木犀草素增强顺铂诱导的人肺癌细胞A549凋亡作用

目的 观察木犀草素与顺铂联合应用诱导体外培养的人肺癌细胞A549凋亡作用及对细胞周期的影响.方法 将木犀草素与顺铂单独及联合作用于A549细胞,AO/EB荧光染料染色,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,Western blotting检测p53蛋白表达情况.结果 木犀草素(40 μmol/L)和顺铂(10 μg/mL)联用组诱导的A549细胞凋亡率和S期阻滞作用均显著强于木犀草素组或顺铂组,Western blotting发现,木犀草素和顺铂联用组p53蛋白水平也明显高于单独木犀草素组或顺铂组.结论 木犀草索能显著增强顺铂诱导的人肺癌细胞A549细胞凋亡和细胞周期阻滞;p53蛋白可能参与调节木犀草索和顺铂联合诱导的肿瘤细胞凋亡.     

白杨素联合顺铂调控JNK磷酸化促进Hep G2细胞凋亡的实验研究

目的研究白杨素联合顺铂对肝癌细胞Hep G2凋亡的影响,并对其分子机制作初步探讨。方法以不同浓度白杨素(10,20,40μmol/L)单独或联合顺铂(5μg/ml)处理Hep G2细胞后,CCK-8法测定细胞活性;Hoechst 33342染色后于荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化;Western blot方法检测凋亡标志蛋白caspase家族及PARP、凋亡抑制蛋白Bcl-2以及c-Jun氨基末端激酶(JNK)的变化情况;分离提取细胞质蛋白,Western blot检测凋亡促进蛋白Bax与细胞色素C的变化情况。结果 CCK-8法测定结果显示白杨素联合顺铂处理HepG2细胞后,细胞活性明显下降,联合作用组与对照组及其他单独处理组比较均有统计学意义(P0.05);形态学观察发现,与对照组比较,白杨素联合顺铂处理Hep G2细胞后,细胞出现凋亡增加,而单独白杨素、顺铂处理组则未观察到明显细胞凋亡;Western blot检测到凋亡标志蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、PARP原蛋白减少;全Caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可明显抑制联合处理引起的细胞凋亡,阻止caspase家族及PARP的活化降解;白杨素联合顺铂处理细胞后能恢复顺铂单独处理引起的凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达上调并且激活JNK1蛋白;Western blot检测细胞质蛋白在联合处理后凋亡促进蛋白Bax与细胞色素C表达明显上调。结论白杨素和低剂量顺铂单独用药对Hep G2细胞无明显影响,但联合用药能促进Hep G2细胞凋亡,其机制为JNK1磷酸化、激活JNK通路使促凋亡分子Bax和细胞色素C的释放从而引起细胞凋亡。     

紫草素对人肝癌HepG2细胞顺铂增敏作用的研究

目的研究紫草素对人肝癌HepG2细胞顺铂增敏作用并初探其可能的作用机制。方法取对数生长期人肝癌HepG2细胞,设空白对照组、紫草素(0.5μg/ml)组、顺铂(40μg/ml)组和联合(紫草素0.5μg/ml+顺铂40μg/ml)组,均设10个复孔;检测细胞增殖抑制率,细胞周期和细胞凋亡状况,Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达,caspase-3蛋白表达。结果与顺铂组比较,联合干预组HepG2细胞增殖抑制率显著升高,细胞周期G_0/G_1期显著延长,细胞凋亡率显著升高,Bax/bcl-2比值显著升高,caspase-3蛋白表达上调。结论紫草素具有提高人肝癌HepG2细胞顺铂敏感性的作用,其机制可能与紫草素阻滞细胞周期及调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

