宁心解毒汤、血塞通、瑞舒伐他汀对ApoE－/－小鼠炎症因子和As斑块的影响

目的通过建立ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(As)模型,探讨宁心解毒汤、血塞通、瑞舒伐他汀对小鼠血脂、炎性因子和斑块结构的影响。方法高脂喂养80只8周龄ApoE~(-/-)小鼠4周后,随机分为宁心解毒汤组、血塞通组、瑞舒伐他汀组和对照组。药物灌胃8周后处死。处死前测量体重、尾动脉血压,小鼠尾静脉取血,检测小鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。分离主动脉,观察主动脉粥样硬化斑块特征。结果对照组ApoE~(-/-)小鼠血总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇较其他3组差异有显著性,且瑞舒伐他汀组与宁心解毒汤组、血塞通组差异也有显著性(P0.05)。对照组ApoE~(-/-)小鼠体重、血压较其他3组差异无显著性(P0.05)。对照组ApoE~(-/-)小鼠IL-6、IL-1β、TNF-α的血清浓度,明显高于较其他3组(P0.05);而宁心解毒汤组、血塞通组、瑞舒伐他汀组3组间差异无显著性(P0.05)。对照组动脉斑块分布弥漫,而其他3组的整个动脉也有斑块,明显轻于对照组(P0.05)。结论ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食能够理想构建动脉粥样硬化动物模型。宁心解毒汤、血塞通、瑞舒伐他汀可以通过调脂、减低炎性因子的表达来发挥抗As作用。瑞舒伐他汀控制斑块发展的效果更好,考虑与其调脂相关。     

JAK2/STAT3通路对大鼠脑出血周围组织VEGF165等的保护作用

目的测定蛋白酪氨酸激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)、信号通路特异性拮抗剂α-氰基-(3,4-羟基)N-苄苯乙烯胺(AG-490)对大鼠脑出血周围组织血管内皮生长因子165(VEGF165)、磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(P-JAK2)、磷酸化信号转导和转录激活子3(P-STAT3)表达的影响,分析VEGF165与P-JAK2、P-STAT3的相关性,探讨VEGF165对大鼠脑出血后的神经保护作用是否由JAK2/STAT3信号通道介导。方法将健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠75只随机分为假手术组、脑出血组和AG-490组。采用大鼠自体血注入法建立脑出血模型;各组按造模成功后时间分为6 h、24 h、48 h、72 h、7 d 5个亚组,比较各组大鼠进行神经功能缺损评分(NSS);免疫组化染色检测血肿周围VEGF165表达,采用Westernblotting检测大鼠血肿周围脑组织P-JAK2、P-STAT3的表达。结果脑出血组和AG-490组VEGF165、P-JAK2、P-STAT表达均高于假手术组(P0.05),并于造模后48 h达高峰(P0.05);AG-490组VEGF165、P-JAK2、P-STAT表达较脑出血组低(P0.05);脑出血组VEGF165的表达与神经功能的缺损评分呈负相关(r=-0.511,P0.05),VEGF165与P-JAK2、P-STAT3的表达呈正相关(r=0.562,P0.05;r=0.479,P0.05)。结论 VEGF165对大鼠脑出血后的神经保护作用可能是由JAK2/STAT3途径介导。     

IL-6对人胰腺癌细胞生长及STAT3信号转导通路的影响

目的 探讨IL-6对人胰腺癌细胞株Capan-2生长及STAT3信号转导途径的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度IL-6刺激后Capan-2细胞的增殖率;免疫细胞化学染色确定磷酸化STAT3(P-STAT3)在Capan-2细胞内的定位及IL-6刺激前后表达量的变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡;Western blot检测IL-6刺激前后Capan-2细胞中P-STAT3、bcl-xl、Cyclin D1蛋白表达量的变化.结果 100 ng/ml的IL-6作用Capan-2细胞后,细胞的增殖从1增加到4.965±0.18(P<0.05);细胞凋亡率从(3.21±0.23)%下降到(1.98±0.67)%(P<0.05);P-STAT3、bel-xl、Cyclin D1蛋白表达明显升高(P<0.05),且bcl-xl的表达与P-STAT3的表达呈正相关(r=0.985,P=0.015);Cyclin D1的表达与P-STAT3表达也呈正相关(r=0.914,P=0.036).结论 JAK/STAT信号转导途径的活化介导了IL-6对Capan-2细胞的增殖促进功能.     

