非转流小型猪原位肝移植模型的建立及评价

目的建立标准化程度高、重复性和稳定性好的小型猪原位肝移植模型。方法选巴马小型猪为实验动物,在非体外静脉转流条件下行同种异体原位肝移植术,观察动物存活率及术中血流动力学、血气和生化指标的改变。结果在非体外静脉转流条件下行同种异体原位肝移植20例,平均手术时间为(181±25.8)min,平均无肝期(28.4±3.2)min。在无肝期,血流动力学和代谢发生急剧变化:平均动脉压(MAP)从无肝前期的(14.59±1.68)kPa(1cm H2O=0.098kPa)降至(5.87±0.91)kPa,中心静脉压(CVP)从(0.66±0.11)kPa降至(0.27±0.10)kPa;体温、pH、剩余碱(BE)及HCO3ˉ显著降低,心率及血清K+显著升高(P<0.05);随着门静脉和下腔静脉血流的开放,血流动力学及代谢紊乱即逐渐恢复正常。动物1周存活率为90%,16头动物存活2周以上。肝功结果:术后第1天ALT、AST和TBIL显著升高并达到峰值,第2天开始下降,第7天降至麻醉后水平。结论非转流条件下的小型猪同种异体原位肝移植模型具有标准化程度及手术成功率高、重复性和稳定性好的优点,是大型动物肝移植系列研究的理想动物模型。     

采用经心尖人工腱索植入装置建立二尖瓣反流动物模型

目的 采用经心尖人工腱索植入装置建立二尖瓣反流动物模型,并验证装置的稳定性及可靠性。方法 以大白猪为实验动物（n=12）,在经心表超声引导下,经心尖小戳口植入二尖瓣人工腱索,通过调整人工腱索长度牵拉瓣叶导致二尖瓣反流。在术前、术后即刻、术后1个月、3个月记录心脏超声指标。结果 所有模型均建立成功,术中及随访期无死亡,术后即刻二尖瓣均为中度反流。与术前相比,随访3个月时二尖瓣反流程度、心脏各径线均不同程度增加（P<0.05）。结论 非体外循环下,超声引导经心尖植入腱索牵拉二尖瓣瓣叶的方法可稳定可靠地建立二尖瓣反流动物模型。     

小型猪原位肝移植模型的建立与评价

目的 探讨建立放弃静脉转流的小型猪原位肝移植模型的可行性。方法 选用广西巴马小型猪(3-6月龄,8-11kg)为实验动物,共实施原位肝移植10例次。供体肝脏游离、冷灌注、切取、修整以及UW保存按常规方法进行。受体术中肝脏游离后夹闭肝上、肝下下腔静脉和门静脉并切除受体肝脏,各血管断端与供肝相应血管进行端端吻合,肝上下腔静脉和门静脉吻合完毕即开放肝脏血流,在此过程中未使用静脉转流,此后吻合肝动脉、胆管。结果 本组10例次肝移植手术后一周存活率90％(9/10),无肝期时间31.3±2.67min,无肝期血压显著下降(MAP4.5±1.58kPa)但肝血流开放后能较快恢复并渐趋平稳。结论 本组结果表明,非静脉转流条件下的小型猪肝移植模型是一操作方便、易于复制同时又具有较好重复性和稳定性的大动物肝移植模型,能应用于肝移植的系列实验研究。     

小型猪腹腔镜肝切除模型的建立

【摘要】〓目的〓介绍构建小型猪腹腔镜肝切除模型的经验和体会,并评价其应用价值。 方法〓建立小型猪腹腔镜肝左外叶切除的动物模型,其技术包括Trocar戳孔布局及CO2气腹的建立、肝脏游离及入肝血流阻断、肝脏离断及肝内外管道的处理等。 结果〓共10只小型猪接受了腹腔镜肝左外叶切除手术,均建模成功,未有中转开放,手术平均时间65.4±10.4 min,平均出血量164.2±23.5 mL,术中无大血管及腹腔脏器损伤等严重并发症发生。 结论〓建立小型猪腹腔镜肝切除模型是安全可行的,并可作为学习腹腔镜肝切除技术的一种重要途径。     

