多药耐药基因MDR1在乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨乳腺癌中多药耐药基因MDR1的表达及临床意义．方法 采用荧光定量RT-PCR法检测47例乳腺癌组织及15例正常对照(包括5例乳腺纤维腺瘤、10例癌旁正常组织)中MDR1基因的表达．结果 乳腺癌中MDR1基因的阳性率为46．8％，且MDR1基因的表达与患者年龄、肿瘤大小、ER、PR、绝经状况无关．对照组中无MDR1基因扩增。结论 乳腺癌中MDR1基因的表达可做为乳腺癌化疗耐药的评价指标．     

乳腺癌雌激素受体、孕激素受体和C-erbB-2的表达及其临床意义

目的 :研究乳腺癌中雌、孕激素受体 (ER、PR)与C -erbB -2癌基因的表达情况及临床意义。方法 :应用免疫组化S -P法 ,对 15 8例原发性乳腺癌组织进行了ER、PR和C -erbB -2检测 ,并进行统计学分析。结果 :ER、PR和C -erbB -2的表达率分别为 6 8 4 %、6 2 0 %、5 4 4 %。ER的表达与PR的表达呈显著正相关 ( P <0 0 1) ;C -erbB -2的表达与淋巴结转移呈正相关 (P <0 0 5 ) ,与ER、PR的表达呈显著负相关 (P <0 0 1)。C -erbB -2表达阴性及ER、PR表达阳性 4年无复发生存率及总生存率较高。结论 :ER、PR的测定有利于选择乳腺癌内分泌治疗。C -erbB -2可作为判断乳腺癌预后的重要指标 ,C -erbB -2阴性者预后较好。     

乳腺癌雌孕激素受体与C—erbB—2基因、多药耐药基因MDR1（P—gp）蛋白表达及相关分析研究

目的：观察乳腺癌组织中雌孕激素受体（ER、PR）与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1（P－gp)的蛋白表达并探讨其相互关系。方法：用免疫组织化学法（EnVision法）对109例术前未行化疗的乳腺癌手术切除标本福尔马林固定，石蜡包埋组织进行ER、PR、C-erbB-2、MDR1(P-gp)检测，结果作统计学分析。结果：（1）ER、PR阳性表这率分别为55．0％和43．％；（2）C-erbB-2、MDR1（P-gp)的阳性表达率各为54．1％和15．6％，乳腺导管内癌患者的C-erbB-2阳性表达高于浸润性导管癌的患者（P＜0．05）；（3）ER、PR均阳性患者的C-erbB-2阳性表达明显低于ER、PR均阴性患者（P＜0．05），ER阳性组的C-erbB-2阳性表达明显低于ER阴性组（P＜0．05）。结论：ER、PR与C-erbB-2基因乳腺癌中有一定的内在联系，C-erbB-2表达与ER表这呈负相关，多药耐药基因MDR1（P-gp）的表达与ER、PR无关。     

乳腺癌雌孕激素受体与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1(P-gp)蛋白表达及相关分析研究

目的观察乳腺癌组织中雌孕激素受体(ER、PR)与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1(P-gp)的蛋白表达并探讨其相互关系.方法 用免疫组织化学法(EnVision法)对109例术前未行化疗的乳腺癌手术切除标本福尔马林固定、石蜡包埋组织进行ER、PR、C-erbB-2、MDR1(P-gp)检测,结果作统计学分析.结果 ①ER、PR阳性表达率分别为55.0%和43.1%;②C-erbB-2、MDR1(P-gp)的阳性表达率各为54.1%和15.6%,乳腺导管内癌患者的C-erbB-2阳性表达高于浸润性导管癌的患者(P<0.05);③ER、PR均阳性患者的C-erbB-2阳性表达明显低于ER、PR均阴性患者(P<0.05),ER阳性组的C-erbB-2阳性表达明显低于ER阴性组(P<0.05).结论 ER、PR与C-erbB-2基因在乳腺癌中有一定的内在联系,C-erbB-2表达与ER表达呈负相关;多药耐药基因MDR1(P-gp)的表达与ER、PR无关.     

