褐藻素对脂多糖活化小胶质细胞诱导神经元损伤的保护作用

目的 探讨褐藻素是否对脂多糖(LPS)激活的小胶质细胞诱导神经元细胞损伤具有保护作用。方法 采用LPS活化BV2小胶质细胞构建小胶质细胞激活模型。将BV2细胞分为6组：正常对照组、LPS组、低剂量褐藻素治疗组、高剂量褐藻素治疗组、正常低剂量褐藻素对照组、正常高剂量褐藻素对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组BV2细胞上清中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平；通过活性氧(ROS)试剂盒和线粒体膜电位试剂盒，采用流式细胞术分别检测各组BV2细胞的ROS水平和线粒体膜电位；采用CCK-8检测各组BV2细胞条件培养基与SH-SY5Y细胞共培养24 h后SH-SY5Y细胞的细胞存活率；采用膜联蛋白(Annexin)Ⅴ-异硫氰酸荧光素(FITC)试剂盒、流式细胞仪检测各组SH-SY5Y细胞的凋亡情况。结果 与正常对照组相比，LPS组TNF-α、IL-6水平明显增加(P<0.05);与LPS组相比，高、低剂量褐藻素治疗组TNF-α和IL-6水平均明显降低(P<0.05)。正常对照组和正常低、高剂量褐藻素对照组TNF-α和IL-6水平均无明显差异(P>...     

岩白菜素对脂多糖诱导小胶质细胞炎症反应的抑制作用及其分子机制

目的 探讨岩白菜素对脂多糖（LPS）诱导的BV2小胶质细胞炎症反应模型的影响以及其机制是否与调控小胶质细胞M1/M2表型极化相关。方法 BV2小胶质细胞分为对照组、LPS组、LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组，LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组分别加入10μmol/L、100μmol/L的岩白菜素预处理2 h后与LPS组一起加入LPS刺激诱导炎症反应模型，对照组正常培养不做任何处理。各组置于倒置显微镜下观察细胞形态变化，Western blotting法检测细胞M1型小胶质细胞分泌型标志物一氧化氮诱导合酶（iNOS）、M2型小胶质细胞分泌型标志物精氨酸1(Arg-1)蛋白表达。结果 对照组细胞呈梭形，胞体小，有较少的分支形成；LPS组细胞胞体变大，细胞分支增多，呈阿米巴样；LPS+低剂量岩白菜素组、LPS+高剂量岩白菜素组细胞形态均较LPS组有改善，胞体变圆，分支减少。细胞iNOS蛋白表达对照组、LPS+高剂量岩白菜素组、LPS+低剂量岩白菜素组>LPS组；细胞Arg-1蛋白表达LPS组>iNOS蛋白表达对照组、LPS+高剂量岩白菜素组、LP...     

枸杞多糖对糖尿病大鼠视网膜caspase-3、Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨枸杞多糖对糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用及作用机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠动物模型。将60只大鼠随机分为对照组、模型组、枸杞多糖低、中、高浓度组。枸杞多糖低、中、高浓度组分别灌胃给予枸杞多糖50、100、200 mg/kg,干预12 w后观察大鼠视网膜病理学变化情况,采用TUNEL法检测大鼠视网膜神经细胞凋亡情况。采用RT-PCR检测视网膜caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA,采用Western印迹法检测视网膜caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组视网膜细胞出现水肿,排列稀疏紊乱,膜盘间隙出现空泡样,视网膜细胞凋亡指数明显升高(P<0.05),视网膜caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),视网膜Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,枸杞多糖低、中、高浓度组视网膜细胞水肿减轻,细胞层次清晰,排列整齐,视网膜细胞凋亡指数明显下降(P<0.05),视网膜caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P<0.05),视网膜Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论枸杞多糖可通过升高视网膜Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平,降低视网膜caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平减少视网膜神经节细胞凋亡,有效防治糖尿病视网膜病变。     

