余甘子提取物对幼鼠非酒精性脂肪肝病的防治作用

目的探讨余甘子提取物对高脂饮食诱导幼鼠非酒精性脂肪肝病的防治作用。方法 48只3周龄SD大鼠随机分为对照组、造模组、二甲双胍组和余甘子提取物低、中、高剂量组。对照组进食普通饲料,其余组进食高脂饲料,每日定时灌胃:二甲双胍组予二甲双胍混悬液250 mg/kg,低、中、高剂量组分别予余甘子提取物250、500和1 000 mg/kg,对照组、造模组予等量生理盐水,饲养及给药6周。检测:①体质量、肝重,计算肝指数;②测血清AST、ALT、TG、LDL、GLU、CHO、INS含量,计算HOMA-IR指数;③HE染色观察肝组织病理形态,进行NAS评分。结果造模组体质量、肝重、ALT、AST、CHO高于对照组,中、高剂量组体质量低于造模组,差异有统计学意义(P0.05)。低剂量组ALT、AST、CHO低于造模组(P0.05),中剂量组ALT、AST、CHO、LDL低于造模组(P0.05),高剂量组ALT、AST、CHO低于造模组(P0.01)。各剂量组NAS分值较造模组下降(P0.05),肝细胞脂肪变有改善。结论余甘子提取物可减轻高脂饲料诱导的幼鼠肝脂肪变病变程度,改善肝功能,起到防治作用。     

马齿苋对非酒精性脂肪肝小鼠的肝脏保护作用及对脂代谢的影响

目的:分析马齿苋对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠的肝脏保护作用及对脂代谢的影响.方法:选取健康雄性小鼠50只,按照体重随机分为对照组、模型组、马齿苋药物低、中、高剂量组五组,各10只,模型组及各剂量组以高脂饲料喂养16周造模;建模成功后,低、中、高剂...     

能量代谢在巨噬细胞极化促进非酒精性脂肪肝病中的作用

巨噬细胞极化参与非酒精性脂肪肝病（NAFLD）相关炎症与纤维化形成。由于肝脏微环境糖、脂质、氨基酸代谢等能量代谢差异,NAFLD不同时期巨噬细胞极化偏倚不尽相同,分泌细胞因子并促进NAFLD进展。该文介绍肝脏巨噬细胞极化在NAFLD进展期的特点,并从糖、脂类、氨基酸代谢综述巨噬细胞极化参与肝脏疾病发生的机制,以期为靶向巨噬细胞能量代谢治疗NAFLD的策略提供依据。     

肠道菌群与非酒精性脂肪肝病相关性研究进展

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病机制尚未完全阐明,目前广为接受的是“二次打击”学说,近年来关于肠道菌群与NAFLD的研究不断深入,充实和发展了“二次打击”学说,也为NAFLD的治疗提供了新思路。本文就肠道菌群与NAFLD相关性的研究进展及益生元、益生菌治疗NAFLD进展进行综述。     

非酒精性脂肪肝病模型小鼠的肝脏病理变化及肝细胞获取方法

目的 检测非酒精性脂肪肝病（NAFLD）模型小鼠的肝脏病理变化,并探索一种获得大量高活性、高纯度的NAFLD小鼠原代肝细胞的实验方法。方法 60只小鼠随机分为正常组（正常饲料,CD）和高脂组（高脂饲料,HFD）,分饮食饲养20周。定期检测小鼠的体质量,苏木精-伊红（HE）染色和天狼猩红染色观察肝脏组织病理特点。高脂饮食15周时,原位灌注Ⅳ型胶原酶6～8 mL消化得到混合肝细胞,铺于40%的Percoll分离液上,进行密度梯度离心获得纯化的肝细胞,锥虫蓝染色确定细胞的活性,显微镜观察其形态。结果 随着建模时间的延长,HFD组小鼠的体质量逐渐增加,且增幅显著高于CD组;HFD组小鼠肝脏脂肪变性程度增加,在第20周伴随出现了纤维化;建模15周时,每只NAFLD小鼠可获得5×10⁷～7×10⁷个肝细胞,细胞存活率≥85%,细胞纯度≥95%,细胞呈圆形或椭圆形,其边缘平滑,且聚团少;通过精准控制温度、降低胶原酶浓度、使用低速离心和低速密度梯度离心等优化条件后,获得的细胞数量和质量均有显著提高。结论 成功构建了NAFLD小鼠模型,并揭示了不同疾病阶段肝脏...     