乳腺癌雌孕激素受体与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1(P-gp)蛋白表达及相关分析研究

目的观察乳腺癌组织中雌孕激素受体(ER、PR)与C erbB 2基因、多药耐药基因MDR1(P gp)的蛋白表达并探讨其相互关系。方法用免疫组织化学法 (EnVision法 )对 10 9例术前未行化疗的乳腺癌手术切除标本福尔马林固定、石蜡包埋组织进行ER、PR、C erbB 2、MDR1(P gp)检测 ,结果作统计学分析。结果①ER、PR阳性表达率分别为 5 5 .0 %和 43.1%;②C erbB 2、MDR1(P gp)的阳性表达率各为5 4.1%和15 .6 %,乳腺导管内癌患者的C erbB 2阳性表达高于浸润性导管癌的患者 (P <0 .0 5 ) ;③ER、PR均阳性患者的C erbB 2阳性表达明显低于ER、PR均阴性患者 (P <0 .0 5 ) ,ER阳性组的C erbB 2阳性表达明显低于ER阴性组 (P <0 .0 5 )。结论ER、PR与C erbB 2基因在乳腺癌中有一定的内在联系 ,C erbB 2表达与ER表达呈负相关 ;多药耐药基因MDR1(P gp)的表达与ER、PR无关。     

乳腺癌组织中survivin蛋白与C-erbB-2基因及各耐药基因表达的关系

目的 探讨survivin在乳腺癌组织中的表达与C-erbB-2基因及各耐药基因表达的关系.方法 采用免疫组织化学法检测51例乳腺癌患者肿瘤组织中survivin与C-erbB-2及各耐药基因的表达情况.结果 51例乳腺癌组织中survivin表达的阳性率为68.63％;survivin蛋白表达在有无淋巴结转移方面差异有统计学意义(P＜0.05),在肿瘤大小及雌激素受体方面差异无统计学意义(P＞0.05); survivin蛋白在C-erbB-2、肺耐药蛋白、胸苷酸合成酶、P-糖蛋白阳性者的阳性表达率高于C-erbB-2、肺耐药蛋白、胸苷酸合成酶、P-糖蛋白阴性者,差异有统计学意义(P＜0.05);在谷胱甘肽转移酶阳性者与阴性者间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 survivin在乳腺癌的发生发展中起一定作用;检测survivin对乳腺癌的预后分析和进一步治疗有指导意义.     

乳腺癌细胞多药耐药基因（MDR1）表达的检测及其临床意义的探讨

目的：探讨多耐药基因MDR1在乳腺癌中的表达及其临床意义,方法：用Pgp单抗C219,C49,JSB1免疫组化方法检测42例乳腺癌组织中的MDR1表达水平,并行化疗疗效的判定,将各指标对比分析,结果,MDR1表达的阳性率为38．1％,MDR1 达与化疗疗效呈负相关,MDR1表达水平与肿瘤大小,病理组织学分化程度及ER情况均有相关性,结论：MDR1在乳腺癌中的普遍存在,MDR1不仅是耐药性指标,也可能是肿瘤细胞的一个生物学指标。     

宫颈癌中多药耐药1基因的表达和意义

目的探讨多药耐药1基因在宫颈癌中表达及其临床意义。方法应用荧光定量PCR法检测42例宫颈癌组织及10例正常宫颈组织中多药耐药1基因mRNA的表达情况。结果宫颈癌组织中多药耐药基因1 mRNA表达(0.573±0.320)明显高于正常宫颈组织(0.186±0.099)(P<0.001);宫颈癌组织中多药耐药基因1 mRNA表达高中分化组(0.678±0.269)高于低分化组(0.383±0.325)(P<0.05),在其他临床病理相关因素上差异无统计学意义(P>0.05)。结论多药耐药1基因在宫颈癌的原发性多药耐药中可能起重要作用,检测多药耐药1基因的表达情况对预测宫颈癌的化疗效果、协助临床选择化疗方案有一定意义。     

雌激素受体、孕激素受体、p53基因和C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、p53和C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化方法检测经病理证实的51例乳腺癌组织的ER、PR、p53和C-erbB-2的表达。结果51例患者ER、PR、p53和C-erbB-2表达的阳性率分别为66.7%、58.8%、29.4%、72.6%。ER的表达在不同肿瘤大小、腋窝淋巴结有无转移组别中差异有显著性(P<0.05),而在年龄、分期组别中未见明显差异,PR、p53及C-erbB-2的表达与年龄、肿瘤大小、分期及淋巴结转移情况四组中均未见明显统计学意义。结论乳腺癌组织中ER、PR、p53和C-erbB-2均有较高表达,且ER表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移密切有关。     

