小胶质细胞体外吞噬模型的建立及相关炎症因子的研究

目的: 建立以细胞凋亡信号－磷脂酰丝氨酸(PS)介导的小胶质细胞体外吞噬模型,研究小胶质细胞发挥吞噬功能时炎症因子的表达变化。方法: 用N-乙基马来酰胺(NEM)预处理红细胞,随后整合氧化PS,制备含氧化PS信号的红细胞凋亡模型,并测定小胶质细胞对整合氧化PS信号红细胞吞噬率的变化。同时, real-time PCR检测小胶质细胞中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达情况,研究小胶质细胞吞噬功能与炎症功能之间的关系。结果: 小胶质细胞对整合氧化PS红细胞的吞噬率显著高于对照组(P<0.01),同时炎症因子IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平明显减少。结论: 成功制备小胶质细胞体外吞噬凋亡细胞模型,小胶质细胞的吞噬作用可能是自身炎症因子IL-1β和TNF-α在转录水平上降低的诱因。     

老年急性冠状动脉综合征患者CRP与TNF-α、IL-1β相关性研究

目的:观察老年冠心病不同类型患者中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平变化及其与C反应蛋白(CRP)之间的关系, 进一步探讨急性冠状动脉综合征临床识别和预测的炎症指标。方法:采用放射免疫分析法测定血清TNF-α、IL-1β和CRP的浓度。结果:急性冠脉综合征患者(ACS)TNF-α和IL-1β水平均显著高于对照(P＜0.05, P＜0.01)和稳定性冠心病(SCHD)患者(P＜0.05, P＜0.01)。ACS患者CRP水平显著高于SCHD组和对照组。CRP水平与TNF-α呈显著正相关(r＝0.545, P＜0.01);与IL-1β亦呈明显正相关(r＝0.31, P＜0.05)。TNF-α水平受甘油三酯(r=0.66, P＜0.01)、低密度脂蛋白胆固醇(r=0.53, P＜0.01)等因素影响。结论:老年冠心病患者细胞因子表达异常与炎性标志物CRP密切相关, 提示可能与急性冠脉综合症的发生有关, 是动脉粥样硬化斑块不稳定的标志。     

蛇床子素对TCP颗粒诱导小鼠颅骨溶解的影响

 目的: 观察蛇床子素对磷酸三钙(tricalcium phosphate,TCP)颗粒诱导小鼠颅骨溶解的影响。方法: 采用TCP颗粒诱导小鼠颅骨溶解模型,于术后第2天颅顶局部注射蛇床子素(osthole)20 mg/kg,每周3次,持续干预2周。干预结束后处死动物取材,应用HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)染色观察假体周围破骨细胞生成和骨溶解程度;ELISA法检测血清和骨组织中骨转换标志物骨钙素(osteocalcin)水平、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和TRACP活性以及骨膜中肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平。Western blot法检测颅骨组织葡萄糖调节蛋白 78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和CAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CAAT/ enhancer binding protein homologous protein,CHOP)的表达变化。结果: 蛇床子素可明显抑制TCP颗粒诱导的破骨细胞生成,减少骨溶解面积,显著增加ALP和osteoclacin水平,降低TRAP活性并阻断炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β释放。此外,蛇床子素干预能明显减弱TCP颗粒激活的内质网应激反应。结论: 蛇床子素可抑制TCP颗粒诱导的小鼠颅骨溶解,其机制可能与抑制TCP颗粒诱导的内质网应激反应有关。     

