湖北汉族人群先天性巨结肠症内皮素受体B基因多态性与突变的研究

目的：研究中国湖北汉族人群内皮素受体-B(EDNRB)基因的多态性与散发性先天性巨结肠症发病的关系。 方法：收集104例散发性先天性巨结肠症患儿(病例组)及其中42例(子代组)的双亲(双亲组)血样， 120例正常儿童作对照(对照组)。 PCR-SSCP与DNA测序确定并比较EDNRB基因外显子4的突变与多态性位点(SNPs)等位基因与基因型分布差异，分析sHD表型与SNPs的关联，传递不平衡检验(TDT)分析3样本家系SNPs的传递不平衡。结果：EDNRB基因外显子4，检测到c831 G→A(L277L)多态性位点，未发现突变;病例组c831 G→A位点的等位基因A频率(68%∶53%)和纯合子AA基因型频率(49%∶30%)均明显高于对照组(P<0.01);病例组等位基因A频率明显高于双亲组(68%∶54%,P<0.01);短段型(SSA)患者等位基因A频率明显高于长段型(LSA)患者(76%∶63%,P<0.05);TDT检验未发现亲子代间在c831 G→A(L277L)位点存在传递不平衡。结论： 中国湖北汉族人群EDNRB多态性与散发性先天性巨结肠症发病关系密切，尤其与短段型表型 关系密切。     

先天性巨结肠症内皮素B受体基因分析

目的　检测中国散发先天性巨结肠症 (HD )是否有EDNRB基因突变 ,以探讨EDNRB与HD发生的关系。方法　提取 3 4例中国散发性HD患儿手术切除的组织标本基因组DNA ,聚合酶链反应(PCR)扩增EDNRB基因第 3 ,4,6外显子 ,单链构象多态 (SSCP)分析上述外显子是否有突变。结果　13例短段型HD中 ,2例有EDNRB基因突变 ;常见型及长段型未见EDNRB基因突变。结论　中国散发短段型HD有EDNRB基因突变 ,提示EDNRB基因与先天性巨结肠症的发生有关。     

TBX22基因多态性与非综合征性唇腭裂相关关系的研究

目的：探讨TBX22基因多态性与中国华东地区部分人群非综合性征唇腭裂的关系。方法：选取80个核心家庭的80例NSCL/P患儿为实验组;选取80例正常儿童作为对照组。分别提取患儿及其父母和正常儿童的外周血DNA。应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）分别扩增TBX22基因编码区外显子3的全部序列（包含G359A、A361G突变位点）,然后运用DNA测序技术,检测华东地区核心家庭的TBX22基因编码区的突变情况,分析记录基因型。根据测序所得基因型数据,比较患者组与正常儿童的基因型和等位基因频率,并对核心家庭的数据进行单倍型相对风险分析（haplotype relative risk,HRR）,对父母至少一方为杂合子的核心家庭进行传递不平衡检验（transmitted disequilibrium test,TDT）。结果：TBX22基因A361G未检出多态性;G359A检测出基因多态性,实验组和对照组儿童进行病例对照研究发现基因型频数分布差异有统计学意义（P〈0.05）。而两组间单体型相对风险率的分析（HRR）和传递不平衡检验（TDT）结果均无统计学意义（P〉0.05）。结论：TBX22基因G359A位点多态性与中国华东地区部分人群NSCL/P的发生相关,可能是NSCL/P的易感基因。     

中国人散发性大肠癌APC基因突变的研究

目的观察中国人大肠癌APC基因突变情况，并结合临床病理资料加以分析。方法应用常规酚、氯仿法提取48例散发性大肠癌组织及相应正常黏膜组织的DNA，聚合酶链反应（PER）扩增、单链构象多态性（SSCP）电泳和DNA直接测序，检测APC基因第15外显子MCR区段的突变情况。结果APC基因突变率为37．5％（18／48），APC基因第15外显子MCR区段突变发生在codon1306-codon1442之间，突变类型有点突变（A→G、G→T、C→A、C→T、G→A）、移码突变（-A、-C、-G、-AG、＋T、＋A、＋AACG）。结论中国人大肠癌APC基因突变率为37．5％（18／48），以体细胞的错义突变为主，codon1309∽codon1356是大肠癌APC基因突变热区，而codon1356（CCT→TCT）是突变热点。散发性大肠癌APC基因突变与患者的年龄、性别、肿瘤的位置、浸润深度、组织类型、分化程度、远处转移、Dukes’分期和5年生存无关。     

