鱼精蛋白对牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响

应用细胞培养新生牛主动脉平滑肌细胞传代培养，取第４－６代平滑肌细胞进行实验，采用细胞计数法观察不同浓度的鱼精蛋白以对牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果显示：不同浓度鱼精蛋白均能刺激牛主动脉平滑肌细胞增殖，鱼精蛋白的浓度与平滑肌细胞增殖量呈正相关。上述     

胰岛素对牛主动脉平滑肌细胞脂质含量的影响

应用细胞培养技术对新生牛主动脉平滑肌细胞进行传代培养，取第４－６代平滑肌细胞作为受度对象研究不同浓度胰岛素对牛主动脉平滑肌细胞内脂质含量的影响。采用Ｈｅｉｄｒ改良法测定平滑肌细胞内微量胆固醇。结果显示：胰岛素增加闰滑肌细胞内胆固醇的含量。且胰岛素浓度与平滑肌细胞内胆固醇含量呈正相关。上述结果提示：胰岛素可促进平滑肌细胞内脂质蓄积，从另一侧面加速动脉粥样硬化的发生与发展。     

参麦注射液对牛内皮细胞增殖抑制作用的实验研究

目的：观察参麦注射液（简称参麦）对内皮细胞增殖的影响。方法：采用MTT法，检测参麦对牛主动脉内皮细胞、牛主动脉平滑肌细胞、人胃腺癌细胞系SGC－7901细胞及人肝癌细胞系SMMC－7721细胞增殖的影响，并检测参麦对肿瘤条件培养液促进的牛内皮细胞增殖的原因。结果：参麦能明显抑制牛血清促进的牛内皮细胞增殖，同牛平滑肌细胞和肿瘤细胞相比，具有显著差异；对肿瘤条件培养液诱导的牛内皮细胞增殖抑制显著，在实验浓度范围（40ul-180ul/ml）内，其抑制作用呈明显量效关系。结论：参麦能特异性抑制内皮细胞增殖，提示参麦可能具有抗血管生成的作用。     

首乌组方对动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

用牛主动脉平滑细胞为模型，结晶紫色分光光度比色法对首乌对组方进行研究，发现其对牛主动脉平滑肌细胞的增殖有显著的抑制作用，其单味药的抑制作用强弱不等，但均低于组方。临床应用的胶囊制型作用与水煎剂相等。提示首乌组方抗动脉粥样硬化的作用机理之一，可能是抑制平滑肌细胞增殖。     

血管内皮细胞脂质过氧化对平滑肌细胞和纤维母细胞DNA…

为探讨血管内皮细胞受脂质过氧化作用后对中膜平滑肌细胞增殖的影响，以氢过氧化枯烯作为引发剂引发培养牛主动脉内皮细胞的过氧化瓜在，测定其内皮细胞条件培养液对培养的牛主动脉中膜平滑肌细胞和Ｓｗｉｓｓ３Ｔ３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：氢过氧化枯烯作用后，内皮细胞脂质过氧化物的含量明显增加；各实验组均未见明显的形态改变和乳酸脱氢酶含量的增加；由氢过氧化枯烯作用后，内皮细胞的条件培养使平滑肌细胞和Ｓｗｉｓｓ３     

胰岛素对培养中兔动脉平滑肌细胞的影响

应用细胞培养技术,进行兔主动脉平滑肌细胞的传代培养,取3～7代细胞进行光学、电子显微镜鉴定后,用不同浓度的胰岛素进行刺激,结果经F检验表明:不同培养天数、不同浓度的胰岛素均能刺激平滑肌细胞增殖,且与正常对照组比较均有显著性统计学差异(P<0.01)。其细胞增殖速度与胰岛素浓度呈正相关,提示高胰岛素血症是促进动脉粥样硬化形成的原因之一。     

罗格列酮抑制鼠动脉平滑肌细胞增殖的实验研究

目的：探讨PPAR-γ合成型配体罗格列酮对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响.方法：采用组织贴块法原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞并传代,根据细胞生长的形态特点和免疫细胞化学染色进行细胞鉴定.取第五代纯化细胞血清饥饿24h,然后用PDGF-BB或bFGF（20ng/ml）刺激24h,按实验分组在30min前加或不加入不同浓度（1～10umol/L）的罗格列酮进行预处理,应用MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期分布.结果：镜下培养细胞呈典型的“谷峰状”生长,免疫细胞化学染色显示胞浆内特异的α平滑肌肌动蛋白阳性表达.PDGF-BB或bFGF均能诱导平滑肌细胞增殖,MTT中A490值增加,G0/G1期细胞减少,S期细胞增多.罗格列酮预处理能够抑制平滑肌细胞增殖,抑制细胞从G0/G1期向S期转变,且呈明显的剂量依赖关系.结论：罗格列酮能够抑制生长因子诱导的血管平滑肌细胞的增殖.     