经皮三叉神经电刺激减轻戊四氮诱导的大鼠癫痫发作并抑制海马内IL-1β和TNF-α的表达

 目的:探讨经皮三叉神经电刺激预处理对戊四氮（PTZ）诱发的急性癫痫大鼠的行为学及海马致痫细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:动物随机分为对照组、致痫组（PTZ组）和经皮三叉神经电刺激组,分别给予7 d、14 d和28 d的假刺激和三叉神经电刺激预处理后,腹腔注射PTZ 建立急性癫痫动物模型,观察给药后大鼠癫痫行为学表现,并分别用免疫组织化学方法及ELISA方法对海马IL-1β、TNF-α进行检测。结果:经皮三叉神经电刺激可以明显减轻大鼠的痫性发作级别,减少癫痫发作持续的时间（P<0.05）, 且海马细胞因子IL-1β及TNF-α的表达明显少于PTZ组（P<0.05或P<0.01）。结论:经皮三叉神经电刺激预处理在PTZ 急性点燃癫痫大鼠模型中不仅具有抗惊厥作用, 还可以减少海马致痫细胞因子IL-1β及TNF-α的表达,可能为癫痫的防治带来新的策略。       

苦参碱对oxLDL 诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制研究

目的:探讨苦参碱对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制。方法:oxLDL 处理人主动脉血管平滑肌细胞建立动脉粥样硬化模型。CCK-8 实验分析细胞活力和增殖。实时定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10 和IL-13 的mRNA 水平。流式细胞术分析细胞凋亡。蛋白印迹检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)和增殖细胞核抗原(PCNA),细胞凋亡标记蛋白B 细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) 和Bcl-2 相关蛋白X(Bax),信号转导及转录激活子3(STAT3)和信号转导及转录激活子5(STAT5)的表达。结果:与对照组相比,造模组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA 水平大大提高,抗炎因子IL-10 和IL-13 mRNA 水平则显著降低(P<0.01)。与造模组相比,模型加药组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA 水平显著降低,抗炎因子IL-10 和IL-13 的mRNA 水平明显升高(P<0.05)。造模组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显高于对照组,模型加药组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显低于造模组(P<0.05)。与对照组相比,造模组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达显著升高,Bcl-2 显著降低(P<0.01)。与造模组相比,模型加药组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达明显减少,Bcl-2 表达明显增多(P<0.05)。造模组p-STAT3 和p-STAT5 相对蛋白表达量显著高于对照组(P<0.01)。模型加药组p-STAT3 和p-STAT5 相对蛋白表达量明显低于造模组(P<0.05)。与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib 组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达明显减少,Bcl-2 表达明显增多(P<0.05);模型加药+Ruxolitinib 组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达显著减少,Bcl-2 表达显著增多(P <0.01)。与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib 组及模型加药+Ruxolitinib 组IL-1β和TNF-α的mRNA 水平都明显降低,IL-10 和IL-13 的mRNA 水平都明显升高(P<0.05)。结论:苦参碱可通过抑制JAK/ STAT3 通路的活化起到抗炎和抑制血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用。     

油酸型急性呼吸窘迫综合征血清及肺组织促炎症细胞因子变化及山莨菪碱干预的实验研究

目的:观察大鼠油酸型急性呼吸窘迫综合征(ARDS)不同时间血清及肺组织中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平变化以及山莨菪碱(654-2)对其影响。方法:经舌下静脉注射油酸复制大鼠ARDS模型,用酶联免疫吸附试验测定不同时间血清及肺组织匀浆上清液中IL-6、IL-8和TNF-α水平。结果:注射油酸4h组血清及肺组织中IL-6、IL-8和TNF-α水平明显高于对照组;注射油酸8h组上述细胞因子均明显低于4h组,但血清中IL-6、TNF-α和肺组织中IL-6仍高于对照组水平;注射油酸16h组血清IL-6、TNF-α水平明显低于8h组,但TNF-α水平仍高于对照组,肺组织中IL-6水平亦高于对照组。654-2干预组血清及肺组织中IL-6、TNF-α水平均明显低于未干预组。结论:IL-6、IL-8和TNF-α在大鼠油酸型ARDS炎症过程中可能起重要作用;654-2可能通过抑制IL-6、TNF-α过量分泌,减轻肺损伤,具有防治ARDS作用。     

