一起肺鼠疫暴发流行的病原学研究及流行病学分析

[目的]研究一起人间肺鼠疫暴发流行的鼠疫菌分离株其生物学特性、基因特征等。拟从分子流行病学的角度分析传染源和传播关系。[方法]对8株于鼠疫患者(尸体)分离的鼠疫菌进行糖醇类酵解试验;检测其毒力、毒力因子、质粒、生物型、基因型;运用分子流行病学方法分析本次流行的传染源。[结果]8株鼠疫菌全部为甘油+、阿胶糖+、脱氮+,生物型为古典型。具备强毒鼠疫菌的4个毒力决定因子,为FraI+、VW+、PstI+、Pgm+;对小白鼠的最小致死量介于50～1000个菌,为强毒株;具备我国多数鼠疫菌所携带的6、45和65Mdal质粒;基因组型全部为10型。[结论]根据分子流行病学和现场流行病学调查结果证实,此次肺鼠疫暴发流行来自同一个传染源。     

河北省鼠疫自然疫源地鼠疫菌生物学特征的研究概述

为进一步研究河北省鼠疫疫源地的结构和性质,通过查阅大量资料,对该疫源地分离的鼠疫菌株的生物学特征做了总结,分别从生化特征、营养需求、质粒特征、毒力因子、毒力和毒素几方面进行介绍,发现河北省分离的鼠疫菌属于B群鄂尔多斯高原型,营养需求表现为对甘氨酸的半依赖和对色氨酸的营养依赖,含有4种质粒,其中13×106质粒是内蒙古长爪沙鼠疫源地所特有,有的菌株缺失45×106质粒,全部菌株表现为F1抗原和鼠疫菌素（PstⅠ）阳性,而鼠疫菌色素沉着（Pgm）和VW抗原阳性仅占一定比例,表现为遗传的不稳定性,中等毒力。     

2017年河北省分离鼠疫菌的毒力研究

目的研究河北省鼠疫自然疫源地2017年动物鼠疫流行期间,分离的鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)对小白鼠和豚鼠的毒力。方法对小白鼠和豚鼠分组并选取2017年分离的鼠疫菌株(201701、201702、201703)为研究对象。将每株菌37℃培养24~36 h制成菌悬液,比浊7个不同浓度,分组进行腹股沟皮下注射,分笼饲养观察14 d,动物死亡后取腺、肝、脾、肺、心进行细菌培养,死亡动物以分离到鼠疫菌为特异性死亡,分别计算每株鼠疫菌对小白鼠和豚鼠的半数致死量(LD50)。结果3株鼠疫菌中,201702、201703株毒力均较强,对小鼠LD50分别为463.44、56.23;201701株毒力相对较弱,对小鼠LD50为2157.74。3株菌中201703对豚鼠有较强的毒力,LD50为316.23,201701、201702株对豚鼠毒力弱,LD50均为3162.28。结论2017分离的鼠疫菌毒力属于中等毒力,与河北省疫源地以前分离菌株毒力一致。     

鼠疫菌最大质粒的研究进展

鼠疫 ( plague)是全世界普遍存在的自然疫源性疾病 ,曾引起 3次世界大流行。其病原体为鼠疫耶尔森菌 (Yersiniapestis ,简称鼠疫菌 ) ,是一种对人和动物都有强大毒力的细菌。世界各地大部分的鼠疫菌都有 3个质粒 ,分别命名为鼠毒素质粒、低钙反应质粒和鼠疫菌素质粒。其中鼠疫菌素质粒和低钙反应质粒目前研究的比较清楚 ,而鼠疫菌最大的质粒———鼠毒素质粒是目前功能最不清楚的。鼠疫菌的毒力基因在这 3个质粒中都有分布。此外 ,还有一些其他类型的质粒 ,如 2 3× 10 6质粒等。质粒的发现是 2 0世纪 80年代鼠疫研究领域中的重要突破之一 …     

2017年河北长爪沙鼠疫源地鼠疫菌的生态及差异区段分型研究

目的研究2017年河北康保长爪沙鼠疫源地鼠疫耶尔森菌的生态及差异片段(DFR)分型,探讨其流行特征。方法分离培养鼠疫菌,进行糖醇酵解实验以确定生态型;煮沸法提取鼠疫菌DNA,进行23对DFR和PMT1质粒序列PCR扩增,并进行PCR产物电泳分析。结果 3株菌(201701、201702和201703)均发酵甘油,阿胶糖产酸不产气;不发酵麦芽糖,鼠李糖;201701,201702两株菌迟缓发酵蜜二糖,201703不发酵蜜二糖;脱氮均为阴性。201701、201702、201703菌株均缺失DFR位点1、6、7、12、13、15、16、17、18、23。结论 2017年河北省鼠疫菌株生态型为B群鄂尔多斯高原型,差异片段分型为G20型。     

