槲皮素对卵巢癌细胞HO-8910增殖的抑制作用及机制

目的观察槲皮素体外对卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制作用,并探讨其机制。方法将体外培养卵巢癌HO-8910细胞用0、10、20、40、80、160μmol／L的槲皮素处理。用MTF法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率,细胞免疫化学染色法检测细胞内Fas及HSP70的表达,分光光度计法检测细胞内Caspase-3和Csapase-8的活性。结果浓度10～160μmol／L的槲皮素均能抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,并有明显的时间和剂量依赖性（P〈0．05）。不同浓度的槲皮素作用48h后各组细胞凋亡率随槲皮素浓度增高,HSP70表达下调,FAS表达增强,Caspase-3、8活性上调,均呈剂量依赖性（P均〈0．05）。结论槲皮素能抑制卵巢癌细胞的增殖。其机制可能与槲皮素通过提高细胞内Fas的表达,降低HSP70的表达及诱导Caspase-3、8的活化及诱导卵巢癌细胞凋亡有关。     

顺铂联合足叶乙甙对卵巢癌SKOV3细胞的增殖抑制作用及机制探讨

目的观察顺铂联合足叶乙甙（PE方案）对卵巢癌细胞增殖和细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养的卵巢癌SKOV3细胞,加入不同浓度的顺铂和足叶乙甙,作用24 h。MTT法检测细胞抑制率;流式细胞仪测定细胞周期,免疫细胞化学法检测细胞的Cyclin B1、p34cdc2和survivin。结果足叶乙甙和不同浓度的顺铂联合应用,可明显抑制SKOV3细胞的增殖,S期和G2-M期细胞增加,G0-G1期细胞减少,细胞Cyclin B1、p34cdc2和survivin表达下调。结论顺铂联合足叶乙甙对SKOV3细胞具有协同抑制作用,阻滞细胞周期,其机制可能与细胞Cyclin B1p、34cdc2和survivin的表达下调有关。     

去氧鬼臼毒素对人卵巢癌细胞SKOV3增殖的抑制作用

目的研究去氧鬼臼毒素(DPPT)对人卵巢癌细胞SKOV3增殖的抑制作用。方法将人卵巢癌细胞SKOV3分为低、中、高浓度DPPT组(2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L),在培养24 h和48 h后通过噻唑蓝(MTT)法检测SKOV3增殖率;培养48 h和72 h后通过蛋白质印迹法检测SKOV3中细胞外信号调节激酶(ERK)1/2蛋白的表达情况。结果低、中、高浓度DPPT组SKOV3细胞增殖率及48、72 h ERK1/2蛋白相对表达量均显著低于对照组(P0.05)。结论 DPPT可以有效抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖,其作用机制与抑制ERK1/2蛋白的表达相关。     

紫杉醇对耐阿霉素膀胱癌细胞株T24/ADM增殖的影响及机制

目的观察紫杉醇对耐阿霉素（ADM）人膀胱癌细胞株（T24/ADM）增殖的影响,并探讨其机制。方法用阿霉素浓度梯度递增法诱导培养人膀胱癌T24/ADM多药耐药细胞。用1、10、102、103nmol/L紫杉醇培养T24/ADM细胞12、24、48、72 h,用MTT法测算T24/ADM细胞增殖抑制率,用流式细胞仪PI单染法测定培养24、48 h时T24/ADM细胞凋亡率,并进行形态学观察。结果紫杉醇可抑制T24/ADM细胞生长,且在一定剂量范围内具有时间和浓度依赖性。实验组细胞凋亡率较对照组高,且随作用时间的延长,细胞凋亡率明显增高。紫杉醇组T24/ADM细胞镜下可见凋亡。结论紫杉醇可抑制膀胱癌T24/ADM细胞株生长,这种作用呈浓度时间依赖性,其机制可能与紫杉醇诱导T24/ADM细胞凋亡有关。     

表皮型脂肪酸结合蛋白-5基因沉默对人卵巢癌细胞A2780增殖、凋亡及侵袭力的影响

目的探讨通过siRNA干扰技术沉默表皮脂肪酸结合蛋白(FABP)-5基因表达对人卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法以人卵巢癌A2780细胞为研究对象,根据FABP-5 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,实施瞬时转染卵巢癌A2780细胞。将人卵巢癌A2780细胞分为FABP-5 siRNA组,阴性对照组、空白对照组。用逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)和Western印迹法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FABP-5基因的表达。细胞计数试剂盒(CCK)-8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术(FCM)检测各组细胞周期和凋亡的变化情况,划痕愈合实验、细胞侵袭实验评价沉默FABP-5基因对人卵巢癌A2780细胞迁移及侵袭能力的影响。结果 RT-PCR和Western印迹法显示,FABP-5 siRNA组较阴性对照组和空白对照组的FABP-5 mRNA和蛋白相对表达水平均显著降低。FABP-5 siRNA组细胞的生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少;与阴性对照组和空白对照组相比,FABP-5 siRNA组细胞的凋亡率明显升高(P0.01),迁移、侵袭力显著下降(P0.05)。结论特异性干扰FABP-5基因表达可抑制人卵巢癌A2780细胞的迁移和侵袭能力,并抑制肿瘤细胞增殖,因此,FABP-5的siRNA序列可能成为治疗宫颈癌的有效靶点。     