黄芪多糖对老年糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的探讨黄芪多糖对老年糖尿病大鼠糖脂代谢的影响。方法将54只老年大鼠分为对照组、模型组(糖尿病组)、阳性对照组(糖尿病+二甲双胍)和黄芪多糖组(糖尿病+黄芪多糖,分高、中、低剂量),每组9只。2型糖尿病建模成功后,阳性对照组给予二甲双胍灌胃,黄芪多糖组给予黄芪多糖灌胃。测量各组大鼠空腹血糖、糖耐量计算曲线下面积(AUC)、空腹胰岛素及血脂水平。结果模型组、阳性对照组和黄芪多糖高剂量组1、2、4、6 w时空腹血糖均高于对照组(P0.05);阳性对照组、黄芪多糖高剂量组1 w和2 w时空腹血糖和模型组比较差异无统计学意义(P0.05),4 w和6 w时空腹血糖低于模型组(P0.05)。模型组、阳性对照组和黄芪多糖高剂量组糖耐量0、0.5、1.0、1.5、2.0 h血糖水平和AUC均高于对照组(P0.05);阳性对照组、黄芪多糖高剂量组糖耐量0.0、1.0、1.5、2.0 h血糖水平和AUC低于模型组(P0.05),0.5 h血糖水平和模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。模型组空腹胰岛素高于对照组,胰岛素敏感指数低于对照组,阳性对照组、黄芪多糖组高剂量空腹胰岛素低于模型组,胰岛素敏感指数高于模型组(均P0.05)。模型组和黄芪多糖高剂量组三酰甘油、总胆固醇和低密度脂蛋白水平均高于对照组(P0.05);黄芪多糖高剂量组三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白水平均低于模型组(P0.05),模型组高密度脂蛋白水平低于对照组(P0.05)。结论老年糖尿病大鼠存在血糖血脂异常,黄芪多糖可以改善老年糖尿病大鼠的血糖血脂水平。     

铁皮石斛多糖对高糖状态下视网膜Müller细胞活力及凋亡的调控

目的通过检测高糖和铁皮石斛多糖培养对高糖状态下大鼠视网膜Müller细胞活力和凋亡的调控,探讨铁皮石斛多糖保护糖尿病引起视网膜损伤的机制。方法大鼠视网膜Müller细胞用高糖(25 mmol/L)孵育48 h诱导损伤,同时用铁皮石斛多糖(100、200和400μg/ml)处理细胞48 h。实验分为正常对照组、铁皮石斛多糖(低、中、高剂量)组、高糖模型组、低、中、高剂量铁皮石斛多糖处理高糖组。采用MTT法和流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡,并计算细胞凋亡率。结果与对照组相比,高糖组Müller细胞活力显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05),铁皮石斛多糖(100、200和400μg/ml)没有显著影响Müller细胞活力和细胞凋亡(均P>0.05),与高糖组相比,高糖+铁皮石斛(100、200和400μg/ml)组Müller细胞活力显著增加(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论铁皮石斛多糖可能通过提高Müller细胞活性,减少Müller的凋亡,达到保护高糖状态下视网膜损伤的作用。     

