不同时程吗啡依赖戒断大鼠海马CA1区BDNF及PSD-95的表达

目的观察不同时程吗啡依赖大鼠戒断1周后海马CA1区脑源性神经生长因子（BDNF）及突触后致密质95（PSD-95）的表达变化，探讨吗啡依赖戒断对海马CA1区的影响。方法建立不同时程（1周、2周、4周）吗啡依赖大鼠模型并自然戒断1周后，应用RT-PCR方法观察海马CA1区BDNF及PSD-95的表达情况。结果吗啡依赖1周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较生理盐水对照组下降（P〈0．01），吗啡依赖2周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠有所上升（P〈0．05），但仍低于生理盐水对照组（P〈0．01），吗啡依赖4周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠、吗啡依赖2周戒断组大鼠均下降（P〈0．01）。结论BDNF及PSD-95在吗啡依赖大鼠自然戒断1周后的海马CA1区的表达降低，吗啡依赖戒断对海马CA1区损伤明显。     

褪黑素对吗啡戒断小鼠血液中卵泡刺激素、黄体生成素和睾酮的影响

目的　探讨褪黑素 (MT)对吗啡戒断小鼠血液中黄体生成素 (LH)、卵泡刺激素 (FSH)和睾酮(T)的影响。方法　皮下注射定量吗啡建立吗啡依赖小鼠动物模型 ,实验分为对照组、吗啡依赖组、吗啡戒断组和吗啡戒断后MT灌胃组 ,应用放射免疫分析法 (RIA)测定各组小鼠血液中FSH、LH及T的含量 ,观察吗啡戒断小鼠用褪黑素灌胃后其血液中FSH、LH、T的变化。结果　吗啡成瘾组FSH、LH及T值低于对照组 (P <0 .0 1) ;吗啡戒断组FSH、LH及T值高于对照组 (P <0 .0 1) ;吗啡戒断后给MT组FSH、LH值低于戒断组和对照组 (P <0 .0 1) ,而T值低于戒断组 (P <0 .0 1)接近对照组 (P >0 .0 5 )。结论　MT可抑制吗啡戒断小鼠FSH、LH及T的分泌。     

吗啡依赖对小鼠肺表面活性物质分泌的影响

目的：探讨吗啡依赖对小鼠肺表面活性物质分泌的影响。方法：以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型，纳洛酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应强度。采用毛细管上升现象测定吗啡依赖和戒断小鼠离体肺灌洗液表面张力的变化。结果：吗啡依赖组和纳洛酮催促戒断组离体肺灌洗液表面相对张力和表面张力均明显大于对照组（P＜0．01），而且吗啡戒断组离体肺灌洗液表面相对张力和表面张力又明显大于吗啡依赖组（P＜0．01）。结论：吗啡依赖和纳洛酮催促戒断小鼠肺表面活性物质含量下降，尤其是戒断期。这些变化可能是吗啡依赖造成肺功能损害的原因之一。     

吗啡依赖及戒断大鼠相关脑区Bcl-2的表达研究

目的:明确吗啡依赖及戒断两种状态时大鼠相关脑区Bcl-2的表达特征.方法:将18只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和空白对照组,每组6只.采用递增法皮下注射吗啡建立大鼠吗啡依赖模型,纳络酮注射戒断,应用免疫组化和地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术检测三组大鼠不同脑区Bcl-2的表达水平.结果:连续给予吗啡5天及纳络酮戒断后,中脑腹侧被盖区、海马、蓝斑、前额叶皮质脑区Bcl-2及其mRNA较对照组显著降低(P＜0.05),而吗啡戒断组伏隔核脑区内Bcl-2及其mRNA的表达较依赖组显著增加(P＜0.05),结论:吗啡依赖及戒断大鼠Bcl-2蛋白及其mRNA的表达在不同脑区有选择性的改变,可能是吗啡依赖及戒断的分子机制之一.     

吗啡依赖对小鼠海马神经元核酸代谢的影响

目的探讨吗啡依赖对小鼠海马神经元结构和功能损害的分子机制。方法以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,采用吖啶橙荧光探针技术,显示吗啡依赖组、纳洛酮催促戒断组和正常对照组小鼠海马神经元DNA和RNA的变化。结果与对照组相比,吗啡依赖组和纳洛酮催促戒断组海马神经元DNA和RNA荧光反应强度均明显减弱,纳洛酮催促戒断组荧光反应强度更弱。结论吗啡依赖和纳洛酮催促戒断损伤海马神经元核酸代谢,后者的损伤程度更为严重,这些变化可能是吗啡依赖造成脑功能损坏尤其是学习记忆功能下降的原因之一。     

