高效液相色谱法测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素含量

目的采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量,为更好的评价不同产地白芷的质量提供依据。方法色谱柱:L ichrospher-C18(250×4.6 mm,5μm),柱温:30℃,流动相:甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL.m in-1。结果欧前胡素、异欧前胡素进样量分别在0.54~5.40μg、0.244~2.44μg范围内,呈现良好的线性关系。欧前胡素平均回收率99.020%,相对标准偏差(RSD)3.318%;异欧前胡素平均回收率97.528%,RSD 2.904%。欧前胡素平均含量为1.465 mg.g-1;异欧前胡素平均含量为0.575 mg.g-1。结论该测定方法简单,快速,重现性好,可作为该药材质量的控制方法。     

白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量测定

目的:建立白芷中欧前胡素和异欧前胡素的高效液相色谱含量测定方法。方法:色谱柱:Venusil XBP C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(60∶40)为流动相,体积流量1.0 mL.min-1,柱温:30℃,检测波长304 nm。结果:欧前胡素和异欧前胡素分别在0.15～1.80μg和0.10～1.20μg范围内呈良好的线性关系(r分别为0.999 5、0.999 6);平均回收率分别为100.2%、99.4%,RSD%分别为1.57、1.21(n=5)。结论:该方法简便、可靠、重现性好,可用于测定药材白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量。     

HPLC法测定元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素

元胡止痛片是由元胡和白芷两味药材组成，具有理气、活血、止痛之功效，用于治疗气滞血瘀的胃痛，胁痛，头痛和痛经等。白芷中香豆素成分欧前胡素和异欧前胡素具有抗菌、抗肿瘤等多种药理作用，与药品质量有密切的关系。目前测定欧前胡素和异欧前胡素的方法多采用薄层色谱法和高效液相色谱法嘲，且测定的成分单一。本实验采用HPLC法同时测定欧前胡素和异欧前胡素两种指标成分，以制定制剂的质量控制标准。     

HPLC法测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度

目的 建立一种同时测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度的方法.方法 采用迪马Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为:甲醇∶水=70∶30(v/v),流速为1.0 mL·min-1,紫外检测波长为320 nm,米非司酮为内标.取大鼠血样 90 μL 进行血浆样品的处理,测定大鼠血浆中蛇床子素和欧前胡素的色谱行为、标准曲线、提取回收率、精密度和准确度、稳定性等.结果 蛇床子素、欧前胡素在大鼠血浆中质量浓度测定方法 的线性范围分别为10.94～700.00 μg·L-1 和15.63～1 000.00 μg·L-1,线性关系均良好(r=0.999 8、0.999 9,均P＜0.05).大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素最低可定量的质量浓度分别为10.94 、15.63 μg·L-1 (以s/n＞4计).大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素低、中、高质量浓度的提取回收率分别为98.96%、95.30%、94.88% 和98.23%、98.94%、97.99%,大鼠血浆蛇床子素和欧前胡素低、中、高质量浓度的RSD均＜15%.结论 建立HPLC法具有检测简便、灵敏度高等优点,可快速、可靠地检测大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度.     

欧前胡素体外诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡

目的 探讨欧前胡素对人乳腺癌细胞的抑制作用及机制。方法 将人乳腺癌细胞系MCF-7用浓度为10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,80μmol/L,160μmol/L的欧前胡素处理48小时,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测欧前胡素处理后MCF-7的细胞活力;通过流式细胞术和western blot方法检测欧前胡素对MCF-7细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1的表达;在MCF-7细胞中转染外源性Mcl-1后再用欧前胡素处理,检测欧前胡素对MCF-7细胞活力和凋亡程度的影响。结果 10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,80μmol/L,160μmol/L欧前胡素细胞活力抑制率分别为(3.4±1.2)%,(9.5±2.4)%,(24.5±4.4)%,(48.7±5.9)%,(74.7±6.4)%。20μmol/L,40μmol/L,80μmol/L欧前胡素凋亡诱导率分别为(4.9±0.9)%,(12.9±1.7)%,(22.1±3.1)%。MCF-7细胞用欧前胡素处理48小时后,细胞的Mcl-1表达水平显著下降。当用pc DNA3.1-Mcl-1质粒转染MCF-7细胞后,80μmol/L欧前胡素对MCF-7细胞的凋亡诱导率(8.8±1.5)%相比于用空pc DNA3.1质粒转染组凋亡诱导率(24.2±3.3)%显著下降(P<0.05)。结论 欧前胡素具有体外抗乳腺癌的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白的表达,从而诱导肿瘤细胞发生凋亡。     