基于Keap1/Nrf2通路介导的自噬探讨紫草素对膀胱上皮癌BUC细胞化疗敏感性的影响

目的基于Kelch样ECH相关蛋白1/核因子E2相关因子2(Kelch-likeECH-associated protein-1/nuclearfactor E2-related factor 2,Keap1/Nrf2)通路介导的自噬探讨紫草素对膀胱上皮癌BUC细胞化疗敏感性的影响。方法体外培养人BUC细胞BIU-87,CCK-8法检测不同质量浓度(10、20、40、80、160μg/mL)顺铂和不同浓度(2、4、8、16、32μmol/L)紫草素+顺铂(40μg/mL)对BIU-87细胞增殖的影响。细胞转染实验,设置对照组、顺铂组(40μg/mL)、紫草素组(40μg/mL顺铂+8μmol/L紫草素)和NC组(转染negative control-Nrf2+40μg/mL顺铂+8μmol/L紫草素)和Nrf2组(转染hsa-Nrf2mimic+40μg/mL顺铂+8μmol/L紫草素),实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测转染后BIU-87细胞中Nrf2 mRNA表达情况;CCK-8法检测各组BIU-87细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组BIU-87细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测BIU-87细胞中Keap1、Nrf2、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)?、LC3II蛋白表达情况。结果与对照组相比,10、20、40、80、160μg/mL顺铂可显著抑制BIU-87细胞增殖(P0.05);2、4、8、16、32μmol/L紫草素联合顺铂可显著抑制BIU-87细胞增殖(P0.05)。细胞转染实验中,与对照组相比,顺铂组BIU-87细胞增殖抑制率、凋亡率、细胞中Nrf2和LC3II蛋白表达水平显著升高,细胞中Keap1、LC3?蛋白表达水平显著降低(P0.05);与顺铂组相比,紫草素组BIU-87细胞增殖抑制率、凋亡率、细胞中Keap1和LC3?蛋白表达水平显著升高,Nrf2和LC3II蛋白表达水平显著降低(P0.05);紫草素组、NC组以上指标差异不具有统计学意义(P0.05);与NC组相比,Nrf2组BIU-87细胞增殖抑制率、凋亡率、细胞中Keap1、LC3?蛋白表达水平显著降低,Nrf2蛋白和mR NA及LC3II蛋白表达水平显著升高(P0.05)。结论紫草素可能通过抑制Keap1/Nrf2通路介导的自噬反应,增强BUC细胞BIU-87对顺铂的敏感性。     

川楝素诱导K562细胞凋亡及其与自噬关系的体外研究

目的 研究川楝素诱导人慢性髓系白血病K562细胞发生凋亡,并探讨凋亡与自噬的关系.方法 采用MTT比色法,检测不同浓度川楝素对K562细胞增殖抑制率的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率,透射电镜观察K562细胞超微结构的改变,免疫细胞化学法检测蛋白Apaf-1、LC3-Ⅱ的表达.结果 川楝素对K562细胞有明显增殖抑制作用,呈时间和浓度依赖性(P＜0.01).50nmol/L川楝素处理细胞72h后,K562细胞早期凋亡率为54.20％,与川楝素处理组相比,3-MlA预处理组,凋亡率为68.30％.透射电镜下可见典型的凋亡小体和自噬体.免疫细胞化学法结果显示,K562细胞Apaf-1、LC3-Ⅱ蛋白表达较对照组增强(P＜0.01).结论 川楝素能够有效诱导K562细胞同时发生凋亡和自噬性死亡,当阻断自噬的发生,加速了凋亡的进程,在此过程中Apaf-1、LC3-Ⅱ蛋白上调.     

灯盏花素对肾损害小鼠肾组织细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的:观察灯盏花素对顺铂致小鼠肾损害肾组织细胞凋亡及相关蛋白的影响。方法:将昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、灯盏花素25,50 mg.kg-1组。除对照组外,其余各组腹腔注射顺铂8 mg.kg-1制备小鼠肾损害模型,灯盏花素组分别灌胃给药,连续7 d。给药结束后收集小鼠尿液进行尿蛋白(Upr)/尿肌酐(Ucr)及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG-U)测定。原位末端标记法(TUNEL)检测小鼠肾脏细胞凋亡状况,免疫组化法检测肾脏相关凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:模型组小鼠Upr/Ucr及NAG-U较对照组明显升高,肾组织的凋亡指数增加,肾组织细胞凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达增强,Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05,P<0.01),而2个灯盏花素实验组Upr/Ucr、NAG-U较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01),其中灯盏花素50 mg.kg-1小鼠较模型组肾组织细胞凋亡指数、Bax表达、Bax/Bcl-2减少,Bcl-2的表达增强(P<0.05,P<0.01)。结论:Upr/Ucr与NAG-U可作为顺铂肾损害的评估指标。灯盏花素减轻顺铂肾损害的机制可能与增强凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,降低Bax表达及Bax/Bcl-2的比值有关。     

