一种用5′-Nase-ALPase染色观察大鼠胰腺组织的方法

目的观察大鼠胰腺组织血管淋巴管分布特点。方法通过5′-核苷酸酶和碱性磷酸酶组织化学双重染色相对比,光镜观察大鼠胰腺组织脉管结构。结果光镜显示,血管显示碱性磷酸酶强阳性蓝色反应,淋巴管呈现5′-核苷酸酶强阳性褐色反应。在腺泡之间和胰岛内部,存在丰富的毛细血管;毛细淋巴管只见于胰岛的周围。结论胰岛的淋巴引流,可能是通过淋巴管前通路实现的。     

家兔舌淋巴管分布的酶组织化学法观察

应用５＇－核苷酸酶－碱性磷酸酶（５＇－Ｎａｓｅ－ＡＫＰａｓｅ）双重染色法，观察了兔淋巴管的微细分布。光镜下可见舌的毛细淋巴管和淋巴管呈５＇－核苷酸酶染色强阳性反应，管壁显示明显的棕色或深棕色，而毛细血管或血管的碱性磷酸酶的反应则显示强阳性，管壁呈现明显的蓝色。研究证明，在舌粘膜固有层存有丰富的毛细淋巴管和淋巴管；于舌肌层肌纤维束间的结缔组织内也可见毛细淋巴管及淋巴管。     

小鼠胰腺淋巴管的分布及其与胰岛的关系

目的:探讨小鼠胰腺淋巴管的形态分布及其结构特点。方法:对小鼠胰组织切片进行HE染色,5核苷酸酶(5-Nase)和碱性磷酸酶(ALP)双重染色,光镜、透射电镜、扫描电镜二次电子和背散射电子图像(SEI/BEI)观察。结果:小鼠胰腺的淋巴管结构较典型,在胰腺的小叶间结缔组织内,较大淋巴管与血管和导管相互伴行;毛细淋巴管起自胰腺腺泡周围,并且均匀地分布于整个小叶内;小叶内有单独走行的集合淋巴管,亦存在与血管并行情况;在胰岛内部未发现毛细淋巴管,但胰岛周围可见丰富的毛细淋巴管。结论:小鼠胰腺小叶间和小叶内结缔组织中,均有淋巴管分布;胰岛内部虽无淋巴管,但胰岛与周围毛细淋巴管的关系较密切。     

胰淋巴管的微细分布

为探讨胰小叶内是否存在淋巴管，用５′－核苷酸酶－碱性磷酸酶双重染色，半薄、超薄切片，光镜和电镜下观察了兔胰淋巴管的微细分布。结果表明，胰的淋巴管仅见于胰小叶间的结缔组织内。在胰小叶内，包括胰岛内均无淋巴管，只见到丰富的血管     

非肥胖型糖尿病小鼠胰腺淋巴管分布及微细结构的酶组织化学 …

应用酶组织化学的方法对非肥胖型糖尿病小鼠胰腺淋巴管的分布及微细结构进行了光镜及电镜观察。５’－核苷酸酶（５－Ｎａｓｅ）阳性小叶间淋巴管具明显的神经支配和丰富的瓣膜，分布于整个胰腺。小叶内毛细淋巴管虽有典型的结构特征，如不规则的管腔，极薄的管壁和淋巴管内皮细胞的独特连接方式（端端、重叠与指状突起连接），但数量很少，其分布相对独立于毛细血管（碱性磷酸酶，即ＡＬＰａｓｅ阳性）。胰岛周围淋巴细胞浸润出现在     

5‘—核苷酸酶—碱性磷酸酶双染色法在淋巴管研究中的应用

应用５＇－核苷酸酶－碱性磷酸酶（５＇－Ｎａｓｅ－ＡＬＰａｓｅ）双重染色法观察了家兔，豚鼠和Ｗｉｓｔａｒ大鼠多个器官的淋巴管和血管。在光镜下见到淋巴管壁呈５＇－Ｎａｓｅ阳性反应，显示褐色；而血管壁呈ＡＬＰａｓｅ阳性反应，显示蓝色。     