欧前胡素通过下调Mcl-1蛋白的表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡

目的：探讨欧前胡素对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法：将人肝癌细胞系HepG2用欧前胡素治疗,MTT法检测欧前胡素治疗后HepG2细胞的增殖抑制情况;通过流式细胞术和western blot检测欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)的表达;在HepG2细胞中转染pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体后再用欧前胡素治疗,检测欧前胡素对HepG2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果：欧前胡素呈剂量和时间依赖性显著抑制HepG2细胞的增殖;欧前胡素能显著诱导HepG2细胞的凋亡和PARP的切割;欧前胡素治疗后,HepG2细胞的Mcl-1表达水平显著下降,当用pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体转染HepG2细胞后, 欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导活性显著下降。结论： 欧前胡素具有体外抗肝肿瘤的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白的表达从而诱导细胞凋亡。     

白芷干物质积累和异欧前胡素的动态研究

目的明确白芷不同生长时期干物质积累及根中异欧前胡素质量分数和积累量变化。方法采用称重法测定白芷干物质,高效液相色谱法测定根中异欧前胡素。结果白芷地上和地下部分干物质积累呈“S”型曲线,地上部分干物质在7月底至10月初逐渐增加,10月中旬达到高峰,随后降低;地下部分干物质前期增加较慢,8月底至9月底为快速增长期,随后增加稍有减慢。根中异欧前胡素以7月底8月初最高,为0.2453%,10月底最低,为0.1177%。异欧前胡素积累量在10月底收获时达到最大。结论以白芷产量和异欧前胡素积累量为白芷的收获目标,10月底为白芷的收获期,与传统采收期一致。     

羌活中异欧前胡素的含量测定

目的 :对羌活中异欧前胡素含量进行测定。方法 :溶剂提取 ,大孔吸附树脂纯化 ,反相高效液相色谱法测定。μbondapakC18色谱柱 ,流动相甲醇 -乙腈 -0 .2 5mol/L磷酸 ( 9∶5∶1 0 ) ,检测波长32 2nm。结果 :进样量 0 .0 84～ 0 .4 2mg/ml,线性关系良好 (r =0 .9998) ,加样回收率为 97.0 0 % ,RSD =1 .6 1 % (n =5 ) ,90 %乙醇洗脱物中异欧前胡素含量为 5 1 .99% (mg/g)。结论 :羌活醇提物经大孔吸附树脂纯化后 ,提高了其异欧前胡素的含量 ,为开发利用羌活提供依据。     

肩痛颗粒中异欧前胡素的含量测定

目的 建立高效液相色谱法测定肩痛颗粒中异欧前胡素含量的方法 .方法 甲醇-水(72:28)为流动相;流速:1mL/min;检测波长:315 nm;柱温:25℃.结果 本法可测定异欧前胡素的含量,其在0.004 2～0.038 1 μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.2%;RSD为1.50%.结论 该方法 简便、准确,可作为肩痛颗粒的含量测定方法 .     

