激素性股骨头坏死模型中凋亡相关因子的表达

背景：近年研究发现,激素性股骨头坏死模型中存在大量凋亡骨细胞,而Caspase-3 及Bcl-2 为调节细胞凋亡的两个重要因子。 目的：观察Bcl-2和Caspase-3在激素性股骨头坏死大鼠模型中的表达及二者的相关性。 方法：选取健康Wistar大鼠60只随机分为2组,实验组臀肌注射泼尼松龙12.5 mg/kg,每周2次,制备激素性股骨头坏死模型;对照组注射等量生理盐水。分别于给药后4,8,12周获取离体大鼠股骨头,采用苏木精-伊红染色观察骨组织形态学改变,免疫组织化学染色观察Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平,并采用直线相关分析Bcl-2和Caspase-3的相关性。 结果与结论：对照组及实验组股骨头外形均完整,软骨面平整、光滑。随着给药时间的延长,实验组大鼠股骨头内骨小梁逐渐变细,脂肪细胞增多,骨陷窝空虚率明显升高。免疫组织化学染色显示：与对照组比较,实验组大鼠股骨头Caspase-3表达明显增高(P < 0.01),且随给药时间的延长呈逐渐增高趋势;而Bcl-2的表达显著低于对照组(P < 0.01)。相关分析结果显示Bcl-2和Caspase-3在各组内的表达不具有相关性。提示激素可提高Caspase-3的表达促进骨细胞凋亡,降低Bcl-2的表达抑制抗凋亡作用,进而导致激素性股骨头坏死的发生和发展。     

Bcl—2在激素性股骨头坏死过程中表达的实验研究

目的探讨激素性股骨头坏死的发病机制。方法24只新西兰大白兔随机分为实验组（冲击注射地塞米松）和对照组。实验8周处死动物，取股骨头作骨细胞组织病理学、超微结构观察，并用TUNEL及免疫组化技术分别检测骨细胞凋亡和Bcl-2表达情况。结果光镜下实验组较对照组股骨头骨小梁变细、稀疏、空骨陷窝明显增多，脂肪细胞增大。电镜下实验组骨细胞体积缩小，核固缩，线粒体及高尔基体肿胀，染色质边聚较多见。实验组凋亡骨细胞增多，Bcl-2表达骨细胞轻度增加。结论激素性股骨头坏死是骨细胞凋亡和坏死共同作用的结果。     

葡萄籽原花青素拮抗激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的作用

文题释义： 原花青素：广泛存在于蔓蓦、松树皮、越桔、绿茶等植物中,特别是葡萄籽中含有大量的原花青素。自从1961年德国科学家KARL首次在葡萄籽中分离出了2种多酚化合物开始,很多学者对各种花青素进行了广泛深入的研究。大量实验数据证实原花青素具有强力的抗氧化、减少细胞酶抑制以及血管保护等活性,体外实验显示葡萄籽原花青素提取物还具有较强的抗细胞凋亡作用。 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)：是一类蛋白酶家族,成员较多,在人类已经鉴定了11种不同的Caspase,根据其蛋白酶序列的同源性可分为3个亚族：Caspase-1亚族包括 Caspase-1、4、5、11;Caspase-2亚族包括Caspase-2、9;Caspase-3亚族包括Caspase-3、6、7、8、10。 背景：激素性股骨头缺血坏死具有复杂的生物学过程,其发病机制至今未明,临床上缺乏行之有效的治疗手段。因此,探明激素性股骨头缺血坏死的病因学机制,仍然是该领域研究的重要内容。 目的：观察葡萄籽原花青素提取物对激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的影响。 方法：日本大耳白兔27只,随机分为3组：模型组静脉注射大肠杆菌内毒素,共2次,每次100 μg/kg,间隔24 h,在第2次注射完成后随即肌肉注射甲基强的松龙20 mg/kg,共注射3次,每次间隔24 h;治疗组进行相同造模,在甲基强的松龙注射同时肌肉注射葡萄籽原花青素提取物200 μg/kg,共注射3次,每次间隔24 h;对照组采用相同剂量注射生理盐水;最后一次注射后第4周空气栓塞法处死动物,取双侧股骨头常规固定脱钙、包埋,切片、苏木精-伊红染色,光镜下计数空缺骨陷窝,Hoechst染色法观察细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法观察股骨头组织Caspase-9、Bcl-2的表达。 结果与结论：①模型组空缺骨陷窝率显著高于对照组(P < 0.01);治疗组空缺骨陷窝率显著低于模型组(P < 0.05),但仍高于对照组(P < 0.01);②对照组股骨头组织凋亡细胞较少;模型组股骨头组织中存在大量凋亡细胞,细胞核呈致密浓染;治疗组中凋亡细胞数有所减少,但仍高于对照组水平;③模型组Caspase-9的平均吸光度显著高于对照组(P < 0.01),治疗组Caspase-9的平均吸光度显著低于模型组(P < 0.01),与对照组相比无显著差异;模型组Bcl-2的平均吸光度值显著低于对照组(P < 0.05),治疗组Bcl-2的平均吸光度显著高于模型组(P < 0.01);④结果表明,骨细胞凋亡参与了激素性股骨头坏死的发生发展,葡萄籽原花青素可能通过促进Bcl-2的表达和抑制Caspase-9的表达来减少骨细胞凋亡的发生。 ORCID: 0000-0002-5431-8717(张志峰) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

