N-乙酰半胱氨酸对早期日本血吸虫病小鼠肝脏虫卵肉芽肿的影响

目的 研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）对早期日本血吸虫病小鼠肝脏虫卵肉芽肿的影响。 方法　 将36只健康小鼠随机分为NAC组、正常对照组、感染对照组。NAC组和感染对照组小鼠每只经腹部皮肤感染25±2条日本血吸虫尾蚴,于感染当天起给NAC组小鼠200 mg/kg NAC灌胃,2次/d,共42 d;正常对照组和感染对照组每只小鼠2 ml蒸馏水灌胃,2次/d,共42 d。感染第42天,各组小鼠全部处死后取血清和肝脏。对肝脏进行病理学观察,测定血清及肝组织的生化指标。 结果 NAC组小鼠的肝组织“+、++、+++”3级单个虫卵肉芽肿个数分别为1.80±0.25、1.37±0.23、0.53±0.15, 均显著低于感染对照组（P＜0.05）。NAC组小鼠血清中NO水平、GSH水平分别为0.53±0.17、229.66±9.47,相对感染对照组均有所下降（P＜0.05）,谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX活性为1101.99±140.81, 相对感染对照组有所升高（P＜0.05）;肝组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性、NO水平、还原型谷胱甘肽（GSH）水平及GSH-PX活性分别为6.85±0.30、13.44±0.40、358.40±19.15、110.84±10.93,均显著低于感染对照组（P＜0.05）。 结论 N-乙酰半胱氨酸可以减缓日本血吸虫病小鼠肝组织病理变化。     

免疫耐受对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

目的探讨免疫耐受对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响.方法分别用10、100、和1000μg的日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)腹腔注射1周龄小鼠,诱导其对虫卵抗原产生免疫耐受性.在感染日本血吸虫尾蚴后42、56、70和84d分批剖杀小鼠,取出肝脏作病理切片测量肉芽肿的大小.结果100～1 000μg SEA可诱导小鼠产生一定程度的免疫耐受性,使虫卵肉芽肿反应减轻.但是随着时间的延长,这种耐受性逐渐减弱或消失.结论SEA诱导的免疫耐受性可以减轻血吸虫感染早期的肝脏肉芽肿反应,但对慢性期的作用较弱.     

吡喹酮早期治疗对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

感染日本血吸虫尾蚴的小鼠分别于感染后35d(PQT_1组)和45d(PQT_2组)用治愈剂量吡喹酮治疗。观察感染后45～115d的肝脏肉芽肿的体积变化。结果:PQT_1组治后10d不能或仅形成很小的虫卵肉芽肿,体积较对照组缩小73.01％,至115d肉芽肿体积缩小98.55％;PQT_2组治疗前肉芽肿体积与对照无明显差别,治后2周肉芽肿缩小43.20％,至115d肉芽肿缩小95.65％。认为吡喹酮不但可以抑制虫卵肉芽肿的形成,而且可以限制已形成的肉芽肿的进一步发展。     

维生素E抑制家兔肝脏日本血吸虫虫卵肉芽肿的实验研究

本研究观察了维生素E对家兔体内日本血吸虫成虫和肝脏虫卵肉芽肿的作用。结果显示：维生素E对成虫无杀伤作用,而可抑制虫卵肉穿肿反应,虫卵肉穿肿直径较对照组小25.88％。说明：维生素E对日本血吸虫感染的家兔具有一定的保护作用,其机理可能与维生素E的抗脂质过氧化作用有关。     

小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的建立

本文报告应用腹腔注射SEA致敏C57BL/6小鼠,继之经脾脏攻击注射虫卵的方法,建立了小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型,并与自然感染模型作比较.结果证明,SEA致敏组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为100%.其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程及单虫卵肉芽肿的直径和面积均与自然感染模型相似.本实验表明经脾脏注射虫卵及SEA致敏建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型是一种良好的肉芽肿实验动物模型.     

