嗅鞘细胞促进大鼠坐骨神经损伤后神经功能恢复

目的研究嗅鞘细胞（Olfactory ensheathing cells,OECs）移植对大鼠坐骨神经损伤后神经再生恢复的作用。方法取SD大鼠40只随机分成对照生理盐水（SAL）组和实验（OECs）组,予离断坐骨神经后直接予神经外膜缝合修复,在神经缝合处周围充填可吸收的明胶海绵,SAL组和OECs组明胶海绵内分别给予SAL和体外培养纯化的OECs;术后4、12周分别行大体观察,电生理检查和组织学检查。结果术后4、12周,SAL组和OECs组修复神经均有不同程度恢复,OECs组在运动神经传导速度、神经肌肉动作电位幅度和直径数据上有优于SAL组,但统计学上未见明显差异,而在有髓神经纤维数目方面明显优于SAL组（P〈0.05）。结论在本实验条件下,嗅鞘细胞（OECs）对大鼠坐骨神经损伤后的神经功能恢复有部分的促进作用。     

嗅鞘细胞移植预防失神经骨骼肌萎缩

日的：了解嗅鞘细胞移植对失神经后骨骼肌萎缩的作用。方法：大鼠坐骨神经切断后骨骼肌内包埋，进行DMEM和嗅鞘细胞的移植，在术后4、8、16和32周进行诱发电位、肌肉湿重、骨骼肌病理学改变和肌纤维截面积检查，对结果进行统计学分析。结果：嗅鞘细胞移植与对照组相比在肌肉功能和抗肌萎缩方面都有明显优越的作用。结沦：嗅鞘细胞移植对失神经骨骼肌有恢复功能和对抗肌萎缩的作用。     

神经干细胞和嗅鞘细胞联合移植改善脑出血大鼠的运动功能

目的研究神经干细胞(NSCs)和嗅鞘细胞(OECs)联合移植对脑出血大鼠运动功能的改善效果。方法制作Wistar大鼠尾状核脑出血模型,3d后,分别将取材于Wistar大鼠胚胎的NSCs和OECs立体定向注入血肿中(联合移植组),并设NSCs和OECs单独移植组(NSCs组,OECs组)和生理盐水对照组,术前及术后3、7、14、30d进行神经功能缺损评分,同时对移植部位组织进行免疫组化染色观察。结果各组大鼠术前神经功能缺损评分均>2分,术后包括对照组在内的4个组的神经功能缺损评分均呈下降趋势,对照组只是术后30d的评分较第3d明显减低(P<0.05),而NSCs组、OECs组及联合移植组在术后14d、30d时的评分即较术后3d时明显减低(P<0.05),NSCs组及OECs组仅在术后30d时的评分明显低于对照组(P<0.05),而联合移植组在术后14d时的评分即较对照组明显减低(P<0.05)。免疫组化染色显示,NSCs组和联合移植组的神经前体细胞比对照组多;移植的NSCs能存活、迁徙,并分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,联合移植组NSCs分化为神经元的数量明显多于NSCs单纯移植组。结论OECs与NSCs联合移植可促进受损组织修复,改善脑出血大鼠的运动功能。     

嗅鞘细胞移植对坐骨神经切断后神经元的作用

目的研究嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植对周围神经切断后脊髓及神经节内神经元的保护作用。方法SD大鼠55只,随机分为3个组:空白组5只、实验组及对照组各25只。行右侧坐骨神经切断,近端断端行肌肉内包埋,实验组和对照组分别予OECs及细胞培养液,空白组暴露神经后不作任何处理。术后1、2、3、7和14d,分批处死,行组织学观察及TUNEL标记观察神经元的改变。结果空白组术后14d均无阳性变化。大鼠坐骨神经切断后,脊髓及神经节内均有神经元凋亡发生。术后1、2、3d实验组细胞存活率分别为98.4%±6.5%、97.6%±6.5%及95.2%±6.7%,对照组分别为97.8%±6.7%、97.4%±6.4%及94.3%±6.8%,比较差异无统计学意义(P>0.05);7、14d实验组细胞存活率分别为92.4%±8.9%、87.7%±9.4%,较对照组87.4%±8.6%、83.4%±8.5%高,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1、2d实验组及对照组脊髓前角运动神经元无细胞凋亡;3、7、14d实验组脊髓前角运动神经元凋亡指数分别为1.2±0.8、1.4±0.6及4.1±1.3,较对照组2.1±1.1、3.1±1.1、6.1±1.8低,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1、2、3d神经节内细胞无凋亡;7d实验组神经节内的凋亡指数2.10±0.32,较对照组4.40±0.56低,差异有统计学意义(P<0.05);14d实验组神经节内的凋亡指数4.3±1.80与对照组6.70±2.50比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论周围神经损伤后脊髓及神经节内神经元有神经元凋亡发生,OECs移植对神经元凋亡有保护作用。     