高温对SGC7901/ADM细胞多药耐药蛋白表达的影响和意义

目的:研究高温43℃对多药耐药基因表达产物P-gp、MRP、LRP在蛋白水平上的影响及其生物学意义,更深入地了解热效应逆转耐药的机制.方法:采用免疫细胞化学染色法、RT-PCR以及Western blot方法,检测在不同温度和不同药物作用下,人胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM和对照的人胃癌敏感细胞SGC7901株中,与人胃癌多药耐药相关的分子MDR1、P-gp、MRP、LRP在蛋白水平上的表达差异.结果:采用免疫细胞化学染色法检测人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞,发现高温43℃60 min处理可使P-gp蛋白表达下调率(down-regulated rate,DRR)31.78%(P=0.016),而MRP表达DRR为20.22%(P=0.037),差异有统计学意义,LRP未表达.采用Western blot法在SGC7901细胞中未检测出P-gp蛋白表达,而SGC7901/ADM细胞中P-gp高表达;在ADM和CDDP处理组细胞中,高温43℃时P-gp的表达量较37℃时DRR分别为45.65%(P=0.007)、17.95%(P=0.021),差异有显著学意义;TAX处理组DRR为11.90%,差异无显著学意义(P=0.065).结论:高温43℃的短期处理对人胃癌SGC7901/ADM细胞中P-gp和MRP多药耐药蛋白的表达有一定的抑制作用,可能是逆转耐药的机制之一.     

阿司匹林对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用

目的 探讨阿司匹林对宫颈癌Hela细胞增殖的影响.方法 体外培养Hela细胞,分别以不同浓度阿司匹林干预.应用Giemsa染色观察细胞形态学的改变;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;采用MTT法测定细胞增殖抑制率.结果 Giemsa染色后可见阿司匹林组细胞体积缩小,凋亡小体形成,且随着浓度增加,凋亡率也增加;不同浓度阿司匹林作用Hela细胞48 h后,提取DNA电泳,可见明显的DNA裂解带;MTT结果显示,在1.0～10.0 mmol/L浓度区间内,随浓度增加和时间的延长,阿司匹林对细胞的抑制率逐渐增加.结论 阿司匹林在体外可抑制人宫颈癌Hela细胞增殖,其机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成有关.     

miR-21转染对卵巢癌细胞株A2780/Taxol紫杉醇耐药性的影响及机制探讨

目的探讨microRNA-21(miR-21)在卵巢癌化疗耐药中的作用及机制。方法荧光定量RT-PCR法检测miR-21在人卵巢癌细胞株A2780及A2780/Taxol的表达水平,合成miR-21的干扰序列,以脂质体为载体转染A2780/Taxol细胞;MTT法检测细胞转染前后对紫杉醇的耐药性;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测磷酸酶基因(PTEN)、BAX及Bcl-2蛋白。结果 miR-21表达下调后,A2780/Taxol对紫杉醇的IC50值明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.05),细胞内PTEN、BAX蛋白表达水平增加,Bcl-2表达降低。结论 miR-21在人卵巢癌耐药株中呈高表达,其可能是介导人卵巢癌耐药的主要因素之一,具体机制可能是降低PTEN、BAX及升高Bcl-2来介导肿瘤细胞耐药。     

二十二碳六烯酸联合5氟尿嘧啶对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用

目的研究DHA联合5-FU对肝癌细胞在抑制细胞增殖、诱导凋亡的影响。方法用Annexin-V-PE/PI荧光双标记法、Hoechst33258染色及JC-1线粒体膜电位检测法检测DHA、5-FU两药单用和联用对肝癌细胞HepG2增殖的影响。结果联合处理组细胞凋亡率较单独使用5-FU组或单独使用DHA均明显增加。Hoechst33258染色显示,5-FU联合DHA组细胞中出现明显的凋亡核表现,细胞凋亡率较单独采用5-FU及对照组细胞显著增高。JC-1线粒体膜电位检测结果显示,联合组细胞线粒体膜电位较单独使用5-FU组显著降低。结论 DHA联合5-FU对肝癌细胞的增殖抑制、诱导凋亡具有协同作用。     

