DNFB柱前衍生化RP-HPLC法测定氨肽素的氨基酸含量

目的用二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化RP HPLC法测定氨肽素中氨基酸的含量。方法采用二硝基氟苯为衍生试剂进行衍生 ,ODS(KromasilC18,4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm)色谱柱分离 ,以乙腈 0 0 5mol·L-1乙酸钠水溶液为流动相 ,梯度洗脱 ,3 60nm检测 ,在 3 0min内 ,测定氨肽素的氨基酸组成与含量。结果线性范围 (总氨基酸 1 4种 )为 0 1 5～ 0 75 g·L-1;回收率为 94 8%～ 1 0 3 5 % ;RSD为0 2 6%～ 1 47% (n =5 )。结论DNFB柱前衍生化RP HPLC法可有效控制产品质量     

RP-HPLC法测定眼氨肽滴眼液中6种氨基酸的含量

目的采用HPLC法测定眼氨肽滴眼液中谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、甘氨酸(Gly)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)的含量.方法采用Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A乙腈-水(1∶1),流动相B醋酸盐缓冲液;流量为1.0 ml·min-1;柱温40 ℃;检测波长为360 nm;用外标法测定.结果本色谱条件下各种氨基酸能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰.平均回收率Glu为100.4%,RSD为0.33%;Ala为100.4%,RSD为0.20%;Gly为100.7%,RSD为0.25%;Val为100.7%,RSD为0.34%;Leu为100.5%,RSD为0.69%;Lys为100.7%,RSD为0.42%. 结论该方法简便、准确、可靠,适用于眼氨肽滴眼液的定量检测.     

RP-HPLC法测定眼氨肽滴眼液中6种氨基酸的含量

目的 采用HPLC法测定眼氨肽滴眼液中谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、甘氨酸(Gly)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)的含量。方法 采用Zorbax SB-C₁₈色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相A:乙腈-水(1∶1),流动相B:醋酸盐缓冲液;流量为1.0ml·min^-1;柱温40℃;检测波长为360nm;用外标法测定。结果 本色谱条件下各种氨基酸能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰。平均回收率:Glu为100.4%,RSD为0.33%;Ala为100.4%,RSD为0.20%;Gly为100.7%,RSD为0.25%;Val为100.7%,RSD为0.34%;Leu为100.5%,RSD为0.69%;Lys为100.7%,RSD为0.42%。结论 该方法简便、准确、可靠,适用于眼氨肽滴眼液的定量检测。     

柱前衍生化HPLC法测定不同产地胡芦巴中4-羟基异亮氨酸的含量

目的柱前衍生化法测定4-羟基异亮氨酸含量。方法采用异硫氰酸苯酯作为衍生化试剂,色谱柱(Zorbax Eclipse XDBC18,150mm×4.6mm,5μm,Agile);流动相A:乙腈,流动相B:1mL·L~(-1)磷酸水,梯度洗脱(A相∶B相):(0~20min,20∶80;20min,60∶40);流速:1.5mL·min~(-1);进样体积:20μL;检测波长:254nm;柱温:30℃。结果 4-羟基异亮氨酸在质量浓度4.2~20.9μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均回收率为96.8%,RSD为1.7%。结论该方法简便、稳定,结果准确,可作为4-羟基异亮氨酸的含量测定方法。     

柱前衍生UPLC法测定甜瓜籽中13种游离氨基酸的含量

目的测定黑龙江产地甜瓜籽中13种氨基酸的含量。方法采用异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)为衍生试剂进行衍生。色谱柱为Shim-pack XR-ODSⅢC18(75mm×2.0mm,1.6μm);流动相A为乙腈-水(体积比为4∶1),流动相B为30mmol·L-1乙酸钠-乙腈(体积比为97∶3),梯度洗脱;流速为0.3mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为254nm。结果 13种氨基酸线性关系良好(r=0.999 1~0.999 8);平均回收率在97.0%~104.0%内,回收率的RSD均小于3.0%。结论本方法可用于甜瓜籽中游离氨基酸的检测。     

雷丸中16种氨基酸的柱前衍生化RP-HPLC法含量测定

目的:测定雷丸中16种氨基酸的含量。方法:样品以6 mol.L-1盐酸于150℃水解1 h,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析。采用Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温为43℃;流动相A为0.1mol.L-1醋酸钠缓冲液(以醋酸调pH 6.5)-乙腈(93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为254 nm。结果:16种氨基酸浓度在1.16～47.32μg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9998～1.000);平均回收率在93.3%～107.2%之间;RSD均小于3.0%。结论:本方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于雷丸中氨基酸的检测。     

不同方法测定赖氨葡锌颗粒中盐酸赖氨酸含量的比较

目的 建立HPLC直接测定法测定赖氨葡锌颗粒中盐酸赖氨酸的含量,并将测定结果与比色法(茚三酮显色)和柱后衍生法测定结果进行比较,确定3种方法的优劣.方法 采用APS-HYPERSIL NH2色谱柱(25 cm×4.6 mm,5μm);流动相:0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至5.0)-乙腈(40:...     