流式细胞术检测乳腺癌患者血细胞中C-erbB-2表达水平及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血中单个核细胞(PBMC)中C-erbB-2的表达水平及其与肿瘤组织中C-erbB-2、激素受体(ER、PR)表达状态及与病期的相关性。方法采用流式细胞术检测77例乳腺癌患者PBMC中C-erbB-2表达水平并与肿瘤组织中C-erbB-2、激素受体(ER、PR)表达状态及与病期进行比较。结果77例乳腺癌患者PBMC中C-erbB-2检测水平为(24.16±20.81)%。瘤组织中C-erbB-2阳性者的PBMC中的C-erbB-2值(30.69±21.70)%,高于瘤组织C-erbB-2阴性值(17.47±17.48)%,2者有显著性差异(P<0.01)。肿瘤组织中激素受体阴性与阳性者、临床分期Ⅲ~Ⅵ患者与Ⅰ~Ⅱ期患者PBMC的C-erbB-2均值无明显差别(P>0.05)。结论乳腺癌患者PBMC中C-erbB-2的表达水平与瘤组织中C-erbB-2的表达状态密切相关,与病期、瘤组织的激素受体表达状态无关。为进一步用FCM研究外周血中C-erbB-2对预后判断的影响及用于指导治疗提供依据。     

人乳癌细胞小球藻CvFad3基因的表达和作用

目的构建真核表达载体pEGFP-C3-n-3,检测小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3在人乳癌MCF-7细胞中的表达和作用。方法通过RT-PCR法扩增得到CvFad3基因,将CvFad3基因cDNA插入到真核表达载体pEGFP-C3中,构建重组表达载体pEGFP-C3-n-3,并将其转染入MCF-7细胞中,设空载体pEGFP-C3为对照组。采用RT-PCR检测CvFad3基因的表达,MTT法分析CvFad3基因对MCF-7细胞增殖的影响,气相色谱检测CvFad3基因对MCF-7细胞n-3多不饱和脂肪酸含量的影响。结果构建的重组载体pEGFP-C3-n-3转染入乳癌MCF-7细胞48 h后可检测到CvFad3基因mRNA的条带,而转染pEGFP-C3的MCF-7细胞48 h后检测不到CvFad3基因mRNA的条带。与对照组比较,转染pEGFP-C3-n-3的细胞MTT吸光度明显降低（t=6.039,P〈0.01）;人乳癌细胞MCF-7细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的含量显著升高。结论重组载体pEGFP-C3-n-3构建成功,CvFad3基因能在MCF-7细胞内有效异源表达,且抑制了MCF-7细胞的增殖,增加了细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的含量。     

乳腺癌化疗后表阿霉素蓄积水平与C-erbB-2表达的相关性研究

目的研究C-erbB-2基因、ER/PR的表达以及发病年龄与化疗后外周血中单核细胞中表阿霉素(EPI)蓄积水平之间的关系。方法采用流式细胞技术检测60例乳腺癌患者化疗前后体内的EPI含量,观察化疗后患者体内外周血单核细胞中EPI蓄积程度。结果化疗后体内EPI蓄积程度与C-erbB-2基因的表达状态密切相关(P<0.01),C-erbB-2表达阳性的患者化疗后EPI蓄积程度明显增高,而与ER/PR的表达以及发病年龄无明显相关性(P>0.05)。结论C-erbB-2基因表达阳性的患者预示着应用含蒽环类药物化疗后体内药物的蓄积程度较高,通过检测体内药物的蓄积程度可更直观,准确地预测患者对治疗的预期受益程度。     

乳癌组织COX-2、ER和PR蛋白表达及其意义

目的分析环氧化酶-2（COX-2）、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）蛋白在乳癌组织中的表达及其与临床病理特征及生存率的关系。方法采用免疫组织化学和组织芯片技术,检测96例乳癌组织中COX-2、ER和PR蛋白的表达情况,同时检测25例乳腺腺病组织中COX-2蛋白的表达情况。结果乳癌组织中COX-2蛋白的阳性表达率明显高于乳腺腺病的阳性表达率（χ2=24.84,P〈0.01）。乳癌组织中COX-2蛋白的阳性表达率与淋巴结转移明显相关（χ2=7.85,P〈0.01）,与ER、PR蛋白阳性表达率相关（2χ=4.60、5.65,P〈0.05）。乳癌组织中ER与PR蛋白的阳性表达率明显相关（χ2=26.86,P〈0.01）,PR蛋白阳性表达率与病人生存率显著相关（OR=0.74,P〈0.05）。结论 COX-2蛋白表达与乳癌病人的预后有关,而COX-2、PR蛋白是预测病人预后的关键因子之一。     

