补肾活血颗粒对骨质疏松大鼠骨组织中OPG/RANKLmRNA及蛋白表达的影响

目的探讨补肾活血颗粒对骨质疏松(OP)大鼠骨组织中骨保护蛋白/核因子-β受体活化因子配体(OPG/RANKL)mRNA及蛋白表达的影响。方法采用卵巢摘除法建立SD大鼠OP模型。分别给予生理盐水(模型组)、50 mg/kg补肾活血颗粒(低剂量组)、100 mg/kg补肾活血颗粒(中剂量组)、200 mg/kg补肾活血颗粒(高剂量组)、30μg/kg 17β-雌二醇(雌激素组)干预治疗12 w,设立假手术组为对照。比较各组骨密度(BMD)、骨组织中OPG/RANKL mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠BMD、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达显著减低(P0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量组及雌激素组BMD、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达明显提高(P0.05)。高剂量组BMD、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达显著高于低、中剂量组及雌激素组(P0.05)。结论补肾活血颗粒可有效改善OP大鼠骨密度,调节OPG/RANKL可能是其作用机制。     

巴戟天多糖对去卵巢大鼠核因子-κB受体激活因子配体和骨保护素表达的影响

目的观察巴戟天多糖对去卵巢大鼠骨组织核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)mRNA表达的影响。方法成年雌性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、巴戟天多糖组,采用摘取双侧卵巢法建立骨质疏松模型,造模2 w后开始给药,给药3个月后观察各组大鼠骨密度(BMD),骨钙、骨磷含量,RANKL、OPG mRNA的表达水平。结果给药3个月后巴戟天多糖组能显著提高去卵巢大鼠的BMD和骨钙、磷的含量,上调OPG mRNA表达,下调RANKL mRNA表达,使RANKL/OPG值下降。结论巴戟天多糖对去卵巢所致的大鼠骨质疏松具有良好的防治作用,其机制可能与调控RANKL和OPG mRNA的表达,降低RANKL/OPG值有关。     

羟基红花黄色素A通过MAPK/ERK信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织损伤的保护作用

目的 探究羟基红花黄色素(HSY)A通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对去卵巢骨质疏松(OP)大鼠骨组织损伤的保护作用。方法 将SD大鼠分为假手术组、模型组、阿仑磷酸钠组(1.5 mg/kg阿仑磷酸钠)、HSYA-L组(2.5 mg/kg HSYA)、HSYA-M组(5 mg/kg HSYA)和HSYA-H组(10 mg/kg HSYA),每组10只，切除卵巢构建绝经后OP(PMOP)大鼠模型，术后1 w阿仑磷酸钠组、HSYA-L组、HSYA-M组、HSYA-H组分别灌胃相应剂量药物，假手术组、模型组灌胃等量生理盐水；双能X线吸收扫描仪检测大鼠骨密度(BMD);酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)含量；测定骨组织生物力学指标；苏木素-伊红(HE)染色观察骨组织病理学情况；实时荧光定量PCR检测骨组织RANKL和OPG mRNA表达水平；Western印迹检测骨组织MAPK/ERK通路蛋白表达水平。结果 与假手术组相比，模型组股骨上下端及股骨BMD、血清OPG含量及mRNA表达水平、...     

丹参素对卵巢去势骨质疏松大鼠TGF-β/Smad信号通路及骨密度的影响

目的 探讨丹参素对卵巢去势骨质疏松大鼠转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路及骨密度(BMD)的影响。方法 建立卵巢去势骨质疏松大鼠模型,随机分为模型组、丹参素低剂量组、丹参素中剂量组、丹参素高剂量组、雌激素组,每组12只,另取12只设为假手术组,分组药物处理后,以BMD仪测定大鼠股骨BMD,以骨科生物力学测试仪检测大鼠股骨生物力学状况,测定指标为弹性模量、最大载荷、屈服载荷;检测大鼠股骨骨矿物盐含量;以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)水平;以蛋白免疫印迹法检测骨组织TGF-β/Smad通路蛋白表达情况。结果 与假手术组相比,模型组BMD、弹性模量、最大载荷、屈服载荷、骨矿物盐含量、血清OPG水平、骨组织TGF-β1表达、p-Smad3/Smad3降低,血清RANKL水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,丹参素低、中、高剂量组和雌激素组BMD、弹性模量、最大载荷、屈服载荷、骨矿物盐含量、血清OPG水平、骨组织TGF-β1表达、p-Smad3/Smad3升高,血清RANKL水平降低,且丹...     