激素性兔股骨头坏死骨形态学及细胞凋亡变化

目的探讨糖皮质激素性兔股骨头坏死骨形态学改变及细胞凋亡变化。方法成年健康新西兰大白兔30只,雌雄不限,随机分为两组,每组15只。空白对照组(N组),单纯标准饲料及草料喂养,每天肌注等量生理盐水。制模组(M组),喂养同N组,每天地塞米松肌肉注射2.5mg/kg。于实验前及实验后2、4、6、8、10、12周行双侧髋关节X检查,分批处死后行骨组织形态学检查及细胞凋亡分析。结果与N组比较,M组实验第6周开始X线及光镜表现,股骨头骨质疏松,皮质变薄,骨小梁模糊,软骨陷窝增多,髓内血管可见脂栓或血栓形成。TEM显示,骨细胞皱缩变形,透亮带形成。实验第12周,可见不同程度软骨面塌陷,延续到实验终点。与N组比较,M组实验第6周开始凋亡指数(AI)显著升高。结论激素性兔股骨头坏死从实验第6周开始出现显著的病理性骨形态学改变及细胞凋亡变化,而且逐渐加重。     

酒精性和激素性股骨头坏死的发病与脂质代谢

背景：非创伤性股骨头坏死的发病机制存在各种理论学说,脂质代谢异常是其中一种假说,但是脂质代谢如何参与骨坏死的发病机制仍不清。 目的：通过对激素性和酒精性骨股头坏死患者血脂改变及股骨头置换标本形态计量学观察分析,探讨脂质代谢改变在非创伤性骨坏死中的作用。 方法：选择股骨头坏死住院患者162例,包括酒精性骨股头坏死57例,激素性骨股头坏死63例,创伤性骨股头坏死42例,其国际骨循环分期为(ARCO)Ⅱ~Ⅳ期。患者入院后常规抽空腹静脉血行三酰甘油、低密度脂蛋白等血脂检测。各组选取12例关节置换股骨头标本,股骨头冠状面正中剖开,在负重区和非负重区取材,对骨髓造血面积、脂肪细胞密度、脂肪细胞直径和脂肪细胞面积等行形态计量学观察。 结果与结论：酒精性股骨头坏死患者血三酰甘油升高率显著高于激素性和创伤性股骨头坏死患者(P < 0.05)。酒精性股骨头坏死患者血低密度脂蛋白降低率明显高于激素性和创伤性股骨头坏死(P < 0.05)。与激素性骨坏死患者相比,酒精性股骨头坏死患者脂肪细胞面积和脂肪细胞直径大,但造血面积减小,且差异有显著性意义。推测脂质代谢改变在酒精性股骨头坏死晚期起重要调节作用,而在激素性股骨头坏死晚期作用不明显。     

激素性兔股骨头坏死模型的建立

背景：激素的应用已经成为激素性股骨头缺血坏死发病的首要原因。 目的：拟应用马血清与皮质醇激素联合制备兔股骨头缺血性坏死早期模型,探讨激素性股骨头坏死的发病机制。 方法：新西兰大白兔随机分成3组。激素联合马血清组静脉注射马血清10 mL/kg,3周后再次注射马血清6 mL/kg,再2周后注射甲强龙45 mg/kg,1次/d,连续5 d。激素组注射甲强龙45 mg/kg,1次/d,连续5 d。正常对照组不做任何处理。于激素给予前及激素注射后1,3,7和14 d检测定血胆固醇、三酰甘油水平;于激素注射后第2、4、8周行股骨头MRI和组织病理学检测。 结果与结论：与对照组比较,激素联合马血清组和激素组大白兔血清三酰甘油和总胆固醇分别于激素注射后1 d 和3 d明显高于对照组(P < 0.01)。MRI检测结果显示,激素联合马血清组大白兔股骨头于激素注射后第4周出现坏死信号;激素组第8周出现坏死信号。组织学检测结果显示,激素联合马血清组大白兔于激素注射第4周时股骨头出现骨小梁部分变细、断裂,空骨陷窝增加;第8周骨小梁稀疏、破碎,脂肪细胞增大,空骨陷窝明显增大。激素组病理坏死程度各时段均较激素联合马血清组轻。结果表明,激素联合马血清方法可成功制备股骨头坏死早期模型。     

