3-溴丙酮酸对人卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察3-溴丙酮酸对人卵巢癌SK-OV-3细胞株增殖和凋亡的影响,探讨3-溴丙酮酸对人卵巢癌细胞的体外抗肿瘤效应.方法 MTT比色法和集落形成试验检测3-溴丙酮酸对SK-OV-3细胞的增殖抑制作用;采用投射电镜观察3-溴丙酮酸作用后的SK-OV-3细胞形态学改变;流式细胞术检测3-溴丙酮酸作用后SK-OV-3细胞的凋亡,并对细胞周期的变化进行分析.结果 3-溴丙酮酸对SK-OV-3细胞的增殖有明显的抑制作用,具有时间（一段时间内）和剂量依赖性（P＜0.05）.3-溴丙酮酸主要将细胞阻滞于G0/G1,S期细胞明显减少.结论 3-溴丙酮酸对SK-OV-3细胞增殖的抑制效应具有时间依赖性（一段时间内）和剂量依赖性,并可诱导其凋亡.     

不同频率脉冲电磁场对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡及迁移的影响

研究不同频率的脉冲电磁场(PEMF)对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和迁移的影响,为PEMF治疗或预防卵巢癌切除术后发生骨质疏松患者的安全性提供实验参考数据。分别对体外培养的人SKOV3细胞施加不同频率(8、16、32和64Hz)、固定强度为1mT的PEMF,2次/d,30min/次,间隔12h,共3d,以未施加PEMF的细胞作为对照组。分别采用EdU荧光法、Annexin V-FITC荧光法和划痕实验检测SKOV3细胞增殖、凋亡及迁移的情况。结果:频率8Hz的PEMF能明显抑制SKOV3细胞的增殖,并诱导其凋亡。频率8Hz和32Hz的PEMF能明显促进人卵巢癌细胞SKOV3的迁移,而频率16Hz的PEMF却明显地抑制SKOV3细胞的迁移。提示不同频率的PEMF对人卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡及迁移的影响不同。在临床中对于卵巢癌切除术后的骨质疏松患者,应当慎重考虑PEMF治疗的安全性,并严格选择治疗参数。     

重组腺病毒Ad-IL-12感染淋巴细胞对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响

目的 探讨重组腺病毒Ad-IL-12感染人外周血淋巴细胞后对人卵巢癌细胞SKOV3周期、增殖和凋亡的影响.方法 采用重组人IL-12腺病毒(Ad-IL-12)感染人外周血淋巴细胞,感染48 h后与人卵巢癌细胞SKOV3共培养(SKOV3/Ad-IL-12),同时设未感染组(SKOV3)和Ad-GFP空载感染组(SKOV3/Ad-GFP)作为对照.RT-PCR检测IL-12双亚基P35和P40的mRNA表达,ELISA检测细胞培养上清中IL-12 P70蛋白的分泌,CCK8法检测卵巢癌细胞增殖,流式细胞术分析卵巢癌细胞周期和凋亡,RT-PCR和Western blot检测抗凋亡蛋白BCL-2、survivin 的表达.结果 重组腺病毒Ad-IL-12可成功感染人外周血淋巴细胞,分泌较高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴细胞过表达IL-12可抑制SKOV3细胞的增殖;与未感染组和空载组相比,SKOV3/Ad-IL-12组G1期细胞显著增加,凋亡率显著升高(P＜0.05),SKOV3细胞中抗凋亡蛋白BCL-2和survivin显著下调(P＜0.05).结论 人IL-12基因重组腺病毒可以成功感染人外周血淋巴细胞,分泌IL-12 P70蛋白,并可以通过阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖.     

吲哚-3-甲醇对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖和凋亡的影响

目的探讨吲哚-3-甲醇（13C）对人肝癌细胞株SMMC．7721的增殖和凋亡的影响。方法不同浓度的13C（100、150、200、250、300、350Ixmol／L）处理细胞48h后,显微镜下观察细胞生长状况;采用WST-1法检测细胞增殖情况,Hoehest33258染色、TUNEL染色检测细胞凋亡情况,Westernblot法检测凋亡相关蛋白。结果13C能够抑制SMMC．7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,处理浓度在250μmol／L以下时,细胞生长变慢;处理浓度达到300μmol／L时,大量细胞凋亡。13C浓度高于200μmol／L时CytC、Cleavedcaspase．9和Cleavedcaspase．3蛋白表达明显增加,且随着13C浓度的增加三种蛋白的表达也明显增加。结论13C在体外实验条件下可抑制人肝癌细胞株SMMC．7721增殖并诱导其发生凋亡。     