嗅鞘细胞移植治疗中枢神经系统疾病1 255例临床分析

目的 总结嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植治疗中枢神经系统疾病的临床价值.方法 2001年11月-2008年1月,收治1 255例中枢神经系统疾病.男928例,女327例;年龄1.2～87岁,平均40岁;病程(4.52±4.67)年.其中晚期脊髓损伤656例,肌萎缩侧索硬化457例,脑性瘫痪68例,多发性硬化20例,脑卒中后遗症11例,共济失调10例,其他疾病33例.患者来自71个国家或地区.均以自愿捐赠的意外流产健康胚胎嗅球培养的OECs植入治疗.结果 1 128例获随访2～8周,平均4周,其中994例神经功能获不同程度改善,近期总改善率为88.12%.围手术期并发症共76例,发生率为6.74%.随访超过1年的脊髓损伤患者共120例,按ASIA标准评价:国外患者组运动功能由(39.82±20.25)分提高至(44.55±18.99)分,轻触觉由(51.56±25.89)分提高至(59.81±27.72)分,痛觉由(50.36±27.44)分提高至(57.09±28.51)分,差异均有统计学意义(P<0.05);国内康复训练良好患者组运动功能由(40.52±20.80)分提高至(46.45±20.35)分,轻触觉由(55.64±26.32)分提高至(68.64±25.89)分,痛觉由(57.05±26.00)分提高至(66.13±24.29)分,差异均有统计学意义(P<0.05);国内康复训练不佳患者组运动功能由(37.03±18.52)分提高至(38.03±18.50)分(P<0.05),轻触觉由(45.88±22.56)分提高至(46.63±23.09)分(P>0.05),痛觉由(45.25±23.68)分提高至(45.28±23.63)分(P>0.05).国外患者组、国内康复训练良好患者组与国内康复训练不佳患者组各项指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05).106例肌萎缩侧索硬化、32例脑性瘫痪、8例多发性硬化、7例共济失调患者分别获随访3～48、3～36、2～20、7～17个月,2例脑卒中后遗症患者分别获随访6、24个月;其中113例(72.9%)神经功能改善或病情稳定恶化趋势得到有效控制.结论 OECs脑内和/或脊髓内移植安全可行,能部分改善晚期脊髓损伤、肌萎缩侧索硬化、脑性瘫痪、脑卒中后遗症等中枢神经系统疾病患者的神经功能和/或延缓病情进行性恶化.     

嗅鞘细胞经低能激光照射后移植对大鼠脊髓损伤神经功能修复的影响

目的 探讨嗅鞘细胞(OECs)经低能激光照射(LPLI)后移植对大鼠脊髓横断损伤后功能修复的影响. 方法 24只SD大鼠T<,12>脊髓完全横断伤模型建模4周后,随机分为OECs移植组、经LPLI的OECs的移植组和空白对照组(DMEM培养液),应用BBB评分法、组织学评价以及Flurogold逆行示踪评价各组脊髓损伤的修复情况. 结果三组大鼠不同移植方式以及评分时间点对移植后下肢功能BBB评分结果的影响差异均有统计学意义(P=0.000),且组间差异均有统计学意义(P=0.000).经LPLI的OECs移植组大鼠头尾侧均可见NGFRp75阳性及GFAP阳性的OECs,OECs移植组则仅可见GFAP阳性的OECs,空白对照组未见NGFRp75阳性及GFAP阳性的OECs.OECs移植组和经LPLI的OECs移植组大鼠头尾侧及瘢痕区均可见Flurogold标记的神经纤维穿行,空白对照组未见Flurogold标记的神经纤维穿行. 结论 OECs及经LPLI的OECs均可促进损伤脊髓的功能恢复,OECs经LPLI后可能更具有促进损伤脊髓功能恢复的作用.     

