金线莲内生真菌Aspergillus sp.J218的次生代谢产物研究

目的 研究从金线莲Anectochilus roxburhii中分离的一株曲霉属内生真菌Aspergillus sp. J218的次生代谢产物。方法 利用Sephadex LH-20凝胶、硅胶和高效液相制备等色谱法从J218固体发酵产物的乙酸乙酯部位分离化合物,采用波谱方法对化合物进行结构鉴定。结果 从金线莲内生真菌Aspergillus sp. J218的次生代谢产物中共分离得到10个化合物,分别鉴定为kotanin(1)、flavasperone(2)、aurasperone B(3)、fonsecinone B(4)、fonsecinone D(5)、tensidol A(6)、fonsecinone A(7)、fonsecinone C(8)、aurasperone A(9)和fonsecinone F(10)。结论 从金线莲内生真菌曲霉属Aspergillus sp J218次生代谢产物分离鉴定多为二聚萘并吡喃酮类化合物,提示该菌株含有丰富的二聚化合成酶,可为后续探索该菌株中二聚萘并吡喃酮类化合物的生物合成途径提供线索。     

2株海洋来源真菌共培养产物的研究

摘要：目的 对2株海洋来源真菌Stachybotrys sp. 3A00409与Aspergillus sclerotiorum MXH-17的共培养产物进行化学成分和生物活性研究。方法 采用溶剂萃取、柱色谱层析及半制备HPLC等方法对2株真菌共培养发酵产物的差异部分进行靶向化学分离,通过理化性质及波谱学方法并参阅文献进行化合物结构鉴定,并初步评价其细胞毒和抑菌活性。结果 以大米静置共培养作为目标培养模式进行大量发酵,经过目标化合物靶向分离,得到6个单体化合物,结构鉴定为二聚萘并-?-吡喃酮类化合物Asperpyrone A（1）、Fonsecinone A（2）、Asperpyrone C（3）、Aurasperone A（4）、Dianhydro-aurasperone C（5）和异色酮类化合物(7S, 8S)-sclerotinin A （6）。抑菌实验结果显示化合物1对大肠杆菌Escherichia coli表现出弱的抑菌活性,MIC为39.7 μmol/L。结论 共培养刺激微生物代谢产物产生是提高微生物化学多样性的潜在有力工具,本研究从海洋来源真菌Stachybotrys sp. 3A00409与Aspergillus sclerotiorum MXH-17的共培养产物中分离得到了单菌培养中未发现过的5个二聚萘并-?-吡喃酮类和1个异色酮类化合物。     

真菌Drechslera catenaria聚酮类代谢产物及聚酮合成酶基因的初步研究

目的 分离分析内脐蠕孢真菌(Drchslera catenaria)的次级聚酮类代谢产物,初步分析其非还原型Ⅰ型聚酮合成酶基因组成,为该菌株中大黄酚生物合成机制的阐明奠定理论基础.方法 应用Czapek Dox培养基发酵培养,酸化乙酸乙酯提取,硅胶柱层析及薄层制备等方法,对该菌株产生的聚酮类代谢产物进行分离纯化;利用紫外(UV),液相-质谱联用(LC-MS)和核磁共振谱(1H-NMR)鉴定化学结构;基于真菌聚酮合成酶保守序列设计引物,克隆与代谢产物合成相关的聚酮合成酶基因.结果与结论 从试验菌株菌丝体及发酵液中分离获得4个芳香聚酮类化合物,其结构分别为大黄酚(chrysophanol),长蠕孢素(helminthosporin),冰岛青霉素(islandicin),链蠕孢素(catenarin),其中后3个为首次从该真菌中得到.从基因组DNA中得到一段非还原性聚酮合成酶(PKS)基因序列(约5.3kb),与Pyrenophora tritici-repentis Pt-1C-BFP中黄色色素合成相关的基因片段有较高类似度,很有可能与内脐蠕孢真菌中大黄酚的生物合成有关;在距离该基因2.5kb处克隆到一段基因序列(0.79kb),与P.triticirepentis Pt-1C-BFP中β-酮酯酰基-ACP-还原酶(KR)基因完全相似,其很可能负责大黄素的6位羰基经还原形成大黄酚.     

