜能和活跃的增殖特性。成为目前股骨头坏死治疗研究中的热点。联合其他方法,特别是髓芯减压BM—MSCs移植、介入BM—MSCs移植、联合填充材料BM—MSCs移植在临床上已经取得良好效果,而基因转染BM-MSCs移植可能是未来新的研究方向。本文对目前BM-MSCs在股骨头坏死治疗中的应用进行综述,以期找到新的有效方法。     

干细胞体外培养关节镜下髓芯减压回植治疗早期股骨头坏死的实验研究

目的 研究髓芯减压关节镜监视下骨髓间充质干细胞在治疗股骨头缺血性坏死中的作用及价值.方法 建立兔右侧股骨头缺血件坏死模型,并分为3组,A组为空白骨坏死对照组,B组为单纯髓芯减压组,C组髓芯减压并植入骨髓间充质干细胞组.关节镜监视并对坏死骨清除后植入骨髓间允质干细胞,术后4周和8周对股骨头行组织学检查.结果 组织形态学检测发现术后4、8周C组术后各时相点血管数量及修复区新骨面积比显著高于两个对照组,差异有统计学意义(F=20.32、16.97,81.32、67.32;均P<0.05).结论 骨髓间充质干细胞的成骨作用较强,可使股骨头缺血性坏死的修复加强,对股骨头缺血性坏死的治疗意义较大.     

HGF修饰的MSCs治疗股骨头坏死的基础研究

目的研究肝细胞生长因子（HGF）修饰的骨髓间充质干细胞（MSCs）治疗股骨头坏死（ONFH）的可行性。方法以40只新西兰兔为实验动物制作股骨头坏死模型,2周后随机分为MSCs组及HGF/MSCs组,透视下行股骨头钻孔后分别注入MSCs悬液及HGF/MSCs悬液,4周后处死动物,对股骨近端进行Micro-CT、组织学及免疫组化观察,了解两种方法对股骨头坏死灶的治疗差异。结果 HGF/MSCs悬液的Micro-CT影像学指标显示骨小梁数量增加,钻孔隧道消失,BMD（517.41±69.37）mg/ml,TMD（817.61±12.31）mg/ml,BVF0.61±0.11,主要指标均优于MSCs悬液组,组织学及免疫组化结果方面也有明显改善。结论 HGF/MSCs悬液可有效治疗股骨头坏死。     

富血小板血浆诱导骨髓基质干细胞联合软骨支架治疗兔激素性股骨头坏死

目的 观察自体富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)诱导骨髓基质干细胞联合同种骨软骨支架治疗早期兔激素性股骨头坏死的疗效,探索早期股骨头坏死治疗的新方法.方法 采用含有抗凝剂的真空采血管从实验兔的耳中央动脉采取动脉血5 mL,再通过离心方法获取PRP,用16号骨髓穿刺针从实验兔自体股骨髓腔抽取骨髓5 mL,把抽取的骨髓进行密度梯度离心,获取兔骨髓基质干细胞,并进行细胞原代培养和成骨诱导.对已获取PRP和骨髓基质干细胞的实验兔进行激素性股骨头坏死造模,取同种股骨髁部骨软骨制作软骨支架,最后以制备的软骨支架为载体,将经过成骨诱导的骨髓基质干细胞移植到软骨支架上,形成细胞-支架复合物,用16号骨髓穿刺针对坏死的股骨头进行髓芯减压术,术中将细胞-支架复合物植入坏死的股骨头下.实验动物共分为4组,每组20只,A组为空白对照;B组仅进行髓芯减压;C组髓芯减压后植入经过成骨诱导培养的细胞;D组髓芯减压后植入细胞-支架复合物.实验后在第2、4、8周各组分别处死6、6、8只,每只实验兔的股骨头行大体标本及组织学检查.结果 D组治疗效果最显著,通过空骨陷窝计数发现D组与其他各组的差异有统计学意义(P<0.05).结论 骨髓基质干细胞通过PRP的诱导向成骨细胞分化;软骨支架材料为骨髓基质干细胞向成骨细胞分化提供良好的空间结构,有利于其向成骨细胞分化;PRP和软骨支架材料联合应用可促进早期兔激素性股骨头坏死的修复.     

地塞米松和洛伐他汀对骨坏死患者骨形态发生蛋白2表达的影响

骨坏死常常由于摄取大剂量的类固醇或酒精而引起，会造成肌肉骨骼系统的残疾。大部分患者在股骨头坏死的几年内需要接受人工全髋关节置换手术。骨坏死与服用类固醇激素有关。既往的研究发现皮质类固醇药物在老鼠多功能骨髓干细胞中会抑制骨髓干细胞及成骨细胞的增生及分化，增加脂肪生成。     

