氨基羟乙酸对慢性酒精中毒大鼠海马杏仁核内硫比氨和胱硫醚-β-合成酶含量及学习记忆能力的影响

目的探究氨基羟乙酸(AOAA)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力及海马组织、杏仁核组织内硫化氢(H_2S)浓度和胱硫醚β-合酶(CBS)表达的影响。方法 60只SD雄性大鼠随机分为3组,除正常对照(NC)组外,慢性酒精中毒模型(M)和AOAA治疗(AR)组给予含6%(V/V)酒精的水溶液喂养28 d。14 d后,AR组腹腔注射AOAA,1次/d,连续14 d。随后测试各组学习记忆能力,检测海马和杏仁核组织H_2S的浓度和CBS表达。结果与NC组相比,M组第2～4天潜伏期、第2～4天游泳距离、海马组织H_2S含量、杏仁核组织H_2S含量、海马组织及杏仁核组织CBS平均光密度值均显著升高(P<0.01)。与M组相比,AR组以上各指标均显著降低(P<0.01)。结论 AOAA能够减轻酒精对大鼠学习记忆能力的影响,可能与AOAA影响海马、杏仁核内H_2S浓度和CBS的表达有关。     

丁苯酞对慢性酒精中毒大鼠海马内硫化氢和纤维状肌动蛋白的影响

目的探究丁苯酞(NBP)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力、海马内硫化氢(H2S)和纤维状肌动蛋白(F-actin)含量的影响。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组,除对照组外,将含酒的水作为大鼠唯一水来源,并逐渐增加酒精含量,采用自由饮用方法建立慢性酒精中毒模型。42 d后按慢性酒精中毒大鼠戒断评分表于末次饮酒后6 h检测大鼠模型,NBP低、中、高剂量组大鼠灌胃不同剂量NBP(大约14 d),饮酒结束后利用Y型电迷宫测试酒精中毒大鼠的学习记忆能力,随后检测海马组织H2S和F-actin的含量。结果与对照组大鼠学习记忆成绩(40.38±5.97)、H2S含量(23.25±3.61)和F-actin在阳性细胞中的表达相比,模型组大鼠学习记忆成绩(83.25±5.47)和H2S含量(43.86±6.95)均升高,F-actin的阳性表达降低(P<0.01)。与模型组大鼠相比,NBP中、高剂量组大鼠学习记忆成绩(64.75±4.71)、(70.00±4.72)和H2S含量(32.21±5.32)、(36.78±7.29)nmol/g均降低,F-actin的阳性表达升高(P<0.01)。结论 NBP能够减轻慢性酒精中毒大鼠对酒精的依赖,缓解酒精对大鼠学习记忆能力的影响,可能与NBP影响H2S和F-actin的含量有关。     

丁苯酞对慢性酒精中毒大鼠海马硫化氢及CA1、CA3区五羟色胺的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力、海马硫化氢及CA1、CA3区五羟色胺(5-HT)含量的影响。方法将90只SD雄性大鼠随机平均分为五组,除对照组外,各组饮含6%(V/V)酒精水溶液42 d,酒精溶液每日9∶00配制,置换。42 d后,NBP低、中、高剂量组灌胃不同剂量NBP(大约14 d),于饮酒结束后采用Y型电迷宫测试酒精中毒大鼠的学习记忆能力,随后检测海马组织H_2S的含量及CA1、CA3区5-HT的表达情况。结果与空白对照组相比,模型组学习记忆和H_2S含量均显著升高,5-HT受体阳性表达显著降低(P0.01)。与模型组相比,NBP中、高剂量组学习记忆成绩和H2S含量均显著降低,5-HT受体阳性表达显著升高(P0.01)。结论 NBP能够减轻慢性酒精中毒大鼠的症状,改善大鼠学习记忆能力,可能与NBP影响H_2S和5-HT的含量有关。     