基于AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路研究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠愈合的机制

目的 基于AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路,探究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的机制。方法 将大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组(6.25 g/kg)、补阳还五汤中剂量组(12.50 g/kg)和补阳还五汤高剂量组(25.00 g/kg)。除假手术组外,其余组均构建骨质疏松性骨折模型,并给予相应剂量药物干预。检测大鼠骨密度(BMD)值、骨折愈合评分及骨痂体积;自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素、钙和磷水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨组织中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠骨痂组织的病理形态;Western印迹检测股骨组织中AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组骨痂骨小梁分布稀疏,成骨细胞大量减少且有纤维组织生成,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水...     

雌激素对ApoE基因敲除小鼠骨保护素和RANKL的影响

目的 观察雌激素对去卵巢C57BL/6J 小鼠股骨内骨保护素(OPG)和RANKL的影响.方法　采用双侧卵巢切除术制备骨质疏松(OP)动物模型,1 w后雌激素组开始每周腹腔注射苯甲酸雌二醇(EB)2次,模型组(E2组)注射同等量的橄榄油.6 w后应用免疫组化法观察各组小鼠股骨内OPG、RANKL的变化.结果 两组小鼠股骨内OPG和RANKL的表达无明显差异(P＞0.05).结论 雌激素不能通过增加ApoE基因敲除小鼠股骨中OPG和RANKL的表达而发挥抗OP作用.     

降钙素基因相关肽对维甲酸致老年骨质疏松大鼠OPG/RANKL信号通路的影响及疗效

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对维甲酸致老年骨质疏松大鼠骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路的影响及疗效。方法 72只15月龄雄性SD大鼠随机分为对照组、维甲酸组、CGRP组和CGRP8-37(CGRP拮抗剂)组,每组18只;后3组用维甲酸80 mg·kg-1·d-1灌胃,1次/d,连续灌胃2 w。维甲酸组腹腔注射生理盐水1 ml,1次/d,6次/w;CGRP组腹腔注射1 ml CGRP(30μg/kg),1次/d,6次/w;CGRP8-37组先腹腔内注射1 ml CGRP8-37(30μg/kg),再向腹腔内注射1 ml CGRP(30μg/kg),1次,6次/w;以上各组均干预2 w。采用双能X射线骨密度仪检测大鼠股骨骨密度(BMD);比较各组血清白细胞介素(IL)-6、IL-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、OPG和RANKL水平;RTPCR法检测各组大鼠骨组织OPG mRNA和RANKL mRNA表达。结果与对照组比较,维甲酸组大鼠左、右股骨BMD明显降低(P0.05);与维甲酸组比较,CGRP组大鼠左、右股骨BMD均显著升高(P0.05);而CGRP8-37组大鼠左、右股骨BMD均明显低于CGRP组(P0.05)。与对照组比较,维甲酸组大鼠血清OPG水平和骨组织OPG mRNA表达明显下降,而血清RANKL、IL-1、IL-6、TNF-α水平和骨组织RANKL mRNA表达明显升高(P0.01);与维甲酸组比较,CGRP组大鼠血清OPG和骨组织OPG mRNA明显升高,而血清RANKL、IL-1、IL-6、TNF-α水平和骨组织RANKL mRNA表达显著降低(P0.01);CGRP8-37组大鼠血清OPG水平和骨组织OPG mRNA明显低于CGRP组,而血清RANKL、IL1、IL-6、TNF-α水平和骨组织RANKL mRNA显著高于CGRP组(P0.01)。结论降钙素基因相关肽可明显提高维甲酸老年骨质疏松大鼠股骨BMD,其作用可能与抑制机体IL-1、IL-6、TNF-α水平从而调节OPG/RANKL平衡有关。     