不同时程吗啡依赖戒断大鼠海马CA1区BDNF 及PSD-95的表达

目的观察不同时程吗啡依赖大鼠戒断1周后海马CA1区脑源性神经生长因子(BDNF)及突触后致密质95(PSD-95)的表达变化,探讨吗啡依赖戒断对海马CA1区的影响。方法建立不同时程(1周、2周、4周)吗啡依赖大鼠模型并自然戒断1周后,应用RT-PCR方法观察海马CA1区BDNF及PSD-95的表达情况。结果吗啡依赖1周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较生理盐水对照组下降(P<0.01),吗啡依赖2周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠有所上升(P<0.05),但仍低于生理盐水对照组(P<0.01),吗啡依赖4周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠、吗啡依赖2周戒断组大鼠均下降(P<0.01)。结论BDNF及PSD-95在吗啡依赖大鼠自然戒断1周后的海马CA1区的表达降低,吗啡依赖戒断对海马CA1区损伤明显。     

褪黑素对吗啡戒断小鼠学习记忆及海马CA1区细胞数的影响

目的　观察褪黑素 (melatonin ,MT)对吗啡戒断小鼠学习记忆能力及海马CA1区细胞数的影响并探讨其机制。方法　建立小鼠吗啡依赖模型 ,皮下注射定量吗啡 ,在注射吗啡的同时每天 2次 (早晚 8:0 0 )用不同剂量的MT(2 .5、5、10mg·kg 1)给小鼠灌胃 ,腹腔注射纳络酮 (5mg·kg-1)催瘾 ,观察其戒断症状 ,电迷宫法检测小鼠学习记忆情况 ;行为学检测结束后 ,处死动物 ,取出全脑 ,固定切片 ,进行形态学观察。结果　褪黑素低、中、高剂量组学习记忆能力与吗啡戒断组比有显著差异 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 0 1) ,在该实验剂量范围内有较好的量效关系 ;3组海马CA1区的细胞数与吗啡戒断组比有显著差异 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 0 1)。结论　MT对吗啡戒断致小鼠学习记忆障碍有改善作用 ,这种作用可能与褪黑素保护海马CA1区神经细胞有关。     

吗啡依赖对小鼠海马神经元核酸代谢的影响

目的：探讨吗啡依赖对小鼠海马神经元结构和功能损害的分子机制。方法：以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,采用吖啶橙荧光探讨技术,显示吗啡领带组、纳洛酮催促戒断组和正常对照组小鼠海马神经元DNA和RNA的变化。结果：与对照组相比,吗啡依赖组和纳洛酮催促戒断组海马神经元DNA和RNA荧光反应强度均明显减弱,纳洛酮催促戒断组荧光反应强度更弱。结论：吗啡依赖和纳洛酮催促戒断损伤海马神经元核代谢,后者的损伤程度更为严重,这些变化可能是吗啡依赖造成脑功能损坏尤其是学习记忆功能下降的原因之一。     

吗啡依赖大鼠海马CA1区地西泮结合抑制因子基因表达与位置偏爱的观察

目的研究地西泮结合抑制因子(DBI)在大鼠吗啡精神依赖中所起的作用.方法 30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为研究组20只和生理盐水对照组10只,研究组再分为依赖组及戒断3 d组、戒断6 d组、戒断10 d组.在处死前各个时点进行条件性位置偏爱测评,处死后利用组织原位杂交技术检测DBI mRNA在海马CA1区(HIPCA1)的表达,进行组间比较,并用相关分析检测吗啡依赖大鼠海马CA1区DBI mRNA的表达与CPP之间的相关性.结果 1.吗啡成瘾组海马CA1区DBI mRNA的表达OD值为0.28±0.018,显著高于对照组的0.24±0.018(P <0.05),并在戒断的第3天达到峰值,随后出现下调.2.在戒断第1、3、6、10天,研究组海马CA1区DBI mRNA的表达与CPP之间呈正相关(P <0.01).结论 1.DBI mRNA在慢性吗啡处理大鼠海马CA1区的表达上调,说明DBI参与了慢性吗啡依赖生物学过程.2.海马CA1区DBI mRNA的表达和CPP有密切关系,推测DBI可能在精神依赖中起重要作用.     