激素性股骨头缺血性坏死发病机制中的细胞自噬北大核心

背景:临床研究表明骨细胞自噬参与了激素性股骨头坏死的病理过程,并与细胞凋亡关系密切。目的:通过对细胞自噬与细胞凋亡及骨细胞的相互作用关系,总结细胞自噬在激素性股骨头缺血坏死发病机制中的研究进展。方法:由第一作者应用计算机检索应用计算机检索PubMed数据库,embase数据库,CNKI数据库中从1996年10月到2016年10月出版的文献,检索词分别为"steroid;necrosis of the femoral head;cell apoptosis;cell autophagy;osteocyte"和"糖皮质激素;股骨头坏死;骨细胞;细胞凋亡;细胞自噬"。选择激素性股骨头坏死与细胞自噬的文章,排除重复及较陈旧的文献及Meta分析。结果与结论:哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3及骨形成蛋白、叉头框蛋白和转录基因家族和转录因子4等与细胞自噬关系密切;细胞自噬与骨细胞的相互作用与激素剂量密切相关,低剂量激素作用下,细胞自噬表现为保护作用,而随着剂量的增多,出现了大量细胞凋亡现象,同时也出现骨量减少,骨易碎性增加的现象,而细胞自噬与骨量维持、细胞凋亡的具体关系现在仍存在争论,需要进一步通过合理的实验设计去研究。     

激素性股骨头坏死发病始动机制的实验研究

目的探讨激素性股骨头坏死发病的始动机制。方法选择健康成年新西兰大白兔48只,随机分为A组(空白对照组)、B组(造模组)两组,每组24只,B组每只每日1次肌肉注射地塞米松磷酸钠注射液2.5mg/kg造模;A组动物每只每日1次肌肉注射等量生理盐水。两组于第2、4、6、8周分别随机选取6只进行血清、组织学检查。结果1.血清甘油三酯(TG)两组间及2、4、6、8周不同时相间差异显著;血清胆固醇(T-CHOL)两组间及2、4、6、8周不同时相间差异显著。2.病理观察:B组:软组织内第2周出现毛细血管增生,组织水肿,脂肪细胞肥大,滑膜完整,第4周时滑膜坏死,胶原纤维增生,第6周胶原纤维部分坏死,第8周时进一步加重,未见炎性细胞侵润;股骨头内骨髓细胞随着时间延长逐渐减少,空骨陷窝每高倍视野所占百分比随着时间延长逐渐增高,经卡方检验,与A组比较差异显著,第4周出现骨小梁变细,稀疏,结构紊乱,偶见碎片,脂肪细胞增多,第8周时股骨头髓内呈现脂肪替代,部分出现软骨细胞增生。结论1.本实验短期内单纯大剂量使用激素,可以引起股骨头坏死,为进一步探讨其发病机制建立了可靠的动物模型。2.激素性股骨头坏死早期出现的髋关节周围软组织的水肿很有可能是其发病的始动机制。     

细胞凋亡在激素性股骨头坏死中的研究进展

<正>概述糖皮质激素诱导的股骨头坏死(Steroid-inducedfemoralhead necrosis,SIFHN)又称糖皮质激素诱导的股骨头缺血性坏死或股骨头无菌性坏死,激素导致股骨头坏死早在20世纪50年代就已经确立。据推测[1],目前中国股骨头坏死患者有500~750万,每年新增病例约7.5~15万,激素成为我国股骨头坏死发病的首要原因。激素诱导的股骨头坏死严重影响患者的生活质量和劳动能力,给社会带来了巨大的负担,大部分     