IL-6/STAT3通路对THP-1单核细胞环氧化酶2表达的影响

目的探讨人THP-1单核细胞中白细胞介素6(IL-6)/信号转导与转录激活子3(STAT3)通路与环氧化酶2(COX-2)表达之间的关系。方法以人THP-1单核细胞株作为研究对象,分别设置0至48 h不同时间点,检测IL-6对STAT3磷酸化和COX-2表达的时效性影响。用100μmol/L S3I-201(STAT3通路选择性抑制剂)对THP-1单核细胞预处理24 h,再经10μg/L IL-6作用相应时间,将THP-1单核细胞分为4组:对照组、S3I-201组、IL-6组及IL-6+S3I-201组,检测STAT3磷酸化及COX-2表达水平变化。采用实时荧光定量PCR方法检测THP-1单核细胞COX-2的mRNA表达量,Western blot方法检测THP-1单核细胞STAT3磷酸化水平与COX-2的蛋白表达量。结果THP-1单核细胞经IL-6作用后STAT3的磷酸化及COX-2的表达均出现时效性激活,IL-6刺激5 min后STAT3磷酸化水平即显著增加(P0.001),同时COX-2 mRNA和蛋白水平均明显上调,分别于1 h和2 h达到峰值(P0.001)。与对照组相比,S3I-201组COX-2 mRNA及蛋白表达水平均降低(P0.01);与IL-6组相比,IL-6+S3I-201组STAT3磷酸化水平下降(P0.001),COX-2 mRNA表达水平降低(P0.001),同时COX-2蛋白表达受到明显抑制(P0.05)。结论 IL-6能够激活THP-1单核细胞STAT3通路,其可能通过催化下游COX-2的表达影响动脉粥样硬化性疾病进程。     

胆酸通过诱导肠道低度炎性反应激活IL-6/STAT3通路在肠腺瘤癌变中的作用

目的探讨胆酸对APCMin/+小鼠肠道瘤癌变的影响及分子机制。方法将18只SPF级APCMin/+小鼠随机分为实验组和对照组各9只。对照组给予常规饮食,实验组在常规饲料中加0.5g胆酸。喂养12 w后断髓处死,观察肠道肿瘤数目和大小;苏木素-伊红(HE)染色评价肿瘤病理类型,Ki-67免疫组化染色检测肿瘤细胞增殖情况;qRT-PCR检测肠道炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA表达水平。培养永生化结肠上皮细胞系(IMCE),Western印迹检测IL-6/信号转导和转录激活因子(STAT)3蛋白及其下游细胞周期蛋白表达水平。结果实验组小鼠肠道腺瘤总数、小肠腺瘤数、结肠息肉数均明显多于对照组(P<0.01),肠道腺瘤直径明显大于对照组(P<0.05),肠道肿瘤组织中Ki-67阳性细胞率明显高于对照组(P<0.05)。HE染色未见小鼠肠道组织中存在明显炎性细胞浸润,但qRT-PCR检测显示,实验组小鼠肠道IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量明显高于对照组(P<0.01)。胆酸可显著上调IMCE磷酸化的STAT3蛋白表达水平和下游细胞周期蛋白表达水平,胆酸刺激组磷酸化STAT3(Tyr816)和细胞周期调节蛋白的相对表达量均明显高于对照组(P<0.01)。结论胆酸可通过诱导肠道低度炎性反应激活IL-6/STAT3通路促进肿瘤细胞增殖,诱发APCMin/+小鼠肠道瘤癌变。     