鼠疫耶尔森菌遗传学研究进展

染色体、质粒作为鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的遗传基础,决定着鼠疫菌的生物学特征及致病力.在现有的鼠疫菌全基因组序列中,各型菌株基因组都表现出G+C含量偏差、存在丰富的插入序列、大量的假基因及频繁的基因重组等特征,这些都是鼠疫菌迅速进化的关键.鼠疫菌遗传学通过基因组学、比较和进化基因组学的研究,确定鼠疫菌对人体的毒力因子和致病机制,探索鼠疫菌致病性和进化的遗传学机制,从而为鼠疫的流行监测及疫苗研制等防治工作提供科学的理论依据.     

鼠疫菌质粒研究进展

质粒是细菌染色体外的遗传物质，它不是细菌生命活动所必需的 ,在自然条件下可以自行丢失或经人工处理而消失 ,但可编码很多重要的遗传物质 ,决定鼠疫菌的毒力因子等某些表现型性状。自２０世纪８０年代Ｆｅｒｂｅｒ首先研究鼠疫菌质粒以来 ,已发现了约３０余种质粒。这些质粒与鼠疫菌某些毒力、侵袭力相关 ［１］,并有一定的流行病学意义。本文就鼠疫菌质粒研究进展综述如下。１鼠疫质粒基本图谱李敏 (１９９５年 )将鼠疫菌所含质粒种类大致可分为 ｐＰｓｔ、Ａｐｐｅｎｄｉｃｅｓ、ｐＣａｄ、ｐＦｒａ４种类型。一株鼠疫菌可携带数种质粒 …     

青海高原藏系绵羊鼠疫流行病学和病原学特征分析

目的 分析青海高原藏系绵羊鼠疫流行病学和病原学特征。方法 汇总1975－2009年青海省藏系绵羊鼠疫背景资料,分析其地区、时间和人间分布及感染途径和传播的生态学因素,并对藏系绵羊鼠疫分离的14株菌进行生化试验、毒力测定、毒力因子鉴定、质粒分析、差异片段(DFR)分型等研究。结果 1975－2009年从青海省藏系绵羊体内分离的鼠疫菌共14株。由藏系绵羊作为传染源引起人间鼠疫10起,鼠疫病例25例,死亡13例。首发病例均有剥食鼠疫病死藏羊史,其次为接触鼠疫病例而感染;以腺鼠疫为首发病例,由腺鼠疫继发为肺鼠疫、败血型鼠疫病例多且病死率高。藏系绵羊动物鼠疫及人间鼠疫几乎均发生于甘南生态区,与其独特的生态地理景观密切相关。藏羊动物鼠疫与藏羊引发的人间鼠疫几乎一致,其中11月(旱獭入蛰后)从藏羊体内分离的鼠疫菌株数及藏羊作为传染源引发的人间鼠疫病例数最多,构成了青海高原藏羊鼠疫流行时间明显滞后于旱獭鼠疫的特点。分离的14株鼠疫菌均为青藏高原型,其毒力因子及毒力检测均显示为强毒菌。鼠疫菌基因型DFR分析显示,玉树、治多县分离的菌株均为5型,囊谦县分离的2株菌分别为5型和7型,德令哈市分离的菌株为8型。结论 藏系绵羊可感染鼠疫并作为传染源引发人间鼠疫,分离的菌株均具备青藏高原鼠疫病原体特性,并具有青海鼠疫流行演变新特点。     

新型鼠疫疫源地鼠疫菌毒力试验

鼠疫菌的毒力是决定动物鼠疫流行强度及预测流行阶段的重要标志之一.我们用布氏田鼠和喜马拉雅旱獭菌株做对照,对青海田鼠型3株鼠疫菌进行了毒力测定.     