曲古抑菌素A对心衰大鼠心脏促炎细胞因子及心功能的影响

目的: 观察组蛋白脱乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对心肌梗死后心衰(HF)大鼠心脏肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及心功能的影响。方法: 采用冠状动脉左前降支结扎术致心肌梗死制备大鼠HF模型和假手术模型(sham),给予TSA或vehicle处理。给药4周后,测定血流动力学参数,应用免疫组织化学和ELISA检测左室心肌TNF-α、IL-1β和iNOS的水平,并测定右室/体重(RV/BW)、肺重/体重(LW/BW)。结果: 与HF+vehide组相比,给予TSA后可使HF大鼠心肌组织内增高的TNF-α、IL-1β和iNOS含量明显降低(P<0.05),左室舒张末压(LVEDP)和LW/BW降低(P<0.05);降低的左室内压最大上升速率(+dp/dt_max)和左室内压最大下降速率(-dp/dt_max)明显升高(P<0.05)。结论: 组蛋白脱乙酰化酶抑制剂TSA抑制心肌梗死后HF大鼠心肌组织TNF-α、IL-1β及iNOS的产生,并且可能通过该抑制作用改善HF大鼠的心功能,减轻肺淤血。     

结肠康泰对大鼠结肠炎肠组织内TNF-α、IL-1β、IL-6水平的影响

目的：探讨大鼠实验性结肠炎结肠组织内TNF-α、IL-1β、IL-6水平变化及中药结肠康泰的影响。方法：将SD大鼠随机分为3组，对照组、模型组、模型+结肠康泰组。采用三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇复制实验性结肠炎模型，检测各组肉眼和组织病理学记分、肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量。结果：模型+结肠康泰组大鼠结肠肉眼及组织学损伤记分、MPO活性明显低于模型组；模型组结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显高于正常对照组；模型+结肠康泰组TNF-α及IL-6水平明显低于模型组，而IL-1β水平无显著差异。结论：结肠康泰对大鼠实验性结肠炎的治疗作用可能涉及到结肠组织细胞因子TNF-α、IL-6的免疫调节作用。     

小檗碱和育亨宾对内毒素血症小鼠脾脏TLR4信号通路中相关基因表达的影响

目的: 观察小檗碱和α₂肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾对内毒素血症小鼠脾脏Toll样受体4(TLR4)信号通路84种基因表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法: 雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、小檗碱+LPS组、小檗碱+育亨宾+LPS组、育亨宾+LPS组、小檗碱组、小檗碱+育亨宾组和育亨宾组。分别用蒸馏水、小檗碱(50 mg/kg)、小檗碱+育亨宾(50 mg/kg+2 mg/kg) 和育亨宾(2 mg/kg)灌胃,每天1次,连续3 d,第3 d灌胃1 h后,腹腔注射LPS(20 mg/kg)或生理盐水。腹腔注射1 h后,用RT² Profiler^TM PCR Array分析技术检测小鼠脾脏TLR4信号通路84种基因mRNA的表达;用Western blotting分析小鼠脾脏TLR4信号通路的抑制分子细胞因子信号抑制物(SOCS)1、SOCS3和白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK)-M蛋白的表达。结果: LPS可上调小鼠脾脏TLR4信号转导通路中相关炎症因子的mRNA表达,包括CXCL10、TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-6、IFN-γ和IFN-β。小檗碱能显著下调下调髓样分化因子(MyD88)依赖信号通路下游TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达,也能MyD88非依赖信号通路下游基因IFN-β和CXCL10 mRNA的表达(P<0.05)。育亨宾能显著下调内毒素血症小鼠脾脏IL-1α、IL-1β 和IFN-β mRNA的表达(P<0.05),但对TNF-α、IL-6和CXCL10 mRNA表达的下调作用与LPS组相比没有显著差异(P>0.05)。小檗碱与育亨宾合剂能显著下调内毒素血症小鼠脾脏IFN-β和CXCL10 mRNA的表达,但不能显著下调内毒素血症小鼠脾脏IL-1α、IL-1β、TNF-α 和IL-6 mRNA的表达。LPS攻击后1 h,小檗碱和(或)育亨宾均不能增强内毒素血症小鼠脾脏SOCS1、SOCS3和IRAK-M蛋白的表达。结论: 小檗碱和育亨宾均能抑制LPS诱导的MyD88依赖和非依赖信号通路下游部分基因的表达,这种抑制作用的机制与SOCS1、SOCS3和IRAK-M蛋白无关。     