海洋真菌095407的抗菌活性代谢产物的研究

目的对海洋真菌095407的抗菌活性成分进行研究。方法用多种色谱技术对化合物进行分离纯化，用光谱技术和理化性质鉴定化合物的结构，并用滤纸片琼脂扩散法测定化合物的抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和白色念珠菌活性。结果从095407号真菌发酵液提取物中分离得到4个化合物，分别鉴定为3，4，5-三甲基-1，2-苯二酚（1）、decarboxydihydrocitrinone（2）、甘露醇（3）、刺芒柄花素（4）。结论化合物1为首次以天然产物的形式分离得到，活性测试结果表明化合物1和2具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性。     

红豆杉内生真菌Trichoderma sp.次生代谢产物及其抗菌活性研究

目的 从红豆杉内生木霉属真菌MPT-009的次生代谢产物中发现具有抗菌活性的单体化合物。方法 采用硅胶、ODS、Sephadex-LH20柱层析和半制备高效液相等方法进行分离,利用高分辨率质谱、NMR波谱数据和电子圆二色谱(ECD)计算等方法确定化合物结构,通过二倍稀释法评价化合物对8种临床耐药性细菌和7种植物病原真菌的抗菌活性。结果 从木霉属真菌MPT-009大米发酵产物中共分离得到了一个新的聚酮化合物trichoketide F (1)和6个已知化合物10-deacetylkoningiopisin D(2)、koninginin A (3)、koninginin B (4)、koninginin D (5)、koninginin E (6)、isoharziandione (7)。化合物1对马铃薯黄萎病菌、水稻纹枯病菌、油菜菌核菌、棉花枯萎病菌、草莓黑斑病菌、玉米小斑病菌显示一定的抑制活性,MIC值为12.5～50μg/mL。结论本文对红豆杉内生真菌Trichoderma sp.的次生代谢产物进行了深入研究,分离得到1个新化合物,丰富了木霉属真菌代谢产物,且该化合物对油菜菌核病菌...     

海洋真菌09-1-1-1次级代谢产物的研究

目的从海洋真菌的代谢产物中寻找新的具有抗真菌活性的化合物。方法以稻瘟霉生物模型筛选海洋真菌,获得编号09-1-1-1的活性菌株,从其发酵液中分离活性代谢产物。结果从发酵液中分离到2个化合物,鉴定其结构为3a,12c-二氢-8-羟基-6-甲氧基-7H-呋喃[3′,2′∶4,5]呋喃[2,3-c]呫吨-7-酮(Ⅰ,sterig-matocystin)和1,3,6,8-四羟基-2-(1-羟己基)-9,10-蒽二酮(Ⅱ,averantin)。结论稻瘟霉生物模型用于筛选海洋真菌活性代谢产物成本低、快速又方便。化合物Ⅱ对109稻瘟霉菌丝的生长最小抑制浓度为1.6μg.mL-1。     

海洋真菌zp6次级代谢产物及其抗真菌活性研究

目的对海洋真菌zp6发酵液的乙酸乙酯萃取部分及其抑菌活性进行研究。方法采用硅胶柱色谱及高效液相色谱进行分离纯化,根据理化性质及各种光谱技术进行结构鉴定,采用滤纸片法对分离到的化合物进行抑菌活性研究。结果从该菌中分离纯化得到8个化合物:(22E)-3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(1)、5α,8α-环二氧-24-甲基麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(2)、赤藓糖醇(3)、腺嘌呤核苷(4)、(24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(5)、阿拉伯醇(6)、(7)、4-乙酰氧基苯甲酸(8)。结论化合物1和5具有抗真菌活性。     

PTP1B抑制活性真菌F956的鉴定和代谢产物研究

目的 研究PTP1B抑制活性真菌菌株F956及其代谢产物。方法 通过形态观察及ITS序列系统发育分析鉴定活性菌株F956;对其发酵产物进行分离纯化获得单体化合物并通过综合波谱解析确定代谢产物的化学结构。对得到的化合物进行分子对接及PTP1B抑制活性评价。结果 F956鉴定为Mucor fragilis(易脆毛霉);从其代谢产物中得到2个具有PTP1B抑制活性的化合物F956-5和F956-6,其中F956-5与化合物JBIR-12相同,F956-6为JBIR-12的13位羟基甲基化衍生物,分子对接结果显示F956-6可占据PTP1B的活性位点;其对PTP1B的IC50分别为7.12和13.92μg/mL。 结论 化合物F956-5(JBIR-12)和F956-6由易脆毛霉产生及其对PTP1B的抑制活性均为首次报道。     