结缔组织生长因子促进人卵巢癌细胞系SKOV3增殖与迁移

目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF)对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、迁移能力的影响,并探索其可能机制.方法 用重组人CTGF(rhCTGF)处理SKOV3细胞;利用CCK-8法和集落形成实验检测SKOV3细胞的增殖;利用细胞划痕实验检测SKOV3细胞的迁移;Western blot检测上皮-间充质转化(EMT)相关蛋...     

胡桃醌对卵巢癌SKOV3细胞氧化应激和凋亡的影响

 目的: 探讨胡桃醌对人卵巢癌SKOV3细胞的毒性作用及机制。方法: 采用MTT法检测胡桃醌对卵巢癌SKOV3细胞生长的作用;流式细胞术检测胡桃醌对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响;采用DCF-DA染色荧光显微镜观察细胞内的活性氧簇(ROS)水平;采用Western blot检测卵巢癌SKOV3细胞细胞色素C(Cyt C)和活化caspase-3的水平。结果: 与对照组比较,胡桃醌对SKOV3细胞的生长有明显抑制作用,且抑制作用随药物浓度和时间的增加而增强(P<0.05)。流式细胞术检测50 μmol/L胡桃醌作用细胞24 h和48 h后诱导细胞凋亡,早期凋亡率和晚期凋亡率均高于对照组(P<0.01)。胡桃醌显著提高细胞内的ROS水平,上调细胞Cyt C和活化caspase-3的蛋白水平。结论: 胡桃醌通过促进SKOV3细胞ROS的积累诱导细胞凋亡和抑制细胞生长。     

miR-300通过LEF-1调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡的实验研究

目的探究miR-300介导LKF-1调控卵巢癌细胞增殖和凋亡的作用的机制。方法体外培养卵巢癌SK0V3细胞及正常卵巢上皮细胞,使用RT-PCR检测卵巢癌SK0V3细胞及正常卵巢上皮细胞中LEF-1及miR-300的表达情况;利用生物信息学软件预测LEF-1为miR-300的靶基因,并通过双荧光素酶等实验进行验证;将卵巢癌细胞分为空白对照组、空白转染组和miR-300抑制剂组。空白转染组使用miR-NC转染卵巢癌SKOV3细胞;miR-300抑制剂组采用miR-300 inhibitor转染细胞。使用CCK-8检测细胞增殖情况;使用蛋A质印记检测各组细胞的增殖相关蛋白Ki-67表达情况;划痕实验法检测各组细胞迁移能力;使用蛋白质印记法检测迁移相关蛋白N-cadherin、E-cadherin表达情况;使用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;使用蛋A质印记法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达情况。结果卵巢癌SK0V3细胞中LEF-1及miR-300的表达显著高于正常卵巢上皮细胞(T=4.528,P=0.017;T=6.328,P=0.017);相比空白对照组,空白转染组卵巢癌细胞增殖、迁移能力均无显著改变(P>0.05);相比空白转染组,miR-300抑制剂组Ki-67蛋内相对表达(T15.687;P=0.001)、增长率(T=9.732;P=0.024)、划痕愈合率(T=11.558;P=O.005)、E-cadherin蛋白相对表达(T=18.558;P=0.003)、Bcl-2蛋白相对表达(T=11.001;P=0.035)均显著降低;N-cadherin蛋白相对表达(T=22.478;P=0.001)、B ax蛋白相对表达(T=18.528;P=0.004)、细胞凋亡率(T=19.975;P=0.000)均显著升高。结论miR-300可以介导LEF-1抑制卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制与调控增殖、凋亡相关蛋白和调控EMT过程相关。     

黄连素抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导凋亡

黄连素(berberine)对多种肿瘤有抑制增殖和诱导凋亡的作用[1-2],但在卵巢癌中的作用尚未见报道.本研究以人卵巢癌SKOV3细胞为研究对象,观察黄连素对SKOV3细胞增殖抑制作用及凋亡诱导效应.     