小型猪渐进性梗阻性黄疸模型的建立

目的建立小型猪慢性渐进性梗阻性黄疸模型，评价其模拟临床渐进性梗阻性黄疸患者的价值。方法开腹手术，将并行有16G注射器针头的胆总管用5％碘酒溶液浸泡处理的10号丝线捆扎后，抽除针头。使胆总管早期部分狭窄，后期组织受化学物质刺激发生无菌性炎症反应、纤维组织修复等病理改变，引发胆管组织慢性纤维瘢痕狭窄，造成渐进性梗阻性黄疸。结果实验动物术后观察28d无死亡，第5—7天逐渐出现黄疸，之后渐重；第28天时的总胆红素较术前明显升高[（1．22±0．41）μmol／L比（125．90±35．77）μmol／L（P〈0．01）]；4周后病理显示胆总管组织发生慢性纤维瘢痕样变，管腔狭窄阻塞。结论本小型猪动物模型模梗阻性黄疸呈渐进性、慢性过程。可重复性强、耐受性好，是比较理想的梗阻性黄疸动物模型。同时，小型猪肝胆系统的生理及解剖结构与人相近，可为临床胆管狭窄和肝门部癌相关研究提供较可靠实验依据。     

小型猪非转流下小体积移植肝损伤模型的建立及评价

目的 建立标准化的、可行性强且临床贴合性好的小型猪小体积移植肝损伤模型,为小肝综合征的深入研究奠定基础.方法 选用巴马小型猪,采用供体体内原位减体积70%的方法(切除肝左外叶、左中叶及大部右中叶),将30%残肝在非静脉转流下行同种异体原位肝移植术.记录动物手术相关数据、手术存活率及小肝7 d存活率,计算术后7 d移植肝再生百分比;监测术中血流动力学及血气改变;采集再灌注后2 h、术后1～7 d的外周血,检测血清总胆红素(TB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、凝血酶原时间及肌酐(Cr)水平的变化.猪死后当天尸检明确死亡原因.结果 实验共完成12对次小型猪小体积肝移植术.所取供肝与受体全肝重量比(GW/RLW)为(28.63±4.42)%,与受体体重比(GW/BW)为(0.73±0.06)%.平均手术时间、无肝期及肝下下腔静脉阻断时间分别为(191.7±14.2)min、(28.3±3.6)min和(45.0±5.8)min.实验动物手术存活率83.33%(10/12),小肝7 d存活率40%(4/10),7 d移植肝再生百分比为(278.06±42.95)%.与无肝前期相比,无肝期动物心率明显加快,平均动脉压、中心静脉压、肛温(RT)、pH、BE值均显著下降,而血清K+显著升高(P<0.01),至关腹前RT、平均动脉压、中心静脉压、K+已基本恢复.血清ALT、AST、PT和Cr均于术后1 d达到峰值,TB于术后第2天达到峰值,与灌注前水平比较具有显著性差异(P<0.01).至术后7 d,除ALT、Cr基本恢复外,TBIL、AST和PT仍维持在较高水平.结论 用巴马小型猪建立的非转流下30%体积供肝移植模型,具有标准化程度高、可行性强且临床贴合性好的优点,可作为小体积肝移植物损伤研究的理想大动物模型.

Abstract：

Objective To establish small-for-size (SFS) graft injury models in miniature pigs with high standardization, reproducibility and similarity to clinical situation. Methods Ba-Ma miniature pigs were introduced in this study and orthotopic liver transplantations (OLTs) were performed in 12 pigs with 30% liver volume allogeneil grafts (small portion of right paramedian lobe, right lateral lobe and caudate lobe) without veno-venous bypass. The profiles of intra-operational hemodynamics and metabolism were investigated. Animals were observed for 7 days with daily serum biochemistry and coagulation function exam. The survival rate related to operation itself and the SFS grafts were respectively calculated as well as the graft regenerative ratio at post-operational day (POD) 7. Results Graft weight as a percentage of the recipient's native liver weight (GW/RLW) and the total body weight (GW/BW) were (28. 63±4. 42)% and (0. 73±0.06)%. The mean operation time, anhepatic phase, and the time of blockage of infra-hepatic IVC were (191. 7±14. 2) min, (28. 3±3. 6) min, and (45. 0±5. 8) min. The survival rate related to the operation itself and the SFS graft were 83. 33% (10/12) and 40% (4/10), and the graft regenerative ratio at POD7 was (278. 06±42. 95) %. Contrast to the remarkable increase of heart rate and serum potassium during anhepatic phase, the mean arterial pressure, central venous pressure, rectal temperature, PH value and buffer excess had a significant decrease (P<0.01) with a gradual recovery after reperfusioa Serum ALT, AST, PT, Cr, and TB were significantly increased with a peak level at POD1 for the former 4 and POD2 for TB, and then began to decrease and favorably recovered at POD7, but TB, PT, and AST levels were still high when compared to those of prereperfusion (P<0. 05). Conclusion This model of OLT performed with 30% liver volume graft without veno-venous bypass was an ideal large animal model for series studies related to SFS graft injury.     

