佛波醇酯和三羟基异黄醇对雌激素受体阳性细胞中三苯氧胺作用的影响

探讨三苯氧胺作用的组织学特异性及乳腺癌内分泌治疗抵抗的可能机制。向MCF7及Hela细胞中转染入含周期素D1基因调控序列的报告基因，用佛波醇酯（TPA）、5，7，4-三羟基异黄醇（Genistein）处理细胞后，检测三苯氧胺对报告基因表达的调控作用。结果发现：MCF7细胞中，TPA可使三苯氧胺产生促进报告基因表达作用。Hela细胞中，Genistein预先作用12h后，三苯氧胺表现出抑制报告基因表达作用。提示雌激素信号传导途径以外的蛋白激酶活性改变可明显影响三苯氧胺的作用，这可能是三苯氧胺作用的组织学特异性及乳腺癌内分泌治疗抵抗的机制之一。     

FKBP51表达降低促进雌激素受体阳性乳腺癌他莫昔芬耐药机制初探

目的:初步探讨FK506结合蛋白51（FKBP51）在雌激素受体阳性（ER+）乳腺癌他莫昔芬耐药中的作用及分子机制。方法:采用ER+人乳腺癌MCF-7细胞建立对他莫昔芬耐药的MCF-7/TAMR细胞,MTT法检测他莫昔芬对MCF-7和MCF-7/TAMR细胞增殖的影响。Western blot检测FKBP51和蛋白激酶B（AKT）信号通路中相关蛋白在MCF-7和MCF-7/TAMR细胞中的表达情况。通过敲低或者过表达FKBP51,观察FKBP51对ER+乳腺癌细胞耐药性及AKT信号通路的影响。在ER+人乳腺癌组织标本中验证FKBP51表达情况。结果:成功建立MCF-7/TAMR细胞株。他莫昔芬对MCF-7和MCF-7/TAMR细胞增殖的抑制率均呈剂量依赖性,且对MCF-7细胞增殖的抑制率高于MCF-7/TAMR细胞（P<0.05）。Western blot结果显示,FKBP51在MCF-7/TAMR细胞中的表达低于MCF-7细胞,并且其表达水平的降低激活AKT信号通路的活性,促进乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药。同时,FKBP51在ER+他莫昔芬耐药人乳腺癌组织中表达水平低于他莫昔芬敏感人乳腺癌组织。结论:FKBP51表达水平降低促进ER+乳腺癌患者对他莫昔芬耐药,可能与激活细胞内AKT信号通路有关。     

乳腺癌雌激素受体mRNA的变异剪切与Tamoxifen耐受

目的 通过检测不同来源乳腺癌雌激素受体mRNA水平的正常剪切和变异剪切，初步探讨人类乳腺癌tamoxifen耐受和雌激素受体mRNA变异剪切的关系。方法 利用RT-PCR技术检测临床正常乳腺、乳腺癌和乳腺癌tamoxifen耐受组织中雌激素受体mRNA的剪切条带，并予以比较，结果 正常乳腺、乳腺癌和乳腺癌tamoxifen耐受组织中均有雌激素受体mRNA的正常剪切和变异剪切，其中1250bp的变异剪切条带最多见，但乳腺癌tamoxifen耐受组织中的变异剪切条带较多，而乳腺癌MCF-7细胞系不存在变异剪切。结论 tamoxifen长期作用于乳腺癌组织可导致雌激素受体mRNA的多种变异剪切并影响雌激素受体的功能。     

The effect of anastrozole on mRNA expression of oestrogen related gene in MCF-7 breast cancer cells

Objective： To look for additional markers of molecular biology response to anastrozole, a new aromatase inhibitor, on the growth and mRNA expression level of MCF-7 cell. Methods： We investigated the effect of anastrzole on growth and gene expression in the human breast cancer cell line MCF-7 and compared with the most widely used antiestrogen tamoxifen. We chose 4 genes to examine regulation of gene expression of estrogen regulated genes ： PR A, PR B, ErbB-2 and cyclin D1. Results： Compared with the tamoxifen, a statistically significant growth inhibition was observed with anastrozole. The PR A, PR B and cyclin D1 mRNA level in anastrozole treated cells was sigificantly below the level in tamoxifen treated cells （P〈0. 05）. They had agonistic effect on ErbB gene （P〉0. 05）. Conclusion： The third generation of aromatase inhibitors anastrozole exert more inhibit function in some expression of estrogen regulated genes than tomoxifen in MCF-7 cell line.     