黄芪多糖对厌食大鼠胃肠动力及氧自由基表达的影响

目的分析黄芪多糖对厌食大鼠胃肠动力与氧自由基表达的影响。方法 SPF级健康SD大鼠105只,将其中15只作为空白对照组,其他90只作为建模组,空白对照组给予常规饲养与自由饮水,建模组喂养特制饲料、自由饮水;经随机数字表法将建模组分为6组,均为15只,模型组:不给药;中成药对照组:给予江中健胃消食片;西药对照组:给予多潘立酮混悬液(吗丁啉);黄芪多糖低剂量组:给予低剂量(100 mg/kg)黄芪多糖;黄芪多糖中剂量组:给予中剂量(200 mg/kg)黄芪多糖;黄芪多糖高剂量组:给予高剂量(300 mg/kg)黄芪多糖。每日详细记录并对比空白对照组与建模组大鼠的摄食量及体重,对比摄食第1天、第7天、第14天、第21天、第28天、第35天两组大鼠摄食量与体重变化情况;记录各组模型大鼠实验结束时的胃肠动力变化情况,包括胃排空能力、小肠推进能力,即胃内残留率与小肠推进率,记录各组模型大鼠实验结束时氧自由基表达变化情况,即血超氧化物歧化酶(SOD)表达变化;记录各组模型大鼠实验结束时的胃动素(MTL)表达变化,包括外周血MTL、下丘脑MTL。结果摄食第1天两组大鼠摄食量比较差异无统计学意义(P0.05);摄食第7、14、21、28、35天,两组大鼠摄食量均呈递增趋势,但建模组大鼠升高幅度不及空白对照组,差异有统计学意义(P0.05)。摄食第1、7、14、21、35天两组大鼠体重比较,差异无统计学意义(P0.05);摄食第28天,建模组大鼠体重明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05)。7组大鼠中,黄芪多糖高剂量组胃内残留率最低、小肠推进率最高,其次为黄芪多糖中剂量组、西药对照组、空白对照组、中成药对照组、黄芪多糖低剂量组、模型组,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。7组中,空白对照组大鼠SOD表达最高,其次为黄芪多糖高剂量组、黄芪多糖中剂量组、中成药对照组、西药对照组、黄芪多糖低剂量组、模型组,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。7组大鼠中,黄芪多糖高剂量组大鼠外周血、下丘脑MTL表达最高,其次为黄芪多糖中剂量组、西药对照组、空白对照组、中成药对照组、黄芪多糖低剂量组、模型组,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论黄芪多糖利于促进厌食症大鼠小肠推进、胃排空功能加强与氧自由基表达改善,对提高患者血内、下丘脑内氧化自由基表达有重要应用价值,可能是治疗厌食症的机制之一。     

金钗石斛多糖对2型糖尿病大鼠心肌组织凋亡相关蛋白的影响

目的探讨金钗石斛多糖对2型糖尿病大鼠心肌组织Bcl-2、Bcl-xl、Bax和Bad凋亡蛋白表达的影响,探讨其对心肌的保护作用机制。方法 60只雄性SD大鼠,在适应性喂养2周后随机分为正常对照组、2型糖尿病心肌损伤组(模型组)、金钗石斛多糖低、中和高剂量治疗组以及阳性药物贝那普利治疗组(阳性对照组),每组均为10只。造模成功后,给予相应治疗,正常对照组和模型组给予1 m L/(kg·d)生理盐水灌胃;金钗石斛多糖3个剂量组分别给予金钗石斛多糖100 mg/(kg·d)、200 mg/(kg·d)和400mg/(kg·d)灌胃治疗;阳性对照组则给予贝那普利1 mg/(kg·d)灌胃治疗,8周后检测心脏指数,之后处死大鼠,检测血糖和胰岛素含量,HE染色检测心脏病理学,荧光定量PCR和Western blot检测心肌组织中Bcl-2、Bcl-xl、Bax和Bad的表达特点。结果正常对照组大鼠精神状态良好,模型组有明显的多饮、多食和多尿的特点,金钗石斛多糖3个剂量治疗组和贝那普利阳性对照组大鼠一般情况较模型组明显好转,但和正常对照组比较差异仍较明显。模型组较正常对照组血糖和胰岛素抵抗指数明显升高,胰岛素含量明显下降;金钗石斛多糖有一定降低血糖、升高胰岛素含量的作用;而贝那普利改善血糖和胰岛素抵抗指数能力较差。模型组较正常对照组左室收缩压(LVSP)及左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)显著降低,左室舒张末压(LVEDP)明显升高;金钗石斛多糖3个剂量治疗组和贝那普利阳性对照组可以明显升高大鼠LVSP和±dp/dtmax,降低LVEDP(P 0.05),而金钗石斛多糖中剂量组和贝那普利阳性对照组疗效基本一致。病理学检测可见,正常对照组大鼠心肌纤维排列整齐,细胞核大小均一;模型组则有明显的心肌纤维断裂和细胞核大小不均一;金钗石斛多糖3个剂量治疗组和贝那普利阳性对照组对改善受损的心肌具有明显的促进作用。模型组较正常对照组Bcl-2、Bcl-xl表达明显降低,Bax及Bad明显升高;金钗石斛多糖和贝那普利可以明显升高Bcl-2和Bcl-xl表达,降低Bax和Bad表达(P 0.05)。结论高脂高糖饮食6个月构建的2型糖尿病大鼠具有明显的心肌损伤特点,而金钗石斛多糖不仅对降低血糖和升高胰岛素含量有明显的促进作用,其对心脏基本指数的改善也有明显的促进作用,其作用机制可能是通过调节凋亡因子Bcl-2、Bcl-xl、Bax和Bad实现的。     