感染亚洲不同地域品系日本血吸虫小鼠的肝虫卵肉芽肿大小

目的 :了解亚洲不同地域品系日本血吸虫对宿主的致病性。方法 :应用相同宿主 C57BL小鼠在同等条件下感染亚洲 7地域品系日本血吸虫后 ,观察和比较其肝虫卵肉芽肿体积大小。结果 :虽然不同地域品系日本血吸虫对小鼠肝组织所致的虫卵肉芽肿体积大小有异 ,但以亲动物的中国台湾品系所致的单个卵的增生期虫卵肉芽肿平均体积为最小。它与亲人体的中国云南、中国广西、中国四川、中国皖鄂、日本、菲律宾 6地品系所致的增生期虫卵肉芽肿平均体积具有显著性的差别。结论 :中国台湾品系日本血吸虫尾蚴感染宿主后 ,寄生虫与宿主的相互关系可能具有某些独特性 ,或存在免疫应答程度上的差异。     

感染亚洲不同地域品系日本血吸虫小鼠的肝虫卵肉芽肿大小

目的 :了解亚洲不同地域品系日本血吸虫对宿主的致病性。方法 :应用相同宿主 C57BL小鼠在同等条件下感染亚洲 7地域品系日本血吸虫后 ,观察和比较其肝虫卵肉芽肿体积大小。结果 :虽然不同地域品系日本血吸虫对小鼠肝组织所致的虫卵肉芽肿体积大小有异 ,但以亲动物的中国台湾品系所致的单个卵的增生期虫卵肉芽肿平均体积为最小。它与亲人体的中国云南、中国广西、中国四川、中国皖鄂、日本、菲律宾 6地品系所致的增生期虫卵肉芽肿平均体积具有显著性的差别。结论 :中国台湾品系日本血吸虫尾蚴感染宿主后 ,寄生虫与宿主的相互关系可能具有某些独特性 ,或存在免疫应答程度上的差异。     

血吸虫虫卵肉芽肿和肝纤维化的形成及调节机制研究进展

血吸虫病是一种严重危害人类健康的寄生虫病,其主要病变是由虫卵沉着在宿主的肝 脏及结肠壁等组织所引起的肉芽肿和纤维化。这种病变的机制目前尚不清楚。本文就虫卵肉芽 肿和肝纤维化机制方面的研究进展作一综述。     

日本血吸虫虫卵肉芽肿与肝纤维化关系的研究

目的从形态学角度来探讨日本血吸虫虫卵肉芽肿与肝纤维化之间的关系。方法用日本血吸虫尾蚴感染新西兰兔,观察虫卵肉芽肿大小、肝纤维化程度的动态变化,同时观察激活的肝星状细胞即肌成纤维细胞。结果感染后第4周α－SMA阳性细胞有表达（分级计分为1．13±0．33）,第6周出现虫卵肉芽肿（大小为129±55,单位：103μm2,下同）,在感染后第8周达高峰（202±86）,肉芽肿周围开始出现成纤维细胞,其后随时间的推移肉芽肿逐渐缩小,而肝纤维化程度逐渐加重,α－SMA阳性细胞表达也逐渐增加。结论提示肉芽肿与肝纤维化无直接关系,而是间接延伸,其中肝星状细胞起重要的桥梁作用。     

SIEA抗血清抑制日本血吸虫卵肺肉芽肿的研究

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）诱导保护性免疫的效果及机制。方法将日本血吸虫未成熟卵在ＲＰＭＩ—１６４０培养液加ＳＩＥＡ免疫血清中培养４天,小鼠尾静脉注射该虫卵,３２天后观察并统计小鼠肺内肉芽肿面积。结果对照组和实验组肺内虫卵肉芽肿面积之间存在显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＳＩＥＡ诱导产生的抗体具有一定的免疫力;抗体可能通过阻塞卵孔或者结合特定抗原,阻止卵内毛蚴发育,达到抗卵胚发育的效果。     

Schistosoma japonicum egg granuloma formation in the interleukin-4 or interferon-γ deficient host