基于芯片数据的雌激素受体阳性乳腺癌他莫昔芬耐药相关基因分析

目的:从分子水平揭示激素受体阳性乳腺癌他莫昔芬耐药的机制,并寻找潜在的治疗他莫昔芬耐药的靶点。方法:从公共基因芯片表达数据库（GEO）中下载雌激素受体阳性乳腺癌的相关基因芯片数据GSE67916,利用GEO2R在线分析工具筛选他莫昔芬耐药性与敏感性乳腺癌的差异表达基因;并利用DAVID软件对所筛选差异表达基因进行相关功能及通路富集分析;通过STRING、Cytoscape等工具对其进行蛋白间相互作用网络的构建和分析。结果:筛选出438个差异表达基因,其中300个上调表达基因,138个下调表达基因。GO功能分析发现这些差异基因主要参与蛋白结合、细胞对雌激素的反应、免疫应答、细胞质及细胞外基质等分子功能及生物学过程;KEGG通路富集分析显示主要富集在MAPK信号通路和HIF-1信号通路等。STRING、Cytoscape分析显示MAPK1、ESR1、SMARCA4、RANBP2和PRKCA为潜在的关键节点基因,对其进行文献挖掘及分析显示与激素受体阳性乳腺癌他莫昔芬耐药相关。结论:利用生物信息学方法对他莫昔芬耐药与他莫昔芬敏感的雌激素受体阳性乳腺癌的差异表达基因分析,可有效发掘这些差异表达基因的相互作用,为雌激素受体阳性乳腺癌他莫昔芬耐药寻找新的治疗靶点提供新方向。     

BCAR3诱导乳腺癌上皮间质转化及与癌细胞迁移、侵袭的关系

目的:观察他莫昔芬耐药乳腺癌细胞BCAR3的表达与上皮间质转化(EMT)现象和乳腺癌的迁移侵袭的关系。探讨他莫昔芬耐药和乳腺癌细胞EMT现象的相关性。方法:以实时定量PCR和Western blot检测乳腺癌上皮样和间质样细胞系中BCAR3的表达;Western blot检测乳腺癌MCF-7、MCF-BCAR3和BT-549中介导EMT发生的转录因子Twist、上皮性标记基因E-钙黏素(E-cadherin)和间质性标记基因N-钙黏素(N-cadherin)表达的改变情况。Transwell侵袭实验检测乳腺癌MCF-7、MCF-BCAR3和BT-549侵袭转移能力。结果:BCAR3在乳腺癌上皮样细胞系中的表达明显低于间质样细胞系;E-cadherin蛋白在MCF-7细胞中的表达为阳性,Twist和N-cadherin表达为阴性;他莫昔芬耐药的细胞MCF-BCAR3 E-cadherin蛋白表达缺失,而Twist和N-cadherin表达阳性。BCAR3过度表达导致乳腺癌细胞MCF-7迁移和侵袭能力增强。结论:过度表达BCAR3增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力,并对他莫昔芬治疗产生耐药,可能与BCAR3诱导乳腺癌上皮间质转化有关。     

miR-4324与Talin2在乳腺癌中高表达

目的 探讨miR-4324对踝蛋白2(Talin2)调控和乳腺癌细胞的影响及临床意义。方法 利用免疫组化法检验Talin2在乳腺癌组织（BCT）和对应癌旁乳腺组织（PCBT）的表达,结合病理资料分析Talin2与乳腺癌预后及病理特征间的关联;qRT-PCR法测定miR-4324在BCT和PCBT的表达;人乳腺癌细胞株（SKBR-3）体外培养,分为Control对照组（正常培养)及相关转染组（转染相关片段）：miR-4324 mimics组;miR-4324 inhibitor组;miR-4324 NC组;si-Talin2组;miR-4324 inhibitor+si-Talin2组。通过细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭实验,检测SKBR-3的生物学活性改变;通过qRT-PCR及Western-blot实验测定Talin2的表达;利用荧光素酶活性实验验证miR-4324对Talin2靶向表达;利用Transwell回复实验验证miR-4324调控Talin2影响SKBR-3细胞的迁移能力。结果 Talin2在BCT中的表达高于PCBT,并与淋巴结转移、HER-2的高表达有关（P<0.0...     