丙泊酚对脂多糖诱导的小胶质细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨丙泊酚能否通过抑制核因子(NF)-κB活化下调脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达。方法将BV2细胞分为4组即对照组、丙泊酚组、丙泊酚+LPS组和LPS组。在干预0 h和24 h时使用MTT法检测BV2细胞活性。在干预24 h后使用RTPCR法和Western印迹法对BV2细胞TNF-αmRNA和蛋白的表达水平进行检测;并使用Western印迹法对细胞NF-κB p65磷酸化水平(phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值)进行分析。结果在给予LPS干预24 h后BV2细胞活性明显降低(P均0.05);但丙泊酚+LPS组细胞活性较LPS组增加(P均0.05),同时对照组和丙泊酚组细胞活性无统计学差异(P均0.05)。与对照组相比较,在LPS干预24 h后BV2细胞TNF-αmRNA和蛋白的表达水平以及phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值均明显升高(P均0.05);但LPS组较丙泊酚+LPS组TNF-α表达的升高以及phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值的增加更加显著(P均0.05);同时对照组和丙泊酚组TNF-α表达水平和phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值无统计学差异(P均0.05)。结论丙泊酚可能通过抑制NF-κB的激活下调了BV2细胞TNF-α合成和释放。     

姬松茸多糖对糖尿病模型大鼠免疫功能的影响

目的观察姬松茸多糖对糖尿病大鼠免疫功能的影响。方法 2月龄雌性SD大鼠随机分为,对照组,模型组,姬松茸多糖低、高剂量组,每组10只。采用链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病模型,观察姬松茸多糖对糖尿病大鼠体重,血糖水平,血CD4+、CD8+T细胞计数,血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平以及胸腺、脾指数的影响。结果与模型组比较,姬松茸多糖组大鼠体质量,血CD4+、CD8+T细胞计数,胸腺、脾指数明显升高(P0.05或P0.01);血糖,血清TNF-α、IL-6水平明显下降(P0.05或P0.01)。结论姬松茸多糖可干预糖尿病大鼠多项免疫指标,发挥辅助治疗作用。     

nmhaFGF对SD大鼠缺血再灌注视网膜SOD、MDA、NO的影响

目的观察非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子（nmhaFGF）对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后视网膜超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的影响.方法 40只SD大鼠随机分为对照组10只,实验组（nmhaFGF组）30只.实验组（大鼠左眼）又分为nmhaFGF低剂量组（1.25μg组）、nmhaFGF中剂量组（2.5μg组）、nmhaFGF高剂量组（5μg组）各10只,右眼为模型组（给予等量生理盐水）.采用升高眼内压的方法建立大鼠视网膜缺血再灌注模型.再灌注24h后分光光度法测定视网膜MDA、SOD含量,GRIESS反应测定NO含量.结果与模型组相比,nmhaFGF中剂量组、nmhaFGF高剂量组MDA含量显著降低（P＜0.01）,SOD、NO含量显著升高（P＜0.05）;nmhaFGF低剂量组和模型组之间SOD、MDA、NO含量没有显著差异（P＞0.05）.结论 nmhaFGF具有抗视网膜缺血再灌注氧自由基的作用;视网膜缺血再灌注损伤时,nmhaFGF可以增加视网膜内NO的含量,并呈现一定的量效关系.     

