巴尔通体体外药敏试验方法研究

目的优化巴尔通体体外药敏试验方法,检测多种抗生素对巴尔通体的最低抑菌浓度(MICs),并分析耐药性。方法优化Etest法试验条件;将该方法与琼脂稀释法进行比较,评价该方法的可靠性。采用Etest法,检测了7株ATCC参考株对22种抗生素的MICs,数据分析使用SPSS 13.0软件。结果确定含5%羊血的胰酶大豆琼脂培养基为最佳培养基、2.0 MCF(麦氏浊度)度为最佳细菌接种浓度,7天为最佳孵育时间。测试的7株巴尔通体在体外对强力霉素等13种抗生素敏感(MIC0.016),对克林霉素等4种抗生素MIC偏高。结论 Etest法简便易行、定值准确、重复性好、结果可靠,可以用于巴尔通体体外药敏试验,并获得了巴尔通体的一些体外药敏数据,为将来制订巴尔通体药敏标准提供一定的依据。     

巴尔通体对19种抗生素体外敏感性分析

目的 检测巴尔通体菌株对10类19种抗生素最低抑菌浓度（MICs）,分析药物敏感性及耐药性,为指导临床用药和耐药监测提供实验和数据参考。方法 采用E试验法,检测巴尔通体属11种、35株菌株对强力霉素、阿奇霉素、利福平等19种抗生素的MICs。将培养的巴尔通体菌制成McFarland（MCF）2.0浊度的菌悬液,均匀涂布于含5%去纤维羊血的胰酶大豆琼脂培养基上,置5% CO2的37℃培养箱培养。培养5~7 d后判读MICs。结果 35株巴尔通体菌在体外对强力霉素、阿奇霉素、红霉素、克拉仙霉素等13种抗生素敏感,MICs 0.016 mg/L;34株对利福平敏感,MICs 0.002 mg/L;对克林霉素、丁胺卡那霉素、万古霉素、多粘菌素和磺胺类5种抗生素不敏感,MICs较高。结论 绝大多数巴尔通体菌对强力霉素等14种抗生素敏感,但也对克林霉素等5种抗生素不敏感,在对巴尔通体病进行治疗时要注意选择敏感药物。     

云南省德宏州居住区啮齿动物携带巴尔通体的调查研究

目的 调查云南省德宏傣族景颇族自治州（德宏州）居住区啮齿动物的巴尔通体感染和分布特点,为相关疾病防制提供参考依据。方法 采用笼夜法捕鼠,采集鼠类脾脏标本,用胰酶大豆琼脂培养基分离巴尔通体,用聚合酶链式反应法扩增巴尔通体gltA基因片段,并进行核苷酸序列测定和系统发育分析。结果 2011年在德宏州居住区共捕获啮齿动物5属9种340只和食虫动物2种18只,黄胸鼠为优势种（77.09%,276/358）。这些动物的脾脏标本中巴尔通体分离率为24.86%（89/358）,其中黄胸鼠分离率为28.99%（80/276）,其他阳性鼠种为黑缘齿鼠（5株）、社鼠（1株）、大绒鼠（1株）、小泡灰鼠（1株）和臭鼩鼱（1株）。共获得85株巴尔通体gltA基因核苷酸序列,进化分析表明,40株为特利波契巴尔通体（Bartonella tribocorum）,28株为伊丽莎白巴尔通体（B.elizabethae）,11株为昆州巴尔通体（B.queenslandensis）,3株为森林巴尔通体（B.silvatica）,3株未定种。黄胸鼠携带上述所有种类的巴尔通体。结论 德宏州啮齿动物中至少存在4种巴尔通体的流行,巴尔通体具有遗传多样性特点。以特利波契巴尔通体、伊丽莎白巴尔通体和昆州巴尔通体为主要流行菌株,黄胸鼠为当地居住区巴尔通体的主要宿主。今后应加强巴尔通体相关疾病的监测和防制工作。     

滇西地区室内鼠形动物巴尔通体感染情况调查研究

目的 了解滇西地区室内鼠形动物巴尔通体感染状况。方法 在滇西地区8个州(市)抽取10个县(市、区)40个自然村,随机抽取800户家庭(每村20户),进行室内捕鼠,采集鼠脾脏标本并提取基因组DNA,运用聚合酶链反应(PCR)扩增巴尔通体枸橼酸合酶(gltA)基因,阳性者进行测序分析。结果 捕获9种421只鼠形动物,采集脏器样本404份,PCR扩增阳性64份,阳性率为15.84%。9种鼠形动物中仅黄胸鼠和褐家鼠检出阳性,阳性率分别为23.05%(62/269)和8.70%(2/23)。10个县(市、区)中6个检出阳性。基因分析表明携带的巴尔通体至少存在6种基因型:B. tribocorum、B. queenslandensis、B. elizabethae、B. rochalimae及2个可能的新型。结论 滇西地区室内鼠形动物感染巴尔通体,且呈现基因多样性特征,部分县(市)阳性率较高,需加强监测和预防控制。     