嗅鞘细胞经低能激光照射后移植对大鼠脊髓损伤神经功能修复的影响

Objective To investigate the effects of transplantation of olfactory ensheathing cells (OECs) irradiated by low power laser irradiation(LPLI) on the repair of transversal spinal cord injury in rats. Methods Twenty-four SD rats were randomized into 3 even groups after the animal models of spinal cord completely transected at T12 had been established for 4 weeks. OECs(group A), OECs ir-radiated by LPLI(group B) and DMEM fluid(empty control group) were transplanted into the caudal zone of the spinal cord in the 3 groups(n=8) respectively. The functional repair was evaluated by Bundle branch block (BBB) score, pathology and Flumgold label, respectively. The BBB scores before and after transplantation were statistically analyzed by one-factor analysis of variance or repeated measurement anal-ysis of variance, respectively (α=0.05). Results The methods of transplantation and the evaluation time had significant effects on the BBB scores in the 3 groups (P=0.000), and the BBB scores were significantly different among the 3 groups (P=0.000). Anti-NGRFp75 and anti-GFAP staining positive OECs were observed in the cephalic and caudal areas in group B, only anti-GFAP staining positive OECs were observed in group A, but nothing was found in the empty control group. The neural fibers labeled by Flurogold passed through the lesion area and extended into the cephalic and caudal areas in groups A and B, but were not present in the empty control group. Conclusion Although transplantation with both OECs and OECs irradiated by LPLI can promote the repair of spinal cord injury in rats, OECs irradiated by LPLI may be more effective.     

嗅鞘细胞移植在大鼠截瘫模型中的应用

目的探讨嗅鞘细胞局部移植治疗脊髓损伤的可行性、安全性及细胞移植数量和时机与疗效的关系。方法应用改良Allen’s法制备大鼠T10脊髓损伤模型,第1部分：随机分4组,移植时间分别设定为手术即时0,1,2,3周,共分为上述4组（随机）,每组共10只,4周后进行CBS评分。第2部分：取40只大鼠,随机分为5组,A组：注细胞数量为5：〈10。个。B组：移植方法同A组。注入细胞数量为4×10^5个。C组：移植方法同A组,注入细胞数量为3×10^5个。D组：移植方法同A组,注入细胞数量为2×10^5个;E组：移植方法同A组,将20μlDMEM／F12培养液注入损伤部位。结果在移植细胞为固定的4×10^5个时,损伤后2周移植大鼠CBS评分（损伤后4周,20．12±5．23,P〈0．05）较其余时间好：而在移植时间均为损伤后两周的情况下。B、C两组大鼠CBS评分（损伤后4周,B：20．34±5．63,C：20．34±5．63,P〉0．05）无明显差别,但较其余各组好（P〈0．05）。结论嗅鞘细胞局部移植治疗脊髓损伤安全有效,移植细胞数量适中和移植时间在2周时脊髓神经功能恢复较好。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的治疗一直是医学界的难题,现今临床上仍无确实有效的治疗方法。目前,SCI修复的研究策略主要有以下几方面:药物治疗、细胞移植治疗、组织移植治疗、基因治疗以及联合治疗等。近年来细胞移植治疗被广泛研究,包括胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)、雪旺氏细胞(Schwann cells,SCs)、嗅鞘     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤进展

脊髓损伤的治疗一直是科学家和临床医生面临的颇具挑战性问题，近百年来没有多大进展!近年来，髓内细胞移植治疗脊髓横断损伤取得了一定疗效，为严重脊髓损伤的治疗提供了新的方法。其中，移植成髓鞘的细胞取得了较好的疗效，如：雪旺氏细胞，少突胶质细胞，嗅鞘细胞。所有的这些细胞中，嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells OECs)使轴     

嗅鞘细胞移植预防失神经骨骼肌萎缩

目的:了解嗅鞘细胞移植对失神经后骨骼肌萎缩的作用.方法:大鼠坐骨神经切断后骨骼肌内包埋,进行DMEM和嗅鞘细胞的移植,在术后4、8、16和32周进行诱发电位、肌肉湿重、骨骼肌病理学改变和肌纤维截面积检查,对结果进行统计学分析.结果:嗅鞘细胞移植与对照组相比在肌肉功能和抗肌萎缩方面都有明显优越的作用.结论:嗅鞘细胞移植对失神经骨骼肌有恢复功能和对抗肌萎缩的作用.     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的新进展

脊髓损伤(SCI)后,局部会发生一系列紧密衔接的病理变化。包括：轴突断裂导致远端的坏死与突触完整性的丢失;局部缺氧;炎症反应;胶质细胞增生;囊肿形成等。神经修复则需要成功阻止胶质瘢痕与囊肿形成和促进轴突萌芽与髓鞘再生。这样,有利于局部乃至长距离神经联系回路的重建,使神经功能恢复成为可能。人们尝试了各种方法,包括：①对抗损伤区域的生长抑制机制。②应用因子促进轴突再生或抑制生长抑制蛋白的作用。③细胞移植。其中细胞移植被认为是治疗SCI最有发展前景的一种方法之一。     