左乙拉西坦在外伤性癫痫中神经保护的实验研究

目的观察左乙拉西坦急性期干预对大鼠外伤性癫痫的行为学、海马神经细胞凋亡与胶质细胞增生的影响。方法三氯化铁皮层注射造模后,予以左乙拉西坦灌胃干预,将大鼠随机分为健康对照组、模型组及左乙拉西坦75mg/kg剂量预防组(低剂量组)、150mg/kg剂量预防组(中剂量组)、300mg/kg剂量预防组(高剂量组)、600mg/kg剂量预防组(极高剂量组)。观察各组大鼠造模7d后的癫痫行为学改变;采用Fluoro Jade-C荧光技术进行海马CA3区凋亡神经元计数;造模后14d采用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色观察海马CA3区胶质细胞增生。评价左乙拉西坦在大鼠外伤性癫痫急性期的海马神经保护作用。结果与模型组比较,除低剂量组外,中、高、极高剂量组癫痫发作次数、神经细胞凋亡与胶质细胞增生计数差异均有统计学意义(P0.05);与低剂量组比较,中、高、极高剂量组癫痫发作次数、神经细胞凋亡与胶质细胞增生计数差异均有统计学意义(P0.05)。结论大鼠外伤性癫痫急性期进行左乙拉西坦干预可以减少癫痫发作,抑制海马神经元凋亡和胶质细胞增生,具有神经保护作用。     

泼尼松龙对脂多糖诱导的BV2细胞NO、iNOS及p38表达的影响

目的探讨泼尼松龙在脂多糖(LPS)所致小胶质细胞炎症反应中的作用。方法利用LPS诱导小胶质细胞株BV2,建立细胞炎症反应模型,实验细胞分为4组:空白对照组、LPS组、泼尼松龙组、LPS与泼尼松龙(0.1、1、10μmol/L)组。Greiss法测定细胞外液中一氧化氮(NO)含量;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测BV2细胞iNOS mRNA表达量;同时利用Western印迹技术检测BV2细胞iNOS和p-p38蛋白的表达量。结果 LPS能高度激活BV2细胞并且能使NO分泌增加,泼尼松龙呈剂量依赖性抑制NO含量;同时抑制iNOS、p-p38蛋白和iNOS mRNA表达。结论泼尼松龙能有效抑制LPS激活BV2细胞所分泌的NO,这种抑制作用可能是通过p-p38 MAPK位点下调p-p38、iNOS蛋白和mRNA的表达而发挥抗炎作用的。     

氟西汀对癫痫合并抑郁大鼠海马GFAP、NeuN表达的影响

目的探讨氟西汀对癫痫合并抑郁大鼠海马齿状回胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核抗原(NeuN)表达的影响。方法SPF级SD大鼠60只,随机分为对照组、模型组、氟西汀低、中、高剂量组各12只。模型组和对照组给予等剂量生理盐水,1次/d,腹腔注射;氟西汀低、中、高剂量组给予氟西汀(5.0、7.5、10.0 mg/kg),1次/d,腹腔注射。治疗28 d,采用强迫游泳实验和旷场实验测试大鼠行为学表现,采用免疫组化、RT-PCR检测海马GFAP、NeuN表达。结果造模后,与对照组相比,模型组、氟西汀低、中、高剂量组不动时间延长,垂直运动次数、水平运动次数明显下降(P<0.05)。干预后,模型组不动时间明显长于对照组,垂直运动次数、水平运动次数明显低于对照组(P<0.01);与模型组相比,氟西汀低、中、高剂量组不动时间缩短,垂直运动次数、水平运动次数明显增加(P<0.05);尤其是氟西汀高剂量组,较氟西汀低、中剂量组相比有统计学意义(P<0.05)。免疫组化、RT-PCR显示,与对照组相比,模型组GFAP表达明显增加、NeuN表达明显下降(P<0.05);与模型组相比,氟西汀低、中、高剂量组GFAP表达明显下降、NeuN表达明显增加(P<0.05);尤其是氟西汀高剂量组,较氟西汀低、中剂量组相比有统计学意义(P<0.05)。结论氟西汀可能通过改变海马区GFAP、NeuN表达,并呈剂量依赖性,发挥神经保护作用,改善癫痫合并抑郁大鼠抑郁症状。     