ESTROGEN RECEPTOR-NEGATIVE BREAST CANCER CELLS TRANSFECTED WITH ESTROGEN RECEPTOR EXHIBIT DECREASED TUMOUR PROGRESSION ANDSENSITIVITY TO GROWTH INHIBITION BY ESTROGEN

Breast cancer containing estrogen receptors (ER) are responsive to antiestrogen treatment and have a better prognosis compared with ER negative tumors. The loss of estrogen receptors appears to be associated with a progression to less-differentiated cells. We transfected the human ER into the ER-negative breast cancer cell line MDA-MB-231 cells. We found that expression of adequate ER is strong associated with the ability of human breast cancer cell growth inhibition and progression. Compared with nontransfected or mock-transfected cells,ER-transfected cells exhibited growth slower, forming smaller colonies in soft agar and growth inhibited by estrogen and tamoxifen. Therefore reactivation or transfection of the estrogen receptor gene can be considered as therapeutic approaches to hormone-lndependent breast cancer.     

褪黑素对乳腺癌的抑制作用

褪黑素对多种肿瘤尤其是乳腺癌有明显抑制作用。在雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性的乳腺癌中, 褪黑素对乳腺癌细胞和移植瘤的抗癌作用主要是通过其受体MT1介导抑制ER mRNA的表达与ER的转录活性而实现; 褪黑素还可调节核受体超家族中其他受体和雌激素代谢酶的转录激活及相关基因的表达,并能抑制肿瘤的有氧代谢 和细胞增殖、生存、转移和耐药的关键通路。在乳腺癌细胞中表现出细胞特异性的细胞生长抑制作用和细胞毒作 用。人类和动物模型的研究均表明褪黑素昼夜节律的紊乱促进了人类乳腺癌生长、代谢和信号转导,进而驱动了乳 腺肿瘤内分泌治疗无效和化疗耐药。     

雌激素受体α在乳腺癌细胞中对Gli1转录活性和表达的影响

目的:在先前研究发现Hedgehog信号通路的下游转录因子Gli1能够抑制乳腺癌细胞中的雌激素信号通路活性的基础上,观察雌激素受体ERα在乳腺癌细胞MCF-7中对转录因子Gli1的转录活性和表达的影响,以探讨两条信号通路之间是否存在着交互作用。方法:应用荧光素酶报告基因转录活性分析的方法,将Gli1的表达质粒和Gli的报告基因质粒pGli-BS-luc以及ERα的表达质粒或者空载体共同瞬时转染到乳腺癌细胞MCF-7中,观察Gli1转录活性的变化。然后分别用实时定量PCR和蛋白质印迹的方法检测乳腺癌细胞中ERα的过表达对Gli1 mRNA和蛋白表达的影响。结果:荧光素酶的活性随着ERα过表达剂量的增加而增加,ERα的质粒量在500 ng/孔时可将荧光素酶的活性升高到对照细胞的3.5倍(P<0.001)。雌激素处理后,荧光素酶的活性无显著变化。过表达ERα后可将Gli1 mRNA的表达水平提高为原来的2倍(P<0.01),也可明显增加Gli1蛋白的表达水平。结论:ERα在MCF-7细胞中的过表达能够明显增强Gli1的转录活性,增加Gli1的表达。这表明乳腺癌细胞中,转录因子ERα和Gli1之间存在着交互作用。     

雌激素对人乳腺癌细胞周期蛋白E表达及血清饥饿时细胞存活力的影响

目的：探讨雌激素对人乳腺癌细胞周期蛋白E表达及在血清饥饿状态下细胞存活力的影响。方法：以MCF-7乳腺癌细胞为模型,采用蛋白印迹分析法检测乳腺癌周期蛋白与表达、显微镜下观察细胞变化、台盼蓝染色及细胞计数法测算细胞存活力。结果：雌激素（10 nmol/L）处理可引起乳腺癌细胞周期蛋白E的过度表达,与对照组比较,增高56.42%（P〈0.05）;在无血清培养条件下,雌激素能减少乳腺癌细胞死亡,增强细胞的存活力,与对照组比较,72 h细胞存活率增高19.86%（P〈0.05）。结论：雌激素能显著上调周期蛋白E的蛋白表达,并增强乳腺癌细胞对血清饥饿的抵抗力。     