The roles of interleukin (IL)-4 and interferon (IFN)-gamma in Schistosoma japonicum egg granuloma formation were investigated in cercariae-infected (infection model) or after implantation of laid parasite eggs (egg implantation model) in cytokine deficient mice. Two weeks after hepatic egg-implantation, a markedly decreased mononuclear cell infiltration and lack of multinuclear cell formation were characteristic features in IL-4 deficient mice. By 4 weeks (late stage), the cellular reactions around the eggs were negligible in the deficient mice. Compared to the controls, there was a drastic reduction in the production of the Th2 cytokines, IL-4, IL-5 and IL-13. MCP-1 levels were also significantly lowered. In mice experimentally infected with cercariae, granuloma cellularity in both the wild-type and IL-4 deficient mice at 45 days and 10 weeks postinfection was analogous to the egg implantation model at 2 and 4 weeks. Overall, the effects of IFN-gamma deficiency on granuloma induction differed markedly from the IL-4 results. Two weeks after egg implantation, IFN-gamma deficient mice showed suppressed neutrophil response and hepatic necrosis with confluent mononuclear cell infiltration along the outer layer of granulomas. By 4 weeks, there was a decrease in cell infiltration, fibrosis and MCP-1 production while IL-10 production increased. While these early characteristic features for IFN-gamma deficiency were common to both the egg implantation (at 2 and 4 weeks) and cercariae infection model (at 45 days), there was a surprising difference, i.e. marked fibrosis was found in the late stages (at 10 weeks postinfection) of cercariae-infected mice, but not in parasite egg implanted mice. Furthermore, while IL-13 levels were unchanged, both MCP-1 and IL-4 production were significantly lower at 10 weeks in comparison with wild-type. The present study clearly demonstrates the importance of both Th1 and Th2 cytokine responses in S. japonicum egg-induced granuloma formation.     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原诱导BIO细胞产生的研究

目的观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）与成虫抗原（SwAP）是否能够诱导小鼠调节性B细胞的产生。方法SEA、SWAP和脂多糖（LPS）分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和磁珠分选后的脾脏CD19＋B细胞,72h后用流式细胞术分别检测CD19＋IL-10＋细胞比例,和细胞表面CD80、CD86及CD40的表达,用ELISA法检测培养上清中IL-10的水平。体内实验用SEA、SWAP、PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠,1次／N,共3次,末次免疫后7d取小鼠脾脏,流式细胞术检测CD19＋IL-10＋细胞比例,用ELIsA法检测培养上清中IL-10的水平。结果LPS与SEA体外均能显著诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19＋IL-10＋细胞,两者无显著差异,而swAP组不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19＋II-10＋。细胞;SEA与LPS能够诱导脾脏CD19＋B细胞表面高表达CD80、CD86和CD40,而SwAP不能诱导脾脏CD19＋B细胞活化;SEA与LPS诱导脾脏CDt9＋B细胞分化为IL-10＋细胞的比例也显著升高,同时能刺激脾脏CD19＋B细胞分泌高水平的IL-10,两者无显著差异;而SwAP不能诱导小鼠脾脏CD19＋。B细胞分化为IL—10＋细胞并分泌IL-10。SEA体内免疫小鼠后,小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19＋IL-10＋细胞比例显著升高,并且能够分泌高水平的IL-10,而swAP和PBS免疫组均不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD-9＋IL-10＋细胞并分泌1L-10。结论SEA体外体内均能诱导小鼠产生分泌IL-10的B10细胞,并且在体外不依赖于脾脏其他免疫细胞的参与,而SwAP体外体内均不能诱导B10细胞的产生。     

Neutropenia augments experimentally induced Schistosoma japonicum egg granuloma formation in CBA mice,but not in C57BL/6 mice