白细胞介素-6抑制剂对银屑病模型大鼠背部皮肤组织的影响及作用机制

目的研究白细胞介素(IL)-6抑制剂对银屑病模型大鼠背部皮肤组织的影响及作用机制。方法选取30只SD健康大鼠,随机分为空白对照组、银屑病组和IL-6抑制剂组各10只,建立银屑病模型,建模成功后,IL-6抑制剂组大鼠腹腔注射5 mg/kg IL-6抑制剂,空白对照组、银屑病组腹腔注射等剂量的生理盐水。在对大鼠最后一次给药后2 d观察大鼠变化,采集大鼠背部皮肤组织行苏木素-伊红(HE)染色、背部皮损表皮厚度检测、Baker病理评分、炎性细胞计数及检测背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6受体/Janus激酶/信号转导和转录激活因子(IL-6R/JAK/STAT3)通路因子mRNA表达量。结果银屑病组、IL-6抑制剂组大鼠Baker评分、炎症细胞浸润数、表皮厚度、背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6R、JAK1、STAT3、CD80、CCL5mRNA表达量均显著高于空白对照组(P<0.05);IL-6抑制剂组大鼠Baker评分、炎症细胞浸润数、表皮厚度、背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6R、JAK1、STAT3、CD80、CCL5mRNA表达量均显著低于银屑病组(P<0.05)。结论 IL-6抑制剂可有效抑制银屑病大鼠背部皮肤组织角质增殖、炎症反应,其作用机制可能与调控IL-6R/JAK/STAT3通路转导因子有关。     

川芎嗪对刀豆蛋白A诱导的小鼠肝纤维化JAK2/STAT3信号通路的影响

目的为探究JAK2/STAT3信号通路与炎性因子白细胞介素6、1β、10(interleukin-6、1β、10)的关系,IL-6、IL-1β、IL-10是否参与刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠肝纤维化过程以及川芎嗪对其的影响。方法 BALB/C小鼠随机分为5组,正常对照组(A组)10只;ConA模型(B组)15只;川芎嗪低剂量(100 mg/kg)组(C组)15只;川芎嗪中剂量(200 mg/kg)组(D组)15只,川芎嗪高剂量(800 mg/kg)组(E组)15只。通过实时荧光定量PCR检测IL-6mRNA、IL-1βmRNA和IL-10mRNA的表达水平;Western-blot检测JAK2、STAT3和p-JAK2、p-STAT3的表达情况。结果与模型组相比,小鼠经不同剂量川芎嗪干预8周后,IL-6mRNA和IL-1βmRNA表达水平均降低,且与给药剂量呈相关性;IL-10mRNA表达水平升高,且与给药剂量呈相关性;p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均降低,且下降程度与给药呈剂量相关性;JAK2和STAT3蛋白表达变化不明显。结论川芎嗪可能通过JAK2/STAT3信号通路及炎性因子IL-6、IL-1β、IL-10对ConA诱导的小鼠肝纤维化产生保护作用。     