结扎大鼠胸导管诱发胰组织结构的形态学变化

目的 观察胰淋巴淤滞动物模型胰组织结构变化和胰淀肽沉积情况,探讨淋巴淤滞对胰组织细微和超微结构的影响. 方法 10月龄大鼠20只,采用腹部结扎大鼠胸导管,建立胰淋巴淤滞动物模型,造模后6个月取材,部分胰组织经石蜡包埋切片,行HE和刚果红染色;部分经冷冻切片,行免疫组织化学染色和光镜观察;部分标本进行透射电镜样品制备和观察. 结果 HE和刚果红染色切片光镜观察显示,胰腺小叶间隙增宽,呈明显的结缔组织增生、脂肪堆积;胰岛淡染或着朱红色,组织间隙明显增宽.免疫组织化学染色切片光镜观察显示,在胰岛及其周围,呈现胰淀肽强阳性棕褐色着色反应.超薄切片透射电镜观察显示,胰腺小叶间隙增宽,可见血管和扩大的淋巴管;胰岛细胞间隙增宽,细胞间隙内可见大量脂滴样物质和胶原原纤维样结构.结论 胸导管结扎可导致胰淋巴引流障碍,引起胰淋巴管扩张,结缔组织间隙增宽,脂肪堆积,胰岛细胞间隙扩大,胰淀肽沉积等,这些结构变化可能影响胰岛的功能.     

小鼠肝癌细胞移植瘤内淋巴管的形态与亚细胞结构

目的 观察小鼠肝癌细胞所致小鼠移植瘤内淋巴管形态学改变，探讨移植瘤内是否有淋巴管新生。方法 将小鼠肝癌(H22)腹水型瘤株细胞接种于昆明小鼠腋部皮下，2周时摘取肿瘤，采用HE染色观察癌肿的发展，光镜下用5′-核苷酸酶一碱性磷酸酶双重染色法观察毛细淋巴管；半薄切片筛选毛细淋巴管；应用透射电镜观察毛细淋巴管内皮细胞超微结构。结果 动物模型显示2周时小鼠腋部可见明显肿块。5′-核苷酸酶一碱性磷酸酶双重染色法可见中心区无毛细淋巴管，周边部可见稀疏的染成棕黄色的毛细淋巴管，染成蓝色的血管较为多见。透射电镜下，周边区可见毛细淋巴管，亚细胞结构发生损伤。结论 小鼠肝癌细胞所致小鼠移植瘤内存在新生毛细淋巴管。     

非肥胖型糖尿病小鼠胰腺淋巴管分布及微细结构的酶组织化学研究

应用酶组织化学的方法对非肥胖型糖尿病（ｎｏｎ－ｏｂｅｓｅｄｉａｂｅｔｉｃ，ＮＯＤ）小鼠胰腺淋巴管的分布及微细结构进行了光镜及电镜观察。５′－核苷酸酶（５′－Ｎａｓｅ）阳性小叶间淋巴管具有明显的神经支配和丰富的瓣膜，分布于整个胰腺。小叶内毛细淋巴管虽有典型的结构特征，如不规则的管腔、极薄的管壁和淋巴管内皮细胞的独特连接方式（端端、重叠与指状突起连接），但数量很少，其分布相对独立于毛细血管（碱性磷酸酶，即ＡＬＰａｓｅ阳性）。胰岛周围淋巴细胞浸润出现在生后４～５周，并开始于近血管或淋巴管一侧。糖尿病发病后，血糖浓度在短期内急剧上升，胰岛由严重的淋巴细胞浸润转化为β细胞脱颗粒及坏死。淋巴管内一般充满大量淋巴细胞。淋巴管内皮细胞内小泡明显增多，并有广泛的细胞质突起。其开放性细胞间连接均匀地附着有５－Ｎａｓｅ反应颗粒，形成了相当大的细胞间通路（５００～１５００ｎｍ），可见细胞或纤维碎片从组织间隙经此进入淋巴管腔。结果提示，糖尿病胰腺的淋巴管对浸润的淋巴细胞、坏死的细胞成分和某些溶质等的转运具有重要的作用。     

5’-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法在鉴别微淋巴管和微血管中的应用

我们采用5’-核苷酸酶-碱性磷酸酶(5’-Nase-Apase)双重酶组织化学法对喉鳞癌新鲜标本冷冻切片进行染色，以期将淋巴管和血管区别开来，特别是显示HE染色所不能显示的微淋巴管和微血管，为从形态学上研究癌组织微淋巴管和微血管以及转移机制提供可靠的实验方法。     

胸导管结扎对大鼠脂质代谢和胰组织结构的影响

目的:探讨胸导管结扎对脂质代谢的影响,揭示淋巴回流障碍诱发胰组织的显微和超微结构变化.方法:SD大鼠随机分为假手术对照组和结扎胸导管模型组.术后6个月取静脉血标本进行血脂检测;部分胰组织标本,H-E和刚果红染色光镜观察;部分胰组织进行透射电镜观察.结果:(1)模型组大鼠游离脂肪酸和甘油三酯浓度明显下降,胆固醇浓度无显著变化.(2)光镜观察显示模型组大鼠的胰腺小叶间隙增宽,脂肪堆积和淋巴管扩张.(3)透射电镜观察显示模型组大鼠的胰岛细胞间隙增宽,细胞间隙及细胞内可见大量脂滴样物质、红细胞和胶原原纤维样结构.结论:胸导管结扎可引起胰腺结构变化和影响胰腺的内、外分泌功能.     