早期激素性股骨头坏死过程中细胞色素c的作用

BACKGROUND: Studies have shown that apoptosis is closely related to the pathogenesis of steroid-induced femoral head necrosis. The release of cytochrome c plays a very important role in the process of apoptosis. OBJECTIVE: To observe the effects of cytochrome c on early steroid-induced femoral head necrosis. METHODS: Twenty-four healthy adult male New Zealand rabbits at 5 months old were randomly divided into model group and control group (n=12 per group). Models of early steroid-induced femoral head necrosis were established by intragluteal injection of hormone combined with ear vein injection of horse serum. In the control group, rabbits were given ear vein injection of the same amount of physiological saline. At 2, 4 and 6 weeks after model establishment, histopathological changes of bilateral femoral head were observed by optical microscope, and the ratio of empty lacuna was calculated. Apoptosis of osteocytes was determined by TUNEL assay, and apoptotic index was calculated. Immunohistochemical method was used to determine cytochrome c and to calculate cytochrome c-positive expression rate. RESULTS AND CONCLUSION: (1) The ratio of empty lacuna and apoptotic index: The model of early steroid-induced femoral head necrosis was successfully established in the experiment. Compared with the control group, ratio of empty lacuna, apoptotic index and expression rate of cytochrome c in osteocytes were significantly higher in the model group (P < 0.05 or P < 0.01). (2) Correlation analysis: Ratio of empty lacuna was significantly positively associated with apoptotic index at various time points in the model group (r=0.856, P < 0.01). Expression rate of cytochrome c was significantly positively associated with apoptotic index at various time points in the model group (r=0.824, P < 0.01). (3) These findings confirm that cytochrome c-involved apoptosis of osteocytes may play an important role in steroid-induced femoral head necrosis. Expression rate of cytochrome c in osteocytes is remarkably positively associated with the occurrence of steroid-induced femoral head necrosis in rabbits. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

激素性股骨头坏死过程中低氧诱导因子1α与骨细胞凋亡

背景：激素性股骨头缺血坏死发病机制未明,缺血缺氧是其根本原因,缺氧状态下低氧诱导因子1α参与多种信号通路传导。作者的前期研究发现,骨细胞凋亡与激素性股骨头缺血坏死存在关联。 目的：分析低氧诱导因子1α和骨细胞凋亡是否与激素性股骨头缺血坏死存在关联。 方法：选健康5月龄新西兰白兔20只,随机分为空白对照组和实验组,每组10只。实验组兔给予激素联合内毒素制备激素性股骨头缺血坏死模型。最后一次给药后第4周处死所有实验动物,取双侧后肢股骨头,光镜与电子显微镜下观察形态与超微结构变化,计算各组空缺骨陷窝;应用免疫组织化学技术检测低氧诱导因子1α表达,应用TUNEL法检测骨细胞凋亡。 结果与结论：实验组空缺骨陷窝率高于空白对照组(P < 0.01);实验组骨细胞凋亡高于空白对照组(P < 0.01);实验组低氧诱导因子1α低于空白对照组(P < 0.01);实验组中低氧诱导因子1α表达与细胞凋亡率呈负相关(r=-0.675),实验组中空缺骨陷窝率与细胞凋亡率呈正相关(r=0.793)。结果说明,在激素性股骨头缺血坏死早期,低氧诱导因子1α的低表达与骨细胞凋亡存在相关性,二者参与了激素性股骨头缺血坏死的病理变化过程,骨细胞的死亡方式为凋亡。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

多壁碳纳米管改善激素性股骨头坏死模型兔的股骨头形态

背景：碳纳米管可以促进成骨细胞的增殖和分化,可能对激素性股骨头坏死发挥治疗作用。 目的：观察多壁碳纳米管在激素性股骨头坏死模型建立过程中的作用。方法：36只新西兰大耳白兔随机选出32只等分为治疗组和模型组,剩余4只作为空白组。治疗组兔每天臀肌注射地塞米松2.5 mg/kg,每周向双侧股骨的骨髓腔内各注射0.1 g/L多壁碳纳米管悬浊液1 mL;模型组每天臀肌注射地塞米松2.5 mg/kg,每周向双侧股骨的骨髓腔内各注射生理盐水1 mL,空白组每天臀肌注射生理盐水2 mL,每周向双侧股骨的骨髓腔内各注射生理盐水1 mL。结果与结论：模型组兔股骨头组织中骨小梁开始少量出现变细断裂,骨髓脂肪化十分明显,脂肪细胞肥大,微血管开始出现血栓;而经多壁碳纳米管悬浊液治疗的兔股骨头病理损伤出现明显改善。提示多壁碳纳米管能在一定程度上改善激素性股骨头坏死的病理损伤。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