1995年云南省鼠疫流行区菌株质粒DNA特征

1995年云南省在盈江、普洱、江城、思茅、澜沧、陇川、潞西、耿马、镇康、景谷等 10县 (市 )先后发生鼠疫动物病流行 ,个别县 (市 )波及人间。为了解该年度鼠疫流行相互间的联系以及不同县 (市 )鼠疫菌质粒ＤＮＡ特征。对上述各县(市 )所分离的鼠疫菌中选择 32株具有代表性的菌株及当年分离自孟连境外 3株鼠疫菌进行了质粒检测 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1 1　菌株 1995年分离自云南省流行县 (市 )鼠疫菌代表株共35株。菌株分离地区及编号见表 1。表 1　质粒提取菌株来源县 (市 )菌株号合计思茅 2 1 81 (蚤 )　 2 1 67　 2 1 70　 2 …     

115株鼠疫菌的生物学特性及流行病学研究

目的：研究115株鼠疫菌的生物学特性及与鼠疫动物病流行的关系。方法：生化试验及毒力决定因子测定。结果：由于鼠疫自然疫源地的不同,所分离的鼠疫菌株在表型特征方面存在着相对稳定性的判别,结论：按中国鼠疫菌的生态分型标准,被试菌株属鄂尔多斯高原型。     

鼠疫菌pMT质粒的模块结构及其连接方式

鼠疫的致病菌鼠疫耶尔森菌有3个常见的质粒，编码一系列的毒力因子；其中最大的质粒pMT编码F1抗原和鼠毒素，是鼠疫菌两个比较重要的毒力因子。     

思茅地区鼠疫菌质粒DNA特征

应用琼脂糖凝胶电泳技术，检测了１９９５年分离自云南思茅地区五县市鼠疫菌质粒，结果表明全部菌株除含有已知的６、４５和６５Ｍａｄａｌ３种常规质粒外，还存在１种分子量约为４Ｍｄａｌ的小质粒，该质粒与１９９２年澜沧，勐海，景洪等地流行株质粒特征一致，分析认为：滇西南部地区可能是家鼠疫源地的一个类型思茅地区各县市相继发生的动物鼠疫流行是同属一个自然疫源内的先后复燃。     

鼠疫菌质粒种类功能及在流行病学中的应用进展

鼠疫菌质粒种类功能及在流行病学中的应用进展董兴齐综述俞东征审校自８０年代初发现鼠疫菌质粒以来，国内外众多学者对研究鼠疫菌质粒产生了浓厚的兴趣，近十年有关方面的研究取得了突破性的时展，相继发现了一些新质粒，证实鼠疫菌某些毒力因子受质粒介导。进一步的遗传...     

梁河县鼠疫菌株质粒DNA特征及其流行病学意义

云南省德宏地区是家鼠鼠疫自然疫源地，１９９０年该州梁河县发生动物间鼠疫流行，对分离自梁河县的鼠疫菌质粒ＤＮＡ检测，该县菌株除具有分子量为６、４５和６５Ｍｄａｌ三种规范质粒外，尚存在一种分子量约２３Ｍｄａｌ的新质粒，而历史上分离的菌株和邻县同年分离的菌株不含此质粒。由此特征证实１９９０年分离自梁河县的菌株并非由盈江或其它邻县传入，而是本地固有的疫源性复活。     

河北省鼠疫菌MLVA基因分型

目的研究河北省鼠疫菌株多位点可变数串联重复序列(multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis,MLVA)分型特征,分析其流行病学意义。方法采用MLVA(14+12)分型策略设计引物。利用聚合酶链式反应(PCR)、毛细管电泳方法和Bio Numerics软件,对河北分离的鼠疫菌进行聚类分析。结果在选取的鼠疫菌26个可变数串联重复序列(variable number of tandem repeats,VNTR)位点中,8个VNTR位点对河北省鼠疫菌具有遗传多态性分析意义。河北省鼠疫疫源地分离到的128株鼠疫菌可分为2个群,15个基因型。结论通过MLVA分析显示河北鼠疫菌株具有多态性,基因遗传变异相对稳定,对于未来鼠疫疫情暴发溯源和鼠疫菌种群的研究具有指导意义。     

鼠疫耶尔森氏菌外膜蛋白研究进展

耶尔森氏菌属包括 11个菌种 ,其中只有鼠疫耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌对人致病 ,而其余 8个菌种只对动物致病。致病性耶尔森氏菌的外膜蛋白(yersiniaouter -membranceproteins ,Yops)一直是研究的热点。现将其研究进展综述如下。1　外膜蛋白的种类与基因定位3种对人致病的耶尔森氏菌在对外环境刺激作用反应时分泌一系列毒力因子和毒力辅助因子。现已证实这一系列毒力因子和毒力辅助因子均由大小为 70kb的毒力质粒编码(包括 11种外膜蛋白和V抗原 )。该编码质粒保守且对耶尔森氏菌毒力的发挥至关重要。鼠疫耶尔森氏…     