喉癌淋巴管的微细分布和超微结构的观察

目的观察喉癌淋巴管的微细分布和超微结构特征,为探讨喉癌淋巴转移机制提供形态学依据。方法采用5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法(5′-Nase-ALP)、半薄切片光镜观察、超薄切片电镜观察。结果喉癌组织中心区未见淋巴管,癌周边区和正常区组织内存在毛细淋巴管,与正常区比较,周边区组织内淋巴管数量增多,管腔扩大,形态不规则。淋巴管内皮细胞连接开放增多,并可见部分内皮细胞破裂溶解,管壁不完整,毛细淋巴管内皮细胞变性,细胞器发生明显改变。正常区毛细淋巴管的形态和超微结构未见明显改变。结论喉癌淋巴管的分布及超微结构的改变与喉肿瘤细胞经淋巴道转移密切相关,因而为进一步探讨喉癌颈淋巴结转移的机制以及防治提供了理论依据。     

卵泡刺激素及其受体在大鼠胰腺的共定位观察

目的观察卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR)在大鼠胰腺中的共存关系,以了解FSH对胰腺的功能意义。方法应用免疫荧光组织化学双标记染色技术,在激光共聚焦扫描显微镜下观察染色结果。结果部分外分泌腺细胞、导管上皮细胞及部分胰岛细胞呈FSH反应阳性,呈强绿色荧光。小血管内皮细胞也呈FSH反应弱阳性,呈弱的绿色荧光。部分胰岛细胞呈FSHR反应阳性,呈强红色荧光。一些外分泌腺上皮细胞呈FSHR反应弱阳性,呈淡红色荧光。有一些胰岛细胞呈FSH和FSHR双阳性反应,呈黄色荧光或红、绿相间荧光。结论FSH及其受体均存在于大鼠胰腺中,胰岛中的部分细胞共同存在FSH及其受体,FSH可能通过旁分泌或自分泌的途径对胰腺的功能起调节作用。     

胰组织结构提示多肽胰岛素的正常转运经淋巴而非门脉途径

目的　探讨胰岛多肽激素释放形式和细胞外正常转运途径的结构基础。方法　对大鼠和人胰尾部组织进行了光镜 (LM )和透射电镜 (TEM)观察。结果　胰组织主要由腺泡构成的腺小叶和分隔腺小叶的结缔组织所组成。胰腺的导管、血管和淋巴管 ,有髓和无髓神经纤维 ,均穿行于胰结缔组织内。在胰岛周围的结缔组织间隙内也可见到完整的膜包分泌颗粒 (2 0 0～ 5 0 0nm)。胰腺的毛细血管为窗孔 (5 0nm)型。结论　胰组织结构特点提示 :胰岛多肽激素的释放形式 ,可能是连同颗粒膜的整体释放而非传统认为的胞吐分泌 ;释放入胰组织液中的多态胰岛素或分泌颗粒 ,更易进入淋巴而非门脉血液     

大鼠胰淋巴管的微细分布

采用半薄切片光镜观察和超薄切片电镜观察方法研究了大鼠胰淋巴管的微细分布。结果证明 ,在胰小叶内包括胰岛内及其周围均不存在毛细淋巴管和淋巴管而有丰富的血管 ;胰的毛细淋巴管和淋巴管仅见于小叶间的结缔组织内。     

家兔喉淋巴管的微细分布

目的进一步明确家兔喉淋巴管的微细分布。方法采用5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法(5′-Nase-ALP),半薄切片光镜观察,超薄切片电镜观察。结果喉壁除韧带和软骨层外,其粘膜层、粘膜下层、肌层和外膜均可见毛细淋巴管和淋巴管,其分布的密度不同。喉各分区淋巴管分布具有显著差异,其中以会厌喉面分布密度最高,声襞淋巴管的分布密度最低。在喉的三个间隙即会厌前间隙、声门旁间隙和任克氏间隙中均存在淋巴管,但检出率较低。结论喉壁除韧带和软骨层外,其余各层均存在毛细淋巴管和淋巴管,喉各分区淋巴管分布密度不同。     