嗅鞘细胞联合VEGF对大鼠损伤脊髓的保护作用

目的探讨嗅球源性嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植联合鞘内重复注射VEGF对损伤脊髓功能恢复的促进作用,以及二者对神经元和神经纤维的协同保护作用。方法取新生2～3 d大鼠嗅球分离纯化培养OECs,于培养9 d用0.25%胰蛋白酶消化后收集细胞。将75只成年雌性Wistar大鼠(体重200～250 g)随机分为5组,A组为假手术组,仅行椎板切除术。B、C、D、E组采用重力打击法制作脊髓损伤模型后,B组术后1 d于脊髓损伤部位分4点共注射DMEM-F12无血清培养基10μL,并每天2次鞘内注射生理盐水10μL,持续1周;C组同上法分别注射DMEM-F12培养基10μL及重组大鼠VEGF165(recombined rat VEGF165,rrVEGF165)25 ng;D组注射含1×105个OECs的DMEM-F12培养基10μL及生理盐水10μL;E组注射含1×105个OECs的DMEM-F12培养基10μL及rrVEGF165 25 ng。术后1 d及术后1～8周每周采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分标准评定大鼠后肢功能恢复情况;术后8周处死实验动物,取材行透射电镜、HE染色观察,并行p75NGF受体(p75 NGF receptor,p75NGFR)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspases-3)、血管性假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)免疫组织化学染色,评价损伤脊髓修复情况。结果术后E组大鼠后肢功能恢复较快,8周时BBB评分显著高于其余各组(P<0.05)。透射电镜和HE染色显示:B组有髓神经纤维和神经元受损严重;C、D组损伤轻于B组;E组受损最轻,断端间残存组织较多,有髓神经纤维髓鞘较完整,神经元呈多角形,有少量空泡化的线粒体。免疫组织化学染色示,B、C、D、E组Caspase-3阳性细胞数显著多于A组(P<0.05),B、D组明显多于C、E组(P<0.05),C、E组间差异无统计学意义(P>0.05)。C、E组vWF阳性血管数多于A、B、D组(P<0.05),但C、E组间差异无统计学意义(P>0.05)。D、E组均可见p75NGFR阳性OECs。结论 OECs移植联合鞘内重复注射VEGF可显著促进大鼠脊髓损伤修复,部分恢复损伤神经功能,对受损神经纤维和神经元的变性有保护作用,且二者有协同作用。     

嗅鞘细胞移植后在脊髓中迁移特性的研究

目的: 观察移植的嗅鞘细胞 (OECs) 在损伤脊髓中的迁移特性。方法: 将OECs用双苯亚甲胺染色, 植入 12只SD大鼠半横断脊髓的头端 (A组 ), 植入 12只大鼠半横断脊髓的尾端 (B组 ), 对照组(C组) 12只植入没有损伤的脊髓内。术后 1、2、4、6周观察脊髓中OECs的分布。结果: A组和B组OECs分别在白质中向头端和尾端迁移, 但越过断端的数量少, C组不迁移。结论: OECs的迁移主要沿着轴突进行, 向头端和尾端迁移的数量和速度都没有明显区别, 但 6周时只有少量OECs能越过损伤区。OECs在没有损伤的脊髓白质中不进行迁移。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的应用前景

介绍嗅鞘细胞在脊髓损伤中的研究进展.嗅鞘细胞是神经系统中具有促进神经轴突再生,引导轴突正确生长的独特细胞,为脊髓损伤的修复带来了希望,具有较好的临床应用前景.目前许多研究将基因工程技术和组织工程技术应用于其移植过程中,取得了一定的成果.     

