菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜VEGF表达的影响

目的:探讨菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜VEGF表达的影响。方法:采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。40只Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、PRD治疗组和导升明组。采用免疫组织化学染色法、Western blot法和RT-PCR法分别检测视网膜VEGF蛋白及mRNA的表达。结果:PRD治疗组与模型组比较,大鼠视网膜VEGF蛋白及mRNA表达均明显降低(P<0.01)。结论:PRD可通过下调糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达,发挥对糖尿病视网膜组织的保护作用。     

糖网明抗糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡的实验研究

目的:探讨糖网明对糖尿病大鼠视网膜神经细胞的抗凋亡作用及其可能的机理.方法:四氧嘧啶制作糖尿病大鼠模型,分为正常组、糖尿病未治疗组、糖尿病糖网明治疗组,180d后处死大鼠,取血测红细胞醛糖还原酶(AR)活性,并用原位末端标记法(TUNEL)标记大鼠视网膜凋亡细胞,光镜观察.结果:糖尿病大鼠与正常组大鼠相比红细胞AR活性及视网膜神经细胞凋亡数量均显著升高,糖网明干预组与模型组相比这些改变明显减轻.结论:糖网明通过降低AR活性,抗视网膜神经细胞凋亡对早期糖尿病视网膜病变具有良好的防治作用.     

川芎嗪对DM大鼠醛糖还原酶活性及肾脏细胞凋亡的影响

目的:研究醛糖还原酶(AR)、凋亡相关基因Bcl-2和Bax与糖尿病肾病(DN)的关系,探讨醛糖还原酶抑制剂(ARIs)和具有ARIs作用的中药川芎嗪对DN的治疗作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机平均分为4组,即正常对照组、糖尿病(DM)对照组、DM依帕司他治疗组、DM川芎嗪治疗组。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发DM。定期测定尿白蛋白变化。16周后,处死大鼠,分离肾脏测定其AR活性,观察Bcl-2、Bax的表达,取部分肾皮质进行电镜细胞计量、观察细胞凋亡的形态学变化。结果:①与正常对照组相比,DM对照组肾脏皮质AR活性明显升高(P<0.001),依帕司他治疗组、川芎嗪治疗组AR活性较DM对照组明显降低(P<0.01),而各组间血糖水平无明显差异。②DM对照组尿白蛋白随病程逐渐升高,而治疗组变化不明显。③DM对照组肾脏Bcl-2、Bax蛋白表达明显增加,依帕司他治疗组、川芎嗪治疗组的Bcl-2蛋白表达较DM对照组增多,而Bax蛋白表达较DM对照组减少。④透射电镜下见DM对照组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,依帕司他治疗组、川芎嗪治疗组肾组织细胞凋亡改变明显减轻。⑤DM对照组肾小球基底膜增厚...     

川芎嗪对糖尿病大鼠视网膜病变IL-1β和ICAM-1表达的影响

目的观察川芎嗪注射液对糖尿病大鼠视网膜病变白细胞介素-1β(IL-1β)和细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨川芎嗪注射液治疗糖尿病大鼠视网膜病变(DR)的作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、模型组和川芎嗪组,用链脲佐菌素(60 mg/kg)一次性腹腔注射的方法建立糖尿病大鼠模型,川芎嗪组予腹腔注射给药川芎嗪(40 mg/kg)。6个月后处死动物摘除眼球进行视网膜血管消化铺片观察和免疫组织化学方法检测IL-1β和ICAM-1的表达。结果造模后模型组视网膜病变明显,川芎嗪治疗后视网膜病变得到明显延缓。视网膜毛细血管IL-1β和ICAM-1的表达,对照组分别为(5.130±1.312)%和(0.424±0.085)%,模型组分别为(7.320±0.623)%和(1.213±0.152)%,川芎嗪组分别为(3.604±1.373)%和(0.614±0.086)%,3组比较均有显著性差异(P均<0.05)。结论川芎嗪可通过降低视网膜IL-1β和ICAM-1的表达,延缓糖尿病大鼠视网膜病变的发生发展。     

