干扰素诱导跨膜蛋白3在肝癌中的表达及功能研究

目的:探讨干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的表达及意义。方法:收集55例配对的肝癌与癌旁组织标本,分别用免疫组化和Western blot检测组织标本中IFITM3蛋白的表达,并分析IFITM3表达与肝癌患者临床病理因素的关系;用IFITM3干扰片段转染在肝癌Hep G2细胞后,观察肝癌细胞侵袭迁移能力的变化。结果:免疫组化结果显示,IFITM3蛋白在肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(88.2%vs.23.5%,P0.05),低/中分化的肝癌组织中阳性表达率高于高分化的肝癌组织(80.0%vs.8.3%,P0.05);Western blot结果显示,肝癌组织中IFITM3蛋白表达量明显高于癌旁组织(1.2 399 vs.0.9 565,P0.05);IFITM3表达量与门静脉癌栓形成、肿瘤大小、TNM分期有关(均P0.05)。Hep G2细胞转染IFITM3干扰片段后,侵袭、迁移能力均明显减弱。结论:IFITM3在肝癌中表达升高,且其升高程度与肝癌细胞的侵袭、迁移能力密切相关,提示IFITM3在肝癌的恶性进展中起了重要作用。     

MMP-2、MMP-9及TIMP-3在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶2，9（MMP-2，MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子3（TIMP-3）在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法和高清晰度彩色医学图文分析系统对35例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜中MMP-2，MMP-9，TIMP-3的表达进行检测分析。结果MMP-2，MMP-9在膀胱癌中呈高表达，且随分期、分级的增高而增高；TIMP-3在膀胱癌中亦呈高表达，且与分级呈正相关，但与分期不相关。结论MMP-2，MMP-9和TIMP-3参与膀胱癌侵袭转移，在膀胱移行细胞癌中的表达对其预后判断具有参考价值。     

MMP-2、MMP-9在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP2),基质金属蛋白酶9(MMP9)在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法和高清晰度彩色医学图文分析系统对35例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜中MMP-2、MMP-9的表达进行检测分析.结果 MMP-2、MMP-9在膀胱移行细胞癌中呈高表达,且随分期、分级的增高而增高(p＜0.01).结论 MMP-2、MMP-9参与膀胱癌侵袭转移,在膀胱移行细胞癌中的表达对其预后判断具有参考价值.     

RhoC及MMP-9在原发性肝细胞癌中的表达水平与术后复发关系的研究

目的：探讨RhoC及基质金属蛋白酶-9（metrix metalloproteinjses．MMP-9）蛋白在原发性肝细胞肝癌（以下称肝癌）发生、发展、转移及术后复发过程中的作用。方法：采用免疫组织化学染色检测43例肝癌患者术后癌灶和癌周标本及25例肝硬化、23例正常肝脏标本中两种蛋白的表达情况，分析两种蛋白的表达与肝癌病理特点的关系及两者表达的相关性，采用COX比例风险模型进行肝癌术后复发风险多因素分析。结果：RhoC在肝癌组与癌旁组、肝硬化组、正常肝组及癌旁组与正常肝组表达程度差异有统计学意义（P〈0．05）；MMP-9在肝癌组与癌旁组、肝硬化组、正常肝组表达程度差异有统计学意义（P〈0．05）。RhoC与MMP-9在肝癌癌灶中表达存在相关性，且为正相关（rs’=0．495，P〈0．01）。RhoC阴性组的中位生存时间46个月，阳性组中位生存时间为20个月；MMP-9阴性组的中位生存时间49个月，阳性组的中位生存时间25个月；RhoC及MMP-9都为阴性，中位生存时间56个月；RhoC或MMP-9为阴性，中位生存时间39个月；RhoC及MMP-9都为阳性，中位生存时间19个月。COX比例风险分析模型分析认为：肿瘤侵及门静脉（包括微转移灶）、淋巴结转移、RhoC及MMP-9阳性表达分别为肿瘤术后复发的独立危险因素。结论：RhoC蛋白在肝癌的早期开始起作用，且RhoC蛋白及MMP-9蛋白的异常高表达提示肿瘤恶性程度高，术后复发率高，指导临床术后预防性化学治疗有一定指导意义。     

抑癌基因PTEN与MMP-9在肝癌组织中表达与侵袭关系研究

目的探讨抑癌基因PTEN与MMP-9在肝细胞性肝癌(HCC)中表达意义及两者与肝癌侵袭性的关系。方法采用免疫组化(SP法)检测67例HCC及癌旁组织中PTEN与MMP-9表达,并分析两者与肝癌临床病理特征、侵袭性的关系。结果HCC中PTEN表达强度明显弱于癌旁组织,而MMP-9阳性表达强度明显高于癌旁组织,且两者间呈负相关;肝癌组织分化程度、侵袭性与PTEN表达呈负相关,而与MMP-9表达呈正相关。结论PTEN、MMP-9的表达一定程度上反映HCC分化和侵袭性强弱;PTEN缺失可引起MMP-9表达增加,在HCC侵袭、转移中发挥作用。     