The present study was designed to investigate the role of neutrophils during the development of Schistosoma japonicum egg granulomas, in C57BL/6 and CBA mice. Laid eggs were implanted into the liver and monoclonal antibody, RB6-8C5, was used to eliminate neutrophils. After daily antibody treatment between days 9 and 13 of egg implantation, both strains of mice showed a marked decrease in neutrophil infiltration and coagulative hepatocyte necrosis at 2 weeks. At 4 weeks, after antibody administration every other day between days 16 and 26, granuloma formation in C57BL/6 mice was not affected by the treatment, whereas CBA mice exhibited a significant increase of reactions. Neutropenia augmented the Th2 cytokine response (IL-4, IL-13 and IL-5), but not for IFN-gamma at any time point examined and in either strain of mice. Higher levels of IL-4 and IL-13 were noted in CBA mice at early and late stages of granuloma formation, compared to C57BL/6 mice. There was also a striking difference in IL-13 production between the two strains. Our results indicate that neutropenia is associated with a significant augmentation of S. japonicum egg-induced granuloma formation in CBA mice, probably through increase in Th2 cytokines, however, the effects differ between early and late stages and between high and low responders.     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原诱导肝纤维化相关miRNA的变化

目的研究与肝纤维化相关miRNA(miR)在日本血吸虫可溶性虫卵抗原刺激小鼠肝细胞(AML12)后的表达情况,为阐明血吸虫感染导致肝纤维化的机制奠定基础。方法使用日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Soluble egg antigens,SEA)刺激AML12后,采用定量PCR检测AML12中的miR-122、miR-182、miR-23b、miR-27b及KH型剪切调控蛋白(KHtype splicing regulatory protein,KSRP)的m NA水平,以Western blotting检测KSRP蛋白的表达变化;分别用anti-miR-27b、miR-27b precursor转染AML12后,以定量PCR和Western blotting检测AML12中KSRP的m NA和蛋白水平。结果经SEA刺激后,AML12中miR-182、miR-23b及miR-27b m RNA水平下降(P均0.05),而细胞中miR-122 m RNA与KSRP的m RNA水平及蛋白表达水平均上调(P均0.05)。此外,anti-miR-27b与miR-27b precursor转染组KSRP的m RNA水平均无明显变化,但anti-miR-27b组细胞中KSRP的蛋白表达增加,miR-27b precursor组KSRP的蛋白表达降低。结论SEA刺激AML12导致诸多与肝纤维化相关的miRNA及KSRP的表达发生变化,其中miR-27b可调控KSRP的表达,这为进一步研究血吸虫感染导致的肝纤维化的分子机制奠定了基础。     

青蒿琥酯对小鼠曼氏血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

目的通过口服青蒿琥酯,观察其对曼氏血吸虫感染小鼠肝脏肉芽肿形成的影响。方法小鼠经尾部接触感染曼氏血吸虫尾蚴后,经不同时间、不同剂量喂服青蒿琥酯,治疗后2～6周解剖,取肝脏作石蜡切片,进行H.E.染色,显微镜下作病理学观察,并测定虫卵肉芽肿的面积。结果未给药对照组虫卵肉芽肿由大量炎性浸润细胞及间质成纤维细胞组成,服药组肝切片未见虫卵肉芽肿或虫卵肉芽肿面积明显小于对照组,肉芽肿周围少量炎性细胞浸润。100mg/kg组肉芽肿面积与对照比较无显著性差异(P>0.05)。但肉芽肿面积比对照减小36.9%。300、500mg/kg组病理切片未查到虫卵和肉芽肿。不同虫龄服药组肉芽肿面积与对照比较均有显著性差异(P<0.05～P<0.01)。其中21、22d服药组肝切片未查到虫卵和肉芽肿。结论青蒿琥酯能抑制虫卵肉芽肿的形成,降低虫体产卵率并减少形成的肉芽肿对肝脏的损害。     

日本血吸虫与曼氏血吸虫的致病差异

曼氏血吸虫和日本血吸虫是全球范围内两种主要的肠道血吸虫病病原体,所致基本病理均为虫卵引起的肝脏肉芽肿和纤维化,但两者在产卵方式以及肉芽肿的组成细胞等方面均存在明显差异。 目前,我国的血吸虫病研究主要以日本血吸虫病为对象,国外主要以曼氏血吸虫病为对象,而介绍两种血吸虫致病差异的综述较少。 为更好地理解两种血吸虫的致病差异,本文从血吸虫的基因组和进化路径、幼虫迁移、成虫寄生位置及产卵方式、局部组织病理、肉芽肿的形成机制以及肉芽肿的细胞组成等 6 个方面对日本血吸虫和曼氏血吸虫的致病差异进行了综述。     

免疫增强剂“425”对日本血吸虫感染小鼠虫卵...