丹参多酚酸对中青年脑梗死患者血清炎性因子及血管内皮功能的影响

目的探讨丹参多酚酸对中青年脑梗死患者血清炎性因子及血管内皮功能的影响,为临床脑梗死疾病的治疗提供参考。方法前瞻性纳入150例中青年脑梗死患者,以随机数字表法分为观察组和对照组,每组75例。对照组患者给予常规脑梗死二级预防治疗,观察组患者在此基础之上联合应用丹参多酚酸。记录两组治疗前后血清白介素-6(IL-6)、白介素-17(IL-7)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)等炎性因子水平,以治疗前后血浆内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)及血管内皮生长因子(VEGF)水平变化评价患者血管内皮功能。采用神经功能量表(NIHSS)评价患者治疗前后神经功能。随访6个月,比较两组不良事件发生率及药品不良反应发生情况。结果两组治疗前IL-6、IL-17、hs-CRP、ET-1、NO、VEGF、NIHSS水平比较差异无统计学意义(P0. 05);治疗后,两组IL-6、IL-17、hs-CRP、ET-1、NIHSS水平均显著低于治疗前(P 0. 05),NO、VEGF水平显著高于治疗前(P 0. 05),且观察组IL-6、IL-17、hs-CRP、ET-1、NIHSS水平显著低于对照组(P 0. 05),NO、VEGF水平显著高于对照组(P 0. 05);两组不良事件总发生率及药品不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论丹参多酚酸能够显著降低中青年脑梗死患者的促炎性因子水平,改善患者血管内皮功能,且安全性好。     

糖尿病周围神经病变与炎性因子的相关性分析

目的探讨糖尿病周围神经病变(DPN)与hsC-RP、TNF-α、IL-6、IL-10的相关性。方法选取2016年11月至2018年6月于武汉市中心医院内分泌科住院治疗的T2DM患者217例,分为合并DPN组(DPN,n=75)及单纯T2DM组(T2DM,n=142),比较两组各项临床指标及炎性因子水平,分析炎性因子和神经传导速度及波幅的相关性。将DPN组分为痛性DPN亚组(n=46)和非痛性DPN亚组(n=29),分析疼痛评分和炎性因子的相关性及痛性DPN发生的危险因素。结果 DPN组病程、HbA1c、FPG、TNF-α、hsC-RP及IL-6水平均高于T2DM组,IL-10低于T2DM组(P0. 05或P0. 01)。Pearson相关性分析显示,TNF-α、IL-6分别与胫神经运动传导速度(mNCV)及波幅(CMAP)、腓浅神经感觉传导速度(sNCV)及波幅(SNAP)呈负相关(r=-0. 599、-0. 624、-0. 483、-0. 555、-0. 570、-0. 493、-0. 495、-0. 491,P0. 05或P0. 01)。多元线性回归分析显示,胫神经mNCV的影响因素为IL-6、TNF-α及hsC-RP(β=-2. 261、-0. 324、-0. 696,P0. 05);胫神经CMAP的影响因素为IL-6、年龄(β=-1. 201、-0. 020,P0. 01);腓浅神经s NCV的影响因素为TNF-α、HbA1c(β=-0. 671、-0. 385,P0. 01);腓浅神经SNAP的影响因素为TNF-α、IL6、HbA1c及糖尿病病程(β=-0. 154、-0. 645、-0. 117、-0. 038,P0. 05)。痛性DPN亚组IL-6、TNF-α水平高于非痛性DPN亚组[(2. 26±0. 59)vs(1. 93±0. 53)pg/ml、TNF-α(11. 38±2. 95)vs(9. 53±1. 88)pg/ml,P0. 05]。Logistic回归分析显示,TNF-α及IL-6是痛性DPN的危险因素(OR=1. 368、5. 042,P0. 01)。结论炎性因子和DPN的发生密切相关,IL-6及TNF-α水平升高与痛性DPN的发生相关。     

益气活血补肾方对激素抵抗型肾病综合征患者SOCS及其相关炎性因子的影响

目的探讨益气活血补肾方对激素抵抗型肾病综合征(NS)中SOCS、炎性因子的影响。方法选取43例激素抵抗型NS患者随机分为治疗组(23例)与对照组(20例),所有患者予西药治疗,治疗组加服益气活血补肾方,3个月后,观察两组血清SOCS1、SOCS3、SOCS5、白细胞介素(IL)-6、IL-20。结果两组治疗后血清白蛋白明显升高,24 h尿蛋白、尿素氮、血肌酐、三酰甘油、总胆固醇均显著下降(P0. 05);对照组与治疗组SOCS3、SOCS5、IL-6均显著降低,IL-20显著升高(P0. 05),治疗组较对照组改善明显(P0. 05)。结论 SOCS及其相关细胞因子可能在激素抵抗型NS的发生、发展中起重要作用;益气活血补肾方通过调控SOCS、炎性因子发挥其生物学机制。     