原代培养大鼠海马神经元液压冲击后PAFR、COX-2和GluR2基因表达比较研究

【目的】研究海马神经元在中度液压冲击损伤后PAFR、COX-2和2GluR2基因表达时序性变化的相关性。【方法】原代培养大鼠海马神经元,复制改良Scott’s中度液压冲击神经元损伤模型,采用免疫荧光双标技术鉴定神经元纯度,应用RT-PCR技术对PAFRmRNA、COX-2mRNA和GluR2mR．NA的表达进行定量研究。【结果】对照组COX-2mRNA呈低表达,损伤后表达逐渐增高,12h达最高值,损伤后12h组与对照组相比差别有显著性（P〈0．05）;对照组GluR2mRNA呈高表达,损伤后表达逐渐减弱,8h达最低值,损伤后8h、12h组与对照组相比差别有显著性（P〈0．05）;对照组PAFRmRNA呈高表达,损伤后表达逐渐减弱,8h达最低值,损伤后8h、12h组与对照组相比差别有显著性（P〈0．05）。【结论】正常时COX-2mRNA在体外培养神经元中仅有少量表达,损伤后4h表达增加,12h达最高值,钙h时仍高于正常。正常时GluR2mRNA在体外培养神经元有较多表达,损伤后4h表达下降,8h达最低值,48h时仍低于正常。正常时PAFRmRNA在体外培养神经元中有较多表达,损伤后4h表达下降,8h达最低,48h时仍低于正常。PAFRmRNA、COX-2mRNA和GluR2mRNA在体外海马神经元中度液压冲击损伤中表达的时序性变化特点基本一致,三者关系密切,共同参与脑损伤病理生理过程。     

硫化氢对海洛因依赖大鼠一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的探讨硫化氢（H2S）对海洛因依赖大鼠一氧化氮（NO）/一氧化氮合酶（NOS）体系的影响。方法实验大鼠随机分成3组：正常对照组、海洛因依赖组（herion组）、海洛因依赖＋NaHS组（heroin＋NaHS组）。采用比色法测定大鼠血浆及海马组织NO含量,Real time PCR测定海马组织nNOS mRNA表达量。结果血浆及海马NO含量比较,herion组与heroin＋NaHS组均高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）;海马组织nNOS mRNA表达量比较,herion组高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组与对照组无显著差异（〉0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）。结论海洛因依赖可导致大鼠体内NO水平升高,H2S供体NaHS可抑制NO的产生,下调nNOS mRNA表达。     

吗啡戒断大鼠脊髓和脑干以及前脑皮层胶质细胞源性神经营养 …

观察吗啡依赖或戒断时大鼠脊髓,脑干和皮层胶质细胞源性神经营养因子（ｇｉａｌｃｅｌｌ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）以及受体ＧＤＮＦＲ－α和ＧＤＮＦＲ－β基因的表达以及毒蕈碱乙酰胆碱受体（ｍＡｃｈ）、Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗或一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂处理后对它们合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,以β－ａｃｔｉｎｍＲＮＡ作为内标检测ＧＤＮＦ,ＧＤＮ     

吗啡依赖大鼠模型的戒断行为学比较

目的　研究吗啡依赖大鼠模型建立方式和催促戒断给药剂量对戒断强度的影响及其相互关系。方法　对两种常用吗啡依赖大鼠模型在不同剂量纳洛酮催促戒断后,观察戒断体征及体重减轻来评估戒断强度。结果　两组方法均成功建立了大鼠吗啡依赖。5日法（吗啡总剂量380mg.kg－1）模型大鼠在2mg.kg－1和4mg.kg－1纳洛酮催促剂量下戒断强度无显著性差异（P＞0.05）。12日法模型（吗啡总剂量1365mg.kg－1）戒断强度随纳洛酮剂量增加显著上升（P＜0.01）,但仅在4mg.kg－1纳洛酮催促剂量时显著高于5日法模型。结论　应根据不同的实验要求,选择适当的吗啡依赖模型的建立方法,并结合实验条件判定结果。     

吗啡依赖大鼠海马CA1区地西泮结合抑制因子基因表达与位置偏爱的观察

目的研究地西泮结合抑制因子(DBI)在大鼠吗啡精神依赖中所起的作用。方法30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为研究组20只和生理盐水对照组10只,研究组再分为依赖组及戒断3d组、戒断6d组、戒断10d组。在处死前各个时点进行条件性位置偏爱测评,处死后利用组织原位杂交技术检测DBImRNA在海马CA1区(HIPCA1)的表达,进行组间比较,并用相关分析检测吗啡依赖大鼠海马CA1区DBImRNA的表达与CPP之间的相关性。结果1.吗啡成瘾组海马CA1区DBImRNA的表达OD值为0.28±0.018,显著高于对照组的0.24±0.018(P<0.05),并在戒断的第3天达到峰值,随后出现下调。2.在戒断第1、3、6、10天,研究组海马CA1区DBImRNA的表达与CPP之间呈正相关(P<0.01)。结论1.DBImRNA在慢性吗啡处理大鼠海马CA1区的表达上调,说明DBI参与了慢性吗啡依赖生物学过程。2.海马CA1区DBImRNA的表达和CPP有密切关系,推测DBI可能在精神依赖中起重要作用。     