莪术醇抑制人骨肉瘤细胞系的增殖和促凋亡

目的 探究莪术醇对人骨肉瘤细胞系MG-63和U2OS体外增殖、凋亡的影响和作用机制。方法 将MG-63细胞和U2OS细胞分为对照组、莪术醇20、40、80和160μmol/L干预组;MTT法检测MG-63、U2OS细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;流式细胞测量细胞凋亡;RT-qPCR和Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、caspase和β-catenin的mRNA和蛋白表达。结果 莪术醇呈浓度依赖性地抑制MG-63和U2OS细胞增殖,IC₅₀值分别为128.03μmol/L、117.95μmol/L。与对照组相比,莪术醇显著抑制MG-63、U2OS细胞的体外迁移和侵袭(P<0.05),并诱导细胞凋亡(P<0.05)。与对照组相比,莪术醇组促进Bax、caspase 3表达,抑制Bcl2表达(P<0.05),MG-63、U2OS细胞内β-catenin的mRNA表达水平和蛋白表达均被显著抑制(P<0.05)。结论 莪术醇显著抑制人骨肉瘤细胞系MG-63、U2OS增殖,诱导细胞凋亡。     

小檗碱对人卵巢癌细胞SKOV3 增殖及凋亡机制的研究

目的:探讨小檗碱对人卵巢癌细胞(SKOV3)增殖及凋亡的影响。方法:MTT 法检测细胞增殖;流式细胞仪Annexin V/ PI 双染色法和透射电子显微镜检测细胞凋亡情况;甲基化特异性PCR 分析hMLH1 基因启动子区CpG 岛的甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR 检测Bcl-2、Bax、Survivin 和hMLH1 mRNA 基因的表达。结果:小檗碱对卵巢癌SKOV3 细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。当与顺铂联用时,小檗碱对卵巢癌细胞有协同抗癌作用。小檗碱可明显诱导SKOV3 细胞凋亡,并下调Bcl-2、Survivin 基因及上调Bax 基因的表达。此外,小檗碱能恢复hMLH1 启动子的甲基化状态及增强hMLH1 mRNA 的表达。结论:小檗碱可抑制卵巢癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,小檗碱可协同增强抗癌药物顺铂的抗肿瘤作用。     

内皮抑素对人卵巢癌细胞系生长的抑制作用

目的探讨人内皮抑素对人卵巢癌SKOV3细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法MTT法检测细胞生长;透射电镜观察细胞凋亡;免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot法检测细胞中BCL-2和BAX蛋白及mRNA的表达。结果内皮抑素抑制SKOV3细胞增殖(P<0.01);能诱导SKOV3细胞凋亡;而对细胞中BCL-2和BAX蛋白及mRNA的表达无明显影响。结论人内皮抑素具有抑制卵巢癌细胞SKOV3生长的作用,其作用机制可能与诱发细胞凋亡相关。     

双氢青蒿素对人胰腺癌细胞系增殖和凋亡的影响

目的探讨双氢青蒿素对人胰腺癌细胞(PANC-1)增殖活性及凋亡的影响,及其作用机制。方法30、60、120、240和480μmol/L双氢青蒿素作用PANC-1 48 h后,采用MTT法检测双氢青蒿素对PANC-1增殖活性的影响,流式细胞术检测其细胞周期和凋亡的变化,Western blotting检测细胞内周期相关蛋白cyclin B1、Cdk1、p21及凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9和细胞色素C(Cyto C)蛋白表达变化。结果 MTT实验结果表明,30~480μmol/L双氢青蒿素对PANC-1增殖活性具有明显的抑制作用(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,双氢青蒿素可以使PANC-1细胞周期阻滞于G2/M期,并诱发PANC-1细胞发生凋亡,且随药物浓度呈现升高趋势(P<0.05)。Western blotting结果显示,双氢青蒿素作用后周期相关蛋白Cdk1和Cyclin B1蛋白表达降低,而P21蛋白表达升高。凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9和Cyto C蛋白表达升高。结论双氢青蒿素能抑制PANC-1增殖并诱发细胞凋亡,其凋亡机制可能与线粒体途径相关。     