竹节香附素A的体外抗肿瘤活性研究

目的:研究两头尖中主要有效成分竹节香附素A的体外抗肿瘤活性,为两头尖抗肿瘤有效成分竹节香附素A的创新药物研究提供科学依据。方法:采用体外MTT法,研究竹节香附素A对人体LAX肺癌、QGY-7703肝癌、Bre-04乳腺癌、Col-6肠癌及L929小鼠成纤维细胞株的增殖抑制作用;考察竹节香附素A对QGY-7703和L929细胞增殖抑制的量-效和时-效关系。采用流式细胞仪研究竹节香附素A对QGY-7703肿瘤细胞的诱导凋亡作用。结果:竹节香附素A对QGY-7703和L929细胞具有显著的抑制增殖作用,且其增殖抑制作用与药物给药浓度、给药时间呈现明显的量效和时效关系。竹节香附素A作用48小时后,对肝癌QGY-7703、肺癌LAX、乳腺癌Bre-04、肠癌Col-6和小鼠成纤维L929五种肿瘤细胞均具有抑制增殖作用,IC50分别为:5.09μg/ml,11.48μg/ml,9.32μg/ml,11.22μg/ml,12.71μg/ml,顺铂的IC50为:5.27μg/ml,6.04μg/ml,6.23μg/ml,6.78μg/ml和9.75μg/ml,其中竹节香附素A对QGY-7703细胞增殖抑制作用最强,作用强度略高于顺铂。竹节香附素A可以显著诱导QGY-7703细胞凋亡,给药剂量的增加,凋亡细胞比例增大。竹节香附素A低剂量(1μg/ml)给药,QGY-7703细胞的凋亡率为19.78%高于顺铂(2μg/ml)给药的细胞凋亡率12.68%,竹节香附素A给药(50μg/ml)24h细胞凋亡率达到67.29%。结论:首次系统研究了竹节香附素A的体外抗肿瘤活性,竹节香附素A体外对QGY-7703具有显著的抑制作用,进而发挥诱导QGY-7703凋亡的生物活性。     

虫草素通过抑制NF-κB途径增强A549细胞对顺铂的敏感性

 目的 通过研究虫草素和顺铂单用或联用对肺癌细胞A549的抗肿瘤效应,探讨其可能的作用机制,为临床肿瘤治疗提供新思路。方法 四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的虫草素与顺铂单用或虫草素与顺铂(3 μg·mL^-1)联用对A549的增殖抑制作用,并计算IC₅₀;采用Hoechst 33258染色法及流式细胞术检测虫草素与顺铂单用或联用诱导A549细胞凋亡情况;Western blot法检测不同处理组的细胞核内NF-κBp65及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果 虫草素与顺铂联用对A549细胞的抑制作用显著增加,增强了顺铂对A549的敏感性; Hoechst 33258染色及流式细胞术显示,与虫草素和顺铂单独用药相比,联合用药能够明显增加顺铂诱导的细胞凋亡;Western blot结果显示,与对照组相比顺铂能够增加细胞核内NF-κBp65的活性,然而虫草素却能抑制NF-κBp65的活性,联合用药后NF-κBp65的活性明显下调;与顺铂单独用药相比,联合用药组能够使促凋亡蛋白Bax表达显著增高,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达则降低。结论 虫草素能够增强顺铂对肺癌细胞A549的敏感性,其作用机制是通过抑制NF-κB途径,调节下游信号分子 Bax和Bcl-2的表达而实现。     