聚腺苷二磷酸核糖糖苷水解酶调节癫痫大鼠海马组织凋亡诱导因子及炎症因子的研究

目的: 探讨聚腺苷二磷酸核糖糖苷水解酶(PARG)对癫痫大鼠海马神经元损伤的影响及其分子机制,探讨PARG抑制剂单宁酸对凋亡诱导因子(AIF)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α (TNF-α)的调节作用。方法: 应用Nissl染色方法检测海藻氨酸致痫大鼠海马神经元在单宁酸干预前后的变化;应用Western blotting检测单宁酸干预前后致痫大鼠海马组织聚腺苷二磷酸核糖、AIF、IL-1β和TNF-α表达的变化。结果: 单宁酸干预明显减少癫痫大鼠损伤海马神经元数目(P<0.05);增加致痫大鼠海马组织聚腺苷二磷酸核糖水平(P<0.05);增加致痫大鼠海马组织线粒体蛋白中AIF含量,降低核蛋白中AIF含量 (P<0.05);可显著降低致痫大鼠海马组织IL-1β和TNF-α蛋白表达(P<0.05)。结论: PARG抑制剂单宁酸可减轻癫痫大鼠海马神经元损伤,阻断线粒体AIF的核转位,抑制海马组织IL-1β和TNF-α的表达。     

MODS患者血清多种细胞因子、C反应蛋白和D-二聚体水平的意义以及与预后的关系

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、C反应蛋白(CRP)和D-二聚体(D-dimer)在多器官功能障碍综合征(multipleorgandysfunctionsyndrome,MODS)的变化特点以及对预后的影响。方法:应用ELISA方法检测27例MODS患者第1d、3d和第5d的血清TNF-α、IL-6和IL-10水平,同时检测CRP和D-dimer水平,并以15例正常健康成人体检者的水平作为正常对照。并比较8例死亡患者和19例治愈患者第1d的水平。结果:所有MODS患者自第1d血清TNF-α、IL-6、CRP和D-dimer均明显高于正常对照组(P<0.05),且随病情的发展水平逐渐升高,而IL-10的水平在第3d开始升高。死亡组第1d的水平高于治愈组,以IL-6和D-dimer较明显。结论:血清TNF-α、IL-6、IL-10、CRP和D-dimer的检测对MODS患者的诊断和预后判断有指导意义。     

孟鲁司特对过敏性紫癜小鼠炎性因子的影响及其作用机制

目的:探讨孟鲁司特对过敏性紫癜小鼠炎性因子的影响及其作用机制。方法:采用灌胃给予0.1% 麦胶蛋白 (溶于6 mmol/ L HCl 酸化水),尾静脉注射印度墨水(40 mg/ kg)封闭网状内皮系统的方法建立过敏性紫癜小鼠模型,采用印度 墨水小鼠碳粒廓清法检测网状内皮系统(RES)功能,采用微量聚乙二醇沉淀法测定血清循环免疫复合物(CIC)含量,采用分 光光度法测定晚期氧化蛋白产物(AOPPs),采用酶联免疫吸附实验测定IL-1β、IL-6、TNF-α含量。结果:与空白组比较,模型 组小鼠RES 功能显著降低,血清CIC、AOPPs、IL-1β、IL-6、TNF-α的水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,低、中、高浓度孟 鲁司特组小鼠RES 功能显著提高,血清CIC、AOPPs、IL-1β、IL-6、TNF-α的水平显著降低(P<0.05)。结论:孟鲁司特可以减轻 过敏性紫癜小鼠症状,其作用机制与降低氧化应激反应、降低血清AOPPs 的含量水平、抑制炎症反应、提高RES 功能和增强循 环免疫复合物的消除能力有关。     

