急性淋巴细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞水平变化

目的 观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)的变化,探讨其临床意义.方法 收集47例ALL初诊患者组、13例经化疗完全缓解组、9例未缓解组及20例健康对照组抗凝血,采用流式细胞仪检测CD4+ CD25+ Treg的水平.结果 CD4+ CD25+ Treg比例在ALL初...     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型及CD4+CD25+T调节细胞检测

背景：在急性淋巴细胞白血病发病过程中,CD4⁺CD25⁺T调节细胞对机体免疫反应可能起着一定的调节作用。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者的免疫分型及外周血CD4+CD25+T调节细胞的变化情况。 方法：采用流式细胞仪对35例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫分型,并检测外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞的数目,与18名健康对照作比较。 结果与结论：急性B细胞淋巴细胞白血病22例,急性T细胞淋巴细胞白血病13例;22例急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19的阳性表达率最高(100%),而13例急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高(100%)。急性B细胞淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞和急性T细胞淋巴细胞白血病患者差异无显著性意义(P > 0.05),但均高于健康对照(P < 0.05)。表明急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19阳性表达率最高,急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高,同时急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞水平显著增高。     

肾移植患者外周血中的CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞

背景：越来越多的实验在分析免疫耐受标志,以期能够更好地辅助患者进行移植后免疫抑制治疗。 目的：分析肾移植后患者外周血中CD4⁺ CD25⁺ CD127^low/-调节性T细胞在肾移植免疫耐受中的作用。 方法：采集62例肾移植后患者(急性排斥反应组22例,移植稳定组40例)及20例健康对照者的外周抗凝血,经免疫染色,应用流式细胞仪分析CD4⁺ CD25⁺ CD127^low/-调节性T细胞所占CD4⁺ T细胞百分含量,同时采用ELISA方法检测患者血清中白细胞介素2和白细胞介素10的质量浓度。 结果与结论：移植稳定组中CD4⁺ CD25⁺ CD127^low/-调节性T细胞所占CD4⁺ T细胞百分含量显著高于健康对照组和急性反应排斥组(P < 0.01);CD4⁺ CD25⁺ CD127^low/-调节性T细胞百分含量与白细胞介素2呈显著负相关(P < 0.05),与白细胞介素10呈显著正相关(P < 0.01)。提示CD4⁺ CD25⁺ CD127^low/-调节性T细胞在肾移植后免疫耐受的机制中发挥了一定作用。     

探讨梅毒IL-10、CD4+CD25+表达与预后的关系

目的 探讨梅毒患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞、血清白细胞介素-10(IL-10)的表达变化及其临床意义.方法 以本院皮肤性病科收治的67例确诊梅毒患者作为病例组,30名健康人群作为健康组,采用流式细胞仪技术检测两组研究对象外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞、T淋巴细胞亚群水平,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DABS-ELISA)测定两组研究对象血清IL-10的水平差异.结果 病例组患者的CD4+ CD25+ (12.64 ±3.86)％、CD8+ (28.27±1.86)％,显著的高于健康组(P＜0.05);病例组患者的CD4+ (31.25±6.14)％、CD4+/CD8+ (1.11 ±0.36)％,显著低于健康组患者(P＜0.05).病例组患者的IL-10 4.89±0.41pg/mL显著的高于健康组(P＜0.05).血清固定梅毒患者的CD4+CD25+、CD8+显著的高于Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒、潜伏期梅毒患者(P＜0.05),血清固定梅毒患者的CD4+、CD4+/CD8+显著低于Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒、潜伏期梅毒患者(P＜0.05).血清固定型患者的血清IL-10 5.02±0.40pg/mL显著的高于Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒(P＜0.05).结论 梅毒患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞、IL-10水平显著升高,同时血清固定患者的升高最显著,这可能与患者的免疫抑制具有一定的关系.     

晚期肺癌患者血CD4+CD25+调节T细胞水平的变化

为探讨晚期肺癌患者CD 4CD 25去调节T细胞水平的变化及其与其它T细胞亚群和NK细胞的相互关系,对86例肺癌组患者和64名对照组测定和比较CD 4CD 25调节T细胞、T细胞亚群(CD 3、CD 4、CD 8、CD 8CD 28)和NK细胞的水平,探讨其临床意义.CD 4CD 25细胞和T细胞亚群均用流式细胞仪检测.结果表明,晚期肺癌患者血CD 4CD 25细胞明显高于对照组(18.4%±6.2%vs7.1%±0.4%,P<0.01),CD 4细胞、CD 8CD 28细胞和NK细胞明显低于对照组(32.4%±8.7%vs44.9%±8.4%,P<0.01;7.4%±3.5%vs16.5%±2.7%,P<0.01;10.2%±4.1%vs18.5%±7.2%,P<0.01),CD 8细胞明显高于对照组(36.7%±7.5%vs31.8%±5.1%,P<0.01).CD 4CD 25细胞与CD 8CD 28细胞、NK细胞呈明显负相关.表明CD 4CD 25细胞增多是晚期肺癌患者免疫功能紊乱的一个证据.     