水蛭素通过PI3K/Akt信号通路抑制卵巢癌细胞增殖的机制研究

目的：探讨水蛭素抑制卵巢癌的潜在分子机制。方法：培养卵巢癌SKOV3细胞株，将其分为空白组、水蛭素组、顺铂组、水蛭素+顺铂组，通过CCK-8法确定水蛭素的最佳抑制浓度，免疫组化评估各组PI3K/Akt通路相关因子的表达情况，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，通过Western blot法检测水蛭素对癌细胞IL-1及PI3K-Akt信号通路中相关蛋白表达量的影响。结果：水蛭素能明显降低卵巢癌SKOV3细胞组织中IL-1水平，水蛭素组、顺铂组及水蛭素+顺铂组诱导人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡(P<0.05),下调了PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平(P<0.01),且水蛭素+顺铂组的p-PI3K、p-Akt蛋白表达下调最为明显。结论：水蛭素对卵巢癌有抑制作用，其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。本研究为进一步深入阐释水蛭素抗卵巢癌机制提供了研究基础。     

紫草素对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究紫草素(shikonin)对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞作用。方法:对宫颈癌Caski细胞进行HPV病毒基因鉴定,将紫草素配成不同浓度(0、5、10、20、40、80μmol·L~(-1))作用于体外培养的宫颈癌Caski细胞,用MTT方法检测不同浓度紫草素作用不同时间(12 h、24 h、36 h)后对Caski细胞增殖能力的影响;采用Annexin V/PI试剂染色不同浓度紫草素(5、10、20、40μmol·L~(-1))作用24 h后的宫颈癌Caski细胞,上流式细胞仪观察细胞凋亡改变;用DAPI染色观察5、10、20、40μmol·L~(-1)紫草素作用于Caski细胞24 h后的凋亡形态学变化。结果:紫草素对宫颈癌Caski细胞具有抑制增殖、促进凋亡作用,在一定范围内,随着浓度和时间增加,抑制增殖作用逐渐增加;凋亡数目逐渐增多,其中20、40μmol·L~(-1)的紫草素可明显抑制细胞增殖并诱导其凋亡,DAPI染色可观察到典型的细胞凋亡改变:细胞核碎裂、固缩;且细胞凋亡现象随紫草素浓度增加而愈加明显。结论:紫草素可抑制感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖并促进其凋亡。     

黄芩苷通过增强自噬介导顺铂对宫颈癌C-33A/cis细胞敏感性的影响

目的:探究黄芩苷对顺铂耐受的宫颈癌C-33A细胞(C-33A/cis)顺铂化疗敏感性的影响,并初步探究其分子机制。方法:使用不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A细胞和C-33A/cis细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,CCK-8法检测细胞增殖情况。使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同30μmol/L顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,自噬特征蛋白MAPLC3II/MAPLC3I比例评价细胞自噬水平;实时定量PCR检测自噬相关基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达。结果:顺铂对C-33A细胞的IC50值为28.32μmol/L,对C-33A/ci细胞的IC50值为78.95μmol/L,C-33A/cis细胞耐药指数为2.79; 20、40μmol/L黄芩苷协同10、30μmol/L顺铂时,对C-33A/cis细胞的抑制率明显高于顺铂单用组; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞MAPLC3II/MAPLC3I比值明显高于顺铂单用组,自噬水平明显提高; 30μmol/L顺铂作用时,C-33A细胞与C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达没有明显差别; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达均高于顺铂单用组。结论:黄芩苷能明显增强宫颈癌C-33A细胞对顺铂化疗敏感性,其机制与增强细胞自噬水平有关。     

