加味蒌石汤对肾阴虚型PCOS小鼠卵泡抑素及激活素的影响

摘要：目的 观察加味蒌石汤对肾阴虚多囊卵巢综合征（PCOS）模型卵泡抑素及激活素的影响,初步探究其作用机制。方法 将54只小鼠随机分为正常对照组,模型组,中药高、中、低剂量组,达英-35组6组,每组9只。采用“硫酸脱氢表雄酮（DHEA）联合甲状腺素及利血平”法制备肾阴虚型多囊卵巢综合征小鼠模型。除正常组外,其余各组予相应的药物浓度灌胃40天,观察小鼠一般情况、体重,酶联免疫吸附法（ELISA）测定小鼠血清性激素[血清睾酮（T）、雌二醇（E2）、促卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH）]、FS、ACT、环磷酸腺苷（cAMP）及环磷酸鸟苷（cGMP）。结果 模型组小鼠较正常组与用药组出现不安定、多动、体毛稀疏、腹泻、消瘦等表现。实验前各组小鼠体重无统计学差异,实验后模型组小鼠体重低于正常对照组[（25.96±0.88）比（28.36±0.77）,P<0.05],中药高、中剂量组与达英-35组小鼠体重均高于模型组[（28.25±0.55）、（27.68±1.21）、（28.08±0.50）比（25.96±0.88）,P<0.05];模型组血清T、LH、FS、cAMP/cGMP高于正常对照组[（146.30±4.04）比（134.36±2.30）,（1772.66±122.37）比（1409.02±47.88）,（45.07±5.63）比（34.59±2.52）,（1.85±0.37）比（1.28±0.15）,P<0.01],ACT模型组低于正常对照组[（6.12±0.63）比（6.87±0.87）,P<0.05],血清FS水平中药高、中、低剂量组与达英-35组均低于模型组[（36.27±3.05）、（38.33±2.47）、（39.27±4.09）、（36.64±2.55）比（45.07±5.63）,P<0.01],ACT水中药高、中、低剂量组与达英-35组均高于模型组[（6.96±0.60）、（6.90±0.81）、（6.86±0.48）、（7.14±0.73）比（6.12±0.63）,P<0.01或P<0.05],cAMP/cGMP比值中药高、中、低剂量组与达英-35组均低于模型组[（1.36±0.10）、（1.48±0.11）、（1.67±0.08）、（1.42±0.11）比（1.85±0.37）,P<0.01]。结论 加味蒌石汤能有效调节肾阴虚PCOS模型小鼠性激素水平,改善肾阴虚状态,降低FS含量和cAMP/cGMP比值,提高ACT含量,促进卵泡发育。     

三生合欢饮抗抑郁作用及其对肠道菌群影响的实验研究

目的研究三生合欢饮抗抑郁作用及其对肠道菌群的影响。方法健康雄性昆明种小鼠60只,随机分为空白组、模型组、百忧解组及三生合欢饮高、中、低剂量组(15.04g/kg、7.52g/kg、3.76g/kg),每组10只。采用慢性应激和孤养的方法复制慢性应激抑郁小鼠模型。第21天测定小鼠体质量增加情况、糖水消耗、行为学以及脑内多巴胺递质含量等指标。第22天,采集各实验组小鼠粪便样品,采用ERIC-PCR技术获得反映肠道微生物群落结构特征的ERIC-PCR指纹图谱。结果与空白组比较,模型组小鼠在第14天后体质量增加显著降低[14天:(16.22±0.80)g比(20.34±1.06)g];21天:(20.04±1.62)g比(22.71±1.35)g;P0.01),与模型组相比,三生合欢饮高剂量组[14天:(17.93±0.94)g,21天:(22.58±2.15)g]、百忧解组[14天:(17.16±0.93)g,21天:(20.97±2.89)g]小鼠体质量增加明显高于模型组(P0.01);与空白组[14天:(3.94±0.80)m L,21天:(2.62±0.56)m L]比较,模型组小鼠糖水消耗[14天:(2.75±1.01)m L,21天:(2.05±0.76)m L]明显降低(P0.01,P0.05)。与模型组比较,第21天后三生合欢饮高﹑中﹑低剂量组小鼠糖水消耗量[(3.66±1.05)m L、(3.10±0.70)m L、(3.10±0.70)m L]显著增加(P0.01),百忧解组小鼠糖水消耗[(3.34±1.84)m L]亦明显增加(P0.01);与空白组[(248.67±43.64)次/s、(35.67±20.66)次/s]比较,模型组小鼠水平活动和垂直活动次数[(207.55±46.07)次/s]明显减少(P0.05),游泳不动时间[(77.44±64.79)次/s]明显增加(P0.05);与模型组比较,三生合欢饮低、中剂量组小鼠自主活动次数[(253.10±40.72)次/s、(251.90±45.39)次/s]显著增加(P0.01),低剂量组小鼠游泳不动时间[(44.70±40.48)次/s]明显减少(P0.05);与空白组[(1.21±0.34)μg/m L]比较,模型组多巴胺(DA)递质含量[(1.12±0.17)μg/m L]显著减少(P0.05);与模型组比较,三生合欢饮低剂量组DA含量[(1.31±0.25)μg/m L]明显提高(P0.05);EKIC-PCR指纹图谱显示,模型组与空白组在500bp以上条带位置、数量及丰度有较大差异,三生合欢饮中、低剂量组与空白组接近。结论三生合欢饮有较好的抗抑郁作用,并能调节抑郁模型小鼠肠道菌群。     