低氧对卵巢癌SKOV3细胞乙酰肝素酶表达及侵袭力的影响

目的：探讨低氧对卵巢癌细胞乙酰肝素酶(HPA)表达及侵袭力的影响。方法:将SKOV3细胞置于常氧(37 ℃，5％CO2，21％O2)和低氧(37 ℃，5％CO2，1％O2) 12、24、36 h条件下培养，采用RT-PCR及Western blotting方法对HPA表达进行检测，采用基质凝胶侵袭实验测定各组细胞侵袭力。结果:与常氧组比较，SKOV3细胞在低氧12、24、36 h HPA mRNA表达增高，以12h增加显著，蛋白表达则依次增加，各组比较差异显著(P<0.01)，而低氧各组间比较，HPA表达量亦不同(P<0.05)；常氧组侵袭细胞数与低氧12、24、36 h组比较差异显著(P<0.05)，且低氧引起的细胞侵袭力的提高呈时间依赖性，随着低氧时间延长，侵袭细胞数逐渐增多，组间比较有显著差异(P<0.05)；低氧时HPA蛋白表达的变化与细胞侵袭力变化呈正相关(r=0.8530，P<0.05)。结论:低氧可提高SKOV3细胞HPA的表达及细胞的侵袭力，且侵袭力的增加可能与HPA表达水平增高有关。     

Ikaros的3种亚型对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响

目的:探讨Ikaros的3种亚型对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法:利用逆转录病毒转染人卵巢癌SKOV3细胞,分别表达Ikaros的3种亚型(IK1、IK2和IK6);采用CCK-8法分析表达不同亚型后SKOV3细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞周期的改变;Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达。结果:CCK-8结果显示IK1和IK2能明显抑制SKOV3细胞的增殖;细胞周期结果表明IK1和IK2能诱导SKOV3细胞发生G1期阻滞,IK6则对SKOV3细胞的增殖能力和细胞周期则无明显影响;Western blot检测结果显示,IK1和IK2明显降低cyclin D1和cyclin D2蛋白的表达水平,同时升高p21蛋白的表达水平。IK6则对SKOV3细胞的cyclin D1、cyclin D2及p21蛋白表达水平无明显改变。结论:IK1和IK2这2种亚型能明显抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,其机制可能是由于IK1和IK2能降低细胞周期促进蛋白cyclin D1和cyclin D2的表达及增加细胞周期抑制蛋白p21的表达,从而诱导细胞周期发生G1期阻滞。而IK6亚型对SKOV3细胞增殖能力及细胞周期无明显影响。     

miR-146a在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌SKOV3细胞增殖-凋亡的影响

目的探讨miR-146a在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响。方法RT-qPCR检测21例卵巢癌组织及对应癌旁正常卵巢组织中miR-146a表达;将miR-146a模拟物和miR-146a阴性对照转染到卵巢癌SKOV3细胞中,RT-qPCR检测转染后SKOV3细胞中miR-146a的表达;CCK8检测转染后miR-146a对SKOV3细胞增殖的影响;流式细胞仪检测转染后miR-146a对细胞凋亡的影响;Western blot检测SKOV3细胞p-Akt和Bcl-2的表达。结果 miR-146a在卵巢癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织;转染miR-146a模拟物能显著提高SKOV3细胞miR-146a的表达量,显著降低SKOV3细胞的增殖能力,提高SKOV3细胞的凋亡率,抑制SKOV3细胞p-Akt和Bcl-2的蛋白表达(P0.01)。结论 miR-146a在卵巢癌癌组织低表达,转染miR-146a模拟物能抑制SKOV3细胞增殖,促进SKOV3细胞凋亡。     

PDGF-C促进体外培养人卵巢癌细胞系A2780和SKOV3的增殖和迁移

目的观察血小板衍生生长因子-C(PDGF-C)对体外培养的卵巢上皮癌细胞系A2780和人浆液性卵巢癌细胞系SKOV3的影响。方法采用培养的人类上皮性卵巢癌细胞系A2780和SKOV3,应用CCK8检测法评价细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期;利用Transwell细胞迁移实验、细胞划痕实验测定细胞迁移能力。结果PDGF-C能明显刺激A2780和SKOV3增殖,增加两种细胞S期细胞的比例,对SKOV3的促增殖作用在20μg/L达高峰,A2780的促增殖作用在30μg/L达高峰。同时,PDGF-C促进A2780和SKOV3的迁移能力。结论 PDGF-C可促进培养的A2780和SKOV3的增殖与迁移能力。