Fourteen--34 days after Schistosoma japonicum-infected mice were injected intraperitoneally with immunoenhancing reagent, Chinese angelica root extract ("425"), the specific antibody (IgG) levels were significantly higher in Group III (362.67 +/- 162.21 - 480.00 +/- 289.45) than the control group (66.67 +/- 39.68 - 245.33 +/- 101.56) in experiment one, and in Group II (488.00 +/- 320.38 - 768.00 +/- 267.38) than the control group (256.00 +/- 189.07 - 394.67 +/- 141.06) in experiment two. The egg granulomatous formation were markedly diminished in the injected mice. The ratios of granulomas vs. eggs' mean diameters of Group III of mice were 5.24 +/- 1.04 - 3.95 +/- 0.77 and those of the control group were 6.59 +/- 1.19 - 5.29 +/- 0.94 in experiment one, those of the group II were 3.75 +/- 0.71 - 4.15 +/- 0.73 and those of the control group were 4.94 +/- 0.81 - 5.36 +/- 0.97 in experiment two. Meantime the egg antigen levels in the injected mice might be lower. This study shows that the control of immunomodulation of granulomatous formation in the hosts injected with immunoenhance reagent "425" can be induced.     

日本血吸虫病肝纤维化的病理学及发病机制研究进展

血吸虫病是一种流行广泛、严重危害人类健康和社会经济发展的人兽共患寄生虫病。我国是日本血吸虫病流行最严重的国家之一。宿主感染血吸虫后虫卵沉积于肝脏,引起机体免疫应答,导致以淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞浸润为主要特征的肝脏虫卵肉芽肿病变,该慢性炎症过程最终会引起肝纤维化并出现腹水、肝脾肿大等临床表现。本文将从血吸虫病肝纤维化病理学特征、肝纤维化的形成与调节、重要的炎症因子及信号通路、nc RNA在血吸虫病肝纤维中的调控作用以及抗纤维化治疗和新药研究等几个方面进行综述。     

SCP提取物合剂对血吸虫卵肉芽肿诱导的Th1型和Th2型细胞因子的调节效应

目的　进一步研究SCP提取物合剂对感染小鼠诱导的抗肝内血吸虫卵肉芽肿病变的调节效应和分子机制。方法　BALB/c小鼠 40只 ,均分为 4组 ,每鼠感染 30± 2条尾蚴。 4w后组I和组III小鼠分别口服SCP提取物SCP1和SCP2 ,并联用“42 5”制剂 14d ,SCP1和SCP2的总量均为 70 0 0 μg ,“42 5”制剂 70 0mg ,组II单用SCP1,用量同上。组IV为对照。停药后1w ,剖检小鼠 ,计算各组小鼠每g肝组织虫卵数 (EPG)和成熟虫卵减少率 ;制成肝组织石蜡切片 ,计算肉芽肿大小 ;分离脾淋巴细胞 ,于 37℃ ,5 %CO2 中培养 48～ 72h ,取上清液 ,测定IFN -γ和IL - 4含量水平 (pg/ml)。 结果　实验组小鼠的EPG均显著低于感染对照鼠者 ,成熟虫卵减少率为 80 .5 6 %～ 87.70 % ;实验鼠肉芽肿的平均面积和体积均显著小于感染对照鼠者 (P<0 .0 5 ) ;实验鼠脾淋巴细胞上清中IFN -γ和IL - 4含量水平均显著低于感染对照鼠的 5 46 .15± 2 43.15和 73.78± 2 8.37。结论应用中药SCP提取物合剂能诱导明显的抗肝内血吸虫卵肉芽肿病变效应及血吸虫性纤维化作用 ,其分子机制与Th1型和Th2型细胞因子应答的调节效应密切相关