脊髓水平NMDAR-ERK5信号通路在吗啡依赖大鼠戒断行为中的作用

目的 探讨脊髓水平N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR）-细胞外信号调节蛋白激酶5（extracellular signal-regulated kinase 5,ERK5）信号通路在吗啡依赖大鼠戒断行为中的作用.方法 成年雄性SD大鼠96只,体质量200～ 250 g,采用随机数字法,将实验动物随机分为四组（n=24）：对照组（A组）、戒断组（B组）、二甲基亚砜（DMSO）组（C组）、MK801组（D组）.采用剂量递增法皮下注射吗啡以建立大鼠吗啡依赖模型,第6天上午经腹腔注射纳洛酮,催促戒断症状出现,即建立吗啡戒断模型.采用行为药理学方法结合western blot技术,鞘内注射NMDAR抑制剂MK801,观察其对吗啡依赖大鼠戒断行为、戒断所致痛觉过敏及脊髓p-ERK5表达的影响.结果 A组大鼠腹腔注射纳洛酮后并未出现戒断症状及痛觉过敏.与A组相比,B组大鼠戒断症状评分[（45.2±7.3）分]、痛觉过敏评分[（14.4±3.7）分],C组大鼠戒断症状评分[（44.7±6.2）分]、痛觉过敏评分[（13.2±2.7）分],D组大鼠戒断症状评分[（28.3±1.6）分]、痛觉过敏评分[（5.9±11）分]明显增加（P＜0.05）;与C组相比,D组大鼠鞘内注射MK801后戒断症状评分[（28.3±1.6）分]、痛觉过敏评分[（5.9±1.1）分]明显降低（P＜0.05）.与A组相比,B组大鼠脊髓水平p-ERK5（12 848±621）、C组大鼠脊髓水平p-ERK5（12 579±396）表达显著上调（P＜0.05）;与C组大鼠脊髓水平p-ERK5（12 579±396）相比,D组大鼠鞘内注射MK801后脊髓水平p-ERK5（5123±546）表达显著下调（P＜0.05）.结论 脊髓水平NMDAR-ERK5信号通路参与吗啡依赖大鼠戒断症状的表达.     

绞股蓝总苷对血管性痴呆小鼠海马组织神经元损伤及pCREB表达的影响

目的探讨绞股蓝总苷对血管性痴呆模型小鼠海马组织神经元损伤和pCREB表达的影响。方法反复夹闭两侧颈总动脉致缺血再灌注制作小鼠血管性痴呆模型。将雄性C57BL/6J小鼠80只随机分假手术（Sham）组、血管性痴呆模型（VD）组、绞股蓝总苷低、中、高剂量（100、200、400mg/kg）处理组。苏木精伊红染色法示小鼠海马组织CA1区神经元损伤的变化情况;Real-time PCR检测海马组织pCREBmRNA的表达量。结果绞股蓝总苷干预可显著减轻VD小鼠的海马神经元损伤;VD模型组海马pCREBmRNA的表达明显低于假手术组（P〈0.05）;绞股蓝总苷各剂量处理组海马pCREB mRNA的表达水平明显高于VD模型组（P〈0.05）。结论血管性痴呆小鼠海马神经元损伤可被绞股蓝总苷减轻,上调海马神经元pCREB的表达。     