外源性H2S对血管性痴呆模型大鼠海马组织H2S浓度和胱硫醚β-合酶表达的影响

目的 探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2 S)对血管性痴呆(vascular dementia,VaD)大鼠海马组织H2 S浓度和胱硫醚 β-合酶(cystathionineβ-synthase,CBS)表达的影响.方法 采用改良四血管法制作大鼠VaD模型,应用随机数字表法分为假手术组、模型组、小剂量和大剂量NaHS组,再按照模型制作后时间进一步分为1 d、7 d和30 d亚组.小剂量和大剂量NaHS组分别模型制作后每日腹腔注射NaHS 30μmol/kg和100μmol/kg,假手术组和VaD模型组每日腹腔注射等体积生理盐水.应用Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,应用实时免疫荧光聚合酶链反应检测海马组织CBS mRNA表达,应用蛋白质印迹法检测海马组织CBS蛋白表达.结果 Morris水迷宫实验显示,模型组、小剂量和大剂量NaHS组逃避潜伏期均较假手术组显著延长(P均<0.05),穿越平台次数均较模型组显著减少(P均<0.05),小剂量和大剂量NaHS组逃避潜伏期均较模型组显著缩短(P均<0.05).模型组、小剂量和大剂量NaHS组海马H2 S含量均较假手术组显著降低,但小剂量和大剂量NaHS组显著高于模型组(P均<0.05).模型组、小剂量和大剂量NaHS组海马CBS mRNA和蛋白表达均显著低于假手术组(P均<0.05),且小剂量和大剂量NaHS组与模型组无显著差异.结论 外源性H2 S能改善VaD大鼠学习记忆能力,可能与增高海马组织H2 S含量有关,但对CBS表达无影响.     

海人酸癫痫大鼠海马区能量代谢异常和线粒体功能障碍的变化

目的 观察海人酸(KA)颞叶癫痫(TLE)大鼠海马区能量代谢异常和线粒体功能障碍的变化.方法 40只大鼠随机分为对照组和模型组(6h、1、3、7d),模型组一侧海马注射KA制备癫痫大鼠模型,对照组注射相同体积生理盐水.检测各组海马三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、ATP/ADP比值及线粒体酶活性.结果 KA注射后随时间延长海马区ATP含量呈明显下降的趋势(P＜0.05),且各时间点ATP表达水平均明显低于对照组(P＜0.05);而海马区ADP表达水平及ATP/ADP比值随KA注射后时间的延长呈显著升高的趋势(P＜0.05),且各时间点ADP表达水平及ATP/ADP比值均明显低于对照组(P＜0.05);KA注射后随时间延长海马线粒体呼吸链复合物Ⅱ琥珀酸脱氢酶(SDH)、复合物Ⅳ(CytoOx)和Na+-K+-ATP酶的生物学活性呈明显下降的趋势(P＜0.05),且各时间点线粒体SDH、Cyto-Ox和Na+-K+-ATP酶的生物学活性均明显低于对照组(P＜0.05).结论 KALE大鼠海马区存在明显的能量代谢异常和线粒体功能障碍情况.     

促红细胞生成素对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力及其超微结构的影响

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对阿尔茨海默病(AD)样大鼠记忆能力和超微结构的影响。方法雄性Wistar大鼠应用Y迷宫进行空间定向学习和记忆训练5 d后,将达到学会标准的48只大鼠随机分为4组:正常对照组、生理盐水组、模型组、EPO治疗组,每组12只。其中生理盐水组双侧海马注射生理盐水各5μl,模型组和EPO治疗组双侧海马注射凝聚态Aβ各5μl。EPO治疗组从造模手术当天按5 000 IU/kg腹腔注射EPO,隔天1次。术后第10天Y迷宫法检测各组大鼠空间定向学习和记忆能力,透射电镜观察海马线粒体和突触结构的改变,使用免疫组化技术检测各组大鼠海马组织神经生长因子(NGF)蛋白的表达。结果 1与生理盐水组相比,模型组学习记忆能力均明显下降,Y迷宫作业的错误反应次数增多,尝试次数增多,全天总反应时间显著延长(P0.05);与模型组相比,EPO治疗组Y迷宫作业的错误反应次数减少,尝试次数减少,全天总反应时间缩短(P0.05);2透射电镜结果显示:正常对照组和生理盐水组神经细胞结构完整,线粒体膜、脊完整,神经轴突和神经突触结构完整;EPO治疗组大鼠海马线粒体和神经突触基本正常;模型组大鼠海马线粒体结构破坏,线粒体肿胀,线粒体脊断裂,结构紊乱,神经突触密度降低,突触膜增厚,突触间隙不清,突触小泡数量减少。3与生理盐水组及EPO治疗组相比,模型组NGF表达降低(P0.05)。结论 EPO注射可以减轻AD样大鼠记忆能力损伤,减轻Aβ对大鼠海马超微结构的破坏。EPO可以显著改善AD样大鼠的空间记忆能力,其机制可能与提高NGF蛋白表达有关。     