强直性脊柱炎继发骨质疏松及相关因素分析

目的 测定强直性脊柱炎(AS)患者骨密度(BMD)、血清骨保护素(OPG)、可溶性核因子κB受体活化因子配体(sRANKL)等骨代谢指标及外周血T细胞表面RANKL表达情况,研究RANKI/RANK/OPG系统在AS骨代谢中的作用.方法 双能X线吸收法(DEXA)测定AS患者BMD;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清OPG、sRANKL、抗酒石酸酸性磷酸酶异构体5b(TRACP-5b)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平;分析BMD、上述骨代谢指标及临床指标间相关性;流式细胞术(FC)检测外周血CD4+/RANKL+及CD8+/RANKL+细胞表达率;分析它们与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)相关性.计量资料采用成组设计的t检验,计数资料采用x2检验,相关性采用直线相关分析.结果 ①AS患者骨量减少、骨质疏松(OP)发生率分别为47%、37%.②AS组血清sRANKL、TRACP-5b水平及sRANKL/OPG比值均高于对照组(P<0.05);2组血清OPG、BALP水平差异无统计学意义.③AS组血清sRANKL水平与OPG呈正相关,两者均与TRACP-5b呈正相关(P<0.01.④AS组外周血CD4+/RANKL+细胞表达率高于对照组(P<0.05).结论 AS存在较高的骨量丢失率,其骨代谢特点以骨吸收增强为主,RANKL/RANK/OPG系统在其中起着重要作用,该系统失衡可能是AS骨量丢失机制之一;CD4+T细胞可能通过上调RANKL表达参与AS破骨细胞分化成熟及骨吸收机制.     

血管紧张素转换酶抑制剂对去卵巢骨质疏松小鼠骨组织结构的影响

目的探讨血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitors,ACEI)对去卵巢骨质疏松小鼠腰椎骨组织的影响。方法将96只8周龄SPF级C57BL/6小鼠按数字表法随机分为假手术组(Sham group),模型组(OVX group)和ACEI治疗组(Treatment group),每组各32只,micro-CT检测并经三维重建获得骨组织微观结构,RT-PCR检测腰椎骨组织骨保护素(osteoprotegerin,OPG),核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)mRNA的表达。结果治疗组及假手术组骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV)、骨小梁数目(trabecular number,Tb.N)及骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)均显著高于模型组(P0.05),结构模型指数(structure model index,SMI)、骨小梁间隙(trabecular space,Tb.Sp)及骨表面积体积比(ratio of bone surface and bone volume of trabecula,BS/BV)均显著低于模型组(P0.05)。治疗后治疗组及假手术组骨组织中OPG mRNA表达均较模型组高(P0.05),RANKL mRNA表达均较模型组低(P0.05);治疗组骨组织中OPG及RANKL mRNA表达与假手术组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论血管紧张素转换酶抑制剂能部分改善去卵巢骨质疏松小鼠骨组织负转换状态,而有助于防治绝经后骨质疏松症。     

雷公藤甲素对佐剂性关节炎大鼠核因子κB受体激活剂配基表达的影响

目的 探讨雷公藤甲素对佐剂性关节炎（AA）大鼠核因子κB受体激活剂配基（RANKL）和护骨素（OPG）表达的影响及其与抑制关节炎大鼠骨侵蚀的关系。方法 AA大鼠经雷公藤甲素治疗后，测定关节中RANKL、OPG的表达，并测定外周血单个核细胞（PBMC） RANKL mRNA的表达水平和外周血中肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-1β水平，同时测定胫骨关节端骨密度，并作关节骨侵蚀病理积分。结果 雷公藤甲素组和甲氨蝶呤组骨密度高于模型组（P〈0.01），关节骨侵蚀积分低于模型组（P〈0．01）。雷公藤甲素组大鼠关节滑膜（P〈0.01）及骨组织（P〈0.05）RANKL表达量低于模型组，滑膜OPG表达量低于模型组（P〈0.05）。雷公藤甲素组PBMC中RANKLmRNA表达水平低于模型组（P〈0.01），并且TNF-α和IL-1β水平低于模型组（P〈0．01）。结论 雷公藤甲素可能通过抑制RANKL表达而抑制AA大鼠骨质侵蚀。未见雷公藤甲素对OPG表达有促进作用。     