海洋来源真菌草酸青霉(Penicillium oxalicum)次级代谢产物的分离与鉴定

目的研究海洋来源真菌草酸青霉(Penicillium oxalicum)的次级代谢产物。方法采用重结晶、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、开放ODS柱色谱等方法进行分离纯化;根据理化性质及光谱数据确定化合物的结构。结果分离得到10个化合物,分别鉴定为N-acetyl-hydrazinobenzoic acid(1)、N-[2-cis-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]formamide(2)、p-hydroxyphenylacetamide(3)、penipanoid A(4)、penipanoid C(5)、2-(4-hydroxybenzyl)quinazolin-4(3H)-one(6)、oxaline(7)、meleagrin(8)、(3R,4R)-3,4,8-trihydroxy-3,4-dihydro-1(2H)-naphthalenone(9)和(3R,4R)-3,4,6,8-tetrahydroxy-3,4-dihydro-1(2H)-naphthalenone(10)。结论化合物1为新天然产物,化合物9、10为首次从青霉属真菌中分离得到。     

构树内生真菌P-L12和C-J1代谢产物的抗肿瘤活性研究

目的 探究从矿区构树组织分离的2株内生真菌葡萄座腔菌(Botryos-phaeria dothidea,P-L12)和燕麦镰刀菌(Fusarium avenaceum,C-J1)的抗肿瘤活性并分析其代谢产物的化学成分。方法 体外培养指数增长期的5种肿瘤细胞,以噻唑蓝(MTT)法测定2株内生真菌次生代谢产物的抗肿瘤活性。在药物处理48 h后,测定不同条件下细胞的增殖情况,计算受试2种次生代谢产物的半抑制浓度(IC₅₀)并进行趋势分析。用液相色谱-质谱联用(LC-MS)法分析2株内生真菌代谢产物的化学成分,明确其物质基础。结果 2株内生真菌发酵产物乙酸乙酯部位提取物对5种肿瘤细胞均具有抑制作用。作用48 h后C-J1有较强的细胞毒性作用,对人肝癌细胞HepG2的抑制作用最强,IC₅₀为(14.21±1.56)μg·mL^-1,对其余4种肿瘤细胞也有较强的细胞毒活性。P-L12的次生代谢产物仅对人前列腺癌细胞DU-145具有较强的抑制作用,其IC₅₀为(9.96±3.00)μg·mL^-1     

植物来源内生真菌Bipolaris sp. TJ-1的次生代谢产物研究

目的：研究植物内生真菌Bipolaris sp. TJ-1的次生代谢产物。方法：利用硅胶、凝胶Sephadex LH-20、高效液相等色谱方法,对菌种的大米发酵提取物进行系统的分离纯化,并根据波谱学数据和理化常数分析等手段鉴定化合物结构。结果：共分离鉴定9个化合物,分别为penicillide （1）,dehydroisopenicillide （2）,3,4-二甲氧基肉桂酸 （3）,N-苯乙基乙酰胺 （4）,（2R,4R）-harzialactone A （5）,4-hydroxykigelin （6）,6-methoxymellein （7）,3,4-dihydro-6,8-dihydroxy-3-methylisocoumarin （8）和4-hydroxy-6-methoxymellein （9）。结论：化合物1~9均为首次从离蠕孢属内生真菌中分离得到。     

Secondary metabolites from fungus Nigrospora sp

Six compounds were purified from the extracts of fungus Z18-17 (Nigrospora sp.) isolated from Scyphiphora hydrophyllacea, a tree from the intertidal zone of Shankou, Guangxi Province of China, which was reported to have cytotoxic activity. Systematic study on the chemical constituents of Nigrospora sp. resulted in the isolation of one new 6-phenylhexanoic acid derivative, one new derivative of uridine, and four known compounds. Their structures were characterized, respectively, as methyl 5-acetamido-6-(4-hydroxyphenyl)-4-oxohexanoate (1), uridine-5'α-hydroxypropanoate (2), 4-hydroxyphenethyl 2-hydroxypropanoate (3), methyl pyroglutamate (4), cyclo (Pro-Val) (5), and cyclo (Phe-Hyp) (6). The cytotoxic activities of the two new compounds against HL-60 cell line were tested and the IC(50) values of the two new compounds were all over 100?μM.     