激素性股骨头坏死模型骨髓间充质干细胞的生物学特性评估

目的评估激素性股骨头坏死模型自体骨髓间充质干细胞增值能力及定向诱导能力。方法建立SD大鼠激素性股骨头坏死动物模型,行病理检查,验证模型。取模型组和对照组的骨髓间充质干细胞进行细胞生物学特性评估。结果联合运用牛血清和激素能够较好地建立激素性鼠股骨头缺血性坏死动物模型,激素性股骨头坏死SD大鼠的骨髓间充质干细胞,增值速率显著慢于对照组(P<0.05),其骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向诱导后ALP染色阳性,但茜素红染色显示钙结节数量少于对照组,向成脂细胞定向诱后油红O染色示脂肪细胞少于对照组。结论实验组骨髓间充质干细胞仍具备干细胞的生物学特性,但相对于对照组其增殖能力减弱,成骨、成脂潜能减弱。     

骨髓间充质干细胞在治疗股骨头坏死方面的临床研究

目的：探讨骨髓间充质干细胞移植技术在治疗股骨头坏死的疗效。方法选用齐齐哈尔医学院附属第三医院骨科股骨头坏死患者60例,按ARCO分期均为1～2期,其中采用死骨刮除＋植骨＋骨髓间质干细胞移植技术治疗股骨头坏死患者30例,采用传统死骨刮除＋植骨治疗股骨头坏死患者30例,通过放射线检查术后骨质变化情况和VAS疼痛评分及Harris 髋关节功能评分进行对比,对两种治疗方法疗效优良率采用χ2检验。结果两组患者住院时间及治疗效果比较差异显著,有统计学意义。结论骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头坏死,能够有效恢复髋关节功能,减轻髋关节疼痛症状,改善股骨头坏死区域的血运,防止股骨头塌陷,保护股骨头,延缓髋关节置换的手术时间。     

骨髓间充质干细胞修复肺损伤研究进展

骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs）也称骨髓基质来源干细胞,是一种具有多向分化潜能的干细胞,在体外较易分离、纯化和扩增,具有多能性。近来报道BMSCs对肺组织损伤修复也具有一定的作用。以下就近年来BMSCs在肺损伤治疗方面的研究作一综述。一、MSCs的生物学特性1.MSCs的表面标记：BMSCs起源于中胚层,是存在于骨髓基质内的非造血细胞来源的细胞亚群,为贴壁生长细胞,     

从股骨近端骨髓分化为破骨细胞能力的改变探讨激素性股骨头的坏死机制

目的从股骨近端骨髓体外分化为破骨细胞能力的改变来探讨激素性股骨头坏死的发病机制。方法取激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓,建立人骨髓基质干细胞诱导分化为破骨细胞的培养体系,通过观察多核细胞的形态、抗酒石酸酸性磷酸酶染色以及进一步培养于牛薄骨片扫描电镜观察以检测骨髓形成破骨细胞的能力。结果与正常组相比,多核细胞的形态、抗酒石酸酸性磷酸酶染色（P〈0.01）以及进一步培养于牛薄骨片扫描电镜观察表明激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓体外分化为破骨细胞的能力及活性上升。结论激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓基质干细胞体外分化为破骨细胞的能力和活性上升。     

VEGF-165基因修饰的骨髓间充质干细胞移植修复犬股骨头坏死

目的研究hVEGF-165基因转染的犬骨髓间充质干细胞移植修复自体股骨头坏死的效果。方法用股骨颈截骨后克氏针再固定的方法建立犬股骨头坏死的动物模型,分为转基因间充质干细胞移植组、单纯间充质干细胞移植组和未治疗组,每组9只动物(18侧髋关节)。脂质体法将hVEGF-165基因转染进入骨髓间充质干细胞。造模后10周经大转子将细胞植入股骨头坏死区,转基因间充质干细胞和未转基因干细胞随机植入同一动物的左侧或右侧后肢。细胞移植后第2、8和12周取股骨头标本进行骨小梁定量分析,结合X线和同位素断层扫描分析3组间成骨修复的差别,并比较第12周时各组标本中截骨平面以上的血管数。结果①造模手术后10周,手术侧股骨颈骨折已愈合,但股骨头均出现典型的坏死。②骨小梁定量分析提示,在每一个时间点各组的成骨修复的差别有统计学意义:转基因间充质干细胞移植组的成骨修复好于单纯干细胞移植,未治疗组最差。X线和SPECT的表现与此相符。③12周时,转基因间充质干细胞移植组中血管数量最多,间充质干细胞移植组与未治疗组的血管数量没有统计差别。结论与未转基因的间充质干细胞移植相比,转染hVEGF-165基因后的间充质干细胞移植能够增加股骨头坏死区血管...     