孟鲁司特钠对ITP 模型小鼠T 淋巴细胞亚群及晚期氧化蛋白产物的影响

目的:探讨孟鲁司特钠对特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠T 淋巴细胞亚群、细胞因子及晚期氧化蛋 白产物(AOPP)的水平,分析孟鲁司特钠治疗ITP 的机制。方法:将40 只ITP 模型小鼠随机分为对照组、模型组、孟鲁司特钠 低剂量组(3 mg/ kg)和孟鲁司特钠高剂量组(12 mg/ kg)。成功造模后第8 天开始,连续14 d 给药后,计算血小板数量(PLT)、 胸腺、脾脏指数,采用流式细胞仪检测外周血T 淋巴细胞亚群,酶联免疫法检测血清中IL-6、TNF鄄琢、AOPP 水平。结果:与空白 组小鼠比较,模型组小鼠的PLT、脾脏指数、CD8+ 、IL-6、TNF-α、AOPP 水平显著升高(P<0.05),CD3+ 、CD4+ 、CD4+ / CD8+ 水平显 著下降(P<0.05);与模型组比较,孟鲁司特钠低、高剂量组小鼠脾脏指数、CD8+ 、IL-6、TNF-α、AOPP 水平显著降低(P<0.05), CD3+ 、CD4+ 、CD4+ / CD8+水平显著上调(P<0.05)。结论:孟鲁司特钠能够通过调节免疫功能紊乱,消除AOPP 积累,降低IL鄄6、 TNF鄄琢水平,对ITP 起治疗作用。     

8周游泳运动对2型糖尿病大鼠周围神经病变的影响

 目的： 探讨长期游泳运动对2型糖尿病大鼠周围神经病变的影响及可能机制。方法: 雄性Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养联合链脲佐菌素注射制备成T2DM大鼠模型后,随机分为空白对照组（C组）、单纯运动组（CE组）、糖尿病对照组（DM组）和糖尿病运动组（DME组）。CE组和DME组进行8周游泳训练（6 d/week）,第1周前3 d练习时间分别为20、30和45 min,第4天起每天持续游泳60 min。运动8周后测定各组大鼠坐骨神经的传导速度（MNCV）,以及该组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、C反应蛋白（CRP）的含量,观察其形态结构。结果: 实验末,与DM组相比,DME组的MNCV明显提高（P<0.05）,坐骨神经组织中TNF-α、IL-6和CRP水平均有所降低,但差异无统计学意义（P>0.05）。DM组坐骨神经光镜下可见明显的损伤,经运动干预后病变程度减轻。结论: 8周游泳运动可提高MNCV,减轻DM造成的神经损伤,对周围神经起保护作用,其机制可能与减轻炎症反应有关。     

骨关节炎模型兔膝关节腔注射丹皮酚联合针刺足三里血清白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的变化

背景：针灸和西药关节腔注射对骨关节炎均有临床疗效,少见针灸联合中药关节腔注射治疗骨关节炎的报道。 目的：验证骨关节炎模型兔膝关节腔注射丹皮酚联合针刺足三里后血清白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平的影响。 方法：实验分为正常组(不作处理)、模型组、中药组、针刺组、针药组5组。后4组采用膝关节腔注射木瓜蛋白酶的方法复制出家兔膝骨关节炎模型。模型组不作处理;中药组向兔右膝关节腔注射丹皮酚,1次/周,共5次;针刺组针刺兔双侧足三里穴,1次/d,共29次;针药组向兔右膝关节腔注射丹皮酚,1次/周,共5次,同时针刺兔双侧足三里穴,1次/d,共29次。于治疗后测定血清中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的含量。 结果与结论：中药组、针刺组、针药组的白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α水平均低于模型组(P < 0.05),高于正常组(P < 0.05);而针药组血清中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的含量显著低于中药组、针刺组(P < 0.05)。提示膝关节腔注射丹皮酚联合针刺足三里可显著降低白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α水平,抑制白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α对关节软骨的破坏作用,延缓关节软骨的退变。      