RP-HPLC法测定18种氨基酸中有关物质

目的:建立 RP-HPLC 测定18种氨基酸中有关物质的方法。方法:采用 Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相 A,乙腈-水(1:1);B,醋酸盐缓冲液(pH 6.1),流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为360 nm,采用校正面积归一化法测定氨基酸中其他氨基酸的含量。结果:本色谱条件下各种氨基酸和杂质均能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰,最低检测限为1ng·mL~(-1)。结论:该方法专属性强,操作方便,结果准确,重现性好。     

氨基酸分析法测定复方骨肽注射液中多肽含量

目的建立复方骨肽注射液中多肽含量的氨基酸分析法。方法氨基酸水解方法:6mol.L-1盐酸110℃水解22h;氨基酸衍生方法:异硫氰酸苯酯(PITC)法;HPLC条件:Agilent Eclipse AAA色谱柱;流动相A:0.1mol.L-1乙酸钠(用冰醋酸调至pH 6.5)-乙腈(97∶3);流动相B:乙腈-水(4∶1);流速:1.0mL.min-1;检测波长:254nm。结果 18种氨基酸的线性、精密度及稳定性良好;除水解样品中的胱氨酸与色氨酸外,其他氨基酸的回收率均达到定量要求。结论方法准确、专属性强,可作为复方骨肽注射液中多肽的定量分析方法。     

HPLC法结合LC-MS法测定硫酸鱼精蛋白含量及肽段鉴定

目的:建立了一种同时测定硫酸鱼精蛋白中主成分纯度和含量的HPLC方法，并采用LC-MS法对肽段氨基酸序列进行鉴定。方法:HPLC方法采用的色谱柱为ThermoHypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相A为0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH至1.8),流动相B为乙腈-0.1 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH至1.8)(6.5∶93.5),梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1,柱温55℃,紫外检测波长为214 nm,进样量100μL。LC-MS法先采用馏分收集方式对各肽段进行提取富集，然后液质联用采用Waters ACQUITY UPLC Peptide BEH C₁₈色谱柱(15 cm×0.21 cm, 1.7μm),流速为0.2 mL·min^-1,流动相A为0.1%甲酸溶液，流动相B为5%乙腈-0.1%甲酸溶液，梯度洗脱；Thermo Q-Exactive Plus, ESI离子源，阳离子检测模式，雾化电压为...     

反相高效液相色谱法测定拉坦前列素滴眼液的含量

目的建立RP-HPLC测定拉坦前列素滴眼液含量的方法。方法采用Chiralcel OD-R色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),以0.025 mol·L-1磷酸盐缓冲液-乙腈(55:45)为流动相,检测波长为200 nm,流速0.5mL·min-1。结果拉坦前列素质量浓度在0.999⁸.991μg·mL-1与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=5);定量限为2.0 ng;平均回收率分别为102.2%、100.7%、101.9%;RSD分别为0.19%、0.31%、0.02%(n=3)。结论该方法灵敏度高,操作简便,可满足本品含量测定。     

HPLC法测定马来酸噻吗洛尔滴眼液中有关物质

目的:建立HPLC法测定马来酸噻吗洛尔滴眼液中的有关物质。方法:色谱柱为Venusil MP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:磷酸酸盐缓冲液(0.05 mol.L-1磷酸二氢钠,每1 000 ml加0.5 ml三乙胺,以磷酸调节pH至3.0)-乙腈(85∶15);检测波长295 nm;流速1.0 ml.min-1,柱温为25℃。结果:马来酸噻吗洛尔与其降解产物分离良好,其最低检出限2.0 ng。结论:所建立的方法稳定性可靠、灵敏、结果准确,可用于马来酸噻吗洛尔滴眼液有关物质检查。     

HPLC法测定地巴唑滴眼液的含量

目的采用高效液相色谱法测定地巴唑滴眼液的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）,流动相为甲醇-0.01mol.L-1磷酸二氢钾溶液（含0.1%三乙胺,磷酸调节pH值至3.5）（55∶45）,流速：1.0mL.min-1,检测波长：277nm,柱温：30℃,进样量：20μL。结果地巴唑浓度在10.3～103.0μg.mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.47%,RSD=0.73%（n=9）。结论本方法简便准确、重复性好。     

HPLC法测定盐酸吗啉胍滴眼液的含量

目的建立HPLC法测定盐酸吗啉胍滴眼液中盐酸吗啉胍的含量。方法采用C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;检测波长为237 nm;进样量为10μl;流动相为甲醇-水-三乙醇胺(100∶400∶1)(冰醋酸调节pH值至4.2);流速为0.8 ml·min-1。结果盐酸吗啉胍在4.03～40.27 mg·L-1范围内线性关系良好,r=0.999 9(n=8)。平均回收率为99.54%,RSD=0.84%。结论该方法灵敏、准确、简便,可作为盐酸吗啉胍滴眼液的质量控制方法。     