加味蒌石汤对肾阴虚型多囊卵巢综合征模型小鼠卵巢功能的保护作用

目的观察加味蒌石汤对肾阴虚型多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠卵巢功能的保护作用,并初步探究其作用机制。方法将54只小鼠随机分为正常对照组,模型组,达英-35组,加味蒌石汤高、中、低剂量组6组,每组9只。除正常对照组外,其余各组均采用脱氢表雄酮(DHEA)联合甲状腺素及利血平法制备肾阴虚型PCOS小鼠模型,各组给予相应药物进行预防性治疗。观察小鼠阴道脱落细胞和卵巢组织形态学改变,称量小鼠体质量及卵巢质量,计算卵巢指数,采用酶联免疫吸附法测定小鼠血清性激素[血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)]水平,抗苗勒氏管激素(AMH)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平及cAMP/cGMP比值,从而评估加味蒌石汤对肾阴虚型PCOS模型小鼠的影响。结果与正常对照组比较,模型组小鼠体质量增量显著降低(P0.05),动情周期紊乱,卵巢湿重及卵巢指数均显著升高(P0.05),血清T,LH,cAMP,AMH水平及cAMP/cGMP比值均显著升高(P0.01),血清E2,FSH,cGMP水平均显著降低(P0.01);与模型组比较,加味蒌石汤中、高剂量组及达英-35组小鼠体质量增量均显著升高(P0.05),卵巢湿重及卵巢指数均显著降低(P0.05),各药物组动情周期逐渐恢复正常,血清T,LH,cAMP,AMH水平及cAMP/cGMP比值均显著降低,血清E2,FSH,cGMP水平均显著升高(P0.05或P0.01);各药物组之间比较,加味蒌石汤高、中剂量组及达英-35组对以上指标的改善作用显著优于加味蒌石汤低剂量组,差异均有统计意义(P0.05)。结论加味蒌石汤能有效改善血清性激素T,E2,LH,FSH水平,且随药物剂量的增高效果越好;加味蒌石汤可通过调节AMH,cAMP水平和cAMP/cGMP比值改善PCOS模型小鼠肾阴虚症状,促进卵泡发育。     

补肾益冲抗衰汤对卵巢储备功能下降大鼠血清AMH和INHB的影响

目的观察补肾益冲抗衰汤对卵巢储备功能下降模型大鼠血清内分泌及抗苗勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)的影响。方法选取40只8周龄雌性SD大鼠,分为正常对照组、模型组、补佳乐组、补肾益冲抗衰汤组,各10只,除正常对照组外,其余各组采用雷公藤多苷片+相应药物制作卵巢储备功能下降大鼠模型。通过阴道涂片观察各组大鼠动情周期,光镜下观察卵巢组织形态学变化,酶联免疫法检测血雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、AMH、INHB水平。结果补肾益冲抗衰汤能维持大鼠动情周期4~5天,促进卵泡发育成熟、改善内分泌水平,与模型组比较,E2上升[(21.51±1.26)pg/m L比(9.81±1.18)pg/m L,P0.05],FSH下降[(6.57±1.88)m IU/m L比(9.59±2.17)m IU/m L,P0.05],FSH/LH降低[(2.27±0.44)比(3.36±0.82),P0.05];升高AMH[(114.45±11.11)ng/L比(100.27±9.17)ng/L,P0.05]和INHB[(56.91±1.74)ng/L比(26.28±6.19)ng/L,P0.05]水平。结论补肾益冲抗衰汤能够改善卵巢储备功能下降(DOR)大鼠性激素水平,升高AMH、INHB水平,并减少闭锁卵泡,改善大鼠卵巢储备功能。     

魔芋葡甘露聚糖对Lewis肺癌小鼠细胞免疫功能的影响

目的观察中药蛇六谷主要成分魔芋葡甘露聚糖(KGM)对肺癌小鼠免疫功能的影响。方法建立小鼠Lewis肺癌模型后,随机分成KGM高、中、低剂量组及对照组、环磷酰胺(CTX)组。建模第2天起,KGM高、中、低剂量按300、200、100mg/(kg·d)连续灌胃13天,对照组以等剂量生理盐水灌胃13天,环磷酰胺组予环磷酰胺30mg/kg每周2次腹腔注射给药,共4次。第14天处死小鼠,取瘤体、脾脏称重并计算抑瘤率和脾脏指数,MTS法检测脾脏中T淋巴细胞增殖活力,ELISA法检测脾细胞IL-2的表达。结果 (1)与对照组比较,CTX组、KGM中、高剂量组瘤重降低明显,差异有统计学意义[(0.69±0.50)g、(1.71±0.95)g、(1.54±0.83)g比(2.51±1.11)g,P0.05];KGM低、中、高剂量组瘤重高于CTX组,差异有统计学意义[(2.15±0.88)g、(1.71±0.95)g、(1.54±0.83)g比(0.69±0.50)g,P0.05]。(2)与对照组比较,CTX组脾脏指数降低[(2.73±1.19)mg/g比(4.61±0.69)mg/g,P0.01],KGM各剂量组脾脏指数升高,其中KGM中、高剂量组差异有统计学意义[(5.93±0.88)mg/g、(6.02±1.47)mg/g比(4.61±0.69)mg/g,P0.05]。(3)与对照组比较,CTX组T淋巴细胞增殖反应能力下降[(0.4055±0.2295)比(0.6125±0.0719),P0.05],KGM各剂量组增强,其中KGM高剂量组最强[(0.8198±0.0251)比(0.6125±0.0719),P0.05];与CTX组比较,KGM各剂量组的T淋巴细胞增殖反应能力均增强[(0.6338±0.1027)、(0.70±0.0966)、(0.8198±0.0251)比(0.4055±0.2295),P0.05]。(4)与对照组比较,CTX组IL-2下降[(434.43±44.64)pg/m L比(552.98±27.99)pg/m L,P0.05],KGM各剂量组上升[(664.69±30.46)pg/m L、(830.83±71.42)pg/m L、(1058.47±70.58)pg/m L比(552.98±27.99)pg/m L,P0.05],且KGM各剂量组两两比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论 KGM通过提高Lewis肺癌小鼠脾脏T淋巴细胞增殖,上调脾细胞IL-2表达,提高其免疫功能,从而发挥抗肿瘤作用。     