肾脏去神经对动脉粥样硬化家兔炎症因子的影响

目的:探讨肾脏去神经(renal denervation,RDN)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)家兔肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1α(IL-1α)和白细胞介素6(IL-6)的影响。方法:28只雄性新西兰白兔随机分为对照组、RDN后高脂饲养(high-fat diet,HFD)组(RDN组)、假手术后HFD组(假手术组)和单纯HFD组(HFD组),每组7只。测量各组血浆去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、炎症因子及血脂水平;免疫组化检测血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)的表达,Western blot检测核因子κB(NF-κB)和血管紧张素Ⅱ 1型受体(AT1R)的表达;real-time PCR检测TNF-α、IL-1α和IL-6 mRNA的表达;光镜下观察肾动脉结构改变和主动脉病理变化。结果:8周后RDN组NE水平明显低于假手术组和HFD组(P0.05);RDN组血浆甘油三酯(TG)水平低于HFD组(P0.05);RDN组的Ang Ⅱ蛋白表达低于假手术组和HFD组(P0.01);RDN组NF-κB蛋白表达低于假手术组(P0.05);RDN组TNF-α和IL-1α的血浆水平低于假手术组和HFD组(P0.05),RDN组IL-6 mRNA的表达低于假手术组(P0.01)。结论:RDN能有效抑制全身交感神经活性,降低血浆TG水平,减轻血管炎症反应,延缓动脉粥样硬化的发展。     

瑞舒伐他汀预处理对缺血再灌注大鼠大脑中动脉血管平滑肌细胞炎症因子的影响及其机制

目的 探讨瑞舒伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后大脑中动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）中炎性细胞因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子ɑ（TNF-α）表达的影响以及可能的机制。 方法 36只健康成年SD大鼠,雌雄不限,随机分为假手术组,局灶性脑缺血再灌注组,瑞舒伐他汀预处理组,每组12只。大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h后, Real-time PCR及Western blotting法检测大鼠大脑中动脉VSMCs中IL-1β、IL-6和TNF-α以及核因子κB（NF-κB）mRNA和蛋白的表达。 结果 再灌注24 h后,模型组VSMCs IL-1β、IL-6 以及TNF-αmRNA和蛋白的表达明显增加,而给予瑞舒伐他汀预处理后,可明显抑制大脑中动脉VSMCs中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA和蛋白的高表达,同时也可发现,VSMCs中NF-κB mRNA和蛋白的表达也明显减少。 结论 瑞舒伐他汀预处理可有效抑制大脑中动脉VSMCs中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA和蛋白的表达,从而减轻缺血再灌注后炎症反应对脑组织的进一步损伤作用。瑞舒伐他汀预处理对IL-1β、IL-6及TNF-α的作用可能与其减少VSMCs中NF-κB的表达有关。     

猪腹腔高压模型的建立及腹腔高压对门静脉血炎症细胞因子表达的影响

目的 探讨猪腹腔高压动物模型的建立方法,以及腹腔高压对门静脉血中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-10等炎症细胞因子表达的影响。方法 选取健康家猪6只,体质量25.2~28.4（26.86±0.85）kg。采用多水囊叠加方法制备腹腔高压动物模型,并放置门静脉导管。在腹腔高压动物模型制备前和模型制备过程中腹腔压力为0、5、10、15、20、25、30 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）时,分别抽取门静脉血5 mL,采用免疫荧光法检测其中炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平。观察对比制备腹腔高压动物模型前及制备过程中不同腹腔压力时门静脉血中TNF-α、IL-6、IL-10的变化情况,采用简单线性回归分析TNF-α、IL-6、IL-10表达水平与腹腔压力的关系。结果 6只实验动物均成功完成模型制备,实验过程中无死亡。腹腔压力达到30 mmHg时腹腔水囊注入液量为2 560~2 720 mL。腹腔高压动物模型制备前及制备过程中不同腹腔压力点,门静脉血中炎症细胞因子TNF-α、IL-10表达水平呈先上升后下降趋势,IL-6表达水平呈上升趋势,差异均有统计学意义（F=15.66、40.37、34.67,P值均<0.001）。线性回归分析显示：TNF-α表达水平与腹腔压力呈负相关性,回归方程分别为$\widehat{Y}$_TNF-α=-0.013X_腹腔压力+1.346（R²=0.341,P<0.001）;IL-6、IL-10表达水平均与腹腔压力呈正相关,回归方程分别为$\widehat{Y}$sub>IL-6=0.013X_腹腔压力+0.222（R²=0.777,P<0.001）, $\widehat{Y}$_IL-10=0.022X_腹腔压力+0.402（R²=0.642,P<0.001）。结论 采用多水囊叠加方法可成功制备腹腔高压动物模型。腹腔压力的升高,促进IL-6的表达,对TNF-α、IL-10的表达先促进后抑制。腹腔高压加重了机体的炎症反应。     