灵芝孢子粉在早期糖尿病大鼠视网膜抗氧化反应中的作用

目的：探讨灵芝孢子粉对早期实验性糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）的作用及其机理。方法：用链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）诱发糖尿病大鼠模型，并以高糖高脂饮食。实验鼠被随机分为对照组、模型组、治疗组。治疗组用灵芝孢子粉灌胃，模型组和对照组用等容量生理盐水灌胃。连续3个月后观察大鼠视网膜中脂质过氧化终产物丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）及大鼠血清中一氧化氮（nitrogen monoxidum NO）、一氧化氮合酶（nitricoxide synthase，NOS）含量的变化。结果：灵芝孢子粉有降低视网膜中MDA含量，提高视网膜中SOD活性的作用，并能提高血清中NO、NOS水平，与模型组比较差异有显著性。结论：灵芝孢子粉能增强糖尿病大鼠抗氧化能力，减轻视网膜的氧化损伤，从而对糖尿病视网膜病变起一定保护作用。     

藏红花对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡过程中线粒体途径的影响

目的:观察藏红花对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡过程中线粒体功能的影响。方法:采用随机数字表法将72只8~10周龄健康无眼疾SD雄性大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、藏红花治疗组,每组24只。正常对照组大鼠不作任何处理。其余组采用链脲佐菌素(SYZ)25 mg/(kg·d)连续腹腔注射3 d,1次/d,建立2型糖尿病模型,以血糖≥16.7 mmol/L为造模成功。模型成功建立后,藏红花治疗组50 mg/kg的剂量腹腔注射藏红花素溶液,1次/d,连续3个月。并检测3组大鼠视网膜醛糖还原酶(AR)、神经细胞凋亡及视网膜中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bcx)、细胞色素C(cyt-c)、半胱天冬酶-3(cespase-3)蛋白的表达。结果:糖尿病模型组大鼠视网膜中的AR活性明显高于正常对照组和藏红花治疗组,且差异有统计学意义(P0.05);对照组RGCs层见少量TUNEL染色阳性细胞,成棕褐色染色;B:糖尿病模型组RGCs、内核层可见大量TUNEL染色阳性细胞;C:藏红花治疗组RGCs、内核层可见量TUNEL染色阳性细胞,但数量远少于糖尿病模型组;糖尿病模型组大鼠视网膜中的bcl-2、bax、cyt-c及caspase-3蛋白表达均明显低于正常对照组和藏红花治疗组,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:藏红花可通过抑制AR活性、上调凋亡抑制基因bcl-2的表达及下调凋亡促进基因bax、cyt-c和caspase-3的表达,抑制线粒体凋亡途径活化,减少糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡,发挥对糖尿病视网膜损伤的保护作用。     

川芎嗪对糖尿病大鼠视网膜组织型纤溶酶原激活物含量的影响

目的探讨糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的发病机制及川芎嗪治疗糖尿病视网膜病变的机制.方法将SD大鼠随机分成正常对照组、糖尿病组和糖尿病川芎嗪治疗组.后两组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发糖尿病模型,于第30天和第90天测定各组大鼠视网膜组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,TPA)的含量.结果糖尿病组大鼠视网膜TPA含量高于正常对照组.治疗组大鼠视网膜TPA含量低于糖尿病组.结论DR的发生与视网膜TPA含量升高有关,川芎嗪可通过降低糖尿病大鼠视网膜TPA含量防治DR的发生.     

滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达的影响

目的:观察滋阴活血方对糖尿病大鼠视网膜瘦素表达的影响。方法:SD大鼠尾静脉注射4.5%链脲佐菌素诱导糖尿病模型。实验分为正常组、模型对照组、多贝斯治疗组、滋阴活血方组,灌胃治疗6周。取各组大鼠眼球组织,分别用免疫组织化学染色、免疫印迹方法检测各组大鼠眼球视网膜瘦素的表达。结果:免疫组化检测结果显示:糖尿病模型组大鼠视网膜各层瘦素染色程度较正常组明显增加为中度(++),多贝斯治疗组和滋阴活血方治疗组的染色程度则为轻度(+)。免疫印迹结果显示:糖尿病大鼠视网膜瘦素相对表达量较正常组明显升高(P<0.01),而多贝斯对照组、滋阴活血方治疗组的表达量较模型对照组明显下降(P<0.01)。结论:滋阴活血方可降低糖尿病大鼠视网膜瘦素表达,对糖尿病视网膜病变起到一定的改善作用。     

川芎嗪对脑外伤后NOS活性变化的影响

目的观察川芎嗪对急性颅脑损伤脑组织一氧化氮合成酶（nitric oxide syantrase,NOS）活性的影响,探讨川芎嗪对急性颅脑损伤的治疗作用及机理。方法建立大鼠脑外伤模型,采用化学定量法对大鼠脑外伤后脑组织中NOS含量进行检测。结果大鼠脑皮质中的NOS活性在伤后30min较对照组升高（P〈0.05）,2h后较对照组升高非常显著（P〈0.01）,6h开始下降,24h降至基础水平。川芎嗪治疗组在伤后2h、6h NOS活性较损伤组明显降低（P〈0.01,P〈0.05）,说明川芎嗪对颅脑损伤早期具有保护作用。结论颅脑损伤后,受损脑组织中NOS活性升高,川芎嗪可通过抑制损伤后NOS活性,起到保护创伤神经元的作用。     