非酒精性脂肪肝病与代谢综合征的关系分析

目的探讨代谢综合征对非酒精性脂肪肝病的作用和关系。方法对2010年3月~2012年12月在我院进行健康体检的880名男性进行横断面调查分析。结果我们的研究显示非酒精性脂肪肝病(Non alcoholic fatty liver disease,NAFLD)和代谢综合征(Metabolic Syndrome,MetS)的发病率分别是18.1%和17.3%,并且发病率随年龄增加有上升趋势,非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的发病率随代谢综合征异常成分数量的增加而升高。结论在男性人群中,代谢综合征是非酒精性脂肪肝病的一个潜在危险因素     

载脂蛋白A-Ⅰ模拟肽对非酒精性脂肪肝病大鼠糖脂代谢的影响

目的:探讨载脂蛋白A-Ⅰ (apoA-Ⅰ)模拟肽对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠糖脂代谢的影响及其可能的机制.方法:50只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为空白组(n=13)和造模组(n=37),空白组大鼠给予普通饲料饲养,造模组大鼠给予高脂饲料喂养,连续喂养12周,每组随机取1只大鼠评估NAFLD模型是否成功.造模组...     

马齿苋总黄酮改善小鼠非酒精性脂肪肝的作用

为探讨马齿苋总黄酮(portulaca oleracea total flavones,POTF)对昆明小鼠的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)脂质代谢异常、氧化应激及炎症反应的影响,将小鼠随机分为5组:对照组、NAFLD组、POTF 2.5 mg/kg组、...     

姜黄素激活自噬干预非酒精性脂肪肝病模型大鼠氧化应激及炎症反应

背景:自噬、氧化应激及炎症反应在非酒精性脂肪肝病中扮演重要角色,姜黄素具有调节自噬、氧化应激及炎症反应等生物活性。目的:探讨姜黄素对非酒精性脂肪肝病大鼠模型保护作用以及机制研究。方法:高糖高脂饮食8周建立非酒精性脂肪肝病大鼠模型,将40只SD大鼠分成对照组、模型组、姜黄素治疗组、姜黄素+3-甲基腺嘌呤组。在第8周末开始干预,对照组和模型组给予PBS灌胃,姜黄素组给予姜黄素500 mg/(kg·d)灌胃,姜黄素+3-甲基腺嘌呤组给予姜黄素500 mg/(kg·d)灌胃及2 mg/(kg·d)自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤腹腔注射,干预8周。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶及总三酰甘油、总胆固醇、空腹血糖浓度;油红O染色观察各组大鼠肝内细胞脂滴分布,透射电镜观察肝细胞线粒体超微结构;采用硫代巴比妥酸法及黄嘌呤氧化酶法测定丙二醛及超氧化物歧化酶活性;Western blot检测自噬及炎症相关蛋白P62、LC3Ⅱ、Beclin-1、NF-κB的表达。实验方案经武汉大学人民医院动物实验伦理委员会批准(批准号2018-541)。结果与结论:①大鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶及总三酰甘油、总胆固醇水平:模型组均高于对照组(P<0.05),姜黄素治疗组显著低于模型组(P<0.05),姜黄素+3-甲基腺嘌呤组高于姜黄素治疗组但低于模型组(均<0.05);②细胞脂质沉积:模型组明显多于对照组;姜黄素治疗组明显少于模型组,姜黄素+3-甲基腺嘌呤组明显高于姜黄素治疗组但低于模型组;③透射电镜观察发现对照组未见明显线粒体损伤,模型组线粒体明显水肿,嵴断裂或消失等,姜黄素可显著缓解线粒体损伤,姜黄素+3-甲基腺嘌呤组对线粒体损失在模型组及姜黄素之间;④肝组织内超氧化物歧化酶水平:模型组显著低于对照组,姜黄素治疗组显著高于模型组,姜黄素+3-甲基腺嘌呤组显著低于姜黄素治疗组但高于模型组;⑤肝组织丙二醛水平:模型组显著高于对照组,姜黄素治疗组显著低于模型组,姜黄素+3-甲基腺嘌呤组显著高于姜黄素治疗组但低于模型组;⑥Western blot检测:与对照组相比,模型组肝组织P62、NF-κB蛋白表达均增加,而Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均降低(P均<0.05),经姜黄素治疗后P62、NF-κB蛋白表达均降低,而Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ增加;姜黄素+3-甲基腺嘌呤组P62、NF-κB蛋白表达均低于模型组但高于姜黄素组,而Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ高于模型组但低于姜黄素组,差异均有显著性意义(P均<0.05);⑦结果说明,姜黄素通过激活自噬调节炎症反应及氧化应激而改善非酒精脂肪肝病大鼠模型脂肪变性。     