140株酵母样真菌分离鉴定及对氟康唑药敏结果分析

目的 为临床根据不同念珠菌种合理选择抗真菌药提供实验室依据。方法 菌种鉴定采用传统手工法和科玛嘉（CHRomagar)显色培养法，药敏采用琼脂稀释法。结果 临床140株酵母样真菌中白色念珠菌检出率最高，为61．4％，其次为热带念珠菌11．4％，光滑念珠菌11．4％，克柔氏念珠菌5．7％，高里念珠菌4．3％，其他念珠菌1．4％，酵母菌4．3％。四类标本中痰液检出82株（占58．6％），宫颈分泌物检出52株（占37．1％）。药敏试验结果显示对氟康唑热带念珠菌敏感率为100％，白色念珠菌敏感率为74．4％，高里和光滑念珠菌都有一定的耐药率，而克柔氏念珠菌耐药率达100％。     

白藜芦醇对葡萄球菌标准株抑菌作用研究

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,简称RES)对金黄色葡萄球菌抑菌作用。方法 以金黄色葡萄球菌标准株ATCC 25923(金葡菌标准株)作为研究主体检测RES对其的最低抑菌浓度(MIC),绘制不同浓度RES作用下金黄色葡萄球菌的生长曲线。结果 RES对金黄色葡萄球菌标准株MIC为0.256 mg/ml; 在RES浓度为1/4 MIC和1/2 MIC时,生长明显受抑,生长曲线不典型,对数生长期比正常对照组减缓; RES浓度为1MIC和2MIC时金黄色葡萄球菌完全受抑制,生长曲线完全失去正常生长状态,趋于平缓。结论 RES对金黄色葡萄球菌标准株抑制作用明显。     

五株金黄色葡萄球菌对消毒剂及热抗力的比较

本试验采用试管法测定了5株金黄色葡萄球菌对几种化学消毒剂的抗力和热抗力。结果,醋酸氯己定、碘伏和乙醇对临床分离的4株金黄色葡萄球菌和消毒试验标准菌株的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)基本一致。5株试验菌对热抗力也基本相同。但标准株对碘伏最小杀菌浓度略高于临床分离株。     

214株鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度及耐药性

目的　了解我院和威尔斯亲王医院鲍曼不动杆菌对16种抗生素的耐药性。方法　收集我院和香港威尔斯亲王医院临床分离的鲍曼不动杆菌共214株,用琼脂稀释法检测鲍曼不动杆菌对16种抗生素的最低抑菌浓度。结果　214株鲍曼不动杆菌对16种抗菌药物的耐药率中以头孢哌酮舒巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率最低,其他抗菌药物耐药率达49. 5% ~73. 4%。上海菌株对替卡西林、哌拉西林、哌拉西林他唑巴坦、替卡西林克拉维酸、氨苄西林舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和复方磺胺甲口恶唑的耐药率均高于香港菌株。其他抗生素耐药率相似。结论　本院鲍曼不动杆菌耐药性高于香港威尔斯亲王医院,需提醒临床医生慎用抗生素,避免多重耐药鲍曼不动杆菌在院内传播。     

214株鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度及耐药性

目的了解我院和威尔斯亲王医院鲍曼不动杆菌对16种抗生素的耐药性。方法收集我院和香港威尔斯亲王医院临床分离的鲍曼不动杆菌共214株,用琼脂稀释法检测鲍曼不动杆菌对16种抗生素的最低抑菌浓度。结果214株鲍曼不动杆菌对16种抗菌药物的耐药率中以头孢哌酮一舒巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率最低,其他抗菌药物耐药率达49．5％-73．4％。上海菌株对替卡西林、哌拉西林、哌拉西林一他唑巴坦、替卡西林一克拉维酸、氨苄西林一舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和复方磺胺甲嚼唑的耐药率均高于香港菌株。其他抗生素耐药率相似。结论本院鲍曼不动杆菌耐药性高于香港威尔斯亲王医院,需提醒临床医生慎用抗生素,避免多重耐药鲍曼不动杆菌在院内传播。     