丹参多酚酸盐对动脉粥样硬化大鼠血流动力学和血液流变学的影响

目的分析丹参多酚酸盐对动脉粥样硬化大鼠血流动力学和血液流变学的影响。方法将96只实验用SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,丹参多酚酸盐低剂量组60 mg/(kg·d)、中剂量组120mg/(kg·d)、高剂量组240 mg/(kg·d)和辛伐他汀组2 mg/(kg·d),各组均16只。采用高脂饲料喂养结合腹腔注射维生素D3的方法建立大鼠动脉粥样硬化模型,通过超声检查确定模型成功。丹参多酚酸盐各组和辛伐他汀组分别灌胃给药,正常对照组和模型组则同步给予等体积生理盐水,疗程12周。分别测定各组大鼠左心室内压最大上升速率(lv+dp/dtmax)和心室内压达峰时间(t-dp/dtmax)以及全血黏性(低切、中切、高切)、血浆黏度、红细胞压积和血小板黏附率。测定血脂指标,总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。采用HE染色观察主动脉形态结构并进行病变分级。结果模型组lv+dp/dtmax较正常对照组显著降低,t-dp/dtmax较正常对照组显著延长,差异有统计学意义(P均0.01)。与模型组比较,丹参多酚酸盐中剂量组和高剂量组lv+dp/dtmax提高,t-dp/dtmax缩短,差异有统计学意义(P均0.05)。模型组全血黏度(低切、中切、高切)、血浆黏度、红细胞压积、血小板黏附率较正常对照组均显著升高,差异有统计学意义(P均0.05)。与模型组比较,丹参多酚酸盐中剂量组和高剂量组血浆粘度、红细胞压积显著降低,其中高剂量组全血黏度(低切、中切、高切)、血小板黏附率均显著降低,差异有统计学意义(P均0.05)。与正常对照组比较,模型组TC、TG、LDL-C水平均显著升高,而HDL-C显著降低,差异有统计学意义(P均0.05)。与模型组比较,中剂量组和高剂量组TC、TG、LDL-C水平显著降低,其中高剂量组HDL-C显著升高,差异有统计学意义(P均0.05)。病变分级结果:模型组大鼠主动脉病变2级及以上共14例(87.5%),正常对照组分级均为0级;丹参多酚酸盐高剂量组2级以下12例(75.0%)。结论中、高剂量丹参多酚酸盐明显改善动脉粥样硬化大鼠血液流变学指标和血液动力学指标,发挥保护作用。     

补肾解毒通络方对EAE大鼠CD4~+、CD8~+ T细胞和IL-17的影响

目的探讨补肾解毒通络方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠外周血CD4~+、CD8~+T细胞和脑组织内白细胞介素(IL)-17的影响。方法将60只雌性Wistar大鼠按照随机数字表法分为空白对照组(正常)、模型对照组(EAE+生理盐水)、低剂量组(EAE+15 g·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量组(EAE+30 g·kg~(-1)·d~(-1))及高剂量组(EAE+60 g·kg~(-1)·d~(-1))。模型建立后持续灌胃14 d。治疗结束后采用流式细胞术检测大鼠外周血CD4~+、CD8~+T细胞水平,采用免疫组织化学方法和阳性细胞计数检测各组大鼠侧脑室周围组织内IL-17水平。结果(1)与空白对照组相比,模型对照组大鼠CD4~+、CD4~+/CD8~+明显偏高,CD8~+明显偏低(P0.05);与模型对照组、低剂量组及中剂量组相比,高剂量组大鼠CD4~+、CD4~+/CD8~+明显偏低,CD8~+明显偏高(P0.05);高剂量组与空白对照组间比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)与空白对照组相比,模型对照组大鼠IL-17阳性细胞数明显偏高(P0.05);与模型对照组、低剂量组相比,中剂量组和高剂量组明显偏低(P0.05);高剂量组与空白对照组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论补肾解毒通络方60 g/kg剂量能更好地升高EAE大鼠外周血CD8~+T细胞同时降低CD4~+T细胞和IL-17阳性细胞数。     