柴胡疏肝散对NAFLD大鼠肝脏脂质代谢及AMPK/SIRT1通路的影响

 目的: 观察柴胡疏肝散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织脂质代谢和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/sirtuin 1(SIRT1)通路相关蛋白的影响。方法: 选用SPF级SD大鼠24只,随机分为正常(NC)组、高脂(HFD)组和柴胡疏肝散(CSP)组,每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,用药组大鼠同时灌服柴胡疏肝散浸膏剂(9.6 g·kg^-1·d^-1)进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清和肝匀浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)含量;HE染色观察肝组织病理损伤变化;油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度,透射电镜观察肝细胞内超微结构变化;Western blot法检测肝组织AMPK、磷酸化AMPK(pAMPK)、SIRT1和解偶联蛋白2(UCP2)的蛋白水平。结果: 大鼠肝组织HE染色、油红O染色和电镜结果证实肝细胞脂质蓄积严重,提示NAFLD大鼠模型建立成功。与NC组比较,HFD组血清和肝组织匀浆TC、TG含量显著升高(P < 0.01),血清AST含量显著升高(P < 0.01),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著降低(P < 0.01),UCP2蛋白水平显著升高(P < 0.01);与HFD组比较,CSP组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善,血清和肝匀浆TC和TG含量呈下降趋势,其中肝匀浆TC和TG含量下降显著(P < 0.05),血清AST含量显著降低(P < 0.05),肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),UCP2蛋白水平显著下调(P < 0.01),但各组大鼠总AMPK蛋白水平差异无统计学显著性。结论: 柴胡疏肝散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活AMPK/SIRT1通路有关。     

SIRT1/AMPK通路在利拉鲁肽早期干预缓解高脂饮食导致的大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

目的:探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂利拉鲁肽(Lira)早期干预对高脂饮食(HFD)诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的影响及沉默信息调节因子1(SIRT1)/AMP活化蛋白激酶(AMPK)通路在其中的作用。方法:SPF级雄性SD大鼠随机分为普通饮食(ND)组、HFD组和HFD+Lira组,每组8只。适应性饲养1周后,按不同分组给药,HFD+Lira组大鼠每日固定时间皮下注射Lira(200μg/kg),其余2组注射等体积生理盐水。干预期间注意观察大鼠体重、毛发、食欲、大小便及活动情况,以便及时调整药量。每周记录体重、进食量和血糖,第16周行葡萄糖耐量实验;第18周末麻醉后行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,该实验结束后颈动脉取血,处死后取肝脏及不同部位的脂肪组织。血清检测丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)等指标;HE染色法观察肝组织病理损伤变化;油红O染色法观察肝组织脂质蓄积程度;马松染色和天狼星红染色法观察肝脏纤维化程度;活性氧簇(ROS)染色观察肝脏氧化应激情况;免疫荧光染色观察肝脏GLP-1受体表达情况;免疫组织化学染色法观察SIRT1和第172位...     