急性冠脉综合征患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血中CIM CD25 调节性T细胞(Treg)的异常与疾病的关系.方法 28例ACS患者(ACS组)、26例稳定性心绞痛(SAP)患者(SAP组)和30例正常人(对照组)作为入选对象,均采用流式细胞术检测各组外周血中Treg表达百分比,并检测各组Tred的功能状态,EILSA法检测循环及上清液中细胞因子TNF-α和IL-10浓度,常规检测循环CRP及血脂水平.结果 外周血中Treg表达百分比水平及功能ACS组显著低于SAP组(P＜0.05)和对照组(P＜0.05),CRP、TNF-α的水平ACS组显著高于SAP组(P＜0.05)和对照组(P＜0.05),ACS组IL-10的水平显著低于SAP组(P＜0.05)和对照组(P＜0.05).结论 ACS患者外周血中Treg比例减少及功能的降低可能破坏了外周免疫耐受的平衡,参与炎症反应激活致动脉粥样硬化发生发展这一病理过程.     

CD4+CD25+T细胞与移植免疫耐受

调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分.CD4+CD25+T细胞以持续高表达CD25为特征,可通过细胞间直接接触或分泌TGF-β、IL-10来发挥抑制功能.它广泛参与自身免疫耐受、肿瘤免疫、移植免疫.现就其发育、特性、发挥功能的机制以及在移植免疫耐受中的作用和应用前景作一综述.     

老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达

背景：研究证实,很多恶性肿瘤患者体内CD4⁺CD25⁺调节性T细胞存在高表达,近期也有研究发现,急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞同样表现出高比例表达。 目的：分析老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的表达特点。 方法：纳入初诊急性髓细胞白血病患者92例,将年龄在60岁以下者设为中青年组(n=22),年龄在60岁以上者设为老年观察组(n=70)。在老年观察组中,32例经规范化疗后完全缓解,设为完全缓解组;将余下38例设为老年组,依据FAB分型标准,分为M2 6例、M3 19例、M4 7例、M5 6例。另选择同期体检健康人群42名作为正常对照组。抽取受试者外周静脉血,检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞表达情况。 结果与结论：老年组、完全缓解组CD4⁺CD25^highFOXP3⁺调节性T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组、完全缓解组CD4⁺FOXP3⁺T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞与CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于中青年组(P < 0.01)。老年组不同分型间CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。Pearson相关性检验结果显示,老年初诊急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例呈正相关(r=0.87,P=0.019)。表明老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞比例高于健康人群和中青年急性髓细胞白血病患者。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

成熟树突状细胞和转化生长因子β联合体外扩增小鼠调节性T细胞*☆

背景：目前天然CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞稀少,远远不能满足临床需求。 目的：建立有效的体外培养扩增小鼠CD4+CD25+T细胞体系。 方法：从C57/BL6小鼠骨髓获得的成熟树突状细胞联合不同剂量转化生长因子β,体外扩增同基因或异基因CD4+CD25+T细胞。 结果与结论：经过2周培养,磁珠分选后的CD4+CD25+T细胞的扩增倍数为自然调节性T细胞的(17.3±10.6)倍, 0.2,2 μg/L质量浓度对T细胞的扩增能力最强;经扩增后的T双阳性率为(85.38±1.82)%,CD127阳性率(78.86±0.91)%;体外扩增的调节性T细胞高表达FOXP3为天然调节性T细胞的1.5倍;调节性T细胞体外抑制实验结果表明：调节性T细胞对自体或异体CD4+T细胞抑制能力随着效靶比浓度的降低而降低,体外扩增的CD4+CD25+T细胞对自体CD4+T细胞抑制率(60.1±0.71)%,对异体CD4+T抑制率为(35.5±0.57)%(P < 0.05)。提示在体外成功扩增了CD4+CD25+T细胞,并且具有免疫抑制功能,此方法扩增细胞数量多,细胞纯度有很大提高,方法简便。关键词：成熟树突状细胞;CD4+CD25+T细胞;转化生长因子β;体外扩增;小鼠 缩略语注释：TGF-β: Transforming growth factor beta,转化生长因子β doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.015     

大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞的分离培养及其功能分析

目的:研究大鼠CD4 CD25 T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析。方法:无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞。用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4 CD25 T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增。采用混合淋巴细胞反应研究CD4 CD25 Tr细胞对CD4 CD25-T细胞的免疫抑制作用。用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异。结果:MACS分离的CD4 CD25 T细胞的纯度达86%~93%。该细胞与CD4 CD25-T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因。体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10。结论:采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4 CD25 T调节细胞,该细胞对CD4 CD25-T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因。     

CD4+CD25+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究

目的初步探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatory T cells,CD4 CD25 Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4 CD25 T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4 CD25 T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4 CD25 T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4 CD25 T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4 CD25 T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4 CD25 Foxp3 Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4 CD25 T细胞转化为CD4 CD25 Treg,提示CD4 CD25 Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。     

慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化和意义

目的 观察慢性乙型肝炎感染者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)的频率,特征性表型及与临床指标的相关性.方法 采集44例慢性乙型肝炎,29例健康人外周血,多色流式分析Treg的频率,CD4 CD25 Foxp3 调节性T细胞的频率.所有病例均经酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量及肝功能的检测.结果 慢性乙型肝炎组Treg的频率(5.02%±2.07%)显著高于正常对照组(3.35%±1.51%,P＜0.05);Foxp3在Treg上特异性表达,慢性乙型肝炎组CD4 CD25 Foxp3 调节性T细胞的频率(2.05%±1.03%)显著高于正常对照组(1.30%±0.68%,P＜0.05);慢性乙型肝炎组Treg的频率与病毒载量呈正相关.结论 Treg在慢性乙型肝炎感染者中明显增高,并与病毒载量相关,提示Treg在慢性乙型肝炎中担负着重要的免疫调节作用,可能是造成乙肝病毒感染慢性化的重要因素.     

急性髓系白血病患者外周血CD4+CD25highFOXP3+调节性T细胞变化及临床意义

目的:观察急性髓系白血病(Acute myelogenous leukemia,AML)患者外周血中调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg细胞)的变化,探讨其在AML发病中的作用及临床意义.方法:应用流式细胞术检测31例初诊AML患者(初诊组)、23例经化疗取得完全缓解患者(CR组)及20例健康人群(对照组)外周血CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞、CD4+FOXP3+ T细胞占CD4+细胞的比例,同时还分析了外周血CD4+/CD8+比值、NK细胞及血清乳酸脱清酶(LDH)水平.结果:与对照组相比较,AML患者初诊组及CR组外周血CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞和CD4+FOXP3+ T细胞均升高(P＜0.01).与初诊组相比较,CR组CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞无显著降低(P＞0.05),CD4+FOXP3+T细胞明显下降(P＜0.01).CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞的升降与CD4+FOXP3+T细胞呈正相关(r=0.86;P＜0.01).CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞及CD4+FOXP3+ T细胞比例与CD4+/CD8+比值呈负相关(r分别为-0.54、-0.52;P＜0.01)、与NK细胞比例呈负相关(r分别为-0.41、-0.43;P＜0.05),而与LDH水平呈正相关(r分别为0.51、0.57;P＜0.05).结论:CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞增多可能是AML患者免疫功能受抑的重要原因之一,其变化对于AML的预后判断有一定的意义.CD4+FOXP3+ T细胞的作用类似于CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞,其在AML疗效评价方面可能更有价值.     

恶性肿瘤患者CD4+CD25+/CD4+CD25high调节性T细胞的研究

目的：探讨恶性肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Regulatory T cell，Treg）水平的特点及其临床意义。方法：采用流式细胞术检测Treg水平，并进行分层分析。结果：62例恶性肿瘤患者外周血中CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high Treg占T细胞的百分比分别为19.61%±8.17%和4.20%±1.90%，高于正常对照组（分别为P〈0.05和P〈0.001），它们与NK细胞呈负相关（r分别为-0.2361和-0.306）。随疾病进展，CD4^＋ CD25^＋Treg水平升高，肿瘤进展期（IV期）与前3期比较有极显著差异（P〈0.001）。CD4^＋CD25^high Treg占CD4＋T细胞的百分比率逐渐升高，中期（Ⅲ期）患者与早期患者、正常对照组比较有极显著差异（P〈0.001）；晚期患者与中期患者比较有极显著差异（P〈0.001）。结论：恶性肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high Treg水平的升高，与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关。     

Expansion of regulatory T cells from umbilical cord blood and adult peripheral blood CD4+CD25+ T cells

CD4⁺CD25⁺ regulatory T cells (Treg), if properly expanded from umbilical cord blood (UCB), may provide a promising immunotherapeutic tool. Our previous data demonstrated that UCB CD4⁺CD25⁺ T cells with 4-day stimulation have comparable phenotypes and suppressive function to that of adult peripheral blood (APB) CD4⁺CD25⁺ T cells. We further examined whether 2-week culture would achieve higher expansion levels of Tregs. UCB CD4⁺CD25⁺ T cells and their APB counterparts were stimulated with anti-CD3/anti-CD28 in the presence of IL-2 or IL-15 for 2 weeks. The cell proliferation and forkhead box P3 (FoxP3) expression were examined. The function of the expanded cells was then investigated by suppressive assay. IL-21 was applied to study whether it counteracts the function of UCB and APB CD4⁺CD25⁺ T cells. The results indicate that UCB CD4⁺CD25⁺ T cells expanded much better than their APB counterparts. IL-2 was superior to expand UCB and APB Tregs for 2 weeks than IL-15. FoxP3 expression which peaked on Day 10–14 was comparable. Most importantly, expanded UCB Tregs showed greater suppressive function in allogeneic mixed lymphocyte reaction. The addition of IL-21, however, counteracted the suppressive function of expanded UCB and APB Tregs. The results support using UCB as a source of Treg cells.