温润通络法对糖尿病模型大鼠的神经保护作用

目的:研究温润通络方对糖尿病(DM)模型大鼠坐骨神经电生理及坐骨神经组织中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)的影响,探讨温润通络法对糖尿病周围神经病变(DPN)的神经保护作用及其部分作用机理。方法:实验动物随机分为空白组、模型组、温润通络方高、低剂量组、血府逐瘀汤组。采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立大鼠DM模型,观察大鼠一般状态和坐骨神经形态功能变化,采用荧光分光光度法、比色法和化学法测定醛糖还原酶(AR)活性、Na~+-K~+-ATP酶和山梨醇(SNS)的表达情况。免疫组化法检测坐骨神经及其周围组织VEGF、bFGF表达。结果:与空白组相比,模型组坐骨神经病变表现为神经纤维肿胀,鞘细胞减少,神经外膜毛细血管扩张充血,炎细胞浸润;模型组大鼠坐骨神经AR活性和SNS含量显著升高(P0.01),Na~+-K~+-ATP酶活性显著降低(P0.01);坐骨神经及其周围组织中VEGF、bFGF表达显著升高(P0.01);经药物治疗后,与模型组比较,温润通络方高剂量组大鼠坐骨神经AR活性和SNS含量显著降低(P0.01),Na~+-K~+-ATP酶活性升高(P0.01),各药物组坐骨神经组织VEGF、bFGF表达均降低(P0.01),各中药干预组中,温润通络方高剂量组降低最为显著。结论:温润通络方不仅降低DM大鼠坐骨神经AR和SNS含量、提高Na~+-K~+-ATP酶活性,还可促进坐骨神经及其周围组织中的VEGF、bFGF表达,说明温润通络法可通过加强对周围神经功能的保护作用而达到改善坐骨神经病变,治疗DPN的作用。     

活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察中药复方活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达的影响。探讨中医药治疗糖尿病视网膜病变(DR)的机制。方法:采用链脲佐菌素(65mg/kg)一次性腹腔注射的方法,建立糖尿病大鼠模型,将78只SD大鼠随机分为模型组和活血解毒方高剂量组(15.4g/kg)、中剂量组(7.70g/kg)、低剂量组(3.85g/kg)及导升明组(0.167g/kg),每组13只,另设13只正常对照组。造模成功后,灌胃给药,24周后处死动物。检测血清和视网膜全层中VEGF的表达;采用Real-time PCR法检测视网膜VEGF mRNA的表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清中VEGF的含量增加(P<0.01),与模型组相比,各用药组VEGF的含量均下降,但差异无统计学意义。与正常对照组相比,模型组的视网膜全层VEGF表达增加(P<0.01),各用药组与模型组相比显著降低(P<0.01)。与正常对照组相比,模型组的VEGF mRNA表达升高,而各用药组的表达比模型组降低(P<0.01)。结论:活血解毒方可能通过降低糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达,延缓DR的发生和发展。     

贞芪胶囊对非增殖型糖尿病视网膜病变大鼠视网膜中醛糖还原酶基因mRNA的表达

目的探讨益气养阴、祛瘀明目中药复方贞芪胶囊对糖尿病视网膜病变（Diabetic retinopathy，DR）大鼠血糖及视网膜中醛糖还原酶基因（Mdose Reductase，AR）mRNA表达的影响。方法高脂饮食喂养后采用脲链佐菌素（Streptozotocin，STZ）注射大鼠腹腔诱发糖尿病。在糖尿病大鼠病程3个月出现DR病理变化后用贞芪胶囊治疗，连续灌胃3个月，通过血糖的测定及逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测，探讨贞芪胶囊对DR大鼠血糖及视网膜中醛糖还原酶基因mRNA表达的影响。结果高脂饮食加链脲佐菌素诱导后3个月大鼠糖尿病视网膜病变造模成功；造模后及治疗前STZ大鼠血糖与空白对照组相比明显升高，差异有统计学意义（P〈0.01）；贞芪胶囊高、中、低剂量组AR mRNA水平均低于模型组和空白对照组，与模型组及空白对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论贞芪胶囊可降低DR大鼠视网膜中醛糖还原酶基因mRNA表达，同时有一定降低血糖的作用。     