黄精对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症的影响

目的观察黄精对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症的影响。方法采用连续3天腹腔注射环磷酰胺建立小鼠白细胞减少症模型;将120只SPF级ICR小鼠随机分成空白组、模型组和黄精高、中、低剂量组,每组20只,灌胃相应药物10天,测定小鼠白细胞计数,并计算脾脏系数。结果实验第10天,与空白组比较,模型组白细胞计数[(4.49±0.63)×109/L比(6.33±0.55)×109/L]和脾脏系数[(2.76±0.13)mg/g比(4.73±0.06)mg/g]均显著降低(P0.05);与模型组比较,黄精中、高剂量组白细胞计数[(10.54±0.89)×109/L、(6.19±0.18)×109/L]和脾脏系数[(4.08±0.29)mg/g、(3.08±0.11)mg/g]均显著升高(P0.05)。结论黄精粗提液对环磷酰胺致小鼠白细胞减少和脾脏系数下降有明显的改善和治疗作用。     

菝葜治疗两种不孕症大鼠模型疗效观察及初步机制研究

目的研究菝葜治疗排卵障碍型不孕症和输卵管炎性不孕症大鼠模型的疗效及其初步机制。方法 Sprague Dawley大鼠70只,采用雄激素致排卵障碍型不孕症大鼠模型,采用苯酚胶浆法致输卵管炎性不孕症大鼠模型,分别设立菝葜组、对照组、模型组和正常组。排卵障碍型不孕症大鼠菝葜组和对照组分别灌胃菝葜提取物12g/(kg·d)、枸橼酸克罗米芬4.5mg/(kg·d),模型组和正常组均灌胃蒸馏水12mg/(kg·d)。输卵管炎性不孕症大鼠除对照组灌胃妇科千金片3.0g/(kg·d),余三组同排卵障碍性不孕症。对排卵障碍型不孕症大鼠检测体质量差、子宫指数、卵巢指数、血清雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH);对输卵管炎性不孕症大鼠进行炎症评分,检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-2(IL-2)。结果排卵障碍型不孕症大鼠菝葜组体质量差比对照组和模型组明显减轻[(37.00±4.78)g比(44.37±2.26)g、(45.12±2.29)g,P0.01],卵巢指数比模型组偏高[(32.51±1.51)比(30.37±1.40),P0.05],子宫指数与模型组无差异(P0.05),血清E2、LH、FSH浓度比正常组和对照组均低,但比模型组明显偏高[E2:(619.75±25.40)pg/m L比(959.25±15.14)pg/m L、(781.00±42.69)pg/m L、(572.37±3.15)pg/m L;LH:(5.10±0.19)m IU/m L比(5.27±0.12)m IU/m L、(6.10±0.19)m IU/m L、(4.32±0.15)m IU/m L;FSH:(0.98±0.16)m IU/m L比(1.37±0.04)m IU/m L、(1.31±0.04)m IU/m L、(0.66±0.07)m IU/m L;P0.05或P0.01]。输卵管炎性不孕症大鼠菝葜组炎症评分比模型组明显降低[(1.71±0.35)分比(3.28±0.77)分,P0.01],与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),血清TNF-α和IL-2与模型组比较差异均有统计学意义[TNF-α:(0.46±0.04)ng/m L比(1.13±0.22)ng/m L;IL-2:(1.70±0.01)ng/m L比(1.00±0.17)ng/m L;P0.01],与对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论菝葜对雄激素致排卵障碍型不孕症大鼠模型的体质量有较好的干预作用,对卵巢指数的增加有一定的帮助,对血清E2、LH、FSH有一定的良性调节;菝葜对输卵管炎性不孕症大鼠模型的炎症评分有明显改善,对血清TNF-α和IL-2具有很好的调节作用。     

桑枝多糖基于YAP/ TAZ信号通路调控db/db小鼠肾纤维化作用的研究

目的研究桑枝多糖基于YAP/TAZ信号通路调控db/db小鼠肾纤维化作用的影响。方法将40只24周龄自发型2型糖尿病db/db小鼠随机分为模型组、缬沙坦组(20mg/kg)、桑枝多糖低剂量组(600mg/kg)、桑枝多糖高剂量组(1200mg/kg),每组10只,日常进行高脂饮食喂养,连续灌胃相应药物60天,每天1次。另将10只db/m小鼠为空白组,日常进行普通饲料喂养,模型组与空白组小鼠灌胃等体积生理盐水60天。给药第60天采集小鼠尿液,测量尿量及终点法测24h尿白蛋白(UP)含量。全自动生化分析仪测定小鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量。末次给药后,小鼠禁食不禁水12h,测其空腹血糖(FBG)。HE染色观察小鼠肾组织病理学变化。采用ELISA法检测肾组织纤维化指标TGF-β1、纤连蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、胶原Ⅰ型(CollagenⅠ)含量及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)含量。Western blot法检测肾组织Yes相关蛋白(YAP)、TAZ蛋白表达。结果与模型组比较,桑枝多糖低、高剂量组小鼠Scr[(0.39±0.09)mg/dL、(0.32±0.07)mg/dL比(0.62±012)mg/dL]、BUN[(25.75±4.75)mg/dL、(20.62±3.68)mg/dL比(39.18±4.63)mg/dL]、UP[(3.45±0.42)mg/24h、(2.76±0.47)mg/24h比(6.38±2.03)mg/24h]含量显著降低(P均0.05);纤维化指标TGF-β1[(3.76±0.52)ng/mL、(2.53±0.38)ng/mL比(4.98±1.17)ng/mL]、FN [(5.29±1.13)ng/mL、(4.47±1.02)ng/mL比(6.13±1.07)ng/mL]、CTGF [(14.52±1.22)ng/mL、(11.24±0.87)ng/mL比(17.52±1.26)ng/mL]、CollagenⅠ[(10.93±0.85)ng/mL、(8.14±0.76)ng/mL比(14.81±1.34)ng/mL]及炎症因子TNF-α[(87.25±7.81)ng/L、(78.66±6.36)ng/L比(134.82±8.90)ng/L]、IL-6 [(34.72±3.35)ng/L、(21.16±2.51)ng/L比(58.65±5.71)ng/mL]、MCP-1[(0.38±0.04)ng/L、(0.29±0.06)ng/L比(0.51±0.05)ng/L]含量明显减少(P均0.05),YAP[(0.48±0.06)、(0.31±0.05)比(0.53±0.11)]、TAZ[(0.31±0.04)、(0.21±0.03)比(0.37±0.05)]蛋白表达显著降低(P均0.05)。结论桑枝多糖对db/db小鼠糖尿病肾病的肾纤维化有一定的保护作用,其作用机制可能与调节YAP/TAZ信号通路,降低肾脏组织纤维化因子形成及减少炎症因子含量有关。     

苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌感染小鼠模型免疫功能的调节作用

目的分析苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)感染小鼠模型免疫功能的调节作用。方法选取30只健康雄性昆明种小鼠,采用随机数字表法分为正常组、对照组及苦参提取物组,每组10只。对照组及苦参提取物组小鼠通过尾静脉注入MDR-TB 3 m L,正常组尾静脉内注入等量0.9%Na Cl注射液。苦参提取物给予200 mg/kg苦参提取物灌胃,正常组和对照组给予等体积极0.9%Na Cl注射液灌胃。采用流式细胞仪测定血清CD+3、CD+4、CD+4/CD+8水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清γ干扰素(IFN)、白细胞介素(IL)4、IL-10、IL-12等细胞因子水平及补体C3、补体C4、免疫球蛋白(Ig)G、Ig M、Ig A水平变化。结果苦参提取物组血清CD+3、CD+4、CD+4/CD+8水平高于对照组[(0.62±0.08)%比(0.53±0.06)%,(0.50±0.06)%比(0.40±0.05)%,(1.68±0.20)比(1.42±0.12),P<0.05],CD+8水平低于对照组[(0.20±0.04)%比(0.29±0.05)%,P<0.05];与正常组[(0.64±0.07)%、(0.56±0.08)%、(0.15±0.03)%、(1.73±0.18)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。苦参提取物组血清IFN-γ、IL-12高于对照组[(1.37±0.08)ng/L比(1.18±0.05)ng/L,(2.35±0.12)ng/L比(2.08±0.11)ng/L],血清IL-10、IL-4低于对照组[(12.01±0.25)ng/L比(12.47±0.26)ng/L,(6.02±0.23)ng/L比(6.31±0.27)ng/L,P<0.05];与正常组[(1.55±0.14)ng/L、(11.23±0.26)ng/L、(5.56±0.27)ng/L、(24.7±0.07)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。苦参提取物组血清C3、C4、Ig G、Ig M、Ig A高于对照组[(1.01±0.15)g/L比(0.67±0.09)g/L,(0.26±0.06)g/L比(0.19±0.03)g/L,(13.22±1.91)g/L比(7.92±0.94)g/L,(2.57±0.63)g/L比(1.84±0.37)g/L,(1.28±0.33)g/L比(0.52±0.11)g/L,P<0.05];与正常组[(1.27±0.20)g/L、(0.31±0.08)g/L、(15.82±1.75)ng/L、(2.91±0.65)g/L、(1.35±0.37)g/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论苦参提取物可以同时提升MDR-TB小鼠的细胞免疫及体液免疫水平,具有明显的抗MDR-TB作用,可以作为苦参提取物应用于临床MDR-TB感染患者治疗的依据。     

消乳块胶囊对乳腺肿瘤模型大鼠血浆IGF-1水平的影响

目的观察消乳块胶囊对乳腺肿瘤模型大鼠血浆胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法 64只50日龄SD健康雌性未孕大鼠随机分为模型组、治疗组各25只和对照组14只。模型组和治疗组大鼠均先经2次9,10-二甲基苯蒽(DMBA,15mg溶于1.5m L芝麻油,间隔1周)灌胃造模,同时治疗组大鼠以消乳块胶囊0.4g/(kg·d)灌胃,持续给药,在第11周和14周分批处死大鼠,取乳腺组织及肿瘤组织作常规病理检查,酶联免疫吸附法测定血浆IGF-1水平。结果与病理表现正常大鼠相比,乳腺癌变及增生大鼠血浆IGF-1水平升高明显[(138.65±8.54)ng/m L、(212.32±10.38)ng/m L比(97.70±5.16)ng/m L,P0.01],癌变大鼠增高更为明显,与增生大鼠相比,差异有统计学意义[(212.32±10.38)ng/m L比(138.65±8.54)ng/m L,P0.05]。模型组、治疗组11、14周时血浆IGF-1较对照组明显增高[11周:(196.99±7.85)ng/m L、(142.33±8.62)ng/m L比(101.46±7.07)ng/m L,P0.01;14周:(229.40±13.37)ng/m L、(138.75±8.82)ng/m L比(90.26±2.50)ng/m L,P0.01],治疗组11、14周血浆IGF-1水平较模型组有明显下降[11周:(142.23±8.62)ng/m L比(196.99±7.85)ng/m L,P0.01;14周:(138.75±8.82)ng/m L比(229.40±13.37)ng/m L,P0.01]。结论消乳块胶囊对DMBA诱导的大鼠乳腺恶性肿瘤具有部分预防作用,其机制可能是通过降低血浆IGF-1水平来实现。     