HPLC测定不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量

[目的]采用HPLC法测定不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量。[方法]色谱柱:XB-C18分析柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1。[结果]欧前胡素在0.0552～0.276μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.5%,RSD为1.3%;异欧前胡素在0.048～0.24μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为98.6%,RSD为1.7%。不同产地的白芷饮片中欧前胡素含量在0.046%～0.145%之间,异欧前胡素在0.038%～0.087%之间,两者之和在0.084%～0.232%之间。安徽产最低,浙江杭州产最高。[结论]不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量存在差异。含量测定方法准确、快速、重复性好,适用于白芷及其制剂的质量控制。     

欧前胡素下调Mcl-1蛋白表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡实验研究

目的探讨欧前胡素对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法将人肝癌细胞系Hep G2用5、10、20、40、80μM的欧前胡素处理24h或48h,以相同培养条件不加欧前胡素的Hep G2细胞为对照组,MTT法检测欧前胡素治疗后Hep G2细胞的增殖抑制情况;Hep G2细胞用10、20、40μM的欧前胡素处理24h,通过流式细胞术和Western blot检测欧前胡素对Hep G2细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)的表达;在Hep G2细胞中转染pc DNA-3.1-Mcl-1真核表达载体后再用欧前胡素治疗,检测欧前胡素对Hep G2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果 10、20、40、80μM欧前胡素组增殖抑制率分别为24h:(7.2±1.7)%、(14.5±2.6)%、(37.4±3.7)%、(56.3±4.3)%;48h:(14.5±2.1)%、(23.6±3.0)%、(52.3±4.8)%、(78.3±5.9)%,与对照组(0)比较,差异均有统计学意义(P0.05);10、20、40μM欧前胡素组凋亡诱导率分别为(3.9±0.8)%、(12.4±1.8)%、(26.9±2.5)%,与对照组(0.5±0.2)%比较,差异有统计学意义(P0.05)。欧前胡素治疗后,Hep G2细胞的Mcl-1表达水平显著下降,用pc DNA-3.1-Mcl-1真核表达载体转染Hep G2细胞后,欧前胡素对Hep G2细胞的凋亡诱导率较空pc DNA3.1载体转染组显著下降[(6.8±1.2)%比(25.7±2.3)%,P0.05]。结论欧前胡素具有体外抗肝肿瘤的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白表达从而诱导细胞凋亡。     

欧前胡素通过下调MCL-1的表达提高口腔鳞癌干细胞对顺铂的敏感性

目的: 探讨中药活性成分欧前胡素是否能增强顺铂对口腔鳞癌干细胞的杀伤活性并研究其机制。方法: 流式细胞术检测欧前胡素和顺铂对Cal27细胞系的肿瘤干细胞种群比例的影响。MTT法和Annexin V染色法检测欧前胡素对顺铂杀伤Cal27肿瘤干细胞能力的影响。利用western blot方法验证欧前胡素是否调节Cal27肿瘤干细胞中MCL-1的表达。运用JC-1染色、Annexin V染色及western blot方法研究欧前胡素影响顺铂疗效的信号通路。结果:顺铂单治疗组的Cal27细胞系的肿瘤干细胞种群比例显著高于对照组(P<0.05)而显著低于顺铂联合欧前胡素组(P<0.05)。顺铂联合欧前胡素组对Cal27肿瘤干细胞的细胞活力的抑制率和凋亡诱导率显著高于欧前胡素组(P<0.05)和顺铂组(P<0.05)。顺铂联合欧前胡素组处理的Cal27肿瘤干细胞的线粒体膜电位显著低于欧前胡素组(P<0.05)和顺铂组(P<0.05)。顺铂联合欧前胡素组处理的Cal27肿瘤干细胞的caspase-9和caspase-3的活化水平显著高于欧前胡素组(P<0.05)和顺铂组(P<0.05)。欧前胡素处理后Cal27肿瘤干细胞的MCL-1表达水平显著降低(P<0.05),而顺铂对MCL-1的表达无影响(P>0.05)。MCL-1表达载体能显著抑制欧前胡素对顺铂的协同作用,降低两者联合治疗对Cal27肿瘤干细胞的细胞活力的抑制和凋亡的诱导。结论: 欧前胡素通过下调MCL-1的表达提高口腔鳞癌干细胞对顺铂的敏感性     