糖尿病大鼠视网膜组织抗氧化机能状况的动态观察

目的探讨糖尿病大鼠视网膜组织的抗氧化机能状况.方法将30只Wister大鼠分为实验组和正常对照组.实验组用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发糖尿病.发病后4、6和12周对两组大鼠血中自由基(FR)含量、视网膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶的活性(GSH-Px)及脂质过氧化物(LPO)水平进行了检测.结果各实验时点视网膜组织中SOD和CAT活性则显着低于对照组.糖尿病大鼠血中FR含量和视网膜组织中LPO水平及GSH-Px活性明显高于对照组大鼠,随病程的延长这些改变更明显.结论糖尿病大鼠血和视网膜组织中的抗氧化机能处于低下状态,这些变化可能在糖尿病视网膜病变、糖尿病血管性并发症的发生发展中起着重要作用.     

补肾活血法中药（糖络通）防治糖尿病大鼠早期视网膜病变的实验研究

目的：研究补肾活血法中药（糖络通）对糖尿病大鼠早期视网膜病变的防治作用及其作用机制。方法：随机将33只正常雄性Wistar大鼠分为正常对照组（N）11只,糖尿病对照组（D）11只,糖络通治疗组（DT）11只,连续给药8周后观察大鼠体重、空腹血糖、FPG、糖化血红蛋白（HbA1c）及大鼠视网膜RAGE mRNA的表达水平。并通过光镜电镜观察大鼠视网膜组织病理形态学的变化。结果：实验研究表明,糖络通可降低糖尿病大鼠视网膜RAGE mRNA的表达水平,组间比较有差异性（P＜0.01）;ALT, AST,Cr,BUN等安全性指标未出现异常,组间比较无统计学差异（P＞0.05）。结论：光镜、电镜观察表明糖络通对糖尿病大鼠的视网膜具有保护作用,能抑制神经节细胞及内外核层细胞的减少,减轻毛细血管扩张及视网膜组织的水肿。说明糖络通能够在一定程度上减缓DM大鼠视网膜的病理变化,对早期DR具有良好防治作用。为中医临床防治糖尿病微血管病变的研究提供理论依据。     

舒唐络复方对糖尿病大鼠视网膜病变干预研究

目的：探讨糖尿病视网膜病变与诱导型一氧化氮合酶的表达的关系并探讨舒唐络复方对诱导型一氧化氮合酶表达的影响以及对糖尿病视网膜病变的防治作用。方法：雄性SD大鼠70只随机分成对照组10只,糖尿病1月、3月、6月组以及舒唐络复方干预3月、6月组各12只。分别留取视网膜标本,部分标本观测视网膜病理改变;部分标本采用免疫组化法测定诱导型一氧化氮合酶表达。结果：视网膜病理结果显示：与正常对照组相比,糖尿病1月、3月、6月组视网膜病理改变逐步加重;免疫组化分析结果显示诱导型一氧化氮合酶表达在糖尿病各组均明显增强（P均〈0．05）,干预组较糖尿病各组均有明显改善（P均〈0．05）。结论：糖尿病视网膜病变早期就出现视网膜诱导型一氧化氮合酶表达增强,且随着视网膜组织病理学改变而持续活化。舒唐络复方有效抑制了诱导型一氧化氮合酶表达,从而达到视网膜保护的目的。     

藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜PKC-β、VEGF、HIF-1α表达的影响

目的：探讨藏药小檗皮对糖尿病大鼠视网膜蛋白激酶C（PKC-β）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和低氧诱导因子（HIF-1α）的影响。方法：SD大鼠采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔内注射的方法造模,随机分为模型组、小檗皮低剂量、中剂量和高剂量组、二甲双胍组、羟苯磺酸钙组、小檗碱组和对照组。成模后开始灌胃给药,小檗皮低剂量组、中剂量组、高剂量组分别按成人剂量的5、10、20倍给药,二甲双胍组和小檗碱组按成人剂量的10倍给药,模型组和对照组予灌服蒸馏水。所有实验大鼠于灌胃6周后处死。采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测视网膜PKC-β、VEGF和HIF-1α表达,采用免疫组织化学法检测视网膜HIF-1α蛋白表达。结果：与正常组比较,糖尿病大鼠视网膜中PKC-β、VEGF、HIF-1αmRNA和蛋白表达显著升高（P〈0.01）;与模型组比较,小檗皮高、中剂量组视网膜PKC-β、VEGF和HIF-1α mRNA表达显著降低（P〈0.01）,PKC-β、VEGF和HIF-1α蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）,小檗皮低剂量组大鼠PKC、VEGF和HIF-1α表达明显降低（P〈0.05）。结论：小檗皮对糖尿病大鼠视网膜具有保护作用,其作用机制可能与整体多点调控糖尿病大鼠视网膜的PKC-β、VEGF、HIF-1α表达有关。     