调经汤对卵巢早衰模型大鼠卵巢功能影响的实验研究

目的观察调经汤对卵巢早衰模型大鼠卵巢功能的影响。方法将60只雌性成熟未交配Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性药物对照组、调经汤低、中、高剂量组,每组10只。空白组大鼠按0.4mL/100g体质量腹腔注射无菌注射用水,其余各组大鼠按0.4mL/100g体质量腹腔注射浓度为0.5mg/mL的顺铂溶液,连续7天。观察大鼠行为变化、动情周期,采用放射免疫法检测大鼠血清促卵泡生成素(FSH)、雌激素(E2)和促黄体生成素(LH)水平,光镜观察卵巢组织形态改变。结果模型组和阳性药物对照组大鼠无稳定的动情周期,调经汤中、高剂量组逐渐恢复规律的动情周期。给药后第7、14天,与空白对照组比较,模型组大鼠血清FSH、LH升高,E2降低,差异有统计学意义[第7天:(7.38±0.99)IU/L比(6.18±0.24)IU/L,(3.35±0.27)ng/L比(2.79±0.24)ng/L,(94.04±6.22)ng/L比(109.10±5.69)ng/L,P均0.05;第14天:(8.01±0.13)IU/L比(6.97±0.88)IU/L,(4.22±0.82)ng/L比(3.20±0.17)ng/L,(131.74±23.65)ng/L比(157.82±5.68)ng/L,P均0.05];给药后第7天,与模型组比较,调经汤低、中、高剂量组大鼠血清FSH降低,E2升高,差异有统计学意义[(5.72±0.51)IU/L、(6.20±1.05)IU/L、(6.08±0.26)IU/L比(7.38±0.99)IU/L;(104.46±10.25)ng/L,(104.48±12.85)ng/L,(106.64±8.67)ng/L比(94.04±6.22)ng/L,P均0.05];血清LH含量水平虽降低,但差异无统计学意义[(2.96±0.38)ng/L、(3.00±0.19)ng/L、(2.96±0.23)ng/L比(3.35±0.27)ng/L,P0.05]。给药后第14天,与模型组比较,调经汤中剂量组大鼠血清FSH、LH降低,E2升高,差异有统计学意义[(7.02±1.04)IU/L比(8.01±0.13)IU/L,(3.37±0.53)ng/L比(4.22±0.82)ng/L,(153.67±20.55)ng/L比(131.74±23.65)ng/L,P均0.05]。模型组大鼠卵巢萎缩,卵泡生长少,闭锁卵泡增加,部分被纤维组织代替,黄体数量少,子宫内膜明显变薄。调经汤低、中、高剂量组大鼠卵泡数量和黄体数目不同程度增多,子宫内膜有所增厚。结论调经汤能有效改善顺铂诱导的卵巢早衰模型大鼠的卵巢功能。     

金匮肾气丸调控β-catenin通路治疗去卵巢小鼠骨质疏松

目的探讨金匮肾气丸治疗去卵巢小鼠骨质疏松疗效和分子机制。方法 24只10周龄雌性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组和金匮肾气丸组,每组8只。模型组和金匮肾气丸组小鼠摘除双侧卵巢造模,假手术组切除卵巢周围等量脂肪组织。术后第4天开始,金匮肾气丸组给予金匮肾气丸溶液含生药1g/m L 0.2m L/天,模型组给予等量生理盐水灌胃。干预8周后,摘取小鼠双侧股骨进行Micro-CT、病理染色和q RT-PCR检测。结果与假手术组比较,模型组小鼠骨密度[(0.90±0.07)mg/mm~3比(1.21±0.10)mg/mm~3,P0.05]、骨体积分数[(26.31±2.90)%比(42.10±5.35)%,P0.05]和骨小梁数目[(2.39±0.29)N/mm比(3.51±0.42)N/mm,P0.05]均降低,骨小梁间距增加[(0.34±0.08)mm比(0.21±0.05)mm,P0.05],骨小梁厚度无显著变化[(0.12±0.01)mm比(0.12±0.03)mm,P0.05],骨小梁面积分数减少[(12.89±4.36)%比(22.52±2.32)%,P0.05],骨髓腔内脂肪空泡面积比[(13.01±4.95)%比(3.03±0.66)%,P0.05]和直径[(32.03±5.62)μm比(23.22±1.90)μm,P0.05]均增加。β-catenin及其下游Osterix和ALP基因表达减少[β-catenin:(0.39±0.14)比(1.04±0.34);Osterix:(0.36±0.13)比(1.11±0.35);ALP:(0.27±0.08)比(1.00±0.12);P均0.05)]。金匮肾气丸治疗后,小鼠股骨骨密度升高[(1.15±0.12)mg/mm~3比(0.90±0.07)mg/mm~3,P0.05],骨体积分数[(34.24±4.01)%比(26.31±2.90)%,P0.05]和骨小梁数目[(2.72±0.25)N/mm比(2.39±0.29)N/mm,P0.05]均升高,骨小梁间距减少[(0.26±0.03)mm比(0.34±0.08)mm,P0.05],骨小梁厚度无显著变化[(0.12±0.02)mm比(0.12±0.01)mm,P0.05],骨小梁面积分数增加[(20.17±4.88)%比(12.89±4.36)%,P 0.05],髓腔内脂肪空泡面积[(6.96±3.58)%比(13.01±4.95)%,P 0.05]和直径[(25.43±3.91)μm比(32.03±5.62)μm,P均0.05]均减少。β-catenin、Osterix和ALP的m RNA表达升高[β-catenin:(0.877±0.224)比(0.387±0.139);Osterix:(0.881±0.187)比(0.362±0.134);ALP:(0.812±0.145)比(0.272±0.077),P均0.05]。结论金匮肾气丸能有效延缓去卵巢小鼠骨量丢失,其可能作用机制是促进β-catenin及下游Osterix、ALP成骨基因表达,进而影响干细胞向成骨细胞分化。     

Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用研究

目的探讨Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用。方法 8周龄雄性BALB/C小鼠分为正常对照组和模型组,各18只。模型组小鼠注射阿霉素(ADR,浓度2mg/m L,剂量10mg/kg鼠重)造模,正常对照组小鼠给予等量的生理盐水,于第4、8、12周每组各处死6只小鼠,检测24h尿蛋白定量、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC),光镜观察肾脏组织病理学改变,免疫组织化学技术检测足细胞数量,RT-q PCR技术检测肾脏组织Kindlin-2、肾病蛋白(Nephrin)及Podocin m RNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组4、8、12周24h尿蛋白定量、血总胆固醇(TC)均增加[24h尿蛋白定量:(5.66±1.06)mg/24h比(1.72±0.62)mg/24h、(4.63±1.16)mg/24h比(1.77±0.63)mg/24h、(4.78±0.87)mg/24h比(1.69±0.49)mg/24h;血TC:(8.84±1.30)mmol/L比(2.01±0.49)mmol/L、(7.45±1.27)mmol/L比(2.06±0.49)mmol/L、(6.79±1.38)mmol/L比(2.10±0.54)mmol/L,P均0.05];血ALB水平降低[(11.98±1.33)g/L比(22.27±1.41)g/L、(12.78±1.47)g/L比(22.65±1.49)g/L、(12.99±1.38)g/L比(23.31±1.49)g/L,P均0.05];模型组第4周可见部分肾小球出现局灶、节段硬化,伴有足细胞肿胀;第8周部分肾小球出现球性硬化,伴有明显的足细胞增生和肥大;第12周弥漫性肾小球出现球形硬化。模型组足细胞数量随着时间的进展逐渐减少[(77.40±7.56)个/肾小球比(104.00±10.05)个/肾小球,(63.27±8.51)个/肾小球比(103.80±12.23)个/肾小球,(53.15±8.23)个/肾小球比(98.86±8.89)个/肾小球,P均0.05]。模型组第4周开始Kindlin-2 m RNA水平明显上调[(1.14±0.06)、(1.13±0.08)、(1.45±0.10)比(0.82±0.07),P均0.05],Podocin m RNA水平明显下调[(1.79±0.08)、(1.64±0.06)、(1.45±0.07)比(2.05±0.05),P均0.05],第8周开始Nephrin m RNA水平明显下调[(1.42±0.13)、(1.17±0.11)比(2.06±0.20),P均0.05]。Kindlin-2 m RNA水平与足细胞数量(r=-0.02,P0.01)、Nephrin m RNA水平(r=-0.8,P0.01)、Podocin m RNA水平(r=-0.9,P0.01)呈显著负相关。结论 Kindlin-2可能通过介导足细胞损伤参与小鼠局灶节段肾小球硬化症的发病过程。     

姜黄素对VEGF诱导下HaCaT细胞增殖及miR-203表达的影响

目的观察姜黄素对血管内皮生长因子(VEGF)干预后Ha Ca T细胞增殖及细胞内微小RNA-203(mi R-203)表达的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度姜黄素(0、19.5、39、78.1、156.2、312.5、625、1250、2500、5000ng/m L)对VEGF刺激干预后Ha Ca T细胞增殖的影响。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测25ng/m L VEGF、1380ng/m L姜黄素、5000ng/m L姜黄素分别及联合作用下对Ha Ca T细胞内mi R-203表达的影响。结果姜黄素在实验浓度范围内呈浓度依赖性抑制Ha Ca T细胞增殖,与0ng/m L姜黄素比较,2500ng/m L姜黄素明显抑制细胞增殖[(0.383±0.006)比(0.520±0.017),P0.05]。与空白组比较,25ng/m L VEGF诱导下的Ha Ca T细胞mi R-203表达明显上调[(4.049±0.302)比1,P0.05],而5000ng/m L姜黄素能明显抑制Ha Ca T细胞mi R-203表达[(0.449±0.052)比1,P0.05],下调25ng/m L VEGF刺激干预下Ha Ca T细胞mi R-203表达[(1.737±0.130)比(4.049±0.302),P0.05]。结论姜黄素可能通过下调mi R-203表达抑制Ha Ca T细胞过度增殖。     

复方黄芪养心合剂对大鼠缺血心肌缝隙连接蛋白CX43磷酸化的影响

目的观察复方黄芪养心合剂(CAMNH)对冠状动脉左前降支结扎所致心肌缺血模型大鼠缝隙连接蛋白CX43的影响。方法 50只SD大鼠采用随机数字表法分为CAMNH大剂量组28g(14mL·kg~(-1)·d~(-1))、CAMNH小剂量组7g(3.5mL·kg~(-1)·d~(-1))、琥珀酸美托洛尔(MSSRT)组9.5ug(7mL·kg~(-1)·d~(-1))、模型组、假手术组五组,每组10只,给予相应药物灌胃后采用冠状动脉左前降支结扎术造模,结扎1h后腹主动脉取血,HE染色观察心肌细胞形态改变;采用ELISA法检测心肌肌钙蛋白I(cTn-I)和肌钙蛋白T(cTn-T)水平;采用Western blot(WB)法检测磷酸化的缝隙连接蛋白CX43表达。结果 cTn-I、cTn-T:与假手术组相比,模型组、MSSRT组、CAMNH小剂量组、CAMNH大剂量组均升高[cTn-I:(144.94±28.83)ng/L、(85.48±24.06)ng/L、(115.07±21.34)ng/L、(81.63±16.89)ng/L比(58.50±9.53)ng/L;cTn-T:(144.33±20.29)ng/L、(97.89±11.78)ng/L、(121.33±15.02)ng/L、(100.20±5.66)ng/L比(77.40±12.52)ng/L,P0.05或P0.01];MSSRT组与模型组比较升高幅度明显减少(P0.01);CAMNH大剂量组与假手术组比明显增高,与CAMNH小剂量组、模型组比增高程度减少(P0.05或P0.01)。WB结果:与假手术组相比,模型组、MSSRT组、CAMNH小剂量组、CAMNH大剂量组CX43表达减少[(0.07±0.01)、(0.13±0.01)、(0.10±0.02)、(0.13±0.02)比(0.18±0.02),P0.01];MSSRT组与模型组比较明显增多[(0.13±0.01)比(0.07±0.01),P0.01];CAMNH小剂量组与模型组比较略升高[(0.10±0.02)比(0.07±0.01),P0.01],与假手术组、MSSRT组相比明显减少[(0.10±0.02)比(0.18±0.02)、(0.13±0.01),P0.05];CAMNH大剂量组与假手术组比明显减少[(0.13±0.02)比(0.18±0.02),P0.01],与CAMNH小剂量组、模型组比增高程度减少[(0.13±0.02)比(0.10±0.02)、(0.07±0.01),P0.05]。结论复方黄芪养心合剂能降低冠状动脉左前降支结扎所引起的心肌缺血损伤,作用与琥珀酸美托洛尔缓释片相当。     