十全大补汤多糖成分抑瘤及免疫调节作用的初步研究

目的:研究十全大补汤总多糖抗肿瘤及对脾细胞功能的调节作用。方法:40只昆明种小鼠,以皮下接种H22细胞的方法制备荷瘤小鼠模型,24 h后随机分为5组,即阴性对照组、顺铂(1 mg/kg)化疗组、顺铂联合高(168.4 mg/m L)、中(84.2 mg/m L)、低(42.1 mg/m L)剂量十全大补汤总多糖组。十全大补汤总多糖采取灌胃给药,0.5 m L/只,1次/d,10 d后眼球放血处死小鼠,称取体质量和瘤质量,计算抑瘤率;分离血清,并分别制备肿瘤细胞和脾细胞悬液,流式细胞仪检测肿瘤细胞和脾细胞的凋亡;ELISA法检测血清中IL-2,IFN-γ和TNF-α含量。结果:顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组小鼠体质量均高于单纯顺铂组,而中、高剂量多糖组的瘤质量均低于单纯顺铂组;顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组肿瘤细胞的凋亡率明显高于单纯顺铂组,而脾细胞的凋亡率均明显又低于单纯顺铂组(P0.05);顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组IL-2,IFN-γ和TNF-α的分泌水平均明显高于单纯顺铂组(P0.05)。结论:十全大补汤总多糖可促进顺铂诱导肿瘤细胞凋亡,并能保护顺铂对脾细胞的损伤作用、促进荷瘤小鼠IL-2,IFN-γ和TNF-α的分泌,与顺铂联合应用具有减毒增效作用。     

黄芩苷通过增强自噬介导顺铂对宫颈癌C-33A/cis细胞敏感性的影响北大核心CSCD

目的:探究黄芩苷对顺铂耐受的宫颈癌C-33A细胞(C-33A/cis)顺铂化疗敏感性的影响,并初步探究其分子机制。方法:使用不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A细胞和C-33A/cis细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同不同浓度(10、30、100μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,CCK-8法检测细胞增殖情况。使用不同浓度(20、40μmol/L)黄芩苷协同30μmol/L顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,自噬特征蛋白MAPLC3II/MAPLC3I比例评价细胞自噬水平;实时定量PCR检测自噬相关基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达。结果:顺铂对C-33A细胞的IC50值为28.32μmol/L,对C-33A/ci细胞的IC50值为78.95μmol/L,C-33A/cis细胞耐药指数为2.79; 20、40μmol/L黄芩苷协同10、30μmol/L顺铂时,对C-33A/cis细胞的抑制率明显高于顺铂单用组; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞MAPLC3II/MAPLC3I比值明显高于顺铂单用组,自噬水平明显提高; 30μmol/L顺铂作用时,C-33A细胞与C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达没有明显差别; 20、40μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达均高于顺铂单用组。结论:黄芩苷能明显增强宫颈癌C-33A细胞对顺铂化疗敏感性,其机制与增强细胞自噬水平有关。     

消癌解毒方联合顺铂通过调控组蛋白去甲基化酶抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长

目的:观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法:BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂(2 mg·kg-1)、消癌解毒方(1×104mg·kg-1)及两者联合用药进行治疗,给药期间称量并记录小鼠体质量和瘤体积,15 d后脱颈处死,剥离并称量瘤块质量,计算抑瘤率,苏木素-伊红(HE)染色观察心、肝、脾、肾和瘤块的病理情况,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察肿瘤细胞凋亡情况并统计凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),组蛋白去甲基化酶1(LSD1),组蛋白H3(Histone H3),组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化(Histone H3K4me2),组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(Histone H3K9me2)的表达水平。结果:与模型组相比,顺铂给药组小鼠体质量均有下降,其中消癌解毒方+顺铂组较单用顺铂组体质量增加(P0.01);消癌解毒方+顺铂较单用顺铂更能缩小移植瘤体积,提高抑瘤率(P0.01);更明显提高了肿瘤细胞凋亡率(P0.05,P0.01);更明显下调肿瘤组织Bcl-2表达水平,上调Bax表达水平(P0.05,P0.01);各给药组均能下调LSD1蛋白的表达,增加组蛋白H3K4,H3K9的二甲基化,消癌解毒方+顺铂组作用最为明显(P0.05,P0.01)。结论:消癌解毒方+顺铂用药对于4T1荷瘤小鼠抑瘤作用明显,其机制可能与下调组蛋白去甲基化酶水平有关。     