CIK对卵巢癌及其耐药细胞的杀伤作用

目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对卵巢癌细胞(SKOV3)及其耐药细胞(SKVCR)的体外杀伤效应。方法用健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)在体外应用多种细胞因子诱导成CIK细胞,流式细胞术分析其表型特征,CIK分别作用于SKOV3及SKVCR 24 h和48 h后,CCK8法检测不同效靶比下的细胞吸光度(A)值并计算CIK对各组细胞的杀伤效应。结果 CIK细胞对SKOV3及SKVCR的杀伤效应随效靶比的增加及作用时间的延长而增强(P<0.05)。在同一作用时间、相同效靶比时,CIK细胞对于SKOV3和SKVCR的杀伤效应差异无显著性(P>0.05)。结论 CIK对卵巢癌及其耐药细胞有较强的杀伤作用,具有一定的临床应用价值。     

地西他滨联合阿糖胞苷对HL60细胞的增殖抑制作用研究

目的:研究地西他滨(DAC)和阿糖胞苷(Ara-C)单用或联合作用对人急性髓细胞白血病HL60细胞增殖的影响,并探讨最佳的联合给药方式。方法:将不同浓度的DAC和Ara-C分别单独或联合作用于HL60细胞,采用CCK8法检测2种药物单独或联合作用对HL60细胞增殖的影响,采用金(正均)氏公式计算协同系数Q值分析两药的协同作用。结果:DAC和Ara-C单独作用时对HL60细胞增殖的抑制作用均呈剂量依赖关系,DAC(0.13~2.00μmol/L)序贯Ara-C联用对HL60细胞增殖抑制有协同作用(Q值为1.20~1.54),并呈剂量依赖性。DAC同时联合Ara-C或Ara-C序贯DAC无协同作用,甚至为拮抗作用(Q值1.15)。且DAC序贯Ara-C对HL60细胞的增殖抑制率明显高于DAC同时联合Ara-C或Ara-C序贯DAC(P0.05)。结论:DAC序贯Ara-C可协同抑制HL60细胞增殖,该方案明显优于DAC与Ara-C同时用药组或Ara-C序贯DAC组。DAC48h后序贯Ara-C联合方案在急性髓细胞白血病的治疗中可能具有重要临床意义。     

三氧化二砷诱导多药耐药肝癌细胞BEL-7402/ADM凋亡的实验研究

目的研究As2O3诱导多药耐药肝癌细胞BEL-7402/ADM凋亡的效果,为As2O3在治疗已产生多药耐药性的原发性肝癌方面的应用提供理论依据。方法采用流式细胞仪检测、分析As2O3诱导BEL-7402/ADM、BEL-7402细胞凋亡情况。结果在体外As2O3能够诱导BEL-7402/ADM、BEL-7402凋亡,其强度与作用浓度和时间有关,两细胞系凋亡率差异无统计学意义。结论As2O3能够诱导表达mdr-1的多耐药细胞BEL-7402/ADM凋亡,将其应用于临床治疗已产生耐药性的原发性肝癌有可能产生较为理想的治疗效果。     

没食子酸对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用及机制

目的探讨没食子酸对卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制作用及机制，为其临床应用提供依据。方法采用MTT法测定没食子酸单独作用及没食子酸与顺铂、丁酸钠联合用药后卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制率。Annexin V-FITC凋亡试剂盒于荧光倒置显微镜下观察没食子酸诱导SKOV-3细胞凋亡情况。结果没食子酸对SKOV-3细胞株生长有明显抑制作用，且呈一定的浓度依赖性；IC50为23．4μg／ml。没食子酸与顺铂合用可以明显增加顺铂对卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用，而与丁酸钠联合用药仅为单纯相加作用。随着没食子酸剂量增加，凋亡细胞数目增多。结论没食子酸可抑制SKOV3细胞生长，其机制为诱导细胞凋亡；没食子酸与顺铂联用有协同作用。     

蒺藜皂苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响

目的 探讨蒺藜皂苷(STT)对体外培养的卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响及机制.方法 选择对数生长的卵巢癌细胞株SKOV3分为空白对照组,实验组加STr.采用MTr法检测细胞活性,流式细胞术(FCM)测定各组SKOV3肿瘤细胞凋亡率及细胞周期变化;应用免疫组化检测SKOV3 Bcl-2和Bax蛋白表达变化.结果 与对照组相比,实验组对卵巢癌细胞的增殖具有明显的抑制作用(P＜0.05).细胞周期分析显示,实验组使卵巢癌细胞的S期细胞比例减小,G1期细胞比例增大(P＜0.05).STr能够降低Bcl-2蛋白表达(P＜0.05),增加Bax蛋白表达(P＜0.01).结论 STT能明显抑制卵巢癌细胞的增殖,其机制可能与细胞周期发生停滞有关,并通过影响细胞周期及下调Bcl-2蛋白和增加Bax蛋白的表达而诱导细胞凋亡.     