多囊卵巢综合征患者胰岛素受体基因外显子17多态性的研究

目的探讨胰岛素受体（INSR）基因外显子17多态性与多囊卵巢综合征（PCOS）发病的关系。方法应用聚合酶链反应限制性内切酶片段长度多态性分析（PCR—RFLP）法对中国汉族96例PCOS患者和56例对照者INRS基因外显子17第1,058位点的多态性进行检测,分析并比较INRS基因外显子17第1,058位点T、C等位基因频率与PCOS胰岛素抵抗、高雄激素血症之间的关系。结果（1）PCOS患者INSR基因外显子17第1,058位点T等位基因出现频率为41．7％,明显高于正常对照组的14．3％（P〈0.05）。（2）PCOS患者出现T等位基因者的体重指数（BMI）明显低于出现C等位基因患者（P〈0.05）。（3）PCOS胰岛素抵抗组与非胰岛素抵抗组T、C等位基因出现频率无统计学差异（P〉0．05）。（4）PCOS高雄激素组与无高雄激素组INSR基因T、C等位基因频率无统计学差异（P〉0．05）。结论INSR基因17外显子C／T单核酸多态性与PCOS患者肥胖密切相关,与PCOS的高雄激素血症、胰岛素抵抗（IR）无明显关系。认为INSR基因第17外显子C／T单核酸多态性仅系PCOS的一个易感基因,对PCOS的发病无决定性作用。     

东北汉族人群中IRF6基因单核苷酸多态性与非综合征唇腭裂的相关性研究

目的探讨干扰素调节因子6基因rs2235371,rs2013162位点单核酸多态性与中国东北部人群的非综合征唇腭裂的相关l生。方法收集东北地区非综合征唇腭裂患儿165例,患者父亲109例,患者母亲118例,核心家系101例,对照组164例。采用聚合酶连一限制性片段长度多态性方法检测基因多态位点的基因型,进行病例对照和传递不平衡（TDT）分析。结果病例对照研究结果显示,单纯唇裂和唇腭裂rs2235371位点的GG基因型频率存在显著差异（P〈0．05）,而在单纯腭裂组比较,差异无统计学意义（P=0．11）。采用传递不平衡分析研究发现,干扰素调节因子6基因rs2235371位点的G等位基因在唇腭裂患者中存在过度传递（P〈0．05）,而在腭裂组没有统计学意义。rs2013162位点基因型无明显统计学意义。但c等位基因在单纯唇裂组与唇腭裂都存在过度传递。rs2235371与rs2013162位点的FBAT分析中未见统计学意义。结论干扰素调节因子6基因rs2235371位点G等位基因与东北人群的非综合征唇腭裂存在相关性。     

RET基因多态性与中国湖北地区汉族人群先天性巨结肠的相关性研究

目的建立中国汉族人群BET基因位于exon2（密码子45）、exon13（密码子769）、exon11（密码子691）和exon15（密码子904）的基因多态性的基因型和等位基因频率的分布背景，探讨其基因多态性与先天性巨结肠的关系。方法应用PCR-RFLP在中国湖北地区汉族人群中检测正常对照组（122例）及散发性先天性巨结肠组（HD组，94例）G45A（GCG→GCA）、T769G（CTT→CTG）、G691A（GGT→AGT）和C904G（TCC→TCG）的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）。结果G45A、T769G和G691A在对照组中均存在多态性，但未发现C904G存在基因多态性。均为CC型。G45A在对照组中的基因型频率分别为AA 0．17、AG 0．72和GG 0．11，突变型A和野生型G等位基因的频率为0．53和0．47；而G45A在HD组则分别为从0．61、AG 0．35和GG 0．04，突变型A和野生型G等位基因的频率为0．78和0．22。T769G在对照组中基因型频率分布分别为GG 0．30、GT 0．52和TT 0．18，G和T等位基因的频率为0．56和0．44；而T769G在HD组则分别为GG 0．49、GT 0．36和TT 0．15，突变型G和野生型T等位基因的频率为0．67和0．33。两组间的两个位点的基因型和等位基因的分布频率差异均有统计学意义（x^2=28．64，P〈0．001；x^2=5．27，P=0．022）。G691A在对照组中基因型频率分别为AA 0．05、AG 0．16和GG 0．79，突变型A和野生型G等位基因的频率为0．13和0．87；而在HD组则分别为AA 0．02、AG 0．14和GG 0．84，突变型A和野生型G等位基因的频率为0．09和0．91，两组间比较差异无统计学意义（x^2=1．232，P=0．267）。结论在中国湖北地区汉族人群中，RET密码子904可能不存在基因多态性，未发现G691A与先天性巨结肠存在相关性，而G45A和T769G的基因多态性可能与中国湖北地区汉族人群先天性巨结肠相关。     

