神经生长因子对四氯化碳致毒性拮抗效应的初步探讨

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养,研究神经生长因子（NGF2．5S）对不同浓度的四氯化碳（CCl4）致毒性拮抗效应．观察细胞分化以及细胞形态的影响同时做了CCl4的毒性试验并与正常细胞分化进行了比较。结果表示,染毒组的细胞集落数形成率明显降低,细胞体积小．细胞间神经纤维减少．表明CCl4可抑制胚胎中脑神经细胞的分化．其半数生长抑制浓度（ICV50）为10．0μmol／L,并显剂量-效应关系。当NGF2.5S和CCl4混合后,在低浓度的CCl4情况下,微团中的集落形成率有明显的增加．ICV50为50．0μmol／L时,NGF2．5S也能促进细胞分化的功能．因此．NGF2.5S对CCl4有一定的拮抗效应。     

锰的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行微团培养,研究了锰的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示锰的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１８．０μｍｏｌ／Ｌ。染毒组的细胞集落形成率降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少等形态学变化,其中前者呈剂量－效应关系,表明锰可抑制胚胎神经元细胞的分化,半数分化抑制浓度（ＩＣＤ５０）为１０．０μｍｏｌ／Ｌ１半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（Ｖ／Ｄ）均大于１     

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养（微团试验）研究了氟化钠（ＮａＦ）的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经细胞纤维减少，其中前者呈剂量－效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎神经细胞的分化，半数分化抑制浓度（ＩＣｄ５０）为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（ｖ／ｄ）大于５．０。本研究表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理     

醋酸铅对胚胎神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度的醋酸铅（Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２．３Ｈ２Ｏ）染毒，观察其对细胞分化的影响。结果显示，Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２．３Ｈ２Ｏ可抑制细胞细胞分化导致细胞形态的改变，表现为细胞储落数目减少细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少，并显示剂量－－效应关系，其半数生长抑制浓度为２５μｇ／ｍｌ，而半数分化抑制浓度为２μｇ／ｍｌ。。ＩｃＶ５０与ＩｃＤ５０比值为１２．     

MTT法检测丙烯酰胺对神经细胞的毒性作用

目的介绍一种用四氮唑蓝（ＭＴＴ）为底物的酶反应定量比色分析法。方法用ＭＴＴ法测定了丙烯酰胺对体外培养的大鼠胚胎中脑神经细胞的毒性。结果在１×１０４～４×１０５／ｍｌ细胞浓度范围内，吸光值与细胞数呈良好的线性关系；丙烯酰胺对神经细胞有明显的细胞毒性作用，其半数生长抑制浓度（ＩＣ５０）为８６μｇ／ｍｌ。结论ＭＴＴ法用于测定细胞毒性作用具有快速、正确等优点。     

锰的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行微团培养,研究了锰的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示锰的半数存活抑制浓度（ICV50）为18.0μmol／L。染毒组的细胞集落形成率降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少等形态学变化,其中前者呈剂量-效应关系。表明锰可抑制胚胎神经元细胞的分化,半数分化抑制浓度（ICD50）为10.0μmol／L,半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（V／D）均大于1.8。表明抑制神经元细胞分化可能是锰致发育危害的重要作用机制。     

醋酸铅对胚胎神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度的醋酸铅（Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２·３Ｈ２Ｏ）染毒，观察其对细胞分化的影响。结果显示，Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２·３Ｈ２Ｏ可抑制细胞分化导致细胞形态的改变，表现为细胞集落数目减少细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少。并显示剂量──效应关系，其半数生长抑制浓度（ＩｃＶ５０）为２５μｇ／ｍｌ，而半数分化抑制浓度（ＩｃＤ５０）为２μｇ／ｍｌ。ＩｃＶ５０与ＩｃＤ５０比值为１２．５，判断为醋酸铅可能具有体外细胞致畸作用     

氯化锂对大鼠胚胎中脑神经细胞毒性作用的研究

目的：研究氯化锂的体外致畸作用，探测氯化锂的体外毒性作用结果判断标准。方法：取SD大鼠中脑神经组织，进行体外原代微团培养。分别加入不同浓度的氯化锂，在相差显微镜下观察细胞生长发育情况。结果：氯化锂对大鼠胚胎中脑神经细胞半数抑制分化浓度(ICD50)为8．6μg／ml，半数存活抑制浓度(ICV50)为6．4μg／ml。结论：微量元素锂对中脑神经细胞的半数分化抑制浓度(ICD50)为8．6μg／ml，(V／D)比值为1．3μg／ml。表明氯化锂只是一种细胞毒性物质，而非致畸物。     