褪黑素对糖尿病大鼠视网膜中糖基化终产物及其受体表达的影响

目的研究褪黑素(MT)对糖尿病大鼠视网膜中糖基化终产物(AGE)和其受体(RAGE)表达的影响。方法清洁级雄性Wistar大鼠80只,体重180~200 g,随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量MT组和高剂量MT组。模型对照组、低剂量MT组和高剂量MT组给予高脂高糖饮食配合链尿佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型。造模成功后,低剂量(10 mg·kg~(-1)体重·d~(-1))和高剂量(20 mg·kg~(-1)体重·d~(-1))MT灌胃16 w。HE染色观察大鼠视网膜病理学改变,免疫组化(SABC)法检测各组大鼠视网膜中AGE和RAGE表达的变化。结果 16 w后,HE染色观察,低剂量和高剂量MT组视网膜病理改变程度均较模型对照组轻。与模型对照组比较,免疫组化法检测低剂量和高剂量MT组AGE和RAGE蛋白阳性表达量明显降低(P0.05)。结论 MT可改善糖尿病大鼠视网膜形态变化,并可下调AGE和RAGE在糖尿病大鼠视网膜中的表达。     

山腊梅提取物对慢性阻塞性肺病大鼠炎症细胞、C反应蛋白、白细胞介素-8水平的影响

目的观察山腊梅茎水提物对慢性阻塞性肺病(COPD)模型大鼠炎症细胞和C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-8的影响。方法采用反复烟熏加内毒素气管内滴入法复制COPD大鼠模型,将60只SD大鼠随机分为五组:正常组、模型组和低、中、高剂量山脂梅组。模型组及正常组给予生理盐水灌胃,山腊梅组分别给予低、中、高剂量进行灌胃,疗程21 d。观察各组大鼠肺组织的病理学改变,测定各组支气管肺泡灌洗液白细胞计数、中性粒细胞比率及各组血清和肺组织中CRP、IL-8水平。结果模型组大鼠出现慢性支气管炎特征性病理改变明显,气管及血管周围有大量炎症细胞浸润,肺气肿明显,低、中、高剂量治疗组肺气肿和炎症浸润较模型组有明显减轻,正常组大鼠肺组织结构基本正常。模型组大鼠肺组织和血清CRP、IL-8较正常对照组显著增多,高、中、低剂量山腊梅组大鼠肺组织和血清CRP、IL-8均明显较模型组减少(P0.05)。模型组中白细胞总数及中性粒细胞比率较各山腊梅组增加(P0.01),各山腊梅组白细胞计数及中性粒细胞较正常组明显增多(P0.01)。结论山腊梅茎水提物可降低COPD大鼠肺组织和血清中CRP及IL-8水平,对COPD大鼠的炎症有抑制作用。     