TPA和丁酸钠对人乳腺癌细胞株Bcap-37和MCF-7中TGFα基因表达的影响

利用分子杂交技术，研究发现生长调节剂ＴＰＡ（１２—０—ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌ　ｐｈｏｒｂｏｌ—１３－ａｃｅｔａｔｅ，１００ｎＭ，３ｈ）和丁酸钠２ｍＭ，２４ｈ），在胰岛素存在下均可降低人乳腺癌细胞株Ｂｃａｐ－３７和ＭＣＦ—７中ＴＧＦαｍＲＮＡ（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｍＲＮＡ）的表达。提示这二种细胞株具有某些相似的生物学特性，推测Ｂｅａｕ－３７可能也是雌激素依赖性细胞株。     

Effects of Estradiol and Tamoxifen on Proliferation of Human Breast Cancer Cells and Human Endometrial Cells

Estradiolplaysimportantrolesinthegrowthandprogressionofhumanbreastcancer Tamoxifen(TAM ) ,anon steroidalanti estrogenmaterial,isthefirst lineendocrinetherapyforthetreatmentofadvancedhumanbreastcancer Unfortunately ,long termtherapywouldbringtheproblemsofTAMresis tanceorTAMinsensitive ThepurposeofthisstudywastoinvestigatetheinfluenceofTAMontheprolif erationofhumanbreastcancercellsandendometrialcellsanddiscusstherelationshipbetweentheeffectoftamoxifeninvitroandthetypesofcells 1　MATERIAL…     

尿路上皮癌相关1基因通过竞争性抑制miR-18a增强乳腺癌细胞的他莫昔芬治疗耐药

目的：探讨尿路上皮癌相关1（urothelial carcinoma-associated 1,UCA1）基因及miR-18a在雌激素受体（estrogen receptor, ER）阳性的乳腺癌细胞他莫昔芬耐药中的作用和调控机制。方法： 通过反转录实时定量PCR测定乳腺癌细胞中UCA1和miR-18a的表达,用双荧光素酶报告实验验证miR-18a和UCA1 3′UTR区域结合。在他莫昔芬敏感的MCF-7细胞中过表达UCA1或敲减miR-18a,在他莫昔芬耐药的LCC9和BT474细胞中敲减UCA1或过表达miR-18a,CCK-8方法测定细胞活力,软琼脂克隆形成实验测定细胞克隆形成能力,流式细胞术测定细胞周期。结果： 他莫昔芬耐药的LCC2、LCC9和BT474细胞中,UCA1表达量显著高于他莫昔芬敏感的MCF-7细胞。MCF-7细胞在0.1 μmol/L 他莫昔芬处理后,UCA1的表达水平显著升高。UCA1过表达提高了MCF-7细胞在他莫昔芬处理后的活力,而UCA1 siRNA则显著降低了LCC9和BT474细胞在他莫昔芬处理后的活力。在MCF-7细胞中,相对于质粒对照+他莫昔芬组,UCA1+他莫昔芬组的克隆数目多19.0%,克隆平均大小增加29.0%,G1期细胞比例减少7.3%,S期细胞增加6.7%。在BT474细胞中,相对于siRNA对照+他莫昔芬组,si-UCA1+他莫昔芬组的克隆数目少54.0%,克隆平均大小减少42.0%,G1期细胞比例增加9.0%,S期细胞减少6.2%。UCA1有一个miR-18a结合位点,敲减miR-18a提高了MCF-7细胞在他莫昔芬处理后的活力,过表达miR-18a则显著降低了BT474细胞在他莫昔芬处理后的活力。在MCF-7细胞中,相对于对照+他莫昔芬组,miR-18a抑制+他莫昔芬组的克隆数目多15.0%,克隆平均大小增加33.0%,G1期细胞比例减少8.8%,S期细胞增加5.3%。在BT474细胞中,相对于对照+他莫昔芬组,miR-18a过表达+他莫昔芬组的克隆数目少47.0%,克隆平均大小减少25.0%,G1期细胞比例增加13.3%,S期细胞减少7.9%。结论： UCA1可以通过竞争性抑制miR-18a增强乳腺癌细胞的他莫昔芬治疗耐药。     