硝酸铅对大鼠胚胎中脑神经细胞发育毒性的研究

目的：研究硝酸铅对胚胎中脑神经细胞分化和增殖的毒性作用。方法：利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代微团培养，观察不同浓度(0．01、0．1、1．0、10．0、100．0mg／L)的硝酸铅对细胞分化、增殖的影响，并利用图象分析细胞形态变化及MTT测定细胞活性。结果：结果显示硝酸铅可抑制中脑神经细胞的增殖和分化，导致细胞形态的改变，表现为细胞集落数目、细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少。并显示剂量一效应关系，其半数生长抑制浓度(ICV50)为23mg／L，而半数分化抑制浓度(ICD50)为3mg／L。结论：ICV50与ICD50比值为7．7，判断为硝酸铅可能具有体外细胞毒性及致畸作用，抑制细胞的分化和增殖可能是硝酸铅致发育危害的重要作用机理     

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养了氟化钠的细胞生及其对神经元分化的细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经细胞纤维减少，其中前者呈剂量－效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎细胞的分化，半数分化抑制浓度为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制２与半数分化抑制浓度的比值大于５．０。本表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理。     

四氯化碳对胚胎神经细胞分化和膜结构的影响

用大鼠胚胎中脑物经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度四氯化碳染毒，研究四氯化碳对细胞分化的影响，并用扫描电镜观察细胞形态和膜结构的变化。结果表明，处于分化前期的胚胎中脑细胞经５天培养形成细胞集落，用神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）免疫化学法鉴定，集落中的细胞是已分化的神经元细胞。四氯化碳可抑制细胞分化，并显示剂量－－效应关系，其半数生长抑制浓度（ＩＣＶ５０）和半数分化抑制浓度（ＩＣｄ５０）分别为１     

丙烯腈对胚胎大鼠脊髓神经细胞毒性作用的研究

目的：研究丙烯腈(ACN)对脊髓神经细胞分化和增殖的毒性效应关系，并探讨其机制。方法：采用大鼠胚胎脊髓神经细胞进行原代微团培养，观察不同浓度0．02、0．2、2．0、20．0、40．0、60．0、80．0、100．0μmol／L的丙烯腈(ACN)对细胞分化增殖的影响，并利用图象分析细胞形态变化及MTT测定细胞活性。结果：各组丙烯腈明显抑制脊髓神经细胞的增殖和分化，集落形成率明显减少，细胞体积小。其半数分化抑制浓度(ICD50)25μmol／L，半数存活抑制浓度(ICV50)为55μmol／L，并显示浓度效应关系。结论：丙烯腈能抑制脊髓神经细胞的增殖和分化，可能是与其抑制蛋白质合成。     

苯对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化与增殖的影响

目的 探讨苯对胚胎肢芽、中脑细胞分化和增殖的影响及对肢芽器官发育的影响.方法 分离12d龄小鼠胚胎肢芽和中脑细胞进行微团培养,观察肢芽和中脑细胞的分化与增殖;结果 随着苯染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞的集落数逐渐减少,中脑细胞形成神经集落数减少、体积小,集落细胞间突起数量减少,肢芽细胞和中脑细胞增殖率下降,均具有较明显的剂量-效应关系;苯对肢芽细胞的半数分化抑制浓度(dID50)和半数增殖抑制浓度(pID50)分别为89.93μmol/L和396.77μmol/L,对中脑细胞的dID50和pID50分别为116.29μmol/L和831.46μmol/L,对细胞分化的抑制作用大于对增殖的抑制作用.结论 苯对胚胎中脑及肢芽细胞的分化和增殖有特异性抑制作用,可能对胚胎骨和脑具有发育毒性.     

稳恒磁场对大鼠胚胎中脑神经细胞分化影响的研究

：利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养,培养物经不同强度的稳恒磁场作用,研究稳恒磁场对细胞生长和分化的影响,并利用图象分析细胞形态的变化。结果表明,各种强度的磁场能明显地抑制中脑神经细胞的分比．集落形成率明显减小,并显示强度效应关系。图象显示稳恒磁场可抑制中脑神经细胞分化,突起减少,认为稳恒磁场对细胞生长和分化有一定的抑制作用。     