嗅鞘细胞移植联合跑步训练对改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能的研究

目的 :研究嗅鞘细胞移植联合跑步训练对改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能的效果,同时探索嗅鞘细胞移植联合跑步训练改善大鼠运动功能的可能机制。方法:选用雄性SD大鼠80只,随机分为4组,每组20只,均进行脊髓损伤造模后进行如下分组处理:生理盐水注射组(A组)、嗅鞘细胞移植组(B组)、生理盐水注射联合跑步训练组(C组)和嗅鞘细胞移植联合跑步训练组(D组)。建模3 d后C、D两组进行跑步训练,1周后B、D两组进行嗅鞘细胞移植(每只大鼠注射总量为4μl,细胞浓度为1.0×106/μl),A、C两组给予相应剂量盐水。观察时间为4周,每组每周测量BBB评分,利用免疫组化染色观察Bax、Bcl-2及NF-200的表达,采用Mallory磷钨酸苏木素染色观察神经纤维数量,使用TUNEL染色观察神经元凋亡。结果:(1)BBB评分:嗅鞘细胞联合跑步训练组与其他3组在第4周差异有统计学意义(P0.05)。(2)在Bcl-2蛋白表达上,嗅鞘细胞移植联合跑步训练有交互作用,两者相互促进(P0.05);在Bax蛋白的表达上,嗅鞘细胞移植可以明显降低其表达,与跑步训练交互作用不明显(P0.05);TUNEL染色显示,嗅鞘细胞移植、跑步训练与时间因素三者具有交互作用,显著抑制细胞凋亡(P0.05)。(3)在Mallory磷钨酸苏木素染色及NF-200免疫组化染色上,嗅鞘细胞移植、跑步训练与时间因素三者具有交互作用(P0.05),促进神经再生。结论 :嗅鞘细胞移植联合跑步训练能够显著改善大鼠后肢运动功能,这可能通过以下途径实现:嗅鞘细胞移植与跑步训练能够相互协同,明显上调Bcl-2基因的表达,从而显著抑制神经元凋亡;同时能明显促进神经元轴索再生,提高神经纤维数量,并且这种效果可以随时间的延长更加显著。     

嗅鞘细胞移植对脊髓损伤后神经细胞的保护作用

嗅鞘细胞移植是近年来研究较多的治疗脊髓损伤（SCI）的方法，多数报道认为这与嗅鞘细胞诱导轴束生长有关。为了解嗅鞘细胞移植对SCI后脊髓内神经细胞凋亡的影响，探讨嗅鞘细胞移植治疗SCI的机制，我们进行了实验研究。     

嗅鞘细胞移植调节星形细胞活性促进急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复

[目的]探讨嗅鞘细胞(OECs)对急性脊髓损伤大鼠星形胶质细胞(AST)激活的影响。[方法]乳鼠嗅球制备嗅鞘细胞,制备急性脊髓损伤模型,随机分为3组,空白组:T_(9-11)椎板去除;对照组:T_(10)脊髓损伤,DMEM/F_(12)移植;实验组:T_(10)脊髓损伤,OEC移植。行BBB评分和体感诱发电位检测评价神经功能,Western Blot检测GFAP、CSPG、bFGF表达变化,观察脊髓损伤后星形胶质细胞激活情况及OEC移植对其影响。[结果](1)脊髓损伤后GFAP阳性细胞数目增加,实验组少于对照组,尼氏染色及NF-200阳性细胞数目实验组多于对照组,差异有统计学意义;(2)Western Blot:脊髓损伤后GFAP、CSPG表达增加,bFGF表达下降,OEC干预后,GFAP、CSPG表达较对照组下降。bFGF表达增加;(3)神经功能:脊髓损伤BBB评分及SEP显示治疗组大鼠神经功能得到改善。[结论]嗅鞘细胞移植可抑制星形胶质细胞增殖,调节因子分泌,促进大鼠脊髓损伤恢复。     

嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤的实验研究

[目的]探讨嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤的可行性和疗效.[方法]制备Wistar大鼠脊髓半切模型,随机分4组:局部移植组(A)、静脉移植组(B)、D/F12静脉移植组(C)、空白对照组(D).定期行CBS功能评分及组织学检查,评价脊髓修复情况.[结果]A、B两组功能恢复和组织学改变与对照组有显著差别,A、B两组间无显著差别.[结论]嗅鞘细胞静脉移植可向脊髓损伤部位迁移并修复损伤脊髓,该移植方式即简化了操作,又有较好疗效,具有良好的临床推广和使用价值.     

嗅鞘细胞移植对急性脊髓损伤修复作用的实验研究

目的：研究嗅鞘细胞(OEG)的培养及其对大鼠脊髓挫伤加横断伤的修复作用。方法：用新生Wistar大鼠嗅球(OB)做OEG培养，OEG植入挫伤加横断伤的大鼠脊髓内(A组)，设立注入DMEM培养液(B组)和单纯椎板切除(C组)的对照组。观察术后动物脊髓功能恢复情况。术后3个月取材，了解脊髓再生情况和双笨亚甲胺(Hoechst)标记的OEG在体内存活情况。结果：(1)手术4周后，BBB运动功能得分A组均高于B组。(2)在脊髓损伤区及其周围，神经纤维A组数量多于B组，均少于C组。(3)Hoechst标记的OEG大量存在于A组脊髓损伤段周围。结论：OEG移植具有明显促进脊髓挫伤加横断伤神经纤维再生和功能恢复的作用。