长链非编码ATB通过抑制miR-200c的表达促进乳腺癌细胞的侵袭转移

目的 探讨长链非编码ATB通过抑制miR-200c的表达促进乳腺癌细胞侵袭转移的作用及其机制.方法 qPCR检测不同乳腺癌细胞株中ATB和miR-200c的表达情况;双荧光素酶报告基因检测ATB与miR-200c的相互作用;MTT细胞增殖实验和Transwell侵袭实验检测沉抑制ATB后乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的变化;MTT细胞增殖实验和Transwell侵袭实验检测抑制ATB后沉默miR-200c对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的逆转作用;Western blot检测抑制ATB后ZEB1和ZNF217蛋白的表达.结果 与其他乳腺癌细胞相比,SKBr-3细胞株ATB表达水平最低,miR-200c的表达水平最高;ATB能与miR-200c的位点特异性结合,调控其表达活性;抑制ATB后可以增强乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力,而沉默miR-200c后可以在一定程度上逆转ATB对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响;抑制ATB后ZEB1和ZNF217蛋白表达水平得到一定的恢复.结论 ATB在乳腺癌发生、发展过程中起重要作用,ATB可以靶向调节miR-200c调控乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力.     

同源盒基因转录反义RNA (HOTAIR)在乳腺癌临床诊疗中的研究进展

同源盒基因转录反义RNA (HOTAIR)是第一个被发现具有反式转录调控作用的长链非编码RNA。作为反义RNA,HOTAIR本身并不编码蛋白质,而是以反式转录调控因子作用于不同染色体上的HOX基因簇,从而在基因组调控和肿瘤的发生、发展中起着重要作用。研究表明,HOTAIR与人类多种肿瘤(如乳腺癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、喉癌等)的发生、发展及转移预后密切相关,高表达HOTAIR能抑制抑癌基因的表达,促进肿瘤复发转移,而下调HOTAIR表达则降低肿瘤细胞的转移侵袭能力。近年来研究逐渐证实,HOTAIR在乳腺癌组织、细胞系及其外周血中存在异常表达,并且这种表达失调有助于阐明乳腺癌的发生机制及耐药机制。临床研究则进一步表明,检测HOTAIR的表达水平不仅有助于提高乳腺癌的诊断敏感性和特异性,而且有助于促进临床上对乳腺癌的病情评估、预后判断、疗效评价和肿瘤复发转移的动态监测。此外,HOTAIR表达可能与乳腺癌不同激素受体类型的生物学行为相关。在乳腺癌治疗方面的探索研究则显示,通过设计HOTAIR促癌通路上的相应抗肿瘤药物或将能够为某些难治性乳腺癌的治疗带来曙光,比如他莫昔芬耐药乳腺癌。本文将对近几年上述研究进展进行综述。      

MiR-4443通过抑制PEBP1的表达促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭

目的 探讨miR-4443对乳腺癌转移的影响。方法 使用高通量测序技术测定检测3例乳腺癌患者原位癌组织及其配对的癌旁组织中miR-4443的表达。使用TCGA数据库验证miR-4443在乳腺癌组织以及正常乳腺组织中的表达水平。以MCF-7细胞（低侵袭性乳腺癌细胞）和MDA-MB-231细胞（高侵袭性乳腺癌细胞）为研究对象,采用RT-qPCR验证miR-4443在这两种细胞株中的表达水平。通过电转染法将miR-4443 mimics（miR-4443模拟物）、mimics-NC（miR-4443模拟物的对照物）或miR-4443inhibitors（miR-4443抑制物）、inhibitors-NC（miR-4443 抑制物的对照物）转染至不同的细胞株,利用RT-qPCR检测miR-4443在转染前后的表达水平,使用流式细胞分析仪分析 miR-4443 表达水平的变化对乳腺癌细胞凋亡的影响,使用划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-4443表达水平的变化对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。使用生物信息学软件预测miR-4443潜在的靶基因,并进一步使用双荧光素酶报告基因系统验证。采用RT-qPCR和Western blot分别检测不同细胞株中PEBP1（重组人磷脂酰乙醇胺结合蛋白1）在mRNA和蛋白水平的表达。结果 高通量测序技术检测发现在乳腺癌组织中miR-4443的表达远高于癌旁组织（P<0.01）。TCGA数据分析显示,与正常乳腺组织想比,miR-4443在乳腺癌组织中的表达升高（P<0.01）。RT-qPCR显示,与MCF-7细胞相比,MDA-MB-231细胞中miR-4443的表达升高（P<0.01）。与转染mimics-NC相比,MCF-7细胞转染miR-4443 mimics后,miR-4443的表达上调（P<0.01）;而转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞,其表达下调（P<0.01）。转染miR-4443 mimics的MCF-7细胞的凋亡率与阴性对照和空白对照差异无统计学意义（P>0.05）,并且转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞的凋亡率与阴性对照和空白对照亦差异无统计学意义（P>0.05）。划痕实验及Transwell侵袭实验显示转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞的迁移及侵袭能力减弱（P<0.01）。相反的,转染miR-4443 mimics的MCF-7细胞迁移及侵袭能力加强（P<0.01）。生物信息学软件预测发现PEBP1可能是miR-4443的潜在靶基因且与转移的相关程度最高。进一步行双荧光素酶报告基因实验,验证PEBP1是miR-4443的靶基因（P<0.01）。RT-qPCR和Western blot显示,MDA-MB-231细胞中PEBP1在mRNA及蛋白中的水平均低于MCF-7细胞（P<0.01）。转染miR-4443 mimics的MCF-7细胞中,PEBP1 在mRNA及蛋白水平均低于对照（P<0.01）;转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞中,PEBP1 在mRNA及蛋白水平均高于对照（P<0.01）。结论 miR-4443通过抑制PEBP1的表达水平促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力,而抑制乳腺癌细胞中miR-4443的表达可能是未来潜在的治疗方法。     