高效液相色谱法测定天麻片中蛇床子素与异欧前胡素的含量

目的建立天麻片中蛇床子素与异欧前胡素的含量测定方法。方法采用ODSC18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,以乙腈-0.1%磷酸（55∶45）为流动相;流速：1.0ml/min;检测波长：320nm。结果蛇床子素浓度在0.0211～1.055μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9998）,异欧前胡素浓度在0.0202～1.010μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9997）;蛇床子素平均回收率为99.12%,RSD=1.27%（n=6）;异欧前胡素平均回收率为98.65%,RSD=1.83%（n=6）。结论此方法简便、准确、重现性好,可作为天麻片的含量测定方法。     

N、P和K肥配施对川白芷产量及欧前胡素和异欧前胡素量的影响

目的 研究N、P和K肥的施用量及配比对川白芷产量和欧前胡素和异欧前胡素量的影响。方法 采用L₉(3⁴)正交组合设计田间试验,测定川白芷产量,HPLC法测定根部欧前胡素和异欧前胡素量。结果 不同N、P和K肥施用量及配比会显著影响川白芷的产量以及品质。N、P、K肥配施对川白芷的产量均表现为正效应,但对川白芷欧前胡素与异欧前胡素量的影响差异较大。在低K水平下（K₂O 120 kg/hm²）,适当增加N、P肥用量可增大欧前胡素的量;在高K水平下（K₂O 240 kg/hm²）,适中的N、P肥配比有利异欧前胡素的形成;在高N水平下（195 kg/hm²）,无论P、K肥用量及配比多少欧前胡素、异欧前胡素量均小于空白(ck)。正交方差分析结果还表明,N、P和K肥对产量影响均达极显著水平,影响顺序为P肥＞N肥>K肥;N、P和K肥对欧前胡素量的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）,其中P、K肥影响比N肥大;但仅N肥对异欧前胡素量影响到达显著水（P＜0.05）。所有处理中,N施用量为150 kg/hm²,P₂O₅为225 kg/hm²,K₂O为120 kg/hm²,N-P₂O₅-K₂O的配比为1.3︰1.9︰1的产量和欧前胡素量最高,与ck之间的差异均达到了显著水平,同时异欧前胡素量也较高。结论 在本实验条件下,得到较适宜配施方案,从而使川白芷产量及欧前胡素和异欧前胡素量均提高。     

羌活中异欧前胡素的含量测定

目的：对羌活中异欧前胡素含量进行测定。方法：溶剂提取,大孔吸附树脂纯化,反相高效液相色谱法测定。μbondapakC18色谱柱,流动相甲醇－乙腈－0．25mol／L磷酸（9：5：10）,检测波长322nm。结果：进样量0．084－0．42mg/ml,线性关系良好（r＝0．9998）,加样回收率为97．00％,RSD＝1．61％（n＝5）,90％乙醇洗脱物中异欧前胡素含量为51．99％（mg/g)。结论：羌活醇提取物经大孔吸附树脂纯化后,提高了其异欧前胡素的含量,为开发利用羌活提供依据。     

HPLC法同时测定北沙参不同部位中3种香豆素的含量

目的:建立HPLC法同时测定北沙参不同部位中3种香豆素的含量。方法:色谱柱为Phenomenex—C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(65:35),流速为1.0ml/min,检测波长248nm。结果:补骨脂素在0.043-1.72μg(r=0.9999),欧前胡素在0.033-1.32μg(r=0.9999),异欧前胡素在0.030-1.20μg(r=0.9998)内线性关系良好;补骨脂素、欧前胡素和异欧前胡素平均回收率分别为97.59%、98.23%、96.94%,RSD分别为1.16%、1.36%、0.98%。结论:北沙参不同部位中3种香豆素含量存在明显差异,这为北沙参的产地加工与质量评价提供了科学依据。     