血管性痴呆大鼠学习记忆障碍及发病机制

目的 研究血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆障碍及发病机制.方法 4血管阻断法制作模型,Morris水迷宫法检测学习记忆能力,免疫组化法观察Bcl-2和Bax表达,流式细胞术检测海马神经细胞凋亡率,亚甲蓝比色法检测血清中H2S含量.结果 模型组大鼠学习记忆能力明显减退.Bcl-2/Bax在缺血再灌注(I/R)开始时升高,随后开始下降.模型组大鼠海马神经细胞凋亡率明显增加.模型组大鼠血清中H2S含量明显减少.血清H2S含量与海马神经细胞凋亡率间呈明显负相关. 结论 VD可导致学习记忆障碍,海马神经细胞凋亡和血清中H2S含量减少;海马神经细胞凋亡程度可能与内源性H2S生成减少有关.     

重组人纽兰格林对心力衰竭大鼠线粒体功能的影响

目的观察重组人纽兰格林(neuregulin,NRG)对心力衰竭(HF)大鼠线粒体功能的影响,并探讨其机制。方法雄性Wister大鼠40只,结扎大鼠左冠状动脉建立缺血性HF模型。4周后,建模成功的24只大鼠随机分为NRG组[NRG 10μg/(kg·d)],AG825组[AG825 50μg/(kg·d)]及HF组,各组8只,另6只大鼠作为假手术组(Sham组)。各组干预10 d,于实验结束时提取左心室梗死区外心肌线粒体,测定线粒体膜电位(MMP)、呼吸控制率(RCR)及组织ATP酶活性,同时测定活性氧水平及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)mRNA水平。结果与Sham组比较,HF组大鼠线粒体功能受损,MMP下降、RCR及ATP酶活性降低,活性氧生成增加,GSHPX mRNA表达减少。与HF组比较,NRG组大鼠MMP增高,线粒体RCR改善,ATP酶活性增多,活性氧生成减少,GSHPXmRNA表达增加,而AG825组RCR、MMP和ATP酶活性均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 NRG明显改善衰竭大鼠线粒体功能,NRG对衰竭心肌线粒体功能的保护作用,可能与其抗氧化应激作用有关。     

普罗布考对NAFLD大鼠肝脏线粒体的影响

目的观察普罗布考对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠线粒体的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(NC组)、NAFLD对照组(HF组)、普罗布考干预组(PB组)。以高脂饲料饲养诱发脂肪肝大鼠模型。18周末,处死所有动物,检测血脂、肝功能、大鼠肝线粒体丙二醛(malondaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、肝线粒体膜电位、肝组织匀浆ATP酶等。结果与NC组比较,HF组TC、LDLC、AST、ALT、肝线粒体MDA含量、肝线粒体膜电位显著升高,肝线粒体SOD和GSH-Px活性、Na-K ATP酶、Ca-Mg ATP酶、HDLC显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);与HF组比较,PB组TC、LDL-C、AST、ALT、肝线粒体MDA含量、肝线粒体膜电位显著下降,肝线粒体SOD、GSH-Px活性、Na-K ATP酶、Ca-Mg ATP酶显著升高,差异均有统计学意义(P0.05),但HDL-C差异不显著(P0.05);与NC组比较,PB组HDL-C显著降低(P0.05)。结论普罗布考可减轻NAFLD大鼠肝脏线粒体氧化应激的损害。     