长链非编码LncRNA-MEG3在激素性股骨头坏死中的表达及相关性研究

目的 探讨长链非编码RNA-MEG3（lncRNA-MEG3）在激素性股骨头坏死中的表达及意义。 方法 应用实时荧光定量PCR方法检测股骨颈骨折患者股骨头组织（30例）和激素性股骨头坏死患者的股骨头及其旁组织（30对）中LncRNA-MEG3的表达并分析其临床意义。 结果 激素性坏死的股骨头骨组织中lncRNA-MEG3的含量最高,其次为其旁组织,股骨颈骨折患者骨组织中含量最低,差异均有统计学意义（P<0.05）;两组间患者的性别比例、年龄（<60岁或≥60岁）比例无显著性差异（P>0.05）;股骨头坏死组,服用不同种类激素（甲泼尼龙、地塞米松）的患者间lncRNA-MEG3含量无显著差别（P>0.05）;在不同ARCO分期（III期或IV期）患者中,IV期lncRNA-MEG3相对表达量明显高于III期（P<0.05）。 结论 长链非编码RNA-MEG3的表达与激素性股骨头坏死关系密切,且它的表达与激素性股骨头坏死的ARCO分期相关。     

普伐他汀与华法林联合应用对兔激素性股骨头坏死的影响

目的: 探讨普伐他汀联合华法林对兔激素性股骨头坏死(SIONF)的影响。方法: 成年健康日本雌性大白兔48只,随机分为3组,对照组(CTR组)12只,激素性股骨头坏死模型组(SIONF组)18只,普伐他汀华法林治疗组(PW组)18只。SIONF组和PW组一次性肌肉注射甲基强的松龙(20 mg·kg^-1)建立兔SIONF模型,CTR组仅肌注等量生理盐水。PW组口服普伐他汀2.5 mg·kg^-1·d^-1,华法林1.5 mg·kg^-1·d^-1。于实验前及实验后2、4、6、8、10、12周随机抽取动物每组2只采血测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血浆凝血原时间(PT)及活化部分凝血活酶时间(APTT)。在后4个时点同时行双侧髋关节X线摄片,随后处死动物,行骨组织形态学及透射电镜检查,检测3组SIONF发生率。结果: 从实验第6周开始到实验终点,与CTR组比较,PW组TC增高(P<0.05),但较SIONF组低(P<0.05),SIONF组TC显著高于CTR组(P<0.01)。3组TG水平有类似TC变化。从实验第2周开始,PW组PT较CTR组及SIONF组明显延长(P<0.01),反之,SIONF组显著缩短(P<0.01)。APTT 3组之间有类似PT的变化。骨组织形态学及影像学显示,与SIONF组比较,PW组股骨头髓内基质脂肪转化率及骨陷窝空虚率显著减少,未见血栓形成,骨细胞核固缩及自溶现象明显减轻。PW组SIONF发生率31%(5/16)显著低于SIONF组63%(10/16)(P<0.05)。结论: 普伐他汀与华法林联合应用能减少兔SIONF发生,这可能与其改善高脂高凝状态有关。     

激素性股骨头坏死模型：不同构建技术分析

背景：良好的股骨头坏死动物模型的建立,有助于研究股骨头坏死的发病机制,为股骨头坏死的预防和治疗提供理论依据。 目的：研究内毒素脂多糖联合地塞米松注射液诱导兔股骨头坏死的实验效果。 方法：新西兰大白兔36只随机分为模型组21只和对照组15只。模型组连续2 d每日经耳缘静脉注射内毒素脂多糖10 μg/kg,再连续3 d,每日肌肉注射地塞米松注射液25 mg/kg;对照组注射同等剂量的生理盐水。 结果与结论：模型组4周后X射线显示兔关节间隙增宽,密度增大,关节软骨下骨密度增高,股骨头变平,骨小梁模糊,软骨下骨与骨松质界限不清,在股骨头内出现斑块状高密度区域,股骨颈变短粗。双能量X射线骨密度测量仪进行股骨头局部骨密度测量,兔股骨头骨密度检测发现模型组股骨头骨密度、骨矿物质含量均显著低于对照组(P < 0.05)。组织学切片见模型组骨细胞陷窝空疏,脂肪细胞增多,部分血管栓塞,其中存活动物的骨坏死率和骨陷窝率均明显高于对照组。证实地塞米松联合脂多糖可有效建立激素性股骨头坏死模型。