RECK、MMP-2和MMP-9基因在结肠癌组织中的表达及其意义

目的：研究回复引导半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元（RECK）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因在结肠癌中的表达情况及其意义。方法：采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测40例结肠癌组织及癌旁组织RECK、MMP-2、MMP-9基因的表达并作相对定量分析。结果：与癌旁组织相比,结肠癌组织中RECK基因表达显著降低（0.46±0.16比0.88±0.08,P〈0.01）,而MMP-2、MMP-9基因表达显著增高（0.41±0.13比0.14±0.13,0.28±0.11比0.12±0.06,P〈0.01）,RECK基因的表达与MMP-2、MMP-9呈显著负相关（r=-0.918,P〈0.01;r=-0.855,P〈0.01）;MMP2、MMP9基因表达水平与淋巴结转移、TNM分期相关;RECK则与肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期相关。结论：结肠癌组织中存在RECK基因的低表达和MMP-2、MMP-9基因的高表达,其机制可能与RECK抑制MMP-2和MMP-9基因的表达有关。联合检测RECK、MMP2、MMP9基因的表达对结肠癌的诊断以及转移和临床分期的判断具有重要的意义。     

血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9在肝细胞癌中的表达及其意义

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肝细胞癌中的表达,并探讨其与肝细胞癌复发、转移的关系.方法采用免疫组化ABC法对50例肝细胞癌组织和30例正常肝组织中VEGF及MMP-9蛋白的表达进行检测.结果VEGF和MMP-9在肝细胞癌组织中的表达阳性率分别为86.0%(43/50)和68.0%(34/50),明显高于正常肝组织中的表达阳性率53.3%(16/30)和33.3%(10/30).差异有统计学意义(P＜0.05);VEGF的表达与MMP-9的表达呈显著正相关(r＝0.98,P＜0.01),二者的协同表达与肝细胞癌的淋巴结转移及包膜形成有关(P＜0.05).结论VEGF和MMP-9在肝细胞癌的生长、侵袭和转移过程中起着重要作用,对预测肝细胞癌复发、转移有一定意义.     

AP-1和MMP-9蛋白在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨转录因子激活蛋白-1(activating protein-1,AP-1)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达特点、相互关系及临床意义.方法 采用免疫组化SABC方法检测比较56例HCC组织和癌旁正常肝组织中AP-1和MMP-9的表达,分析两者与临床病理因素的相关性.结果 HCC组织中AP-1 (c-Jun/c-Fos)和MMP-9阳性表达率均明显高于癌旁正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.05).c-Jun和c-Fos蛋白的表达与患者肝内转移、病理分级、TNM分期明显相关(P<0.05或者P<0.01).MMP-9蛋白表达与患者有无肿瘤包膜、肝内转移、TNM分期明显相关(P<0.05或者P<0.01).HCC组织中AP-1(c-Jun/c-Fos)和MMP-9表达呈正相关(r=0.535,P<0.01).结论 AP-1、MMP-9在HCC的发生发展过程中起着重要的作用;AP-1可能通过上调MMP-9的表达和活性而促进HCC的浸润和转移.     

MMP-9和TIMP-1在膀胱癌中的表达及临床意义

目的：研究基质金属蛋白酶9（MMP-9）和组织型金属基质蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）在膀胱移行细胞癌中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测56例膀胱移行细胞癌标本中MMP-9和TIMP-1的表达,并与肿瘤的临床及病理参数相比较。结果：在56例膀胱移行细胞癌中,MMP-9和TIMP-1的表达率分别为6．1．29％和57．14％,MMP-9表达率随肿瘤的临床分期、病理分级的升高而增加,TIMP—1表达率也呈上升趋势,两者间的表达仔在轻度正相关。结论：MMP-9和TIMP—1的相互作用对于膀胱移行细胞癌的浸润转移发挥了重要作用,MMP-9可能成为早期无创诊断膀胱肿瘤的生物学指标。     