左归丸对去势骨质疏松大鼠钙磷代谢和细胞核因子κB受体活化因子配体/骨保护素的影响

目的探讨左归丸对卵巢摘除大鼠钙磷代谢和细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的影响。方法 SD雌性大鼠60只,采用去卵巢法制备骨质疏松症大鼠模型,将大鼠分为假手术组,切除卵巢组,左归丸低、中、高剂量组,西药对照组(戊酸雌二醇片),每组10只。造模成功12周后给予药物干预,西药对照组给予戊酸雌二醇片0.09 mg/kg灌胃治疗,左归丸低、中、高剂量组按4.75、9.5、19 g/kg灌胃治疗,假手术组和切除卵巢组大鼠给予等体积蒸馏水灌胃,干预4周后股动脉采血处死大鼠。比色分析法检测血清钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)含量;ELISA法检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、细胞核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factorκB,RANK)和RANKL含量;双能X骨密度仪分析测定大鼠股骨的骨密度(bone mineral density,BMD);AG-IX生物力学万能实验机检测最大载荷和弹性模量,比较各组间差异。结果假手术组,切除卵巢组,西药对照组,左归丸高、中、低剂量组的BMD分别为(0.145±0.004)、(0.116±0.007)、(0.146±0.006)、(0.142±0.004)、(0.134±0.002)、(0.129±0.001)g/cm2;这6组的体质量分别为(173.20±13.92)、(264.10±28.61)、(249.44±26.64)、(243.00±10.25)、(253.45±18.19)、(268.50±22.39)g;这6组的子宫指数分别为(1.62±0.34)、(0.45±0.09)、(0.89±0.22)、(1.03±0.23)、(0.91±0.13)、(0.46±0.07)mg/g;这6组Ca、P含量分别为(2.07±0.07/0.30±0.02)、(0.92±0.08/0.10±0.03)、(1.89±0.11/0.22±0.03)、(1.95±0.13/0.27±0.02)、(1.67±0.10/0.19±0.06)、(1.59±0.15/0.12±0.02)mmol/L;这6组OPG、RANKL和RANK含量分别为(755.00±58.05/5.73±0.27/10.68±0.69)、(493.67±36.77/10.24±0.33/18.62±0.74)、(653.00±56.93/7.37±0.19/12.23±0.76)、(731.00±38.49/6.77±0.65/11.52±0.39)、(704.33±62.92/7.97±0.41/14.69±0.86)、(555.00±97.09/9.31±0.75/15.04±0.52)pg/m L;这6组的最大载荷分别为(142.16±0.10)、(86.26±0.13)、(126.43±0.31)、(119.77±0.74)、(111.96±1.57)、(98.92±1.44)N;这6组弹性模量分别为(19.48±0.24)、(13.10±0.43)、(16.70±0.37)、(16.17±0.15)、(15.99±0.22)、(14.98±0.15)MPa。与假手术组比较,切除卵巢组大鼠的BMD、Ca、P、OPG、最大载荷和弹性模量水平均显著降低,而RANK和RANKL含量均明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与切除卵巢组相比,左归丸各剂量干预组和西药对照组大鼠BMD和弹性模量均显著升高,RANK和RANKL含量明显降低,左归丸中、高剂量组和切除卵巢+西药对照组Ca、P、OPG含量和最大载荷显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论左归丸能升高去卵巢大鼠的骨密度,提高骨强度,并改善其力学性能,其机制可能与调节RANKL/OPG水平和Ca、P代谢有关。     

老年男性骨质疏松性髋部骨折患者血清网膜素-1与骨转换的关系

目的研究老年男性骨质疏松(OP)性髋部骨折患者血清网膜素(Omentin)-1水平与骨转换的关系。方法采用酶联免疫法测定82例老年男性OP性髋部骨折患者(OP骨折组)、50例老年男性OP患者(OP组)和50例正常男性老年人(对照组)血清Omentin-1、血清核因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)水平,采用电化学发光免疫分析法测定其血清Ⅰ型胶原氨基端前肽(PINP)、β-胶原降解产物(CTX),采用双能X线骨密度仪分别测定其正位腰椎(L2～4)及左侧股骨颈骨密度(BMD)。分析老年男性OP性髋部骨折患者血清Omentin-1水平与骨转换指标间的关系。结果 OP骨折组腰椎股骨颈BMD、血清Omentin-1、OPG、PINP水平较OP组明显降低(均P0.01),血清RANKL、β-CTX水平、RANKL/OPG比值OP骨折组较OP组明显升高(均P0.01)。OP骨折组血清Omentin-1与腰椎、股骨颈BMD、血清OPG、PINP呈正相关(r=0.402,r=0.389,r=0.428,r=0.401,均P0.01),血清Omentin-1与RANKL、β-CTX、RANKL/OPG比值呈负相关(r=-0.447,r=-0.412,r=-0.528,均P0.01)。结论血清Omentin-1水平影响骨转换,血清Omentin-1水平降低在老年男性OP性髋部骨折的发病中发挥重要作用。血清Omentin-1、OPG、RA NKL、PINP、β-CTX水平可作为预测老年男性OP性骨折风险的参考指标。     