海绵共附生真菌Hansfordia sp.次级代谢产物的分离与鉴定

目的从海绵共附生真菌Hansfordia sp.的次级代谢产物中得到具有活性的化合物。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC色谱分离纯化,根据化合物的NMR、MS波谱数据和理化性质进行结构鉴定。结果从真菌Hansfordia sp.的固体发酵物的乙酸乙酯提取物中分离得到8个单体化合物,分别鉴定为1,3,6-trihydroxy-8-methylxanthone(1)、4-chloro-1,3,6-trihydroxy-8-methylxanthone(2)、6-hydroxymellein(3)、(R)-4ydroxymellein(4)、3-(2-hydroxypropyl)-8-hydroxy-3,4-dihydroisocoumarin(5)、2,5-dimethyl-7-hydroxychromone(6)、(S)-regiolone(7)和cy-clonerodiol(8)。结论化合物1～8全部为首次从Hansfordia属真菌中分离得到。     

植物内生真菌Talaromyces sp.的次级代谢产物研究

摘要：目的 对1株植物内生真菌Talaromyces sp.的次级代谢产物进行研究。方法 采用稻米培养基培养,通过正反相 硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、半制备反相高效液相色谱等技术对发酵提取物进行分离纯化,运用质谱、核磁 共振、圆二色谱等波谱技术进行结构鉴定,采用MTT测定化合物的细胞毒活性。结果 从该菌株中共分离鉴定11个已知化 合物,其中包括9个聚酮类化合物(1~9)和2个环肽类化合物(10和11),分别为1-deoxyrubralactone(1)、alternariol(2)、alternariol 5-methyl ether(3)、altenuisol(4)、3-hydroxyalternariol 5-O-methyl ether(5)、(2'R,4'R,5'R)-altenuene(6)、(2'S,4'R,5'R)-isoaltenuene(7)、 (2'R,4'R,5'R)-altenuene-5'-acetoxyester(8)、7-hydroxy-3,5-dimethyl-isochromen-1-one(9)、腾毒素(10)和二氢腾毒素(11)。结论 化合 物1、化合物3~11为首次从该属菌株中分离,化合物2和3在100 μmol/L的浓度下对人膀胱癌J82细胞株具有抑制活性,抑制率分 别为56.9%和59.7%。     

海洋真菌Aspergillus sp.的二肽类代谢产物的研究

目的对海洋真菌Aspergillussp.发酵液的乙酸乙酯萃取物进行化学成分的研究。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等手段,利用理化和波谱分析方法,对海洋真菌Aspergillussp.发酵液的乙酸乙酯萃取物的化学成分进行分离鉴定。结果与结论从该真菌发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到8个二肽类化合物,经光谱数据分析,鉴定它们的结构分别为3-苯甲基-6-异丙基哌嗪-2,5-二酮(1)、3-苯甲基-6-异丁基哌嗪-2,5-二酮(2)、3-苯甲基-6-另丁基哌嗪-2,5-二酮(3)、3,6-二苯甲基哌嗪-2,5-二酮(4)、3-异丁基-6-异丙基哌嗪-2,5-二酮(5)、3-另丁基-6-异丁基哌嗪-2,5-二酮(6)、3-另丁基-6-异丙基哌嗪-2,5-二酮(7)、3-异丁基-吡咯并哌嗪-1,4-二酮(8)。这些化合物均是首次从该真菌代谢物中分离得到。     

一株海洋真菌Talaromyces sp.的次级代谢产物及抗细菌活性研究

目的 研究一株浙江舟山东海沉积物来源真菌Talaromyces sp. ZHS32次级代谢产物及其抗菌活性。方法 利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备高效液相色谱等分离方法对该菌株发酵粗提物进行分离纯化;通过核磁共振波谱（NMR）、质谱（MS）等方法并结合相关文献数据比对鉴定化合物结构;采用肉汤微量稀释法对化合物进行抗菌活性评价。结果 从海洋真菌Talaromyces sp. ZHS32中分离鉴定了7个已知化合物,分别为dankasterone A（1）、penifupyrone（2）、3-O-methylfunicone（3）、alternariol（4）、rubralactone（5）、orsellinic acid（6）和2-formyl-3,5-dihydroxy-6-methylbenzoic acid（7）;体外抗菌活性测试结果表明,化合物1对幽门螺杆菌有较好的抑制作用。结论 从海洋真菌Talaromyces sp. ZHS32中分离得到7个化合物,化合物1具有抑制幽门螺杆菌生长的活性。     