MMP-2和MMP-9在肝内胆管细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)在肝内胆管细胞癌(ICC)组织中的表达及其与ICC患者临床病理特征及预后的关系。方法:收集2011年1月—2014年12月收治的50例ICC患者的癌组织与癌旁组织手术标本,采用免疫组织化学方法及RT-PCR方法检测MMP-2和MMP-9在以上组织中的表达,分析MMP-2和MMP-9表达与ICC患者临床病理参数以及术后生存率的关系。结果:免疫组织化学结果显示,ICC组织中MMP-2和MMP-9蛋白阳性表达率分别为34.0%和32.0%,而两者在癌旁组织中无阳性表达;RT-PCR结果显示,ICC组织中MMP-2和MMP-9的相对表达均明显高于癌旁组织(均P0.05)。MMP-2和MMP-9表达与ICC患者是否存在淋巴结转移和肿瘤分化程度有关(均P0.05),而与患者性别、年龄和肿瘤分期无关(均P0.05);MMP-2和MMP-9阳性患者生存率明显低于各自阴性者,而两者均阳性患者的生存率最低(均P0.05)。结论:ICC组织中MMP-2和MMP-9表达明显上调,且两者的表达与ICC患者恶性临床病理特征及不良预后密切相关。     

跨膜蛋白201在肝细胞癌中的表达及其预后意义与作用机制

背景与目的 研究发现跨膜蛋白（TMEM）家族基因与肿瘤关系密切,TMEM201是TMEM家族的一员,其在肝细胞癌（HCC）中的表达与作用目前尚不清楚。因此,本研究通过生物信息学方法分析TMEM201在HCC中的表达与作用,并预测其在HCC中可能作用的通路,进而探讨机制。方法 在TIMER中分析TMEM201在泛癌中的表达。下载TCGA与GEO数据库中HCC患者数据,并收集106例HCC患者的手术标本与临床信息,分析TMEM201在肝癌组织与癌旁组织中的表达情况,并绘制生存曲线,分析TMEM201表达与HCC患者的预后关系。用单因素与多因素Cox分析判断HCC相关危险因素。根据TCGA与临床数据,分析TMEM201的表达与HCC患者临床病理特征的关系。应用String和GeneMANIA数据库绘制与TMEM201及其相关基因的网络图谱。通过TCGA数据库分析TMEM201与免疫细胞的关系。通过LinkedOmics数据库分析与TMEM201相关的共表达基因,并对共表达基因进行GO功能分析与KEGG通路预测。结果 泛癌分析结果显示,TMEM201在绝大部分肿瘤中呈高表达。多数据库及临床HCC标本免疫组化分析显示,TMEM201在HCC组织中的表达明显高于癌旁组织（均P<0.05）,且TMEM201高表达患者生存时间明显短于低表达患者。单因素与多因素Cox风险回归提示TMEM201的表达是HCC患者总体生存率的独立危险因素。蛋白质互作网络、GeneMANIA数据库分析显示,TMEM201与SUN1、SUN2、LMNB1、EMD等基因存在明显相互作用。免疫浸润分析结果显示,TMEM201表达与树突状细胞、细胞毒性细胞、Th2细胞等明显有关。此外,功能富集分析显示,TMEM201与共表达基因参与了许多HCC的生物学过程、细胞组成、分子功能和作用通路。通路结果及相关性热图提示TMEM201与细胞周期高度相关。结论 TMEM201在HCC组织中高表达,是影响HCC患者预后的独立危险因素,TMEM201在HCC中的作用机制可能与免疫浸润的调节、细胞周期的调控有关。     

DIP在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨死亡诱导蛋白(DIP)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与肝癌临床病理特征之间的关系.方法:运用RT-PCR免疫组化分别检测DIP在40例HCC及其癌旁组织中的表达情况,并分析DIP蛋白表达与HCC临床病理特征之间的相关性;应用RT-PCR检测人正常肝细胞株LO2和HCC细胞Hep3B,HepG2,SMMC-7721中DIP mRNA的表达.结果:DIP mRNA及蛋白在肝癌组织中的表达明显高于其癌旁组织(均P＜0.05);DIP蛋白高表达与较大肿瘤体积、高Edmonson分级和高TNM分期有关(r=0.419,0.414,0.531;均P＜0.05);人HCC细胞株Hep3B,HepG2,SMMC-7721中DIP mRNA的表达均较正常肝细胞株LO2明显增高(均P＜0.05).结论:HCC组织中DIP表达上调,且这种表达上调与HCC的恶性病理特征相关.     

长链非编码RNA MALAT1在肝癌中表达及功能研究

目的:探讨长片段非编码RNA(lnc RNA)MALAT1在肝癌中的表达及其的功能。方法:用q RT-PCR方法检测80例肝癌患者手术切除的癌组织及其癌旁组织,以及不同肝癌细胞系(Hep G2、Hep3B、HCCLM3、Hu H7)与正常肝细胞系(L02)中MALAT1的表达。分别用MTT试验、划痕试验、流式细胞术检测肝癌细胞(Hep G2、Hu H7)转染MALAT1 si RNA后增殖、迁移、凋亡的变化。结果:80例配对标本中,72例(90%)肝癌组织MALAT1表达较其癌旁组织明显上调,MALAT1在不同肝癌细胞系中的表达水平均不同程度明显高于正常肝癌细胞(均P0.05);Hep G2、Hu H7转染MALAT1 si RNA后,增殖率均呈时间依赖性降低、划痕愈合能力均明显减弱(均P0.05),细胞凋亡率分别为17.0%、16.41%,而各自的对照组分别为8.89%、6.56%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:MALAT1在肝癌中的表达上调,且可能与肝癌的恶性生物学行为密切相关,对其作用机制的进一步研究,有望为肝癌的治疗找到新的靶点。     