嗜麦芽窄食单胞菌的药敏及最低抑菌浓度分布分析

目的　分析临床分离到的嗜麦芽窄食单胞菌的药敏试验结果及其对临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度 (MIC)分布情况。方法　用法国生物梅里埃公司新近推出的全自动微生物鉴定仪进行菌种鉴定及药敏分析。结果　嗜麦芽窄食单胞菌对磺胺甲唑 /甲氧苄啶复方制剂和喹诺酮类的左氧氟沙星敏感率分别达 79.31%和72 .4 1% ,对其他抗生素的敏感率相对较低。 79%菌株对磺胺甲唑 /甲氧苄啶复方制剂的MIC≤ 4 μg/ml;93%菌株对左氧氟沙星的MIC≤ 4 μg/ml。 结论　嗜麦芽窄食单胞菌主要引起呼吸系统的感染 ,多重耐药性情况十分严重。对其感染的治疗 ,应在抗生素敏感试验及其MIC的指导下进行。     

Culture and antibiotic susceptibility of Bartonella quintana in human erythrocytes

Bartonella quintana, the agent of trench fever, has recently been implicated in various diseases, in particular, bacteremia and endocarditis in homeless people. The host cell of Bartonella spp. is believed to be the erythrocyte, and in the present study we demonstrate that B. quintana can be cultured in vitro in human erythrocytes. The bacteria were found to be intraerythrocytic by laser confocal microscopy with Bartonella species-specific monoclonal antibodies. Infections with B. quintana decreased the life span of erythrocytes in culture from 8.6 to 4.8 days. In the culture system we found that most of the antibiotics that we tested (doxycycline, fluoroquinolone compounds, and beta-lactams) were not bactericidal. Gentamicin was bactericidal at 4 micro g/ml, as was rifampin, but to a lesser extent. At this concentration, gentamicin has been shown to enter erythrocytes slowly and to reach a peak level of 0.26 micro g/ml after 24 h. At 0.26 micro g/ml, however, we found that gentamicin was not able to kill extracellular B. quintana, even after 96 h of incubation. We hypothesize that erythrocytes may be a reservoir for B. quintana and that the bactericidal activity of gentamicin that we observed occurs mainly when the bacteria emerge from the erythrocytes and are found extracellularly. It would appear that gentamicin should be administered for at least 5 days to cure patients infected with B. quintana.     

脲原体属对加替沙星等9种抗菌药物的敏感性分析

目的本研究检测脲原体属对加替沙星及其他氟喹诺酮类、大环内酯类和四环素类抗菌药物的敏感性,为临床合理用药提供参考依据。方法所有菌株均为近期自泌尿生殖道临床标本中分离,采用改良的微量稀释法测定9种抗菌药物对52株脲原体属的MIC。结果改良的微量稀释法方法稳定,结果可靠。加替沙星对脲原体属具有良好抗菌活性,MIC≤4mg/L,MIC500.5mg/L;其抗脲原体活性优于环丙沙星,与左氧氟沙星及阿奇霉素相似,强于红霉素,但略弱于四环素类。克拉霉素对脲原体属抗菌活性明显高于红霉素及阿奇霉素;四环素类对脲原体属均具有良好抗菌活性。结论可采用微量稀释法测定脲原体属对抗菌药物的敏感性。加替沙星可作为治疗脲原体属感染,特别是泌尿生殖道感染的首选药物之一。     

Antimicrobial susceptibility by Etest of Bartonella henselae isolated from cats and human in Japan

Bartonella henselae, a small fastidious Gram-negative bacillus, is the causative agent of cat-scratch disease (CSD). Because of difficulty in isolating the organism, there has been no report on its antibiotic susceptibility in Japan. We determined the minimal inhibitory concentrations (MICs) of eight antimicrobial agents against 32 isolates of B. henselae (31 from cats and one from a human in Japan) by the Etest method. MICs of all 32 isolates were <0.016 μg/ml for minocycline and ranged from ≤0.016 to 0.064 μg/ml for erythromycin, clarithromycin, azithromycin, ceftriaxone, and amoxicillin. MICs ranges of ciprofloxacin and gentamicin were from 0.064 to 0.25 μg/ml and from 0.5 to 3 μg/ml, respectively. All isolated strains showed high susceptibility to minocycline and macrolides antibiotics, which are currently used in the primary treatment of CSD in Japan. Although in vitro result of B. henselae susceptibility testing may not necessarily correlate with clinical response, these data are relevant in the choice of drugs for CSD treatment.     