黄体生成素及其受体在大鼠胰腺的免疫荧光定位

目的观察黄体生成素(LH)及其受体(LHR)在SD大鼠胰腺的定位分布,以了解LH对胰腺的功能意义。方法选取SD大鼠12只,雌雄不拘,经腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后,用4%多聚甲醛灌流固定2h,取出胰腺组织置于300g/L蔗糖液中,用于双标记免疫荧光定位研究,在激光共聚焦扫描显微镜下观察。结果胰腺部分外分泌腺细胞质、导管上皮细胞及部分胰岛细胞质LH反应阳性,小血管内皮细胞质呈LH弱阳性。部分胰岛细胞质呈LHR反应阳性,一些外分泌腺上皮细胞质呈LHR反应弱阳性,部分胰岛细胞及胰腺外分泌细胞质呈LH和LHR双阳性反应。结论LH可能通过旁分泌或自分泌的途径对胰腺的功能起调节作用。     

青年供体胰段移植的超微结构及解剖学基础

背景:在胰腺和胰岛移植中,青年供体胰腺血管吻合难度较小,成功概率大,但目前青年供体胰腺胰段移植的解剖学基础国内尚缺乏。目的:观察青年人胰腺胰尾的微细结构、胰岛B细胞胰高血糖素和胰岛素阳性表达面积及胰岛B细胞免疫阳性染色面积,以及青年尸体胰腺血管的解剖情况。方法:选择青年人尸体12例,取胰尾切片苏木精-伊红染色后光镜观察,显微测微器测量胰岛数量和面积,用胰高血糖素抗血清和胰岛素抗血清进行免疫组织化学染色。另取3例青年人尸体取胰尾组织块铀铅染色。透射电镜观察青年供体胰腺B细胞,胰岛形态和数量、结构及其分泌颗粒,以及青年供体胰腺血管情况。结果与结论:青年供体胰尾组织中胰岛B细胞内分泌颗粒多,内质网、高尔基复合体和线粒体等细胞器发达,胰岛数目分布多,胰岛B细胞的免疫阳性染色面积大。青年供体胰尾有较多而密的胰岛B细胞散在分布,胰岛B细胞分泌颗粒多。血管适合做端侧吻合。提示青年供体胰腺细胞的分泌活动旺盛,血管适合做端侧吻合,适宜作为胰腺胰段胰岛移植供体。     

人结肠癌和胃癌淋巴管形态结构的研究

目的　研究人结肠癌和胃癌组织淋巴管的微细分布、超微结构特征和组织化学染色特性 ,观察其共同特点 ,为进一步探讨癌组织的淋巴道转移机理提供形态学依据。方法　取临床结肠癌和胃癌病人手术切除的组织 ,按癌组织中央区、周边区及正常区分别取材 ,应用半薄切片光镜观察、超薄切片电镜观察及 5′核苷酸酶 -碱性磷酸酶双重染色和高碘酸 -无色品红 -橙黄G染色的方法 ,对结肠癌和胃癌组织淋巴管的形态结构进行研究。结果　无论在结肠癌和胃癌 ,癌组织中心区均未见淋巴管 ;而癌组织周围区淋巴管的密度较正常区的增高 ,且管径较大 ,形态不一 ;淋巴管内皮细胞及细胞器有明显变化 ,内皮细胞间连接开放增加 ,常见淋巴管管壁的破坏和不完整 ;癌组织正常区的淋巴管分布于各层组织中 ,其超微结构变化不明显。结论　淋巴管只存在于结肠癌和胃癌组织周围区和正常区 ,提示结肠癌和胃癌组织的淋巴道转移可能是通过癌组织周围区淋巴管内皮细胞连接的开放和癌组织对淋巴管内皮细胞的破坏溶解作用而进入淋巴管管腔的     

家兔肺内淋巴管的微细分布

目的：研究家兔肺内淋巴管的微细分布,探讨肺泡隔内是否存在淋巴管。方法：采用5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法(5′-Nase-ALP)、半薄切片光镜观察、超薄切片电镜观察。结果：(1)肺内淋巴管存在于富含结缔组织区,延伸至呼吸性细支气管区,不延伸至肺泡区,呼吸性细支气管外膜下可见毛细淋巴管,肺泡隔内未见毛细淋巴管和淋巴管,仅见到大量呈蓝色的毛细血管。(2)伴行肺动脉的淋巴管为肺深淋巴管系的主流,其末梢向小叶中央延伸到末级微动脉附近。(3)伴行肺静脉的淋巴管位于静脉外膜边缘的结缔组织中,与肺泡紧密相邻。结论：肺泡隔内无淋巴管,肺内淋巴管起始于呼吸性支气管。