灵芝多糖肽对Alzheimer样大鼠海马超微结构和抗氧化能力的影响

目的 观察灵芝多糖肽(GLPP)对Alzheimer样大鼠海马超微结构、海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量以及空间学习记忆能力的影响.方法 雄性Wistar大鼠60只,随机分为对照组、模型组、NS组、GLPP组,每组15只.除对照组(正常昼夜节律)外,其余各组每天连续光照(光照度400 Lux)24 h,共30 d.其间GLPP组每天1次灌胃 GLPP(250 mg/kg);NS组灌胃相同体积的生理盐水.光照30 d后Morris水迷宫法测试各组大鼠空间学习记忆能力,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量,透射电镜观察海马线粒体和突触结构的改变.结果 寻台潜伏期模型组大鼠较对照组明显延长(P＜0.05),GLPP组较模型组明显缩短(P＜0.05);NS组与模型组比较无显著差异.模型组较对照组海马SOD活性降低、MDA含量升高(P＜0.05);GLPP组较模型组SOD活性升高、MDA含量降低(P＜0.05);NS组SOD活性降低、MDA含量升高,与模型组比较无显著差异.透射电镜结果 显示:对照组、GLPP组大鼠海马线粒体神经轴突和神经突触基本正常;模型组和NS组大鼠海马线粒体膜结构破坏,线粒体肿胀,线粒体嵴模糊、消失,结构紊乱,神经髓鞘内神经细丝稀少,神经突触缺失、减少,突触密度降低,突触间隙不清,突触小泡减少.结论 GLPP可防止持续光照对大鼠海马超微结构的破坏和减轻Alzheimer样大鼠的空间记忆障碍.     

左旋丁基苯酞对血管性痴呆大鼠神经功能、线粒体氧化应激及海马组织胶质细胞源性神经营养因子表达的影响

目的通过建立血管性痴呆(VD)大鼠模型,观察左旋丁基苯酞(L-NBP)对VD大鼠神经功能、线粒体氧化应激水平及海马组织胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响。方法选择6月龄雄性SD大鼠,随机分为假手术组,模型组,L-NBP组,每组20只,采用永久性结扎双侧颈总动脉建立大鼠VD模型,L-NBP组给予L-NBP 3 w,Morris水迷宫行大鼠学习记忆能力测定,取海马线粒体测定超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS),HE染色观察脑组织神经元损伤,免疫组化法测定GDNF蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显降低,海马组织神经元损伤明显,ROS含量明显升高,SOD活性、GDNF表达明显降低(P0.05);与模型组比较,L-NBP组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增加,海马组织神经元损伤明显改善,ROS含量明显降低,SOD活性、GDNF表达明显增高(P0.05)。结论 L-NBP可能通过调控线粒体氧化应激水平、上调VD大鼠海马GDNF表达,减轻VD大鼠神经元缺血损伤,改善学习记忆能力。     

L-精氨酸对糖尿病大鼠心肌损伤的影响

目的研究L-精氨酸(L-Arg)对糖尿病(DM)大鼠心肌的保护作用。方法 28只大鼠腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制备DM模型,随机均分为DM组、L-Arg〔300 mg/(kg.d)〕治疗组。另设立正常对照(NC)组(n=12)。用药12周末处死大鼠,用透射电镜观察3组大鼠心肌细胞的形态学改变,采用RT-PCR检测心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1(ET-1)mRNA的表达水平,并测定心肌组织内eNOSi、NOS、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性以及一氧化氮(NO)、ET-1的含量。结果电镜下可见DM组大鼠心肌细胞肌原纤维含量明显减少,肌浆网扩张,线粒体肿胀变性。DM组大鼠eNOS mRNA表达、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及NO含量明显低于NC组,而ET-1 mRNA表达及ET-1含量明显高于NC组。L-Arg组大鼠心肌病变明显减轻,eNOS mRNA表达、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及NO含量明显高于DM组,ET-1mRNA表达及ET-1含量明显低于DM组。结论 L-Arg对DM大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与L-Arg增加心肌组织NO含量、降低ET-1含量,改善心肌血供有关。     