LAMC3低表达对卵巢癌细胞紫杉醇耐药的影响

目的 探讨层粘连蛋白γ3亚基(LAMC3)低表达对卵巢癌细胞紫杉醇耐药的影响。方法 采用Western blot检测卵巢癌紫杉醇耐药细胞HeyA8-R(H-R)及其亲本细胞HeyA8(H)中LAMC3的表达水平。通过慢病毒转染H-R细胞构建LAMC3低表达的稳定细胞株H-R-C3 shRNA3及其对照细胞株H-R-C3 Scramble。通过CCK-8法检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC₅₀),通过平板克隆形成实验验证细胞克隆形成能力。通过Western blot实验检测多药耐药、铁死亡、细胞周期、凋亡等关键通路蛋白的表达情况。结果 与卵巢癌亲本细胞H和对照细胞H-R-C3 Scramble相比,LAMC3在卵巢癌紫杉醇耐药细胞H-R和H-R-C3 shRNA3中的表达显著降低。敲减LAMC3表达可降低卵巢癌紫杉醇耐药细胞对紫杉醇的耐药性及其平板克隆形成能力。Western blot实验结果显示,在梯度浓度紫杉醇药物处理下,与H-R-C3 Scramble细胞相比,H-R-C3 shRNA3细胞的多耐药蛋白多重耐药1/ATP结合盒亚族B1(MDR1/ABCB1)...     

胡椒碱对人结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用

背景 最近许多报道显示胡椒碱(piperine,PIP)具有抗癌活性,而其在结肠癌中的具体作用及生物学机制的研究并不完善.目的 探究PIP对人结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及潜在机制.方法 分别用0(空白对照)、5、10和20 μg/mL的PIP处理SW480细胞24 h,采用细胞计数试剂盒8(cell...     

斑蝥酸钠维生素B6对人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖抑制作用

目的观察斑蝥酸钠维生素B6对体外培养的人卵巢癌细胞株(SKOV3细胞)的增殖抑制率、凋亡率及其对细胞周期的影响。方法应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6对SKOV3细胞的增殖抑制率。流式细胞仪定量检测经斑蝥酸钠维生素B6作用后的SKOV3细胞周期进程的变化及凋亡率。结果不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6制剂对SKOV3细胞增殖均有抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞仪结果显示G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,SKOV3细胞凋亡率升高。结论斑蝥酸钠维生素B6制剂对SKOV3细胞生长增殖有显著的抑制作用,抑制SKOV3细胞G1期向S期转化进程,从而使S期细胞减少,造成G2/M期细胞相对增多,诱导SKOV3细胞凋亡。     

槲皮素联合survivin反义核苷酸对肝癌SMMC7721/ADM细胞MDR的逆转作用

目的 探讨槲皮素与survivin反义核苷酸(ASODN)联合应用对肝癌SMMC7721/ADM细胞多药耐药(MDR)的逆转作用.方法 选择肝癌敏感细胞株SMMC7721和MDR细胞株SMMC7721/阿霉素(ADM),观察其对四种不同化疗药物的耐药性及槲皮素、survivin反义核苷酸(ASODN)对SMMC7721/ADM细胞MDR的逆转效果.结果 槲皮素和ASODN联合时较两者单独应用时能显著降低四种化疗药物对SMMC7721/ADM细胞的半数抑制浓度(IC50) (P<0.05).槲皮素单独应用及联合ASODN时均能明显降低SMMC7721/ADM细胞的多药耐药基因1(MDR1)mRNA及p170和多药耐药相关蛋白基因(MRP)mRNA及p190的表达(P均<0.05). 结论 槲皮素与ASODN联合能明显逆转SMMC7721/ADM细胞对四种化疗药物的耐药性.槲皮素可能通过抑制MDR1 mRNA和MRP mRNA的表达使p170和p190的合成减少而发挥耐药逆转作用,ASODN不能通过该途径发挥作用.     

川芎嗪和(或)环孢素A对HL 60/HT细胞耐药的逆转

多药耐药（ＭＤＲ）是产生难治和复发性白血病的关键所在,逆转白血病ＭＤＲ是当今亟待解决的问题。环孢素Ａ（ＣｓＡ）是一种免疫抑制剂,体外研究表明ＣｓＡ可以通过增加ＭＤＲ细胞内药物浓度而提高化疗药物的敏感性,国外已进入二期临床试验［１］,但由于副作用较大和...