IL-27调控JAK/STAT通路在博来霉素诱导肺纤维化中的作用

目的探讨白细胞介素(IL)-27是否通过酪氨酸激酶(JAK)/信号转导与转录激活子(STAT)信号通路抑制肺纤维化。方法将40只雄性C57/BL6小鼠随机分为空白对照组(A组)、博来霉素(BLM)组(B组)、BLM+IL-27组(C组)和BLM+IL-27抗体组(D组),每组10只。于造模后第7、28天每组各处死5只小鼠,取右肺组织用Western印迹方法检测JAK2、STAT1、STAT3、STAT5及SOCS3蛋白的表达。结果 BLM诱导肺纤维化模型中,7、28 d肺组织均有p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5表达量升高,IL-27治疗后降低SOCS3的表达;D组p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5表达量在造模后7、28 d均最高,C组在造模后7 d表达量少于B组。结论外源性IL-27可能通过抑制JAK/STAT通路相关蛋白的磷酸化减轻肺纤维化。     

STAT5基因沉默对支气管哮喘小鼠T细胞增殖的影响

目的 探讨STAT5a/b基因沉默对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠T细胞增殖功能的影响.方法 将20只雌性BALB/c小鼠按随机数字法分为正常组和哮喘组,哮喘组按处理因素不同分别分为空白对照组、STAT5a沉默组、STAF5b沉默组及错义链对照组,采用免疫磁珠法筛选出正常及哮喘模型小鼠的脾脏T细胞,利用RNA干扰(RNAi)沉默T细胞内STAT5a/b基因.荧光定量PCR检测STAT5a/b基因沉默前后STAT5a/b的mRNA表达变化;蛋白免疫印迹法检测STAT5a/b基因沉默前后的蛋白含量的变化;CCK-8检测T细胞RNA干扰前后增殖率的变化;流式技术检测T细胞RNA干扰前后细胞增殖周期及早期凋亡率的变化.结果 (1)哮喘小鼠气道病理结果显示明显炎症改变.(2)哮喘组小鼠脾脏淋巴细胞STAT5a/b mRNA表达量较正常组小鼠明显增高(T值分别为11.71、33.04,均P＜0.05).(3)与空白对照组比较:特异性siRNA转染哮喘小鼠T细胞后,STAT5a和STAT5b沉默组的mRNA表达明显降低(T值分别为35.014、14.553,均P＜0.01);STAT5a和STAT5b沉默组蛋白表达也明显降低(T值分别为- 10.958、- 14.706,均P＜0.01);STAT5a和STAT5b沉默组T细胞增殖率明显降低(T值分别为8.692、10.540,均P＜0.01);STAT5a和STAT5b沉默组增殖期T细胞均明显降低(T值分别为-6.975、-5.567,均P＜0.05);STAT5a和STAT5b沉默组T细胞凋亡率明显升高(T值分别为-6.404、-6.038,均P＜0.05).结论 RNA干扰能特异性降低哮喘小鼠STAT5 a/b表达,抑制T细胞的增殖并促进T细胞凋亡.     