2型糖尿病大鼠视网膜病变模型的建立及 羟苯磺酸钙的干预作用

目的:建立及评价2型糖尿病大鼠视网膜病变(DR)模型,观察羟苯磺酸钙对DR的干预作用。方法:72只SD大鼠随机分成正常组和造模组。造模组大鼠以高脂饲料喂养3个月后ip STZ(45 mg.kg-1)1次。12周后造模大鼠再随机分为模型组和药物组。药物组每日ig羟苯磺酸钙1次(150 mg.kg-1),给药周期2个月结束后,检测视网膜组织中脂质过氧化物丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH)含量,血管内皮生长因子(VEGF),糖基化产物(AGEs)等指标。结果:与正常组比较,模型组各指标均有明显改变;与模型组比较,羟苯磺酸钙组SOD的活力,VEGF的表达有显著性差异(P<0.05),但GSH,MDA含量及AGEs的表达差异不明显。结论:本实验2型糖尿病大鼠视网膜病变模型与人类2型糖尿病视网膜病变有很多共性,且能被羟苯磺酸钙所干预,可能为研究2型糖尿病视网膜病变及其防治药物的理想动物模型之一。     

密蒙花方对链脲佐菌素性糖尿病大鼠视网膜病理形态的影响

目的探讨密蒙花方对链脲佐菌素性糖尿病大鼠视网膜病理形态的影响。方法选用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠作为动物模型,以羟苯磺酸钙胶囊(昊畅)作为阳性对照药。密蒙花方煎剂分为低、中、高3种不同浓度。糖尿病大鼠成模后分别以前述不同药物灌胃4个月。进行以下几方面的研究:①STZ性DM大鼠一般状况观察:饮食、尿量、体质量变化等。②HE染色观察STZ性DM大鼠视网膜病理形态学变化。③免疫组织化学法检测STZ性DM大鼠视网膜ICAM-1、E-selectin蛋白表达情况。结果①一般状况:STZ诱导的DM大鼠高血糖状态持久稳定,表现为明显的"三多一少"典型症状。密蒙花方中剂量组体质量高于DM模型组,具有统计学意义(P<0.05)。②DM模型组视网膜各层出现典型的病理学改变,密蒙花方中剂量组视网膜病理学改变较DM模型组减轻。③DM模型组大鼠视网膜ICAM-1、E-selectin表达较正常组明显增多(P<0.01);昊畅组及各密蒙花方组ICAM-1、E-selectin表达均较模型组有不同程度的减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。与昊畅组比较,密蒙花方中剂量组ICAM-1、E-selectin表达降低,差异具有统计学意义。结论 STZ诱导的DM大鼠是一种相对简单易行、可靠的模型制备方法。密蒙花方中剂量能在一定程度上减轻STZ性DM大鼠视网膜及视网膜毛细血管的病理改变。密蒙花方改善大鼠视网膜及视网膜毛细血管病理改变的作用与减少视网膜ICAM-1、E-selectin表达有关。     

血管内皮细胞生长因子反义寡聚脱氧核苷酸对视网膜新生血管的影响

目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODNs)对增生性视网膜病变视网膜血管发育及新生血管形成的影响.方法注射血管内皮细胞生长因子反义寡聚脱氧核苷酸干预高浓度氧诱导SD幼鼠建立的增殖性视网膜病变动物模型,取眼球作病理切片,计数视网膜新生血管芽、测量视网膜内血管横断面积并比较.结果球后注药组和静脉注药组视网膜新生血管芽细胞核数均明显低于未用药组(P＜0.01);球后注药组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);而静脉注药组则显著高于正常对照组(P＜0.01).球后注药组(P＜0.01)和静脉注药组(P＜0.05)视网膜内血管横断面积均显著低于正常对照组,球后注药组亦明显低于未用药组(P＜0.05).结论VEGF ASODNs能在明显抑制视网膜新生血管形成的同时,影响新生幼鼠视网膜血管的正常发育,且局部用药作用明显优于全身给药.