网状钛柱植入治疗成人股骨头坏死

目的观察网状钛柱植入治疗成人中晚期股骨头坏死的疗效。方法采用AO网状钛柱植入32例40髋坏死塌陷股骨头内,网状钛柱内填满自体髂骨骨粒,撑起塌陷的股骨头。结果所有病例均获得随访,随访时间1～4年,平均2．5年,28例疼痛消失,3例疼痛轻度,1例疼痛中度。所有术前ARCOⅢ期者均恢复同心圆形状,疗效按Harris评分,优23髋,良16髋,差1髋,优良率为92．7％。结论网状钛柱植入治疗成人中晚期股骨头坏死有较好的临床疗效。     

siRNA阻断PPARγ基因表达预防酒精性股骨头坏死的实验研究

目的:观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体阻断酒精诱导兔骨髓基质细胞(MSCs)的成脂分化预防酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法:采用RNA干扰技术,构建重组PPARγ的siRNA腺病毒表达载体;将腺病毒载体感染家兔体外MSCs以及活体股骨头内MSCs,检测MSCs内PPARγmRNA及蛋白表达、甘油三酯、ALP活性和培养液骨钙素含量,并计数脂肪细胞;观察股骨头病理学变化。结果:干扰组体外MSCs内PPARγmRNA表达值、脂肪细胞数、甘油三酯、ALP活性值与骨钙素含量均接近正常,与模型组、感染空载体组、感染无关siRNA组间差异有统计学意义(P<0.05),与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。活体实验干扰组股骨头内PPARγmRNA和蛋白均呈低表达、空骨陷窝计数、脂肪细胞及最大脂肪细胞平均直径未见明显增加,与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向PPARγ基因siR-NA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔体外MSCs及活体股骨头MSCs内PPARγ基因表达,阻止其成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。     

激素所致股骨头缺血性坏死的影像学诊断

激素所致股骨头坏死的发病率目前已明显高于股骨颈骨折等外伤所致的股骨头坏死。笔者将搜集的36例激素所致股骨头坏死进行了影像学分析,探讨了激素所致股骨头坏死的发生机理和早期影像学诊断及选择性血管造影的表现等,为临床防治提供理论依据。     

Research advances in experimental animal models of osteonecrosis

Osteonecrosis is a common disease, mainly affecting femoral head. Good animal models are helpful in research on the pathologic mechanism of osteonecrosis and the exploration of effective treatment. Although it is relatively easy to establish animal models of early osteonecrosis of femoral head using various approaches, it is difficult to develop an animal model that mimics the full range of osteonecrosis of femoral head. In this paper, we reviewed the current researches on experimental animal models of osteonecrosis, with an attempt to provide evidences for choosing the appropriate animal models and find the way of future development.     

非创伤性股骨头坏死的流行病学研究进展

股骨头坏死是骨伤科的一种多发病、难治病,其病程长,致残率极高。而非创伤性股骨头坏死更是病因复杂,起病隐匿,常不能进行及时的诊断和治疗,随着病情加重,最终导致髋关节功能障碍,严重影响生活质量。本文对非创伤性股骨头坏死的流行病学研究进展进行综述,进一步了解非创伤性股骨头坏死的一般发病情况,明确主要致病因素的发病趋势,为其诊断提供更为全面的信息。     

激素性骨坏死动物模型的研制

目的　成功制作激素性骨坏死的动物模型。方法　采用 34只健康成年中国大耳白兔 ,随机分成单纯激素组 (A组 ,5只 )、单纯马血清组 (B组 ,10只 )、联合使用马血清和激素组 (C组 ,14只 )、正常对照组 (D组 ,5只 ) 4组。各组于激素注射后 4周处死 ,取心、肝、肺、肾及骨标本 ,作光镜及透射电镜观察组织病理学改变 ,根据有无骨坏死表现计算各组骨坏死发生率。结果　C组骨坏死发生率较高 (71.43% ) ;组织病理学观察发现多个部位均有骨坏死表现 ;坏死的股骨头软骨下可见髓腔内脂肪细胞明显增大 ,造血细胞减少 ,骨小梁内骨陷窝空虚 ,部分骨标本在软骨下骨的骨小管中可见血栓形成 ;透射电镜下可见骨细胞内脂滴存在 ,骨内血管内皮细胞空泡样变性。结论　联合使用马血清和地塞米松可成功制作激素性骨坏死动物模型 ,所需成本低 ,重复性好     

股骨头坏死动物模型研究进展

股骨头坏死是常见的髋部疾病之一,是由于不同病因破坏了股骨头血液供应所造成的最终结果。由于其病程长,股骨头塌陷造成的病残较重,严重影响患者的生活质量,越来越引起人们的重视。另一方面,对股骨头坏死的研究进展仍有很多局限性,这主要由于股骨头坏死的绝大部分发病原因和发病机制并不十分清楚。股骨头坏死动物模型的建立对该病的研究有重要意义。本文就近年来国内外动物模型制作的方法进行综述。     

创伤性与激素性股骨头缺血性坏死全髋关节置换疗效比较

目的　比较创伤性与激素性股骨头缺血性坏死全髋关节置换术的疗效。方法　对我院 1991～ 2 0 0 1年间行全髋关节置换术治疗创伤性与激素性股骨头缺血性坏死患者进行随访研究共 5 1例。结果　激素组松动率大于创伤组。结论　激素性股骨头缺血性坏死全髋关节置换术疗效较创伤性股骨头缺血性坏死差。