音乐疗法对阿尔茨海默病小鼠空间学习记忆能力及神经免疫炎性因子的影响

目的通过Morris水迷宫测试阿尔茨海默病(AD)小鼠空间学习记忆能力,检测AD小鼠脑海马中神经免疫炎性因子的蛋白阳性表达强度及脑组织中神经免疫炎性因子的mRNA水平,探讨音乐疗法对AD小鼠的免疫治疗作用机制。方法选取野生C57BL/6和转基因APP/V717雌性小鼠作为研究对象,实验分为对照组(C57BL/6野生雌性小鼠,n=10)、AD模型组(APP/V717转基因雌性小鼠,n=10)和音乐治疗组(APP/V717转基因雌性小鼠,n=10)。三组均给予正常饮食,音乐治疗组每天早、中、晚各一次给予音量40～65 dB舒缓、轻柔性的音乐30 min,共治疗12 w。采用Morris水迷宫检测各组小鼠空间学习记忆能力;苏木精-伊红(HE)染色在普通光学显微镜下观察各组小鼠脑海马神经细胞损伤程度;免疫组织化学染色检测各组小鼠脑海马中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度;实时荧光定量PCR法检测各组小鼠脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、5-羟色胺(HT)和去甲肾上腺素(NE)的mRNA水平。结果 (1)Morris水迷宫检测结果:与模型组比较,音乐治疗组空间学习记忆能力明显提高(P0.05)。(2)HE染色可见音乐治疗组小鼠脑海马神经细胞固缩坏死较模型组明显减轻。(3)免疫组织化学染色可见音乐治疗组小鼠脑海马中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度均较模型组明显降低(P0.05)。(4)实时荧光定量PCR检测可见音乐治疗组小鼠脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平均较模型组明显降低(P0.05),5-HT和NE mRNA水平均较模型组明显升高(P0.05)。结论音乐治疗能够提高AD小鼠的空间学习记忆能力,同时通过下调AD小鼠脑海马及脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度和mRNA水平,上调神经免疫炎性因子5-HT和NE mRNA水平,在提高机体神经免疫治疗方面作用显著。     

冠心病患者血尿酸与炎性因子水平变化及相关性

目的测定冠心病(CHD)患者血尿酸及炎性因子水平变化及其相关性,探讨血尿酸在CHD中的可能作用。方法选择CHD患者90例为CHD组,同年龄段健康体检者60例为对照组。采用全自动生化仪测定血尿酸及超敏C反应蛋白(hsCRP)水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-18水平。结果与对照组相比较,CHD组血尿酸、hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-18水平明显升高(P0. 05),CHD组血尿酸水平与hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-18等炎性因子呈显著正相关(P0. 05)。结论 CHD患者血尿酸水平显著升高,与炎性因子显著相关,血尿酸可能通过炎症反应在CHD中发挥重要作用。     

不同手术方式对老年结肠癌病人炎性因子、应激及胃肠激素的影响

目的探讨不同手术方式对老年结肠癌病人炎性因子、应激及胃肠激素的影响。方法选择2015年2月至2018年5月我院收治的89例老年结肠癌病人,按照手术方式分为观察组46例及对照组43例,观察组采用腹腔镜下结肠癌根治术,对照组采用传统开腹结肠癌根治术。观察比较2组病人炎性因子、应激及胃肠激素水平,并记录并发症发生情况。结果术前,2组病人炎性因子、应激及胃肠激素水平差异没有统计学意义(P0. 05);术后2组病人白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及胃肠激素水平较术前显著降低(P0. 05),2组C反应蛋白(CRP)及应激激素水平则较术前显著升高(P0. 05);且术后观察组IL-6、TNF-α、CRP及应激激素水平显著低于对照组(P0. 05),胃肠激素水平显著高于对照组(P0. 05);观察组并发症总发生率显著低于对照组(P0. 05)。结论相较于传统开腹结肠癌根治术,腹腔镜下结肠癌根治术能更好地改善老年结肠癌病人的炎症反应、应激反应及胃肠功能。     