参麻益智方对酒精性痴呆大鼠认知功能及海马氧化应激水平的影响

目的探讨参麻益智方对酒精性痴呆大鼠认知功能及氧化应激水平的影响。方法以30只Wistar大鼠为研究对象,随机分为空白组、模型组、中药低剂量组(3.3 g/kg)、中药中剂量组(6.6 g/kg)、中药高剂量组(16.5 g/kg),各6只,分别灌胃蒸馏水及相应剂量中药,3个月后模型组、中药组分别灌胃25%酒精5 g/(kg·d),连续灌胃10 d,空白组仍灌胃等量蒸馏水。观察大鼠行为学变化和海马CA1区椎体细胞形态结构,同时比色法检测大鼠海马组织还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化,免疫印迹法检测Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果中药高剂量组潜伏期较模型组显著缩短(P0.05),穿台次数及目标象限停留时间百分比较模型组均上升(P0.05),海马CA1区形态较模型组趋于正常,海马组织中Nrf2及HO-1蛋白表达、GSH含量、SOD活力较模型组均显著升高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05)。结论参麻益智方能通过抗氧化应激进而保护神经细胞,改善慢性酒精中毒大鼠的学习记忆功能。     

胃饥饿素及其受体的变化在血糖波动加速GK大鼠糖尿病脑病发病中的作用

目的探讨胃饥饿素(Ghrelin)及其受体(GHSR1a)的变化在血糖波动加速糖尿病脑病发病过程中的作用。方法 8只雄性Wistar大鼠为正常对照组(NC),16只雄性GK大鼠随机分为持续高血糖组(MS)与血糖波动组(MF)。MF组每日错时腹腔注射葡萄糖及皮下注射胰岛素造成血糖波动模型,MS组每日错时腹腔注射葡萄糖造成持续高血糖模型,NC组每日错时腹腔注射等剂量生理盐水,连续6周,每日观察大鼠一般体征。第6周对大鼠进行行为学检测,包括Morris水迷宫实验、Y迷宫实验;第6周末检测全日9个时间点血糖。麻醉大鼠,心脏采血,检测血清中TC与TG含量。断头取脑,分离海马,HE染色与甲苯胺蓝染色分别观察大鼠海马病理变化及神经元改变。RT-PCR与免疫组织化学分别检测海马中Ghrelin及GHSR1a mRNA与蛋白的表达。结果与NC组比较,MS组与MF组体重增长速度减慢,TC、TG含量升高(P0.05或P0.01),认知功能减退,海马病理及神经元改变严重,海马中Ghrelin及GHSR1amRNA与蛋白的表达减少(P0.05或P0.01);与MS组比较,MF组在TC、认知功能、海马病理改变、Ghrelin及GHSR1a蛋白的表达上的变化更加明显(P0.05或P0.01)。结论 Ghrelin与GHSR1a在糖尿病大鼠海马组织中的表达减少,其在血糖波动加速糖尿病脑病发病过程中发挥重要作用。     

硫化氢减轻吗啡依赖大鼠戒断症状的机制

目的观察硫化氢(H2S)对吗啡依赖大鼠戒断症状、体质量、一氧化氮(NO)含量以及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,探讨H2S减轻吗啡依赖大鼠戒断症状的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、吗啡依赖组、硫氢化钠(Na HS)组和羟胺(HA)组。吗啡依赖组按剂量递增原则皮下注射吗啡,Na HS组和HA组分别于注射吗啡前30 min腹腔注射Na HS和HA,对照组注射等量生理盐水。纳洛酮诱发戒断症状确定模型成功建立,然后观察四组大鼠戒断症状和体质量变化,比色法测定大鼠血浆及海马组织NO含量,Real time PCR测定海马组织n NOS m RNA表达量。结果吗啡依赖组和HA组与对照组比较,戒断症状积分升高(P0.05),体质量下降(P0.05),血浆和海马组织NO含量以及NOS活性升高(P0.05);Na HS组与依赖组相比,戒断症状积分降低(P0.05),体质量增加(P0.05),NO含量以及NOS活性下降(P0.05)而Na HS组与对照组比较,戒断症状、体质量、NO含量以及NOS活性均无显著差异(P0.05)。结论外源性H2S可减轻吗啡依赖大鼠戒断症状,控制吗啡依赖大鼠体质量的下降,其作用机制可能与外源性H2S抑制NO的产生、下调n NOS m RNA表达有关。     