TUSC3基因在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨TUSC3基因在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法:收集92例行肝切除术且术后病理证实为HCC患者的石蜡组织标本及其临床病理资料,用免疫组化法检测TUSC3在HCC组织及相对应癌旁组织中的表达,分析TUSC3的表达情况与HCC患者临床病理因素的关系;用qRT-PCR及Western blot方法检测20对冷冻HCC及癌旁组织中TUSC3 mRNA与蛋白的表达。结果:92例石蜡组织标本的免疫组化结果显示,56例(60.9%)HCC组织中TUSC3表达下调,癌旁组织中33例(35.9%)TUSC3表达下调,差异有统计学意义(P0.001);TUSC3在HCC组织中的低表达与肿瘤Edmondson分级(P=0.008)、TNM分期(P=0.031)、肿瘤直径有关(P=0.0 2 0)。20对新鲜标本的qRT-PCR与Western blot检测结果显示,肝癌组织中TUSC3的mRNA[(0.99±1.46)vs.(1.96±2.18)]与蛋白[(0.49±0.35)vs.(1.04±0.43)]相对表达量均明显低于癌旁组织(均P0.05)。结论:TUSC3基因在HCC中的表达下调,其低表达可能与HCC的恶性进程密切相关。     

Smad4 siRNA对乳腺癌细胞侵袭力和MMP-9表达的影响

目的:探讨Smad4特异性小分子干扰RNA(siRNA)对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭力及MMP-9表达的影响。方法:构建Smad4 siRNA,将细胞分为空白对照组,Smad4 siRNA转染组,TGF-β处理组,Smad4 siRNA转染+TGF-β处理组。首先用Western blot法检测转染Smad4 siRNA后细胞中Smad4蛋白的表达,以及用荧光素酶报告基因法检测TGF-β处理后细胞Smad结合元件(4xSBE)的活性;然后用Transwell小室模型和Western blot法检测各组细胞的黏附侵袭能力以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达水平。结果:转染Smad4 siRNA后,乳腺癌细胞的Smad4蛋白表达及其TGF-β诱导的4xSBE活性增强均被明显抑制(均P<0.05);与对照组细胞比较,细胞经TGF-β刺激后的侵袭能力及MMP-9的表达量均明显增加(均P<0.05),但预先转染Smad4 siRNA的细胞的上述TGF-β刺激作用被明显抑制(均P<0.05),单纯Smad4 siRNA转染对细胞的侵袭能力及MMP-9的表达量无明显影响。结论:Smad4 siRNA能减弱TGF-β诱导的MDA-MB-231细胞的侵袭能力,该作用可能与其抑制MMP-9的表达有关。     

NRAGE在小肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨NRAGE在小肝细胞癌中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化技术检测160例原发性小肝细胞癌组织及配对癌旁非癌组织中NRAGE的表达,分析NRAGE表达与小肝细胞癌患者临床病理指标及预后的关系。结果:NRAGE在小肝细胞癌组织中阳性表达率明显高于配对癌旁组织(63.13%vs.14.38%,P0.05)。NRAGE表达增高与患者年龄、术前AFP水平、完整包膜和复发密切相关(均P0.05)。单因素分析显示,微血管癌栓、术前AFP水平、子灶、完整包膜、复发、浆膜浸润、巴塞罗那分期、分化程度和NRAGE表达是小肝细胞癌患者的预后影响因素(均P0.05)。多因素分析结果显示,NRAGE表达与微血管癌栓、术前AFP水平、复发、巴塞罗那分期是影响小肝细胞癌患者预后的独立危险因素(均P0.05)。NRAGE高表达小肝细胞癌患者5年生存率明显低于低表达患者(35.63%vs.54.23%,P0.05)。结论:NRAGE在小肝细胞癌组织中表达增高,NRAGE高表达患者预后差。     

IFITM1在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞生物学行为的影响

背景与目的:干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)是一种在淋巴细胞中转导同型黏附信号的膜复合物,在胰腺癌组织中表达量异常,但是其在胰腺癌中的作用机制则仍不清楚,因此,本研究初步探讨IFITM1的表达对胰腺癌细胞生物学行为的影响.方法:用Western blot法检测78例胰腺癌患者(32例转移,46例未转移)的癌组织和...