Msx1编码区突变与非综合性唇腭裂相关性分析

目的：探讨核心家庭中Msx1编码区突变与非综合征性唇腭裂的关系。方法：运用测序技术检测华东地区核心家庭的Msx1基因全部编码区的突变情况，预测其编码氨基酸的突变频率，比较突变位点在患儿与正常儿童中的分布差异并判断是否有统计学意义，比较患者组与父母组的基因型和等位基因频率，并对核心家庭的数据进行单倍型相对风险分析（HRR），对含杂合子父母的核心家庭进行传递不平衡检验（TDT）。结果：Msx1编码区序列共有三个位点突变，分别为编码区1的C101G（A34G）突变，编码区1同义突变C330T（G110G），编码区2的G162A（S278N）突变。其中只有编码区1的同义突变C330T（G110G）在患儿与正常儿童中的分布差异有统计学意义，患者与其父母各位点基因型和等位基因分布差异无统计学意义（P〉0．05），HRR结果和TDT结果无统计学意义，另外两个突变位点各项统计均无统计学意义。结论：编码区1的同义突变C330T（G110G）可能与中国华东人群非综合征性唇腭裂存在相关性，而编码区1的C101G（A34G）突变和编码区2的G162A（S278N）突变与中国华东人群非综合征性唇腭裂不存在相关性。     

MTHFR基因C677T和A1298C多态与中国部分人群非综合征性唇腭裂的相关研究

目的 探讨MTHFR基因C677T和A1298C多态与非综合征性唇腭裂（NSCL／P）发生的关系。方法 采用病例对照设计，应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法，进行亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T和A1298C多态性检测，并进行遗传统计分析。结果 对于MTHFR基因C677T，48个杂合子父母及患儿的核心家庭TDT检验（X^2=0．02，P〉0．05）；76例NSCL／P患儿和60例正常儿童基因型及等位基因频数病例对照研究（X^2=9．91，P〈0．05）。而MTHFR基因A1298C，27个杂合子父母及患儿的核心家庭TDT检验（X^2=4．00，P〈0．05）；76例NSCL／P患儿和60例正常儿童基因型及等位基因频数病例对照研究（X^2=4．42，P〈O．05）。结论 MTHFR基因C677T位点多态与NSCL／P的发生相关，MTHFR基因A1298C位点多态可能是NSCL／P的遗传易感因子。     

基因测序筛选前列腺癌患者PCA3(DD3)基因外显子多态性

目的 筛查前列腺癌患者PCA3基因外显子单核苷酸多态性位点,初步探讨PCA3基因多态性与前列腺癌的相关性.方法 采用基因测序法对41例前列腺癌(PCa)患者和40例良性前列腺增生(BPH)患者进行PCA3基因外显子SNP位点的筛选,对筛选到的sNP位点进行前列腺癌的相关性分析.结果 PcA3基因外显子1、外显子3、外显子4区域均未检测到基因多态性位点,PCA3基因外显子2区域存在1个SNP位点(A→C),基因型分别为AA型、AC型、CC型,该位点的基冈型频率和等位基因频率与前列腺癌存在相关性(P<0.05).结论 基因测序可有效筛选到PCA3基因外显子的SNP位点,PCA3基因外显子2基因多态性可能与前列腺癌发病风险有关.     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。