人类白血病耐药细胞系K562／VCRmdrl及GST表达的研究

建立了一种高度敏感、特异性强并能定量的逆转录／多聚酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测ｍｄｒｌｍＲＮＡ的方法，用该法研究Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞系ｍｄｒｌ基因表达。结果显示Ｋ５６２／ＶＣＲ有较高水平ｍｄｒｌ基因表达（０．８６），而Ｋ５６２／Ｓ未检测到表达。此外，利用酶学方法和点杂交方法在蛋白质和ｍＲＮＡ水平上检测了Ｋ５６２／Ｓ和Ｋ５６２／ＶＣＲ中谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）活性及其基因表达，发现Ｋ５６２／ＶＣＲ中ＧＳＴ活性明显高于Ｋ５６２／Ｓ（Ｐ＜０．００５），且该种活性的增高是由ＧＳＴπ、ＧＳＴμ过度表达引起。     

Reversal effect of substituted 1,3-dimethyl-1H-quinoxalin-2-ones on multidrug resistance in adriamycin-resistant K562/A02 cells

QA1 and QA3 are the derivatives of substituted 1,3-dimethyl-1H-quinoxalin-2-ones that may selectively antagonize P-glycoprotein (P-gp) in multidrug resistance (MDR) cancer cells. Herein, we examined the reversal effect of two compounds on MDR in adriamycin (Adr)-induced resistant K562/A02 cells. MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide) assay showed that QA1 and QA3 weakly inhibited the growth of tumor cells. However, the compounds increased Adr-induced cytotoxicity toward K562/A02 cells. The IC₅₀ values of Adr toward K562/A02 were decreased in the presence of QA1 or QA3. The maximal reversal fold (RF) of QA1 and QA3 was reached 6.9 and 9.0, respectively. The action of QA1 and QA3 was also confirmed by the increase of intracellular Adr accumulation in K562/A02 cells. In mechanism study, the intracellular accumulation and efflux of Rh123 were measured using multilabel counter with excitation/emission wavelengths of 485/535 nm. An increase of intracellular Rh123 and the decrease of efflux were observed in K562/A02 cells incubation with QA1 or QA3, indicating that the activity of P-gp was blocked. These results suggested that the derivatives of substituted 1,3-dimethyl-1H-quinoxalin-2-ones might reverse MDR in K562/A02 cells via inhibition activity of P-gp. QA1 and QA3 might be the candidate agents for reversing MDR of cancer.     

乳腺癌HER-2基因荧光原位杂交检测的临床应用

目的研究荧光原位杂交(FISH)用于乳腺癌HER-2检测的临床应用及HER-2基因扩增与乳腺癌临床病理的相关性。方法应用FISH技术和免疫组化(IHC)技术检测40例乳腺浸润性导管癌石蜡包埋标本,对比分析。结果IHC检测CerbB-2(3+)/(2+)/(1+或0),其FISH阳性率分别为85.7%、50%、5.9%。24例腋窝淋巴结阳性者,其FISH检测HER-2基因扩增10例(P=0.0399)。ER/PR阴性8例,其HER-2基因扩增6例(P0.05)。结论IHC检测HER-2蛋白有很高的假阳性及假阴性,FISH有效性及准确性显著高于IHC,可在临床广泛推广应用。HER-2基因扩增与腋窝淋巴结阳性相关。     

腺苷对心房肌细胞钾钙通道的影响及受体机制

运用膜片钳全细胞记录方式，研究腺着（Ado）及选择性腺着A;受体阻滞剂8-环戊基-1，3-二丙基黄嘌呤（DPCPX）对豚鼠心房肌细胞延迟整流性怀通道电流（IK）和L-型钙通道电流（L－ICA）的影响及受体机制。结果表明：3μmol／LAdo可加强IK，其峰值电流增大（P＜0.01），LK尾电流Ik．tail亦增大，Ik.tail的快、慢失活时间常数均减少。同时Ado可抑制L－ICa，峰值电流减少36.9％．其激活和失活时间常数均增大。Ado对两者的峰值电压、激活电位、反转电位及时间和电压依赖性均无影响。DPCPX可基本消除Ado对IK、L-ICa的作用，表明Ado对心房肌细胞钾、钙通道的影响由A1受体介导实现的。