六味地黄汤及“补泻”药对对肾阴虚模型小鼠HPA轴功能及肾上腺组织形态学的影响

目的 观察六味地黄汤及三个“一补一泻”药对对肾阴虚模型小鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能及肾上腺形态的影响.方法 将小鼠随机分为空白组、模型组和给药组(六味地黄汤组、山茱萸-牡丹皮组、熟地黄-泽泻组、山药-茯苓组)共6个试验组;连续9d分别灌胃给予以上对应药物;第5～9天,除空白组灌胃蒸馏水外,其他各组按50 mg/kg体质量每天灌胃氢化可的松注射液,称体质量,测定环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor.)含量,观察肾上腺病理切片.结果 肾阴虚模型小鼠体质量、血浆cGMP含量降低,血浆cAMP、血清ACTH、Cor.含量升高,与空白组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),肾上腺组织受损;与模型组比较,六味地黄汤能上调模型小鼠体质量、血浆cGMP含量,下调血浆cAMP含量、血清ACTH、Cor.含量(P＜0.05,P＜0.01),修复受损肾上腺组织;山茱萸-牡丹皮药对能下调模型小鼠血浆cAMP、血清ACTH含量(P＜0.01),修复受损肾上腺组织.结论 六味地黄汤能改善肾阴虚证,其作用机制可能与其降低垂体分泌的ACTH含量、下调肾上腺分泌的Cor.含量,改善HPA轴的功能及肾上腺形态有关.其中山茱萸-牡丹皮药对是该方改善肾阴虚证的主要药效物质基础.     

加味黄风汤对糖尿病肾病模型大鼠肾组织8-OHdG表达的影响

目的观察加味黄风汤对糖尿病肾病模型大鼠肾脏8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平的影响。方法 40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、加味黄风汤低、高剂量组,各10只,除空白对照组外其余组大鼠均经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造模,8周后检测24h尿微量白蛋白,检测血清肌酐及血糖水平,肾组织病理切片光镜及电镜检查,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肾组织8-OHdG表达水平,化学发光法(Luminescence)检测大鼠肾组织腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平。结果模型组大鼠24h尿微量白蛋白较空白对照组增加[(1702.06±659.75)μg比(503.03±320.16)μg,P0.05],肾脏病理可见肾小球肥大,系膜基质增生,基底膜增厚及足细胞足突融合,模型组大鼠肾组织8-OHdG表达水平较空白对照组增加[(795.23±185.73)ng/mL比(600.79±159.54)ng/mL,P0.05)],肾组织ATP水平较空白对照组下降[(0.27±0.17)pmol/mg比(0.72±0.14)pmol/mg,P0.05)]。治疗8周后加味黄风汤低、高剂量组糖尿病肾病模型大鼠24h尿微量白蛋白水平明显下降[(783.34±326.11)μg比(1567.46±621.97)μg,(610.99±325.54)μg比(1610.34±695.64)μg,P0.05];血糖水平明显下降[(24.31±1.90)mmol/L比(29.19±1.88)mmol/L,(23.97±2.73)mmol/L比(30.56±1.88)mmol/L,P0.05];光镜下肾小球肥大、系膜基质增生减轻;电镜下足细胞足突融合、基底膜增厚情况都有所改善。加味黄风汤低、高剂量组较模型组肾组织8-OHdG表达水平均有所下降[(695.49±159.76)ng/mL、(610.61±71.43)ng/mL比(795.23±185.73)ng/mL,P0.05]。高剂量组肾组织8-OHdG表达水平低于低剂量组,但二者差异无统计学意义[(610.61±71.43)ng/mL比(695.49±159.76)ng/mL,P0.05]。加味黄风汤低、高剂量组较模型组肾组织ATP表达水平均有所上升[(0.39±0.15)pmol/mg、(0.52±0.14)pmol/mg比(0.27±0.17)pmol/mg,P0.05]。高剂量组ATP表达水平高于低剂量组,但二者差异无统计学意义[(0.52±0.14)pmol/mg比(0.39±0.15)pmol/mg,P0.05]。结论糖尿病肾病模型大鼠肾组织8-OHdG表达明显上升,ATP表达水平下降,出现蛋白尿,足细胞损伤。加味黄风汤可下调糖尿病肾病模型大鼠肾组织8-OHdG表达水平,提高肾组织ATP水平,减轻蛋白尿水平,改善血糖,保护肾功能。     

腹腔镜结直肠癌根治术的临床研究

目的研究腹腔镜结直肠癌根治术的临床价值。方法选择2012年5月至2015年3月乐山市市中区人民医院收治的结直肠癌患者80例为研究对象,采用随机数字表法分为腹腔镜组和开腹组,各40例。腹腔镜组进行腹腔镜下结直肠癌根治术,开腹组进行常规开腹结直肠癌根治术。比较两组患者的手术情况、炎症应激反应、胃肠功能、术后存活和复发情况。结果腹腔镜组患者手术时间、术中出血量、术后切口引流量、术后卧床时间等均明显低于对照组[(79±9)min比(121±16)min、(37±4)m L比(78±9)m L、(24±4)m L比(51±7)m L、(2.6±0.7)d比(4.1±0.6)d],差异有统计学意义(P<0.01)。腹腔镜组术后肿瘤坏死因子α、C反应蛋白、白细胞介素6、去甲肾上腺素、皮质醇均低于开腹组[(45±5)mg/L比(59±6)mg/L,(34.9±4.6)mg/L比(66.4±7.3)mg/L,(81±8)μg/L比(103±11)μg/L,(321±26)μg/L比(362±35)μg/L,(145±18)μg/L比(232±34)μg/L],差异有统计学意义(P<0.01)。腹腔镜组术后腹胀持续时间、肛门排气时间短于开腹组[(3.3±0.5)d比(4.9±0.7)d,(3.0±0.5)d比(4.1±0.5)d],胃动素、胃泌素高于开腹组[(225±28)ng/L比(168±21)ng/L,(118±12)ng/L比(88±10)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01)。术后3年,腹腔镜组病死率和复发率低于开腹组(P<0.05)。结论腹腔镜下结直肠癌根治术有助于减小手术创伤,缓解炎症与应激反应,保护胃肠功能,促进术后恢复,改善预后情况。     