雌、孕激素联合给药逆转miR-145对三阴性乳腺癌的抑癌作用

目的 探讨雌、孕激素在三阴性乳腺癌形成中的作用及相关分子机制.方法 构建MDA-MB-231/miR-145及 MDA-MB-231/miR-SCR(对照组)稳定细胞株,分5组培养细胞,分别为 miR-SCR 组、miR-145 组、miR-145 + E2 组、miR-145 + P4组、miR-145 + E2 + P4组,分别分组给药.利用 CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力,Western blot检测miR-145靶基因胰岛素样生长因子受体-1(IGF-1R)、N-RAS的蛋白表达水平,荧光定量PCR(qRT-PCR)检测IGF-1R、N-RAS下游信号分子血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及转染后 miR-145的表达.结果 CCK-8试剂盒检测结果显示,雌、孕激素联合给药可逆转miR-145对三阴性乳腺癌细胞增殖的抑制作用(P＜0. 05).Western blot法检测结果显示,雌、孕激素联合给药使miR-145靶基因IGF-1R、N-RAS的蛋白表达水平上升.qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,转染后miR-145的表达水平上升(P＜0.05);雌、孕激素联合给药使VEGF的表达水平明显上升(P＜0.01).结论 雌、孕激素联合给药可促进三阴性乳腺癌VEGF的表达和细胞增殖,从而逆转miR-145在三阴性乳腺癌中的抑癌作用.     

IL-6诱导卵巢癌细胞对他莫西芬产生耐药的实验研究

目的:研究IL-6在诱导卵巢癌细胞对他莫西芬（TAM）产生耐药中的作用。方法:选择A2780（不分泌IL-6,但表达其受体,且对TAM敏感）和CAOV3（高表达IL-6及其受体,且对TAM耐药）细胞作为研究模型,应用重组IL-6短期处理或将ss/as IL-6基因稳定转染至A2780（该数据已有文章发表）及CAOV3细胞,通过MTT、RT-PCR、ELISA等观察内源性及外源性IL-6是否影响卵巢癌细胞对TAM的敏感性。结果:经稳定转染得到IL-6中、高抑制表达的2个CAOV3/asIL-6细胞克隆,与空载体转染细胞CAOV3/pcDNA3.1+相比,IL-6分泌水平分别下降了63.82%和75.69%（P<0.05）,其IL-6 mRNA水平与其分泌水平相似;外源性IL-6处理及内源性过表达IL-6均可诱导A2780 细胞对TAM产生耐药,而内源性抑制IL-6表达则可恢复CAOV3细胞对TAM的敏感性。结论:IL-6可诱导卵巢癌细胞对TAM产生耐药,IL-6有可能是卵巢癌抗雌激素治疗耐药中的重要一环,有望成为逆转卵巢癌抗雌激素治疗耐药的重要靶点。     

乳腺癌中DNA甲基化与ER和PR及HER-2表达的关系

DNA甲基化是人类基因组发生的最为常见的一种表观遗传学事件,在乳腺癌发生相关机制中具有重要意义。激素受体阳性和阴性的乳腺癌中DNA甲基化的模式和频率不同。DNA甲基化可能参与了三苯氧胺耐药的发生,也是提示预后的因素之一。研究乳腺癌相关基因异常甲基化与其雌激素受体、孕激素受体和人类表皮生长因子受体2表达的关系,有助于进一步明确乳腺癌的分子分型,指导诊断和临床预后,也有助于阐明内分泌治疗的耐药机制。