云南省鼠疫菌质粒特征及地理分布

目的探讨云南省鼠疫菌质粒分子流行病学意义.方法按Kado和Liu法提取云南省44个县市及中缅边境一带共1020株鼠疫菌的质粒,经琼脂糖凝胶电泳进行检测分析.结果云南省鼠疫菌具有相对分子质量(Mr)分别约3.93、6.05、22.97、35.65、45.35、64.82、74.59、111.36和129.55×106的9种质粒,其中3.93、35.65和111.36×106的3种质粒为云南省鼠疫菌特有.按质粒组成可分为10种不同类型的质粒谱,其中Ⅰ～Ⅴ种类型较为常见,且在分布上具有明显的地区集中现象.结论根据鼠疫菌质粒特征,可将云南省自1982年以来发生鼠疫流行的地区划分为多片相对独立的疫源地.认为80年代重新开始的家鼠鼠疫流行,可能来源于多片潜伏的鼠疫自然疫源地的复燃.     

察哈尔丘陵一起鼠疫动物病流行分析

1994年10月至1995年11月,察哈尔丘陵发生鼠疫动物病流行,流行地区涉及2省(区)6县(旗)48个村,总面积3300ｋｍ2。流行期间共分离鼠疫菌300余株。通过对宿主种类、菌株的空间和时间分布的分析,对这次鼠疫动物病流行有一个系统全面的认识,为进一步探索长爪沙鼠(Ｍｅｒｉｏｎｅｓｕｎｇｕｉｃｕｌａｔｕｓ)鼠疫动物病流行规律提供了依据。1　资料来源在鼠疫动物病流行期间,河北、内蒙有关旗(县)对可能有鼠疫动物病流行的地区进行了全面监测,并通过锡林郭勒盟、乌兰察布盟和张家口市鼠疫联防委员会以《疫情通报》通报分菌情况。河北省的菌株分离情…     

青藏铁路沿线鼠疫菌表型性状及对抗生素敏感性的研究

目的检测青藏铁路沿线鼠疫菌表型性状、质粒组成、外膜蛋白种类及对抗生素的敏感性。方法采用常规糖醇发酵管法检测生化等表型性状;采用反向血凝试验、用假结核菌为复盖种子层法、用草酸镁培养基和刚果红色素培养基检测FraI、Pstl、Vwa和Pgm4种毒力因子;用Lawton最小培养基测定营养型;采用常规的动物接种试验测定毒力;采用碱裂解、酚一氯仿抽提法提取鼠疫菌质粒;鼠疫菌经破碎后采取超高速离心法提取外膜蛋白;采用纸片法进行抗生素敏感性试验。结果实验用的青藏铁路沿线鼠疫菌株生化性状表现为甘油＋、鼠李糖一、阿胶糖＋、密二糖一、麦芽糖＋、脱氮＋的特征;具有鼠疫菌荚膜抗原（FraI＋）、毒力抗原（Vwa＋）、鼠疫菌素I（PstI＋）、色素沉着因子（Pgm＋）4种毒力因子;营养型表现为对Trp、Thr、Leu、Arg不依赖,而对Phe、Met、Cys依赖,对Ile和Glu表现出低营养;对小白鼠的LD100在10^2～10^3个菌,LDs。为7．94-31．62个菌,对豚鼠的LD100在10^5～10^7个菌,LD50为68．14-685．49个菌;携带Mr为6×10^6、45×10^6、52×10^6、65×10^6、92×10^6]质粒;在10％的SDS-PAGE上37℃条件下的培养物可表达26条外膜蛋白带,28℃培养物可表达36条外膜蛋白;部分头孢类和喹诺酮类药物对实验菌株的敏感性效果较好,20种抗生素均较链霉素为佳。结论青藏铁路沿线的鼠疫菌属于典型的青藏高原型菌株,都是强毒力鼠疫菌,临床治疗除常规的链霉素外可选用头孢类和喹诺酮类药物,该项研究可为青藏铁路沿线的鼠疫防治提供科学的依据。