银杏叶提取物对MPP+诱导的中脑多巴胺能神经细胞损伤的保护作用

目的：探讨银杏叶提取物（EGB761）对1-甲基4-苯基吡啶离子（MPP^＋）诱导的帕金森病细胞模型是否具有保护作用．方法：采用胚胎大鼠中脑原代细胞培养法,分离培养中脑神经细胞,随后进行EGB761及MPP^＋处理,最后通过3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）微量比色法,酪氨酸羟化酶（TH）免疫细胞化学,研究EGB761对MPP^＋损伤后的中脑原代培养细胞及DA能神经细胞活性的影响,同时进行iNOS免疫细胞化学法,了解iNOS的表达情况．结果：在MPP^＋诱导的中脑原代细胞凋亡中,MPP^＋组TH阳性细胞数及细胞存活率均显著低于各EGB761组及阳性对照组（P〈0．01）．而iNOS的表达则显著多于各EGB761组（P〈0．01）．结论：EGB761对MPP^＋诱导的胚胎大鼠中脑原代培养细胞损伤具有保护作用,且此作用有随剂量的增大而增加的趋势．     

稳恒磁场对大鼠胚胎中脑神经细胞分化影响的研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养,培养物经不同强度的稳恒磁场作用,研究稳恒磁场对细胞生长和分化的影响,并利用图象分析细胞形态的变化。结果表明,各种强度的磁场能明显地抑制中脑神经细胞的分化,集落形成率明显减少,并显示强度效应关系。图象显示稳恒磁场可抑制中脑神经细胞分化,突起减少,认为稳恒磁场对细胞生长和分化有一定的抑制作用。     

五氧化二钒的体外发育毒性研究

采用胚胎肢芽细胞进行原代微团培养,培养物经不同浓度的五氧化二钒（Ｖ２Ｏ５）对细胞肢芽细胞经５天增减形成细胞集落,Ｖ２Ｏ５对体外肢细胞的分化有明显抑制作用,并有较明显的剂量－效应关系,其半数生长抑制浓度（ＩＣＶ５０）和半分化抑制浓度（ＩＣＤ５０）分别为１２．６和１．６μｇ／ｍｌ,Ｖ／Ｄ值为７．９。表明抑制细胞分化可能是Ｖ２Ｏ５致发育危害的重要作用机理。     

无机氟对大小鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

采用胚胎肢芽细胞微团培养方法，观察无机氟对ＳＤ大鼠和昆明种小鼠胚胎芽细胞增殖和分化的影响。结果显示培养液中一定浓度的氟对两种动物胚胎肢芽细胞增殖和分化有明显抑制作用，且呈剂量－反应关系。拟合细胞分化和增殖抑制曲线，计算得大、小鼠半数抑制分化浓度（ＩＤ５０）分别为６．８％μｇ／ｍｌ、７．３μｇ／ｍｌ；半数抑制增殖浓度（ＩＰ５０）为４４．１μｇ／ｍｌ、６３．６μｇ／ｍｌ。ＩＰ５０分别为６．４和８．７。     

昆明小鼠胚胎干细胞大鼠侧脑室内移植诱导分化的在体研究

目的：探讨脑内微环境诱导胚胎干细胞向神经细胞分化的状况，确定胚胎干细胞脑内移植的最佳分化阶段。方法：将未分化的昆明小鼠胚胎干细胞和经维甲酸初步诱导分化的胚胎干细胞分别进行侧脑室内移植，通过苏木素伊红（HE）染色、尼氏染色和神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫组织化学染色，检测胚胎干细胞移植后的存活和分化情况。结果：未分化的昆明小鼠胚胎干细胞侧脑室内移植后．不能很好地向神经细胞方向分化，有形成畸胎瘤的倾向。而经维甲酸初步诱导分化的胚胎干细胞进行侧脑室移植后4周，移植物中有相当一部分细胞为NSE免疫阳性细胞．部分细胞的胞浆中可见尼氏小体。具有神经细胞的典型特征。结论：经过维甲酸诱导后，胚胎干细胞发生了向神经细胞的分化．在侧脑室微环境中可以存活．并朝着神经细胞方向分化。     

萘甲异喹对离体豚鼠回肠平滑肌的作用

研究萘甲异喹（ＮＩ）对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。ＮＩ（１０、３０μｍｏｌ／Ｌ）可明显抑制离体豚鼠回肠的自发性收缩，能拮抗组胺、乙酰胆碱和５－羟色胺对回肠的收缩效应，表现为非竞争性拮抗，其ｐＤ＇２分别为５．３６±０．４９、４．７４±０．３２和４．８１±０．５１。ＮＩ（１０、３０μｍｏｌ／Ｌ）尚能抑制ＣａＣｌ２和ＢａＣｌ２引起的离体豚鼠回肠收缩，并可抑制组胺引起肠组织内Ｃａ２＋浓度升高。结果提示：ＮＩ能抑制肠平滑肌细胞外Ｃａ２＋内流及细胞内Ｃａ２＋释放引起的平滑肌收缩，可能是一非特异性钙拮抗剂。