真菌Aspergillus sp.YN-3的次级代谢产物研究

目的研究真菌Aspergillus sp.YN-3次级代谢产物的化学成分。方法采用硅胶柱色谱法、制备薄层色谱法、Sephadex LH-20凝胶柱色谱法和HPLC法等方法进行对真菌Aspergillus sp.YN-3发酵产物的分离纯化,根据理化性质、NMR、MS等波谱数据鉴定化合物的结构,并采用台盼蓝法对化合物1~3进行了人早幼粒白血病细胞株HL-60的生长抑制实验。结果分离得到10个化合物,分别鉴定为:chrodrimanin E(1)、thailandolide B(2)、thailandolide A(3)、3-(3-羟基-5-甲基苯氧基)-5-甲基苯酚[3-(3-hydroxy-5-methylphenoxy)-5-methylphenol,4]、2,3-二羟基苯甲酸(2,3-dihydroxybenzoic acid,5)、3-羟基-2-甲基苯甲酸(3-hydroxy-2-methylbenzoic acid,6)、环(色-苯丙)二肽[cyclo(Trp-Phe),7]、环(色-亮)二肽[cyclo(Trp-Leu),8]、(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇[(22E,24R)-ergosta-5,7,22-trien-3β-ol,9]和3-乙酰氨基-5-乙酰呋喃(3-acetamido-5-acetylfuran,10)。结论化合物1~3从该属真菌中首次分离得到,化合物10为一新天然产物;化合物1~3对于HL-60细胞株显示了较弱的生长抑制活性。     

1 株海洋真菌Talaromyces sp. HK1-18次级代谢产物及其抗菌活性研究

目的 研究 1 株分离于海南东寨港红树林自然保护区海桑根际土壤的真菌Talaromyces sp. HK1-18的次级代谢产物及其抗菌活性。方法 利用正、反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和半制备高效液相色谱等色谱分离方法,对该菌的次级代谢产物进行分离纯化;利用核磁共振波谱以及参考文献等方法,鉴定化合物的结构;采用MIC法对化合物进行抗菌活性评价。结果 从该真菌中分离获得 8个化合物 (1～8),结构分别鉴定为 penicillide(1)、purpactin A(2)、vermistatin(3)、deoxyfunicone(4)、dankasterone A(5)、fortisterol(6)、过氧化麦角甾醇(7)、radiclonic acid(8)。结论 化合物6为首次从Talaromyces属真菌中分离得到。化合物1和8对多药耐药金黄色葡萄球菌(S. aureus ATCC 43300)显示出较强的抑制活性,MIC值均为0.78 μg/mL。化合物6对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(S. aureus ATCC 33591)显示出较强的抑制活性,MIC值为0.78 μg/mL。     

海绵共附生真菌Nigrospora sp.的次级代谢产物及PD-1/PD-L1抑制活性研究

目的 研究海绵Callyspongia sp.共附生真菌Nigrospora sp.中化学成分以及生物活性。 方法 利用正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备型反相高效液相色谱(RPLC)等方法对该菌株乙酸乙酯提取物进行分离纯化;通过核磁共振谱(NMR)、质谱(MS)等技术并结合文献报道数据分析鉴定化合物结构;采用均相时间分辨荧光(HTRF)法检测化合物的PD-1/PD-L1结合抑制活性。结果 分离得到7个已知化合物,分别为punctaporonin D (1),punctaporonin E (2),punctaporonin F (3),desuccinoylpunctaporonin C (4),(20S, 22E, 24R)-麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇 (5),(22E, 24R)-麦角甾-3β-羟基-5α, 9α-环氧-7, 22-二烯-6-酮 (6),麦角甾-7, 22-二烯-6β-甲氧基-3β, 5α-二醇 (7)。在体外生物活性检测中,化合物6显示出PD-1/PD-L1结合抑制活性,其IC50值为22.5 μmol/L。结论 化合物4为新天然产物,化合物1-3和化合物6为首次从该属真菌中分离得到。化合物6显示PD-1/PD-L1结合抑制活性。