参芪扶正注射液通过肿瘤相关巨噬细胞提高人乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂的敏感性

目的:观察参芪扶正注射液通过免疫调节提高顺铂化疗的敏感性,并探讨其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定参芪扶正注射液1,10,100 m L·L^-1对细胞的敏感性,流式细胞法检测细胞凋亡率,酶联免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子表达水平。结果:参芪扶正注射液能显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231与THP-1共培养细胞生长,参芪扶正注射液10,100 m L·L^-1时,其细胞存活率分别为71.8%,59.9%;参芪扶正注射液10 m L·L^-1与顺铂联合运用,提高了共培养细胞对顺铂的敏感性,顺铂的半数抑制浓度(IC50)由30μmol·L^-1降低至15μmol·L^-1;联合运用参芪扶正注射液10 m L·L^-1和顺铂,比15μmol·L^-1顺铂诱导的细胞凋亡率增加了15.5%(P<0.05);联合用药均能明显抑制B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-w(Bcl-w)和细胞外大淋巴瘤(Bcl-xl)的表达,增加Bcl-2相关X蛋白(Bax)和人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)的表达(P<0.05);参芪扶正注射液降低顺铂诱导的白细胞介素-10(IL^-10)和前列腺素E2(PGE2)的释放(P<0.05)。结论:参芪扶正注射液通过调节免疫细胞改善了乳腺癌细胞MDA-MB-231对顺铂的敏感性,起到协同抑制肿瘤细胞增殖的作用。该研究为益气扶正防治肿瘤提供实验依据,为中医药缓解肿瘤耐药研究提供实验参考。     

食道通结方对食管癌细胞株TE-1增殖和凋亡的影响

目的观察具有理气化痰功效的食道通结方对食管癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法利用SD大鼠制备食道通结方含药血清,以食管癌TE-1细胞株为观察对象,用MTT法筛选合适的含药血清浓度;再用含药血清、顺铂和含药血清+顺铂分别作用于TE-1细胞株。采用MTT检测各组肿瘤细胞的生长情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡情况,Western印迹法检测各组凋亡相关蛋白(p-Akt、Akt、P53、Bcl-2、Bax、Caspase3)的表达。结果①确定20%的含药血清为最佳含药血清浓度。②含药血清组、顺铂组和含药血清+顺铂组细胞增殖抑制率均随干预时间的延长(0 h,12 h,24 h,48 h)而增加,48 h时的细胞增殖抑制率最高,分别为30.9%、35.4%和50.6%,组间差异有统计学意义(P0.01)。③与对照组比较,顺铂组和含药血清+顺铂组G1期细胞比例增高(P0.01),含药血清组和含药血清+顺铂组G2期细胞比例降低(P0.05);含药血清+顺铂组G1期细胞比例高于顺铂组和含药血清组,差异有统计学意义(P0.01)。④12 h、24 h组内比较,各组细胞凋亡指数差异均有统计学意义(P0.01);与对照组各观察时点比较,顺铂组、含药血清组和含药血清+顺铂组细胞凋亡指数均明显增加(P0.01);顺铂组、含药血清+顺铂组各观察时点细胞凋亡指数均高于含药血清组(P0.01),含药血清+顺铂组各观察时点细胞凋亡指数高于顺铂组(P0.01)。⑤与对照组比较,顺铂组、含药血清组和含药血清+顺铂组中p-Akt、Bcl-2表达明显下降(P0.01),P53、Bax、Caspase3表达显著增加(P0.01)。结论食道通结方含药血清对食管癌TE-1细胞株的增殖和生长有一定的抑制作用,能够促进细胞凋亡,与顺铂联合后具有较为明显的协同作用。     