压力超负荷致心力衰竭大鼠解耦联蛋白2表达及心肌能量变化

目的 探讨压力超负荷致心力衰竭大鼠心肌线粒体解耦联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)表达的改变及其意义.方法 雄性SD大鼠45只随机分为腹主动脉缩窄组(H20w组)、假手术组(SH20w组)和正常对照组(N组)3组,每组15只,H20w组行腹主动脉缩窄术.术后20周,行心脏超声检测心功能、观察大鼠血液动力学参数,高压液相色谱法测量心肌组织腺苷酸含量,密度梯度法提取大鼠心肌线粒体,逆转录聚合酶链反应及Western blot法分析心肌线粒体UCP2表达.结果 大鼠行腹主动脉缩窄术后20周出现心功能减退,血液动力学异常等心力衰竭表现,提示建模成功.同时间比较,H20w组心肌组织内三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷、单磷酸腺苷及磷酸肌酸含量均低于SH20w组和N组.逆转录聚合酶链反应及Westem blot表明H20w组心肌线粒体UCP2表达水平分别较SH20w组高69%、61%,较N组高76%、65%(P<0.01),相关性分析显示UCP2表达量与心肌组织内ATP含量变化呈负相关(r=-0.929,P<0.01).结论 心力衰竭时,心肌线粒体UCP2表达增高,导致心肌ATP含量减少,可能参与了衰竭心肌能量代谢障碍.     

利多卡因对老龄大鼠学习记忆能力的影响

目的比较单次皮下注射利多卡因对老龄大鼠学习记忆能力及其对麻醉后1 d、3 d和7 d大鼠海马内APP、p-tau、caspase-3和神经元特异性烯醇化酶(NSE)蛋白表达的影响。方法选用18月龄健康雄性老年SD大鼠,随机分为对照组(G组,n=30)和利多卡因组(H组,n=30)。H组和G组再被分为麻醉后1 d、3 d和7 d 3个亚组,即H_1、H_3、H_7亚组,G_1、G_3、G_7亚组,每个亚组10只大鼠。H组大鼠经皮下单次注射利多卡因50mg/kg,对应的G组则注射相同容积生理盐水。以Y-型电迷宫测试大鼠的学习记忆能力。学习记忆测试后,采用western-blot和免疫组织化学方法测定各亚组海马内APP、p-tau、caspase-3和NSE蛋白的表达量。结果与G组中对应的亚组相比较,H_1、H_3、H_7亚组的大鼠达到学会标准时累计学习次数及海马内APP、p-tau、caspase-3和NSE蛋白表达水平差异均无统计学意义(P0.05)。结论在本实验条件下,皮下单次注射50 mg/kg利多卡因对老年大鼠空间学习记忆以及对老年大鼠海马内APP、p-tau、caspase-3和NSE蛋白表达水平均没有显著影响。     

慢性应激和组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠对大鼠空间学习和记忆能力的影响及其作用机制

目的观察慢性应激和组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠对大鼠空间学习和记忆能力的影响及其作用机制。方法将58只雄性SD大鼠随机地分为对照+生理盐水组、对照+丁酸钠组、慢性应激+生理盐水组及慢性应激+丁酸钠组。慢性应激组给予连续21 d制动应激,应激结束后将每组大鼠随机选出8只采用Y迷宫及Morris水迷宫检测空间学习、记忆能力,余下大鼠采用蛋白质免疫印迹(WB)检测海马组蛋白H3、H4乙酰化和反应元件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达变化。结果慢性制动应激的大鼠较未应激大鼠体重增长缓慢(P0.01)。在Y迷宫测试中,各组大鼠进入各个臂次数百分比差异无统计学(P0.05);各组大鼠在三个臂的停留时间百分比的分析,组间比较无统计学差异(P0.05),而组内分析发现,对照+生理盐水组、对照+丁酸钠组和慢性应激+丁酸钠组在新异臂的停留时间远多于其他两臂(P0.05);此外,单因素方差分析显示慢性应激+生理盐水组在各个臂的总穿越次数较对照+生理盐水组多明显减少(P0.05)。水迷宫定位导航试验实验显示,各组大鼠平均潜伏期组内、组间均差异显著;定位导航试验第2天,对照+丁酸钠组平均潜伏期较对照+生理盐水组有明显增高(P0.05);而慢性应激+生理盐水组大鼠在训练第3天的平均潜伏期显著高于对照+生理盐水组,同时慢性应激+丁酸钠组找寻找平台的时间也明显低于慢性应激+生理盐水组(P0.05)。水迷宫空间探索试验中,大鼠在目标象限游泳时间、距离百分比及穿越平台区域的次数均无显著差异(P0.05);而对大鼠在目标象限及目标相反象限的游泳时间进行统计发现,组内有显著差异(P0.01),而组间差异不明显(P0.05);慢性应激+生理盐水组大鼠在两个区域的游泳时间无明显差异,而其余三组大鼠在目标象限的游泳时间均显著高于其在目标相反象限的时间(P0.01)。WB结果提示慢性应激+生理盐水组大鼠ac H3蛋白含量的低于对照+生理盐水组(P0.05),而ac H4蛋白含量虽有降低趋势,却无统计学差异;慢性应激+丁酸钠组与慢性应激+生理盐水组大鼠相比较,ac H3、ac H4蛋白水平均明显增加(P0.01)。慢性应激+生理盐水组大鼠海马p-CREB水平明显低于对照+生理盐水组(P0.01),其BDNF含量也同样低于对照+生理盐水组(P0.05);慢性应激+丁酸钠组与慢性应激+生理盐水组大鼠相比p-CREB、BDNF含量均有明显增加(P0.01、P0.05);对照+丁酸钠组组大鼠相对于对照+生理盐水组BDNF含量有所减少(P0.05),而p-CREB含量则无明显变化。结论慢性应激可减缓大鼠体重增长,损害其空间学习和记忆水平,而丁酸钠可以对应激大鼠的学习记忆起保护作用,其可能是通过影响海马组蛋白乙酰化及认知相关蛋白表达而实现。     