RP-HPLC同时测定诺替可滴耳液中3组分的含量

目的：建立诺替可滴耳液中诺氟沙星、替硝唑、氢化可的松的含量测定方法。方法：色谱柱：Kromasil C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相：甲醇一乙腈加．025mol·L^-1磷酸溶液（用三乙胺调至pH至3．0）-注射用水,梯度洗脱。诺氟沙星,替硝唑,氢化可的松分别为288nm,318nm,245nm,流速：0．8ml·min^-1,柱温：室温。结果：诺氟沙星、替硝唑、氢化可的松分别在30．0～3001μg·ml^-1（r=0．9993）、30．0—300μg·ml^-1（r=0．9997）、5．0～50μg·ml^-1（r=0．9995）浓度范围内,峰面积与浓度的线性关系良好;平均回收率分别为99．5％（RSD=0．61％）,99．9％（RSD=0．80％）和99．4％（RSD=0．89％）。结论：所用方法简便快速、结果准确可靠,适用于该复方制剂中3组分的同时测定。     

HPLC法测定玻璃酸钠滴眼液中的葡萄糖酸氯己定含量

目的:研究玻璃酸钠滴眼液中的抑菌剂葡萄糖酸氯己定的含量测定方法。方法:用C18柱,磷酸盐溶液(取磷酸二氢钠0.7 g和高氯酸钠12.2 g,加水适量使溶解,加10%磷酸溶液3 ml,加水至1 000 ml,混匀)-乙腈(60∶40)为流动相;流速1.0ml.min-1;柱温40℃;检测波长:254 nm;进样量:20μl;采用外标法计算。结果:葡萄糖酸氯己定浓度在1.005～3.015μg.ml-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 7);平均回收率为100.8%(RSD=0.7%)。结论:所用方法操作简便、准确可靠,可用于玻璃酸钠滴眼液中葡萄糖酸氯己定的含量测定。     

HPLC-ELSD测定妥布霉素滴眼液的含量

目的建立高效液相色谱一蒸发光散射检测器检测法（HPLC—ELSD）测定妥布霉素滴眼液的含量。方法选用耐酸性的Agilent Zorbax SB-C18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱;流动相为0．2mol·L^-1三氟乙酸溶液,甲醇（92：8）,柱温为35℃,流速为0．8mL·min^-1,进样体积为10μL;ELSD检测器漂移管温度为45℃,雾化气体压力为3．5bar,信号增益（GA跗）为5。结果妥布霉素在55．6～1396．7μg,mL^-1内,其峰面积的对数与浓度的对数呈良好的线性关系（r=0．9997）,检测限和定量限分别为0．15μg·mL^-1和0．45μg·mL^-1。结论方法专属性强,准确可靠,适用于妥布霉素滴眼液产品质量控制。     

HPLC法测定复方牛磺酸滴眼液中苯扎溴铵的含量

目的:建立HPLC法测定复方牛磺酸滴眼液中苯扎溴铵的含量.方法:采用C18柱(4.6mm×150mm,5μm);以乙腈:0.07mol/l醋酸铵溶液(含三乙胺1%,冰醋酸调pH至5.0)(70∶30)为流动相;检测波长为262nm,流速:1.0ml·min-1.结果:复方牛磺酸中苯扎溴铵浓度在39.12μg/ml～78...     

复方门冬维甘滴眼液中苯扎氯铵的测定

目的：建立测定复方门冬维甘滴眼液中苯扎氯铵含量的方法。方法：采用Agilent Zorbax C18色谱柱（150 mm ×4.6 mm,5μm）,以乙腈-5 mmol·L^-1醋酸铵溶液（含1%三乙胺,用冰醋酸调节pH至5.0＆#177;0.5）（65∶35）为流动相,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为214 nm。结果：苯扎氯铵在50.00~150.00μg·ml^-1范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9980;平均回收率为99.1%,RSD为0.6%。结论：该方法简便,迅速,灵敏度高,具有良好的重复性及回收率,可用于复方门冬维甘滴眼液中苯扎氯铵的测定。     

柱前衍生RP-HPLC法测定法半夏中γ-氨基丁酸的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定法半夏中γ-氨基丁酸含量的方法。方法:在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应,生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物;采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm,5μm)、二元梯度洗脱方式测定样品含量,流动相A为0.05mol.L-1醋酸钠溶液(pH6.5),流动相B为乙腈-水(80∶20),检测波长为248nm。结果:γ-氨基丁酸检测浓度在2.056～12.336μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈较好的线性关系;加样回收率为99.0%,RSD=0.92(n=6)。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于法半夏的质量控制。