紫杉醇联合顺铂治疗局部晚期宫颈癌29例临床观察

目的:观察局部晚期宫颈癌采用紫杉醇联合顺铂辅助化疗治疗的临床效果。方法:选取58例局部晚期宫颈癌患者,对比分析单纯手术(对照组)与紫杉醇联合顺铂实施新辅助化疗(观察组)治疗效果以及不良反应发生情况。结果:观察组治疗效果明显高于对照组,观察组出现轻微不良反应,给予对症治疗后病情明显改善。结论:给予局部晚期宫颈癌患者采用紫杉醇联合顺铂辅助化疗治疗,可显著提高患者生命质量。     

基于AKT信号通路探讨紫草素对宫颈癌细胞凋亡及Cyclin-D1蛋白表达的影响

目的:研究紫草素激活AKT信号通路对宫颈癌细胞凋亡及Cyclin-D1蛋白表达的影响.方法:将宫颈癌海拉(Hela)细胞接种于DEME培养基中,根据分组,加入不同浓度的紫草素细胞培养液进行培养.分别测定培养24、48、72 h后空白组、低浓度组、中浓度组及高浓度组细胞凋亡率.另采用实时荧光定量PCR技术及Western...     

癌宁诱导入胃腺癌细胞SGC-7901凋亡的形态学变化及末端标记

目的:探索癌宁对人胃癌细胞的诱导凋亡作用。方法:采用体外细胞培养技术,通过形态学、分子生物学方法,对中药复方癌宁和顺铂诱导胃癌细胞凋亡进行了深入研究。结果:经癌宁及顺铂处理后的细胞出现凋亡形态学改变;癌宁在1 g/L浓度对细胞的凋亡诱导率是46.36％,与25 mg/L顺铂对细胞的凋亡诱导率49.12％间无显著差异(P>0.05),两者均与空白对照组有显著差异(P<0.01)。结论:癌宁及顺铂对人胃癌细胞具有诱导凋亡作用,中药复方癌宁可望成为一种有前途的新的癌细胞凋亡诱导剂。     

六味地黄醇提物联合顺铂对人肝癌BEL-7402细胞凋亡和肿瘤血管生成因子的影响

目的:探讨六味地黄醇提物联合顺铂对人肝癌BEL-7402细胞凋亡及肿瘤血管生成的影响。方法:体外培养BEL-7402细胞,以不同质量浓度的六味地黄醇提物作用于细胞,CCK-8法检测其对细胞生长的影响,选择后续实验浓度。将BEL-7402细胞分为正常对照组、六味地黄醇提物100 mg/ml组、顺铂1 mg/ml组、六味地黄醇提物100 mg/ml+顺铂1 mg/ml组。CCK-8法检测细胞增殖抑制率,细胞成像分析系统观察BEL-7402细胞形态学变化,Hoechst染色法观察细胞凋亡现象,免疫荧光法检测肿瘤血管生成相关因子:血管内皮生长因子(VEGF)、促血管生成素-2(Ang-2)、血小板反应素(TSP)、金属蛋白酶-2组织抑制因子(TIMP-2)蛋白表达水平的影响。结果:六味地黄丸醇提物能呈剂量依赖性地抑制BEL-7402细胞活性,选择100 mg/ml用于后续实验。与正常对照组比较,各用药组细胞抑制率均明显升高;细胞胞质回缩,漂浮的死细胞增多;胞核偏于一侧,染色质浓染,呈马蹄形或月牙状的典型凋亡特征;细胞内VEGF、Ang-2蛋白表达明显降低,而TSP、TIMP-2蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。与顺铂1 mg/ml组和六味地黄醇提物100 mg/kg组比较,顺铂1 mg/ml+六味地黄醇提物100 mg/ml组更能明显抑制BEL-7402细胞增殖;细胞内VEGF、Ang-2蛋白表达明显降低,而TSP、TIMP-2蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:六味地黄醇提物及其联合顺铂能诱导BEL-7402细胞凋亡,并可能通过下调细胞内肿瘤血管相关VEGF、Ang-2蛋白表达、上调TSP、TIMP-2蛋白表达增强对BEL-7402细胞的抑制作用。