足底注射吗啡可阻止谷氨酸和天然辣椒碱引起的动物对放射热的逃避行为

目的探讨足底注射吗啡对由谷氨酸和天然辣椒碱引起的动物对放射热的逃避行为的影响,从而了解阿片和谷氨酸受体在末梢神经痛觉传递中的相互作用。方法120只健康SD雄性大鼠随机分为12组,每组10只。在大鼠后肢左侧足底分别注射（正常对照组不用药）、生理盐水组（saline组）、谷氨酸组（Glu组）、天然辣椒碱组（Cap组）、吗啡组（Mor组）、盐酸纳洛酮组（NLX组）、谷氨酸牟吗啡组（Glu＋Mor组）、谷氨酸＋盐酸纳洛酮组（Glu＋NLX组）、谷氨酸＋盐酸纳洛酮＋吗啡组（Glu＋NLX＋Mor组）、天然辣椒碱＋吗啡组（Cap＋Mor组）、天然辣椒碱＋盐酸纳洛酮组（Cap＋NLX组）、天然辣椒碱＋盐酸纳洛酮＋吗啡组（Cap＋NLX＋Mor组）;注射药物15min,1、2、3、4、5、6h后分别观察SD雄性大鼠双足温度逃避域值的变化。结果大鼠双足逃避域值的变化,正常对照组左足的温度逃避域值为（11．7±0．29）s,右足的温度逃避域值为（11．5±0．4）s,两者的比为100％;saline组、Mor组、NLX组左右足的温度逃避域值比均为100％,3组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;Cap组最大减少幅度发生在15～180min之间[150nmol为（66．4±3．9）％;300nmol为（70±4．3）％],与saline组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;Glu组最大减少幅度发生在15～120min之间[1．5μmol为（85．9±1.3）％,5±mol为（78．7±2．7）％],与saline组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;Glu＋Mor组逃避域值比最大值为（130±4）％,显著高于G1u组（P〈0．05）;Glu＋NLX＋Mor组最大值为（81±6）％,低于Glu＋Mor组（P〈0．05）;Cap＋Mot最大值为（203±10）％,显著高于Cap组（P〈0．05）;Cap＋NLX＋Mor组最大值为（89±9）％,低于Cap＋Mor组（P〈0．05）。结论谷氨酸受体参与末梢神经痛觉传递,激活阿片受体可以阻止外源性和内     

核酶切割per基因所致的缓解吗啡成瘾作用研究

目的　探讨 per基因与阿片类成瘾的相关性 ,进而寻找治疗阿片成瘾的基因戒毒疗法。方法　设计并合成特异性 per锤头状核酶基因和 per核酶靶 m RNA组分基因 ,并分别重组入体外转录质粒 ,而后将经体外转录反应得到 per核酶 RNA和地高辛标记的 per核酶靶 m RNA组分。将转录产物混合 ,在不同条件下进行体外切割反应后 ,采用地高辛化学发光法检测 per核酶的体外切割效率。小鼠脑室注射直接导入脂质体包裹的重组质粒 pc DNA3.1- per RZ DNA,按剂量递增法建立吗啡依赖动物模型 ,用纳洛酮催瘾 ,观察戒断反应的变化。结果per核酶对 per核酶靶 m RNA组分的体外切割效率达到 6 0 %。重组质粒组小鼠的刻板跳跃、“湿狗”样抖动和打洞次数与空质粒组、生理盐水组相比明显减少 ,但并不抑制小鼠的体重下降。结论　 per核酶具有体外定点切割 per基因 m RNA组分的活性。经小鼠吗啡成瘾模型检测 ,该重组质粒能成功转染活体小鼠脑细胞并在脑组织内稳定表达 per核酶 ,发挥阻断 per基因表达的作用 ,有效地减轻吗啡成瘾的戒断症状。     

针刺对慢性神经痛大鼠海马EphrinBs/EphBs mRNA和EphrinB3蛋白表达的影响

目的:观察长期针刺治疗对慢性神经痛大鼠海马EphrinBs/EphBs mRNA和EphrinB3蛋白表达的影响,探讨针刺镇痛可能的机制。方法:SD雄性大鼠共35只,随机分为假手术组(n=9)、模型组(n=8)、电针组(n=9)、手针组(n=9)。采用慢性坐骨神经结扎性损伤(CCI)模型,电针组和手针组大鼠从造模后第8天开始至第34天分别给予电针、手针干预大鼠"足三里"和"三阴交"穴,隔日1次。所有大鼠均在造模前、造模后第7、14、21、28和35天进行机械性痛阈(MWT)测定;各组大鼠于术后第35天处死取材,采用定量Q-PCR的方法检测海马EphrinBs/EphBs各型mRNA的表达,并采用Western blot方法检测EphrinB3蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组造模后第7天起各时间点MWT值显著降低(P0.01)。与模型组比较,电针组、手针组大鼠造模后第14至35天大鼠MWT值均显著上调(P0.05,P0.01),与假手术组相比,模型组大鼠海马中EphB1、EphB2、EphB3和EphrinB2的mRNA表达水平均显著增加(P0.05,P0.01);与模型组比较,手针组及电针组大鼠EphB1、EphB2、EphB4和EphrinB3 mRNA表达水平显著下降(P0.05,P0.01),电针组EphB6 mRNA的表达显著下调(P0.01);电针组和手针组海马EphrinB3蛋白表达水平明显降低(P0.05)。结论:针刺广泛调节海马EphrinBs/EphBs系统的表达可能是针刺治疗神经病理性疼痛的机制之一。