补肾法中药对去卵巢大鼠骨质疏松骨代谢指标的影响

目的探讨补肾法中药对去卵巢大鼠骨质疏松(OP)骨密度(BMD)、骨生物力学、血清碱性磷酸酶(ALP)、血清Ⅰ型前胶原羧端肽原(PICP)的影响。方法将36只SD雌性大鼠随机分为治疗组、假手术组和模型组。切除双侧卵巢造模,治疗组给予补肾法中药治疗,模型组予等量生理盐水,灌胃3个月后取材。Medical viva CT40测量获得BMD;三点弯曲实验获得最大应变和弹性模量;酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测血清ALP、PICP的含量。结果与假手术组比较,模型组BMD水平明显降低(P<0.05),最大应变和弹性模量均明显下降,血清ALP水平明显升高,血清PICP水平明显降低(均P<0.05)。与模型组比较,治疗组BMD无明显差异,但均有增长的趋势,最大应变和弹性模量均明显升高,血清ALP水平明显降低,PICP水平明显升高(均P<0.05)。结论补肾法中药可能通过降低OP模型大鼠血清ALP含量,升高PICP含量,提高骨生物力学性能和BMD,达到治疗OP的作用。     

雌激素抗骨质疏松的OPG/RANKL和ApoE作用机制的实验研究

目的观察雌激素对去卵巢C57BL/6J小鼠股骨内骨保持素(OPG)、骨保护素配体(RANKL)和载脂蛋白E(ApoE)的影响。方法采用双侧卵巢切除术制备骨质疏松动物模型,1w后雌激素替代组开始每周腹腔注射苯甲酸雌二醇(EB)2次,假手术对照组和模型组均注射同等量的橄榄油至第6w末。6w后应用免疫组化和原位杂交法观察各组小鼠股骨内OPG、RANKL、ApoE的变化。结果去卵巢模型组股骨内OPG、RANKL和ApoE表达与对照组相比明显下降,而补充雌激素后OPG、RANKL和ApoE的表达明显上升。结论雌激素可通过增加股骨中OPG、RANKL和ApoE的表达抗骨质疏松。     

川芎嗪对类风湿关节炎模型大鼠关节滑液RANK/RANKL/OPG表达的影响

目的 探讨川芎嗪对类风湿关节炎(RA)大鼠关节滑液核因子κB活化受体(RANK)、RANK配体(RANKL)和骨保护素(OPG)表达的影响,以及在RA骨破坏和炎症过程中的作用机制.方法 建立大鼠佐剂性关节炎模型,并分为5组,模型对照组、阳性对照组、川芎嗪高、低剂量组和正常对照组,造模15 d后,连续给药7 d,应用间接免疫荧光标记、流式细胞术检测关节滑液中RANK/RANKL/OPG表达水平和平均荧光强度.结果 与正常对照组相比,模型组CD3+T细胞OPG表达明显降低,RANK,RANKL升高,差异有显著性(P＜0.05),中性粒细胞和单核细胞上变化不明显;经过川芎嗪高剂量治疗后,CD3+T细胞上OPG表达增强,RANK、RANKL减弱,平均荧光强度降低,差异有显著性(P＜0.05),中性粒细胞和单核细胞治疗前后RANK、RANKL、OPG表达变化不明显;低剂量组各指标变化无统计学意义.结论 高剂量川芎嗪主要通过调节关节滑液中CD3+T细胞上RANK/RANKL/OPG表达起到缓解RA骨损伤和关节炎症的作用.     