银杏叶片对土三七诱导大鼠肝小静脉闭塞病的干预作用

目的观察银杏叶片对土三七诱导的大鼠肝小静脉闭塞病(HVOD)的干预作用。方法雌性SD大鼠42只,采用土三七诱导建立大鼠HVOD模型,随机分为对照组10只,模型组12只,银杏叶片低、高剂量组10只。对照组大鼠给予蒸馏水7m L/(kg·d)灌胃;模型组给予土三七浓缩煎液7m L/(kg·d)灌胃;银杏叶片低、高剂量组分别给予土三七提取液[7m L/(kg·d)]+银杏叶片[50mg/(kg·d)]、土三七提取液[7m L/(kg·d)]+银杏叶片[100mg/(kg·d)]灌胃;4周后处死大鼠,采集血清、肝组织,检测血清学指标、观察肝组织病理学变化,评价肝脏胶原表达及纤维化程度。结果银杏叶片低、高剂量组大鼠总胆红素(TBILI)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)等较模型组均有显著降低[TBILI:(2.43±1.00)μmol/L、(2.28±0.55)μmol/L比(6.02±1.26)μmol/L,P0.05;ALT:(117.44±35.24)U/L、(98.13±13.50)U/L比(143.54±23.25)U/L,P0.05,P0.01;AST:(220.44±48.13)U/L、(198.20±41.64)U/L比(303.92±51.53)U/L,P0.05,P0.01;HA:(157.80±41.63)ng/m L、(162.63±13.48)ng/m L比(189.72±23.30)ng/m L,P0.05,P0.01;PCⅢ:(16.26±2.86)ng/m L、(14.40±1.73)ng/m L比(20.50±4.52)ng/m L,P0.05,P0.01];银杏叶片低、高剂量组大鼠血白蛋白(ALB)较模型组显著增加[(31.95±1.64)、(32.48±1.33)g/L比(29.08±3.62)ng/L,P0.05],银杏叶片高剂量组Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)较低剂量治疗组下降更明显[(2.58±0.36)ng/m L比(3.16±0.76)ng/m L,P0.05];病理学检查示,银杏叶片各剂量组较模型组肝纤维化程度轻,其中高剂量组改善更显著。结论银杏叶片对土三七诱导的大鼠HVOD有明显的防治作用。     

衢枳壳提取物改善2型糖尿病db/db模型小鼠肾脏氧化损伤的作用研究

目的观察衢枳壳提取物(QFAE)改善2型糖尿病db/db模型小鼠肾脏氧化损伤的作用及机制。方法 24只7～8周龄雄性C57BLKS/J db/db模型小鼠随机分为模型组,QFAE低、高剂量组,每组8只;同时以8只C57BLKS/J db野生型小鼠为对照组,对照组和模型组小鼠每天以蒸馏水灌胃,QFAE低、高剂量组小鼠每天按QFAE 100、300mg/kg灌胃,连续7周。记录小鼠体质量、血糖、肾质量;检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性;HE染色观察肾组织病理学形态;RT-PCR法检测各组小鼠肾组织抗氧化基因谷氨酸-半胱氨酸修饰亚基(Gclm)、醌氧化还原酶1(Nqo1)和谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(Gclc)表达情况。结果与模型组比较,QFAE对db/db模型小鼠血糖[(31.30±1.88)mmol/L、(30.78±2.07)mmol/L比(32.78±0.66)mmol/L,P0.05]、体质量[(44.76±3.55)g、(43.92±4.58)g比(45.26±2.74)g,P0.05]无影响,但显著减轻小鼠肾质量[(0.54±0.04)g、(0.48±0.08)g比(0.66±0.05)g,P均0.01],降低血清Cr[(38.16±2.47)μmol/L、(36.17±2.00)μmol/L比(45.76±3.70)μmol/L,P0.05或P0.01]和血清BUN [(7.72±1.22)mmol/L、(7.55±0.72)mmol/L比(11.31±0.63)mmol/L,P均0.01]水平,提高肾组织SOD [(125.74±18.17)U/mgprot、(147.64±16.36)U/mgprot比(107.15±10.83)U/mgprot,P均0.05]、GSH [(2.34±0.28)μmol/mgprot、(2.40±0.26)μmol/mgprot比(1.93±0.06)μmol/mgprot,P0.05或P0.01]和CAT [(38.20±6.53)U/mgprot、(42.50±10.90)U/mgprot比(28.99±1.67)U/mgprot,P0.05或P0.01]活性,且显著减轻肾组织病理损伤。RT-PCR结果显示,与模型组比较,QFAE能够促进抗氧化基因Gclm[(1.30±0.15)、(1.46±0.27)比(0.87±0.11),P0.05或P0.01]、Nqo1 [(1.23±0.06)、(1.31±0.18)比(0.82±0.16),P0.05或P0.01]、Gclc [(1.19±0.08)、(1.28±0.16)比(0.93±0.11),P0.05或P0.01]mRNA表达。结论 QFAE能够显著改善2型糖尿病db/db小鼠肾脏氧化损伤,其机制可能与促进抗氧化基因表达,提高肾组织抗氧化能力有关。