抑制或过表达GRK5 基因对星形胶质细胞凋亡及IL-1β和TNF-α表达的影响

目的:探讨抑制或过表达G 蛋白偶联受体激酶5(GRK5)基因对星形胶质细胞(AS)凋亡及IL-1β和TNF-α 表达的影响。方法:培养原代AS,将干扰GRK5 表达的siRNA(GRK5-siRNA)及GRK5 的过表达质粒(pcDNA3.1-GRK5)分别转染AS,通过Western blot 检测转染24 h 后的细胞中GRK5 蛋白的表达;缺氧处理AS,细胞分为空白组、缺氧组、缺氧+pcDNA3.1-GRK5 组和缺氧+GRK5-siRNA 组,缺氧处理24 h 后通过流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率及ROS 含量;RT-PCR检测IL-1β和TNF-α的mRNA 表达;Western blot 检测p53、信号转导与转录因子3(STAT3)和p-STAT3 蛋白表达。结果:与空白组比较,转染GRK5-siRNA 的AS 中GRK5 的表达显著降低,转染pcDNA3.1-GRK5 的细胞GRK5 的表达显著升高(P <0.05);与空白组比较,缺氧组细胞凋亡率、ROS 水平及IL-1β、TNF-α、p53 和p-STAT3 的表达均显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,缺氧+pcDNA3.1-GRK5 组细胞凋亡率、ROS 水平及IL-1β、TNF-α、p53 和p-STAT3 的表达均显著降低,缺氧+GRK5-siRNA组细胞凋亡率、ROS 水平及IL-1β、TNF-α、p53 和p-STAT3 的表达均显著升高(P<0.05)。结论:过表达GRK5 可降低AS 凋亡和ROS 水平,下调IL-1β、TNF-α、p53 表达及STAT3 信号通路,抑制GRK5表达反之。     

肺炎大鼠心肌TNF-α、IL-6mRNA表达及腺苷对其影响

目的:观察金葡菌感染大鼠肺炎时心肌组织TNF-α、IL-6mRNA表达, 以及腺苷对其影响。方法:50只SD大鼠被随机分为5组, 为对照组、肺炎组和腺苷治疗A、B、C组。金葡菌经气管插管注入复制肺炎大鼠模型, 于注菌后第2、3、4d静脉点滴腺苷治疗, 每天90min, 剂量分别为50、100、150μg·kg^-1·min^-1。第5d处死大鼠, 立即取心脏液氮保存, 心肌组织用于病理检测和采用RT-PCR方法检测TNF-α、IL-6mRNA的表达。结果:(1)肺炎组心肌中TNF-α、IL-6mRNA的表达显著高于对照组(均P<0.01);(2)腺苷治疗B、C组心肌中TNF-α、IL-6mRNA的表达低于肺炎组(P<0.01), 且治疗C组心肌IL-6mRNA表达低于治疗B组(P<0.01);而A组心肌中TNF-α、IL-6mRNA的表达与肺炎组无明显差异(P>0.05);(3)腺苷治疗可以减轻心肌的病理损伤(P<0.01)。结论:金葡菌感染大鼠肺炎可致心肌损害, 细胞炎症因子IL-6和TNF-α参与心肌损伤的发生和发展, 外源性腺苷治疗可抑制炎症因子TNF-α、IL-6的分泌, 从而有利于减轻炎症和保护心肌。