老年性骨质疏松患者血清细胞因子水平与 OPG/RANKL/RANK 轴的相关性

目的 通过观察老年性骨质疏松(0P)患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、γ干扰素(IFN-γ)、骨保护素(OPG)等细胞因子水平,探讨细胞因子在老年性OP防治过程中的临床价值.方法 抽取年龄大于70岁的老年患者106例,扫描骨密度(BMD),根据Tscore值,分为OP组(n=92)和骨量减少组(n=14).另选年龄35～ 47岁健康成人30例为对照组.采用RIA法测定TNF-α,ELISA法测定IL-6、M-CSF、IFN-γ 、OPG水平.结果 老年性OP组与骨量减少组,TNF-α、IL-6、M-CSF、IFN-y水平明显高于对照组,OP组又明显高于骨量减少组;OPG水亦明显高于对照组,但OP组却显著低于骨量减少组.结论 不同浓度细胞因子水平,可直接间接或通过OPG/RANKL/RANK系统对破骨细胞进行调节,与老年性OP的发生发展密切相关.     

脂联素对2型糖尿病大鼠骨髓微环境氧化应激水平及骨吸收的影响

目的探讨脂联素(adiponectin,APN)对2型糖尿病大鼠骨髓微环境氧化应激水平及骨吸收指标的影响及其可能的作用机制。方法将6周龄雄性SD大鼠60只随机分为正常对照组、糖尿病模型组。将建模成功大鼠36只随机分为糖尿病组(DM组)和APN干预组(APN组),APN组予腹腔注射球形APN 10μg/(kg·d)。干预后分别于4、8、12周检测骨髓糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)、晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化素配体(receptor activator of nuclear fator-κB ligand,RANKL)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)水平,骨组织HE染色观察骨小梁结构。结果正常对照组大鼠骨组织AGEs、骨髓上清液AOPP水平随饲养时间延长无明显变化,TRAP水平逐渐升高,DM组及APN组上述指标水平逐渐升高,各组骨髓细胞中OPG/RANKL及骨密度(bone mineral density,BMD)均降低。组间比较,12周时,DM组AGEs (1 041. 44±82. 20)、AOPP (1 260. 86±263. 71) pg/mL及TRAP(65. 12±4. 44) pg/mL水平较正常组AGEs (276. 48±54. 97)、AOPP (279. 69±54. 57) pg/mL及TRAP(57. 60±6. 55) pg/mL水平明显升高(P 0. 05),DM组OPG/RANKL (5. 91±1. 69)、BMD (0. 19±0. 03) g/m~2水平较正常组OPG/RANKL (29. 62±9. 78)、BMD (0. 25±0. 01) g/m~2水平显著降低(P 0. 05); APN组AGEs (691. 44±106. 76)、AOPP (936. 90±89. 58) pg/mL及TRAP (55. 63±2. 73) pg/mL水平较DM组明显减低(P0. 05),OPG/RANKL (29. 70±6. 26)、BMD (0. 24±0. 01) g/m~2水平较DM组明显升高(P0. 05)。骨组织形态学观察可见4周时三组间骨小梁结构尚无明显差异; 12周时DM组与对照组相比骨小梁稀疏变细,破坏严重,而APN组与DM组相比骨小梁结构有所改善。结论 2型糖尿病大鼠骨髓微环境中氧化应激程度加重,可能诱导破骨细胞生成增多而导致骨吸收增强,外源性APN可能通过降低骨髓微环境氧化应激水平,降低骨吸收,从而对骨代谢起正向调节作用。     