Surveillance on susceptibility of strains isolated from pediatric infections

During the period from January to December 2015, 104 Streptococcus pneumoniae strains, 129 Haemophilus influenzae strains and 54 Moraxella catarrhalis strains isolated from clinical specimens of pediatric infections in the national 16 institutions, studied susceptibilities of total 28 antibiotics, the capsular serotype for S. pneumoniae, the capsular b type and β-lactamase production capability for H. influenzae, and the β-lactamase production capability for M. catarrhalis were measured.In S. pneumoniae, the results showed that 68 strains (65.4%) were PSSP, 32 (30.8%) were PISP, and 4 (3.8%) were PRSP. The susceptibilities of TBPM and GRNX among oral antibiotics, and PAPM among injectable antibiotics demonstrated the lowest value with MIC90 ≤ 0.06 μg/mL. The most frequent distribution of S. pneumoniae serotypes was seen in 15B, followed by 19A, and 35B. Serotype strains contained in 13-valent pneumococcal conjugate vaccine (PCV13) were 19 strains (18.3%).In H. influenzae, the results showed that BLNAS accounted for 40 strains (31.0%), BLNAI for 28 strains (21.7%), BLNAR for 47 strains (36.4%), β-lactamase producing for 14 strains (10.8%). The susceptibilities of quinolones demonstrated the lowest outcome among oral antibiotics with MIC90 ≤ 0.06 μg/mL, and CTRX and TAZ/PIPC (TAZ4 fixed) among injectable antibiotics with MIC of 0.25 μg/mL. There was no detection of capsular type b strains.In M. catarrhalis, all the isolates were β-lactamase producing strains. The susceptibilities of TBPM, CPFX, TFLX and GRNX among oral antibiotics, and TAZ/PIPC (TAZ4 fixed), PAPM, MEPM and DRPM among injectable antibiotics demonstrated the lowest outcome with MIC of ≤0.06 μg/mL.     

116例耐多药肺结核患者二线抗结核药物耐药情况分析

目的 分析宁波地区耐多药结核分枝杆菌对二线抗结核药物的耐药现况,为耐多药结核病的有效防控提供科学依据。方法 从宁波市疾病预防控制中心共收集116例耐多药结核分枝杆菌临床分离株,对其进行8种二线抗结核药物左氧氟沙星、氧氟沙星、莫西沙星、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素、丙硫异烟胺和对氨基水杨酸的敏感性进行检测,分析不同药物耐药率及交叉耐药情况。结果 二线抗结核药物中耐药率分别为左氧氟沙星（31.0%）、氧氟沙星（29.3%）、莫西沙星（9.4%）、卡那霉素（8.6%）、阿米卡星（7.8%）、卷曲霉素（3.4%）、丙硫异烟胺（6.0%）和对氨基水杨酸（19.8%）。初治患者对卷曲霉素的耐药率显著高于复治患者（2=4.925, P0.05）,此外卡那霉素和阿米卡星之间,氧氟沙星和左氧氟沙星之间存在完全交叉耐药。结论 耐多药肺结核患者对二线抗结核药物耐药率较高,且存在广泛耐药结核病例,应开展二线抗结核药物敏感性检测,以便给予合理治疗。     

临床分离棒状杆菌对常用抗菌药物的敏感性分析

摘要:目的：研究棒状杆菌的药敏试验方法,了解临床标本中分离的棒状杆菌对常用抗菌药物的敏感性。 方法：以微量肉汤稀释法测定12种抗生素的最低抑菌浓度(MIC),用SENSITITRECMP2IHM微量肉汤药敏板进行质控对照。 结果：184株棒状杆菌对青霉素、头孢噻肟、红霉素、环丙沙星、四环素、多西环素、克林霉素的耐药率超过50%。超过50%的菌株对亚胺培南、庆大霉素和利福平敏感,未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药。 结论：用微量肉汤稀释法检测临床分离棒状杆菌的MIC值,用CLSI M45-A判断标准判读结果,可为临床提供准确的敏感或耐药结果。棒状杆菌对多种抗菌药物的敏感性降低,多重耐药株在增加。     

浙江省富阳区临床分离甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的流行现状及耐药性分析

目的 分析浙江省富阳区临床分离的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率、基因分型及药敏特征等流行现状。方法 收集2013年11月至2014年10月两家医院临床标本中分离的金黄色葡萄球菌,对其中经头孢西丁纸片表型筛选确认的44株MRSA进行应用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、spa、SCCmec基因分型,筛查pvl基因,应用脉冲场凝胶电泳的分型图谱进行菌株间的同源性分析。同时应用16种抗菌药物进行药敏实验。结果 44株MRSA,占金黄色葡萄球菌的16.4%(44/268)。两家医院流行的主要克隆不同,富阳中医骨伤医院以ST59-t437-SCCmecⅣ型为主,菌株间同源程度低;人民医院以ST5-t311-SCCmecⅡ型为主,部分菌株间同源程度高。检出3株pvl阳性菌株,占6.8%。药敏结果表示MRSA对内酰胺类普遍耐药,红霉素、克林霉素的耐药率高(85.0%),未发现万古霉素、利奈唑胺、替加环素的耐药株。结论 富阳地区MRSA的检出率相对较低,流行以ST5-t311-SCCmecⅡ型为主,两家医院MRSA流行的主要克隆有较大差异。MRSA的耐药情况不容乐观,多重耐药现象严重,不同基因型别的菌株其药敏结果有差异。