高效液相色谱法测定养血生发胶囊中羌活醇和异欧前胡素的含量

[目的] 建立高效液相色谱法(HPLC)测定养血生发胶囊中羌活醇和异欧前胡素的含量测定方法。[方法] 色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(45:55),流速:1 mL/min,检测波长:310 nm,柱温:25 ℃。[结果] 羌活醇和异欧前胡素分别在0.204~1.224 μg(r=0.999 7)和0.103~0.616 μｇ(r=0.999 8)线性关系良好,平均回收率分别为99.24%(RSD=0.74%)和99.86%(RSD=1.36%)。[结论] 该方法简便易行、重复性好,可用于养血生发胶囊中羌活醇和异欧前胡素的质量控制。     

基于网络药理学与分子对接的欧前胡素治疗宫颈癌的作用机制

目的 探讨欧前胡素治疗宫颈癌的活性成分和作用机制。方法 通过使用网络药理学筛选欧前胡素药用成分和疾病宫颈癌靶点并进行相关的分子对接技术验证。中草药系统药理平台查找欧前胡素的有效成分和作用靶点,采用OMIM和GeneCards数据库,对宫颈癌相关的目标基因进行交叉筛选,Cytoscape软件分析宫颈癌和欧前胡素的共同靶点,String数据库分析并建构PPI网络分析,Rstudo 4.0软件分析并绘图,DAVID生物信息数据库统计,GO富集、KEGG富集分析。分子对接使用AutoDock分析。结果 PPI网络结果显示TERT、ESR1、PTGS2、PGR、PPARG、CA9、ESR2、AR、CASP9、ALPL、CLK1可能为欧前胡素和宫颈癌的核心靶点。GO富集得到26个生物过程,KEGG富集得到6条主要通路,包括Chemical cancer receptor activation、Estrogen、Breast cancer、VEGF、Prolactin等信号通路。分子对接结果显示LYS-243、ARG-240和GLU-272等化合物能与宫颈癌的核心靶点有良好的结合力。结论 欧前胡素可...     

高效液相色谱法测定羌活中异欧前胡素含量

中药羌活为伞形科(Umbeiliferae)植物Notopterygium Ting的根及根茎(地下部分)，为传统中药，有解表散风寒，除湿止痛之功能。其主要化学成分为异欧前胡素、香柑内酯、羌活醇、佛手酚等约15种。现行药典(1995年版药典一部)对羌活药材未作含量测定要求，其含量测定报道较少．为此，笔采用高效液相色谱法测定羌活药材中异欧前胡素含量．为羌活质量控制提供了实验数据。     

欧前胡素抑制compound48/80介导的肥大细胞脱颗粒作用机制研究

[目的]探讨欧前胡素抑制compound48/80介导的肥大细胞脱颗粒作用机制.[方法]取雄性SD大鼠的腹腔肥大细胞进行体外培养,利用compound48/80诱导肥大细胞活化,治疗组分别加入10,20,40μmol/L的欧前胡素.利用ELISA法检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,利用Western blot法检测NF-κB p65水平.[结果]与正常对照组比较,compound48/80可激活实验大鼠腹腔肥大细胞,增加细胞核内NF-κB p65表达量,减少胞浆中NF-κB p65表达量,促进NF-κB p65核转位;与正常对照组比较,模型对照组TNF-α,IL-6水平均明显升高(P<0.05).与模型对照组比较,欧前胡素各剂量组细胞核内NF-κB p65表达量明显减少,胞浆中NF-κB p65表达量明显增加,欧前胡素抑制NF-κB p65核转位,并明显降低肥大细胞TNF-α,IL-6水平(P<0.05),且作用效果呈浓度依赖性增强.[结论]欧前胡素可通过调节NF-κB激活抑制肥大细胞脱颗粒,从而抑制炎性细胞因子的释放.