丹蓝仙硼疗氟胶囊对氟中毒大鼠骨保护素/核因子κβ受体活化因子配体/核因子κβ受体活化因子系统表达水平的影响

目的 观察慢性氟中毒大鼠骨组织中骨保护素(OPG)、核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)、核因子κβ受体活化因子(RANK)蛋白表达水平,探讨OPG/RAN KL/RANK系统与慢性氟中毒大鼠骨骼损伤的关系及丹蓝仙硼疗氟胶囊的拮抗作用.方法 将SD大鼠按体质量随机分为6组(组内雌雄各半):氟中毒组、高剂量药物组、中剂量药物组、低剂量药物组、对照组、硼砂(阳性药物对照)组,每组12只.对照组饮用自来水,其余5个实验组饮用含氟水(50 mg/L),而高、中、低剂量药物组另摄入丹蓝仙硼疗氟胶囊,剂量分别为0.8、O.4、O.2 g/kg,硼砂组另摄入硼砂,剂量为0.8 g/kg.6个月时用免疫组织化学方法检测OPG、RANKL、RANK蛋白在大鼠股骨干骺端的表达.结果 与对照组(173.79±5.23、174.17±5.O1、155.63±7.11)比较,氟中毒组大鼠股骨干骺端OPG、RANKL(156.83±5.80、157.74±6.70)表达增高,RANK(173.92±4.37)表达降低,差异有统计学意义(P均＜0.05).与氟中毒组比较,高、中剂量药物组OPG、RANKL(169.67±5.07、168.08±5.05,170.78±5.01、168.41±7.19)表达降低,RANK(162.12±4.24、166.69±5.78)表达增高,差异有统计学意义(P均＜O.05).与硼砂组(167.27±4.08、167.85±5.O1、166.14±3.95)比较,低剂量药物组OPG、RANKL(163.40±4.11、159.49±5.78)表达增高,RANK(171.54±8.06)表达降低,而高剂量药物组RANK(162.12±4.24)表达增高,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 慢性氟中毒可引起成骨与破骨活动均增强的骨转换增高状态,并可通过改变OPG/RANKL/RANK系统表达影响骨吸收的程度.丹蓝仙硼疗氟胶囊能通过OPG/RANKL/RANK系统影响骨重建,对氟致骨损伤有拮抗作用.     

瑞舒伐他汀对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞骨保护素和核因子κB受体活化因子配体的影响

目的观察瑞舒伐他汀对慢性心力衰竭(CHF)大鼠中心肌细胞骨保护素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)表达的影响。方法 70只雄性SD大鼠中,随机选择58只采用腹主动脉缩窄法制备CHF模型,将存活的48只CHF大鼠随机分为未治疗组、低剂量瑞舒伐他汀组(低剂量组)和高剂量瑞舒伐他汀组(高剂量组),各16只,另12只作为假手术组。于造模4周及给药4周后行超声心动图检查后处死,观察心肌组织病理学变化,测定心肌组织OPG、RANKL mRNA表达。结果给药4周后,与未治疗组和低剂量组比较,高剂量组大鼠左心室收缩末内径明显降低,LVEF、左心室短轴缩短率明显升高(P<0.05)。光镜下,高剂量组心肌损伤程度较未治疗组及低剂量组减轻。与假手术组比较,未治疗组、低剂量组、高剂量组大鼠心肌组织OPG、RANKL mRNA表达明显增加(P<0.01),RANKL/OPG值增高(P<0.01);与未治疗组及低剂量组比较,高剂量组心肌组织RANKL mRNA表达下调(P<0.05),RANKL/OPG值降低(P<0.05)。结论 CHF大鼠心肌细胞OPG、RANKL表达增强。高剂量瑞舒伐他汀可能通过下调RANKL表达抑制心室重构,改善心功能,延缓CHF进展。     

增龄及去卵巢对C57BL/6J小鼠护骨素表达的影响

目的观察增龄和去卵巢状态下小鼠血清护骨素(OPG)水平和骨组织中OPG表达的变化。方法4组C57BL/6J小鼠,每组15只：成年雄鼠组(6月龄),老年雄鼠组(20月龄)；假手术雌鼠组和去卵巢雌鼠组鼠在9月龄时分别行假手术和卵巢切除术,手术6个月后处死小鼠。双能X线检测小鼠骨量变化,实时RT-PCR观察OPG mRNA表达水平,ELISA测定血清中OPG的蛋白水平。结果老年组小鼠和去卵巢组小鼠骨密度明显下降。老年组雄性小鼠血清中OPG水平和成年组[(729±180)ng/Lvs (565±131)ng/L]比较明显上升(P＜0.01)。和假手术组比较(644±140)ng/L,去卵巢组小鼠OPG水平(908±338)ng/L也升高(P＜0.05)。老年组雄鼠骨中OPG mRNA的表达拷贝数为成年组的43.75%(P＜0.05)。与假手术比较,去卵巢组雌鼠骨中OPG mRNA的表达拷贝数下降了75%(P＜0.01)。结论增龄以及去卵巢状态下．小鼠血清中OPG以及骨中OPG mRNA表达水平均有明显变化。