早期恐惧声音应激对大鼠远期学习记忆能力及海马CA1区5-HT1AR-CREB-BDNF信号通路的影响

目的观察早期恐惧声音应激对大鼠远期学习记忆功能及海马CA1区5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 40只出生后1 d的健康新生SD雄性大鼠随机分为对照组和应激组各20只。应激组以恐惧的声音为应激源,于每日上、下午各播放2 h,持续21 d,建立早期恐惧声音应激模型;对照组于正常环境下饲养。应激结束后5 w行Morris水迷宫实验检测学习记忆能力;水迷宫实验结束后断头取脑,苏木精-伊红(HE)染色观察海马区的病理情况,免疫荧光组织化学法和蛋白免疫印迹法检测大鼠海马CA1区5-HT1AR、CREB和BDNF蛋白表达。结果与对照组相比,应激组学习记忆能力明显下降(P<0.01);对照组海马CA1区的神经元结构整齐、排列紧密,而应激组海马CA1区的神经元排列疏松并且出现了神经元的丢失;与对照组相比,应激组海马CA1区的5-HT1AR、CREB和BDNF蛋白表达均明显降低(P<0.01)。结论早期恐惧声音应激可导致大鼠成年后学习记忆功能障碍,其机制可能与早期恐惧声音应激抑制5-HT1AR-CREB-BDNF信号通路有关。     

川芎嗪对D-半乳糖损伤模型小鼠脑自由基代谢的影响

目的探讨川芎嗪对D-半乳糖(D-gal)损伤模型脑皮层和海马自由基代谢的影响。方法 C57BL/6J小鼠颈背部皮下注射2%D-gal100 mg.kg-1.d-1,连续40 d制造模型。第3周起各组分别用生理盐水(正常组、模型组)、川芎嗪(高、低剂量组)和哈伯因(阳性对照组)灌胃。第6周起进行Morris水迷宫测试,连续5 d。测试结束后,进行脑皮层、海马超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和Na+-K+ATP酶活力及丙二醛(MDA)含量的测定。结果与正常组相比,D-gal模型组学习记忆能力、皮层SOD、皮层和海马的GSH-Px和Na+-K+ATP酶活性均明显下降(P<0.05,P<0.001),海马SOD活性明显增高(P<0.005),皮层和海马MDA含量明显增高(P<0.05)。给予川芎嗪可明显提高模型小鼠的学习记忆能力(P<0.005,P<0.001),增强皮层SOD及皮层和海马的GSH-Px和Na+-K+ATP酶活性(P<0.05,P<0.001),降低海马SOD活性(P<0.05)及皮层和海马的MDA含量(P<0.001)。结论川芎嗪可明显提高模型小鼠的学习记忆功能,其作用机制与增强抗氧化活性有关。