PARP-1抑制剂5-AIQ对实验性结肠炎小鼠Treg/Th17的调节作用

[目的]探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-AIQ)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠Th17/Treg平衡的调节作用及其机制。[方法]将30只C57 BL/6 J小鼠随机分为3组:空白组、DSS组、5-AIQ组,每组10只;小鼠自由饮用质量浓度为30 g/L的DSS共7 d,组建UC模型。空白组:正常饮水的同时给予0.9%氯化钠溶液,腹腔注射7 d;DSS组:造模同时给予0.9%氯化钠溶液,腹腔注射7 d;5-AIQ组:造模同时给予5-AIQ(1.5 mg/kg),腹腔注射7 d。观察各组小鼠体质量、大便黏稠度及出血情况、计算结肠炎相关的疾病活动指数(disease activity index,DAI)和结肠组织病理评分,RT-PCR检测小鼠结肠组织中的炎症因子IL-10、IL-17、IL-21、IL-35,同时检测小鼠结肠组织中Th17和Tregs细胞分化相关转录因子RORγt、STAT3、Foxp3、Smad3表达。[结果]与DSS组相比,空白组和5-AIQ组中DAI降低(P0.01);5-AIQ组结肠病理损伤明显改善;与空白组相比,DSS组IL-10、IL-35、Foxp3、Smad3蛋白下调,IL-17、IL-21、RORγt、STAT3蛋白上调;5-AIQ组与DSS组比较,IL-10、IL-35、Foxp3、Smad3蛋白上调,IL-17、IL-21、RORγt、STAT3蛋白下调,差异有统计学意义(P0.01)。[结论]PARP-1抑制剂5-AIQ可能通过调控实验性结肠炎小鼠Treg/Th17免疫平衡起到抑制肠道炎症,保护结肠黏膜的作用。     

白细胞介素-6在溃疡性结肠炎模型小鼠Th17/Treg细胞失衡中的作用

目的研究白细胞介素-6(IL-6)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型小鼠结肠固有层黏膜局部Th17和调节性T细胞(Treg)失衡中的作用。方法制备葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC模型小鼠(UC组,n=5),检测UC组小鼠和正常对照组小鼠(NC组,n=5)结肠固有层黏膜单个核细胞中Th17细胞及Treg细胞的水平,用CBA检测细胞培养上清IL-6、IL-10、IL-17等细胞因子的水平。结果在DSS诱导的UC小鼠结肠固有层黏膜中,Th17细胞水平均高于NC组(P0.05);IL-17A水平高于NC组(P0.05);Treg细胞水平显著高于NC组(P0.05)。UC模型小鼠结肠固有层黏膜单核细胞培养上清液中IL-10表达水平均低于NC组(P0.05)。UC模型小鼠血清及结肠固有层黏膜单核细胞中,IL-6的水平高于NC组(P0.05),而在其他组织中,两组差异无统计学意义(P0.05);在UC模型小鼠中,血清及结肠固有层单核细胞中IL-6的水平高于其他组织(P0.05)。结论在UC模型小鼠结肠固有层黏膜中存在Th17/Treg细胞的失衡,局部IL-6升高参与了Th17/Treg细胞间的分化失衡,从而在UC模型小鼠的免疫异常发病中起重要作用。     

IL-2诱导类风湿关节炎与骨关节炎T淋巴细胞STAT3 STAT5酪氨酸磷酸化状态的比较

目的观察白细胞介素(IL)-2作用于类风湿关节炎(RA)与骨关节炎(OA)外周血T淋巴细胞前后,T淋巴细胞中STAT3及STAT5的酪氨酸磷酸化活化状态,并进行比较.方法从RA与OA患者的外周血中分离培养单个核细胞,继而纯化得到T淋巴细胞,静息后,用重组人IL-2刺激,在各时相裂解细胞,收获提取蛋白,进行Western blot分析.结果在静息后,RA与OA的外周血T淋巴细胞中STAT3与STAT5均处于极低水平磷酸化的状态;在IL-2作用后,T淋巴细胞中STAT3和STAT5发生时相性的酪氨酸磷酸化,而RA的T淋巴细胞磷酸化程度较OA显著增高.结论IL-2对RA患者T淋巴细胞的STAT3和STAT5过度激活,引起T淋巴细胞中IL-2信号传导的异常放大效应,可能在RA的发病过程中发挥重要作用.