COX-2/sEH双抑制剂PTUPB通过抑制内质网应激改善小鼠非酒精性脂肪性肝病

目的　探讨环氧合酶2（COX-2）和可溶性环氧化物水解酶（sEH）的双抑制剂PTUPB对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠肝脏的保护作用及机制。 方法　将32只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组（Control）、双抑制剂对照组（PTUPB）、高糖高脂饲料组（HFD）和双抑制剂治疗组（HFD+PTUPB）。其中PTUPB组和HFD+PTUPB组每天皮下注射COX-2/sEH双抑制剂PTUPB（5 mg/kg）,Control组和HFD组皮下注射PTUPB的溶剂PEG400。12周后,观察各组小鼠的体重变化;HE染色、油红O染色和Masson染色分别观察小鼠肝组织病理改变、脂质堆积及胶原沉积;Western blot法检测小鼠肝组织内质网应激相关蛋白IRE-1α和XBP-1s的表达;Real-time PCR检测棕榈酸（PA）处理的小鼠肝细胞（AML-12）内质网应激相关基因（Perk、Ire-1α、Xbp-1s和Aft-6）的表达。 结果　与HFD组小鼠相比,HFD+PTUPB组小鼠体重及体重变化率显著降低,肝组织病理损伤、脂质堆积和胶原沉积明显改善,IRE-1α和XBP-1s的蛋白表达显著下调;进一步在细胞水平观察到,PTUPB预处理可降低PA诱导的AML-12细胞内质网相关基因的表达。 结论　抑制COX-2和sEH可减轻HFD诱导的小鼠NAFLD,其机制与抑制肝细胞内质网应激有关。     

COX-2/sEH双抑制剂PTUPB通过抑制内质网应激改善小鼠非酒精性脂肪性肝病

目的　探讨环氧合酶2（COX-2）和可溶性环氧化物水解酶（sEH）的双抑制剂PTUPB对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠肝脏的保护作用及机制。 方法　将32只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组（Control）、双抑制剂对照组（PTUPB）、高糖高脂饲料组（HFD）和双抑制剂治疗组（HFD+PTUPB）。其中PTUPB组和HFD+PTUPB组每天皮下注射COX-2/sEH双抑制剂PTUPB（5 mg/kg）,Control组和HFD组皮下注射PTUPB的溶剂PEG400。12周后,观察各组小鼠的体重变化;HE染色、油红O染色和Masson染色分别观察小鼠肝组织病理改变、脂质堆积及胶原沉积;Western blot法检测小鼠肝组织内质网应激相关蛋白IRE-1α和XBP-1s的表达;Real-time PCR检测棕榈酸（PA）处理的小鼠肝细胞（AML-12）内质网应激相关基因（Perk、Ire-1α、Xbp-1s和Aft-6）的表达。 结果　与HFD组小鼠相比,HFD+PTUPB组小鼠体重及体重变化率显著降低,肝组织病理损伤、脂质堆积和胶原沉积明显改善,IRE-1α和XBP-1s的蛋白表达显著下调;进一步在细胞水平观察到,PTUPB预处理可降低PA诱导的AML-12细胞内质网相关基因的表达。 结论　抑制COX-2和sEH可减轻HFD诱导的小鼠NAFLD,其机制与抑制肝细胞内质网应激有关。     

利拉鲁肽对非酒精性脂肪肝大鼠脂联素及胰岛素抵抗的影响

 目的：观察利拉鲁肽（Lira）对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠血清和肝组织脂联素（ADP）及胰岛素抵抗的影响。方法：雄性SD大鼠30只,随机分为3组,分别予普通饮食（ND组）10只、高脂饮食（HFD组）10只和高脂饮食加利拉鲁肽腹腔注射（Lira组）10只。高脂饮食12周建立大鼠NAFLD模型,建模成功后Lira组予利拉鲁肽腹腔注射治疗4周。16周末处死各组大鼠,生物化学法检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）及总胆固醇（TC）,分光光度计测定游离脂肪酸（FFAs）,酶联免疫吸附法测定胰岛素和ADP。结果：与HFD组比较,Lira组大鼠体质量、肝指数、胰岛素抵抗指数、血清TG、TC、ALT、FBG及肝匀浆TG、TC、FFAs显著下降（均P<0.05）,血清及肝组织ADP明显升高（P＜0.05）,肝脏脂肪变性程度明显减少至恢复正常（P<0.05）,肝组织ADP含量与肝脏FFAs含量呈负相关。结论:利拉鲁肽改善胰岛素抵抗和肝脏脂肪变的可能机制之一与其升高血清及肝组织脂联素水平有关。     

Regional prevalence of non-alcoholic fatty liver disease in Seoul and Gyeonggi-do,Korea

Background/Aims

The prevalence of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in Korea has increased recently. The aim of the present study was to determine the regional differences in the prevalence and characteristics of NAFLD.