猪急性肾衰竭并多器官功能障碍模型建立及病理观察

目的：建立一个重症感染后多器官功能障碍综合征（MODS）并急性肾衰竭（ARF）复合的猪模型。方法：16只健康杂交家猪随机分成模型组和假手术对照组。模型组行盲肠结扎和穿孔（CLP）,加作肾动脉夹闭（CRA）制作腹腔感染致MODS并ARF模型,对照组行盲肠和双肾探查术。观察生命体征及主要器官功能（MODS相关指标）变化。结果：模型组术后24～72h出现器官功能障碍：（1）ARF：血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）分别从（92.70±11.05）μmol/L、（4.16±1.02）mmol/L升至（986.37±132.61）μmol/L、（48.13±2.68）mmol/L。（2）肝功能：血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）均超过对照值的2倍;（3）凝血功能：血小板数〈80%对照值,且皮肤可见弥漫或散在的出血点;（4）心功能：平均动脉压（MAP）持续≤70%对照值,且呈进行性下降;心率≥130次/min;（5）肺功能：动脉血二氧化碳分压（PaO2）下降,低于69.75mmHg;呼吸频率增快,均值超过照值的2倍;（6）胃肠功能障碍;（7）肾、肝、脾、肺及小肠等器官组织病理上均有不同程度的实质性改变。模型组动物6d内全部死亡,平均存活时间（69.81±22.59）h;对照组全部存活,且器官功能无明显变化。结论：采用CLP＋CRA方法,可以成功地复制出MODS并ARF复合模型,并可见最终均发展为多器官衰竭。     

小型猪原位肝移植模型的建立:体外静脉转流的重要性及两种被动静脉转流方式的比较

目的 建立巴马小香猪原位肝移植模型,探究体外静脉转流对于猪肝移植模型建立的重要性.方法 实施以巴马小香猪为实验对象的原位肝移植共30例.供体肝脏游离、灌注、切取以及保存按常规方法进行.受体术中置入左侧髂外静脉、脾静脉/门静脉和左侧颈浅静脉"Y"形插管,用作无肝期的静脉-静脉转流.受体术中肝脏游离完成后阻断门静脉,肝上、肝下下腔静脉后开放左侧髂外静脉、脾静脉/门静脉-左侧颈浅静脉转流.血管和胆道均采取端端吻合.结果 前6例未采取体外静脉-静脉转流的原位肝移植手术的受体术中全部死亡,存活率为0.0%(0/6);采用脾静脉-颈浅静脉转流方式的受体术中存活率为57.1%(8/14),而采用门静脉-颈浅静脉转流方式的受体术中存活率为100.0%(10/10),具有显著性差异(P＜0.05).原位肝移植手术时间平均为6.5 h,受体无肝期平均为(33±12)min.供肝热缺血时间平均为2 min,冷缺血时间平均为130 min.结论 采用左侧髂外静脉、门静脉主干-左侧颈浅静脉转流方式的巴马小香猪原位肝移植模型是具有可重复性好,需要的设备少,更加经济,疗效好,是比较理想的猪肝移植模型.可作为肝移植系列研究的平台.     

颅内加压法巴马小型猪脑死亡模型建立过程中血压和心率的变化

目的　观察缓慢间断颅内加压法巴马小型猪脑死亡模型建立过程中血压和心率的变化。方法　巴马小型猪16头,随机分为2组:对照组(C组) ,5头,仅行麻醉维持;脑死亡组(B组) ,11头,应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型。监测实验过程中动物平均动脉压(MAP)和心率(HR)变化。结果　B组中10头(10头/11头)建立脑死亡模型,1头(1头/6头)在开始颅内加压后“心肺死亡”。与C组比较,B组颅内加压后MAP和HR变化显著:(1)MAP和HR随着间断颅内加压呈波浪式上升和下降,总体呈升高趋势;颅内加压过程中MAP (176.91±3 3 .2 9)mmHg(1mmHg =0 .13 3kPa)和HR (182 .71±2 5 .67)次/分,与颅内加压前MAP (117.60±13 .75 )mmHg和HR(94.5 0±9.2 0 )次/分比较,差异有统计学意义(P <0 .0 5 )。(2 )确认脑死亡后,MAP和HR缓慢下降;直到MAP≤60mmHg或收缩压≤90mmHg ,需依赖液体支持来维持血压的稳定。与C组比较,确认脑死亡3h后,B组MAP差异有统计学意义(P <0 .0 5 ) ;确认脑死亡6h后,B组HR差异无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论　颅内加压法建立巴马小型猪脑死亡模型过程中血压和心率呈特征性变化