苦瓜总皂苷对心力衰竭大鼠心肌凋亡的影响

目的探讨苦瓜总皂苷对心力衰竭大鼠心功能和心肌凋亡蛋白Caspase-8、Bcl-2表达的影响。方法取清洁级雄性SD大鼠60只,适应性喂养14d后按照随机数字表法分为正常组、模型组及苦瓜总皂苷低剂量、中剂量和高剂量组,每组12只。苦瓜总皂苷低剂量、中剂量和高剂量治疗组分别给予苦瓜总皂苷10mg/(kg·d)、20mg/(kg·d)、40mg/(kg·d)皮下注射,正常组和模型组分别给予0.5mL/(kg·d)生理盐水皮下注射。全程记录大鼠精神活动状态、毛色以及饮食等一般情况,治疗8周后处死大鼠,检测心功能相关指标以及炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,苏木精-伊红染色(HE染色)检测心肌组织病理学改变;免疫组化、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western印迹检测心肌组织中Caspase-8和Bcl-2相关蛋白。结果正常组大鼠精神良好,饮食正常;模型组有明显精神萎靡,饮食量较低;苦瓜总皂苷低、中、高剂量治疗组较模型组上述症状明显减轻。与正常组比较,模型组平均心室舒张压(LVDP)明显升高(P 0.05),平均左室峰压(LVSP)、心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)及平均等容舒张期室内压最大下降速率(-dp/dtmax)明显降低(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷中、高剂量组LVDP明显降低(P 0.05),LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显升高(P 0.05)。与正常组比较,模型组TNF-α、IL-6明显增加(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷低、中、高剂量治疗组TNF-α、IL-6明显降低(P 0.05);HE染色可见正常组大鼠心肌细胞排列整齐,而模型组有明显心肌细胞排列紊乱,苦瓜总皂苷低、中、高剂量组心肌组织较模型组均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达明显下降(P 0.05),Caspase-8蛋白表达明显升高(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷中、高剂量组Bcl-2蛋白表达均升高(P 0.05),Caspase-8蛋白表达则明显降低(P 0.05)。结论苦瓜总皂苷可以明显改善慢性心力衰竭大鼠心功能,降低炎性因子TNF-α、IL-6的表达,可能与其下调Caspase-8、上调Bcl-2表达有关。     

淫羊藿苷对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力及其海马内GFAP、TNF-α、IL-6表达的影响

目的 观察淫羊藿苷(ICA)对脂多糖诱导的阿尔茨海默病炎症模型大鼠记忆能力的影响,并探讨其作用机制.方法 大鼠八臂迷宫训练成功后,36只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、ICA低剂量组、ICA高剂量组,侧脑室注射脂多糖建立AD炎症模型,八臂迷宫实验检测大鼠的空间记忆障碍,免疫组化法(SP法)检测大鼠海马内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6 (IL-6)的表达.结果 治疗结束后,与模型组相比,高剂量组大鼠的TE 、RME、WME均明显减少(P＜0.01),低剂量组大鼠的错误选择次数无统计学意义(P＞0.05).与模型组相比,大鼠海马GFAP、TNF-α、IL-6的表达在高剂量组明显降低(P＜0.01),低剂量组无统计学意义(P>0.05).结论 淫羊藿苷能显著改善AD模型大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能是通过抑制胶质细胞的增生活化、抑制炎症对神经细胞的损伤实现的.     

参麻益智方对双侧颈动脉结扎大鼠海马认知功能的影响

目的观察参麻益智方对双侧颈动脉结扎大鼠行为学及星形胶质细胞和小胶质细胞的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、双侧颈动脉结扎组(2-VO)、多奈哌齐组(0.5 mg/kg)、中药低剂量组(3.3 mg/kg)、中药中剂量组(6.6 mg/kg)和中药高剂量组(16.5 mg/kg),每组10只。灌胃给药4周后进行水迷宫实验,并观察海马CA1区星形胶质细胞及小胶质细胞的形态改变。结果 2-VO组大鼠逃避潜伏期较Sham组明显延长(P<0.05),目标象限停留时间百分比明显下降(P<0.05);多奈哌齐组及中药高剂量组、中剂量组大鼠逃避潜伏期较2-VO组明显缩短(P<0.05),目标象限停留时间百分比显著延长(P<0.05)。2-VO组大鼠海马CA1区星形胶质细胞及小胶质细胞较Sham组增多,胞体增大。给药后,多奈哌齐组与中药高剂量组、中剂量组星形胶质细胞及小胶质细胞较2-VO组数量减少,胞体变小。结论参麻益智方可改善大鼠学习记忆能力,减轻双侧颈动脉硬化大鼠海马CA1区星形胶质细胞和小胶质细胞的增生和激活,从而改善大鼠认知功能。