Methods

From January 2009 to December 2010, 161,891 Seoul and Gyeonggi-do residents receiving a health examination at our institution were enrolled in this cross-sectional study. After applying exclusion criteria, the data of 141,610 subjects (80,943 males, 60,667 females) were analyzed. The presence of NAFLD was established by ultrasound examination.

Results

The overall prevalence of NAFLD was 27.3% (38.3% in men, 12.6% in women). When standardized according to age, area, and sex, the prevalence of NAFLD was 25.2%. The age and area standardized prevalence of NAFLD was higher for men (34.4%) than for women (12.2%; P<0.001). The overall prevalence of NAFLD was higher in Gyeonggi-do (27.7%) than in Seoul (26.9%; P<0.001). Among the men, the prevalence of NAFLD was higher in Gyeonggi-do (39.2%) than in Seoul (37.4%; P<0.001), while for the women it was higher in Seoul (13.2%) than in Gyeonggi-do (12.0%; P<0.001).

Conclusions

The regional prevalence of NAFLD differed between Seoul and Gyeonggi-do. Further studies are needed to establish the etiology of this difference.     

The role of the gut microbiome and diet in the pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is the leading cause of chronic liver disease, with a prevalence that is increasing in parallel with the global rise in obesity and type 2 diabetes mellitus. The pathogenesis of NAFLD is complex and multifactorial, involving environmental, genetic and metabolic factors. The role of the diet and the gut microbiome is gaining interest as a significant factor in NAFLD pathogenesis. Dietary factors induce alterations in the composition of the gut microbiome (dysbiosis), commonly reflected by a reduction of the beneficial species and an increase in pathogenic microbiota. Due to the close relationship between the gut and liver, altering the gut microbiome can affect liver functions; promoting hepatic steatosis and inflammation. This review summarises the current evidence supporting an association between NAFLD and the gut microbiome and dietary factors. The review also explores potential underlying mechanisms underpinning these associations and whether manipulation of the gut microbiome is a potential therapeutic strategy to prevent or treat NAFLD.     

替米沙坦抑制大鼠非酒精性脂肪肝纤维化

目的 探讨替米沙坦(Tel)对大鼠非酒精性脂肪肝纤维化(NAFLF)的抑制作用.方法 60只Wistar大鼠随机均分为6个组,对照组用含胆碱的氨基酸(CSAA)饲料喂养,添加0(CSAA组)或2.5 mg/(kg BW)(CDAA治疗组)的Tel;剩余4组用胆碱缺乏的氨基酸(CDAA)饲料喂养复制非酒精性脂肪肝纤维化模型,分别添加0(CDAA组)、0.5(低)、1.0(中)和2.5 mg/(kg BW)(高浓度组)的Tel,共10周.常规方法检测血清生化指标.免疫组化法观察肝组织α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达;实时定量PCR法测定肝组织Ⅰ型前胶原、金属基质蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)的表达.结果 CDAA组血浆中透明质酸,碱性磷酸酶,γ-谷氨酰转肽酶和总胆红素均高于CDAA添加Tel组(P＜0.05或P＜0.01);肝组织α-SMA和TGFβ1定量分析表明,CDAA组表达明显高于CDAA添加Tel组(均P＜0.01).CDAA组的Ⅰ型前胶原表达明显高于CDAA添加Tel组(P＜0.01),且随着Tel剂量的增加,表达逐渐减少;同时MMP-13表达上升(P＜0.01),而MMP-2及9和TIMP-1及2的表达下降(P＜0.01);Tel控制CDAA喂养大鼠的体质量增加.结论 替米沙坦可通过抑制肝星状细胞的活化而阻止NAFLF的形成,有望成为控制非酒精性脂肪肝病发展的很有前景的药物.