绿茶多酚抑制晚期糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的 本研究观察绿茶多酚对晚期糖基化终产物(AGEs)刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)应用不同浓度的AGEs分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较．将不同剂量的绿茶多酚与AGEs共同作用并设立对照组进行比较，采用非放射性的MTS／PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果 与对照组相比，晚期糖基化终产物对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用。在晚期糖基化终产物刺激下．绿茶多酚可明显抑制血管平滑肌细胞的生长。AGEs对p44／42MAPK磷酸化蛋白表达有显著的增强作用，此作用可被绿茶多酚抑制。结论 本研究提示绿茶多酚可抑制晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖及p44／p42 MAPK磷酸化蛋白的表达。     

溶血性磷脂酰胆碱对培养的小牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

为探讨溶血性磷脂酰胆碱（Lysophosphatidylcholine,LysoPC）对培养的小牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用,采用原代培养的小牛胸主动脉平滑肌细胞,用细胞直接计数法、MTT比色法、流式细胞术,观察LysoPC对平滑肌细胞增殖的影响。结果:与对照组相比,LysoPC在浓度小于（或等于）50μmol/L时呈剂量依赖性刺激平滑肌细胞增殖。结论:LysoPC可显著地诱导小牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖。提示LysoPC在动脉粥样硬化的发生中起重要作用。     

壳多糖对兔主动脉平滑肌细胞和内皮细胞增殖的影响

目的：研究壳多糖对体外培养的兔主动脉平滑肌细胞和内皮细胞生长的影响。方法：将不同质量浓度（０．２,２,２０,２００,２０００μｇ／ｍｌ）的壳多糖溶液分别加入兔主动脉平滑肌细胞和内皮细胞培养液中,培养１２,２４,４８ｈ后用ＭＴＴ经色法测定细胞数。结果：平滑肌细胞数随着壳多糖质量浓度和作用时间的增加而减少;内皮细胞数随着其质量浓度和作用时间的增加,在一定范围内相应增加。结论：壳多糖能抑制兔主动脉平滑肌     

血管内皮细胞脂质过氧化对平滑肌细胞和纤维母细胞DNA合成的影响

为探讨血管内皮细胞受脂质过氧化作用后对中膜平滑肌细胞增殖的影响，以氢过氧化枯烯作为引发剂引发培养牛主动脉内皮细胞的过氧化反应，测定其内皮细胞条件培养液对培养的牛主动脉中膜平滑肌细胞和Ｓｗｉｓ３Ｔ３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：氢过氧化枯烯作用后，内皮细胞脂质过氧化物的含量明显增加；各实验组均未见明显的形态改变和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）含量的增加；由氢过氧化枯烯作用后，内皮细胞的条件培养液使平滑肌细胞和Ｓｗｏｓｓ３Ｔ３细胞的〔３Ｈ〕－ＴｄＲ掺入率明显增高。可以认为：脂质过氧化作用使内皮细胞对平滑肌细胞和纤维母细胞的增殖促进活性增强。为阐明脂质过氧化作用促进和加重体内动脉粥样硬化病变形成的机理提供了实验资料。     

丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖

本实验采用噻唑蓝（MTT）比色法观察氧化型低密度脂蛋白（OLDL）对体外培养的牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响及抗氧化剂丙丁酚的作用。结果表明OLDL能降低一氧化氮（NO）含量和刺激血管平滑肌细胞（SMC）增殖（P＜0．05），丙丁酚能拮抗OLDL刺激SMC增殖作用，同时增加NO含量。NO合成酶抑制剂硝基-L-精氨酸增强OLDL刺激血管平滑肌细胞增殖作用，且部分抵消丙丁酚的桔抗作用。提示丙丁酚能抑制OLDL刺激血管平滑肌细胞增殖作用，且与其促进平滑肌细胞合成释放一氧化氮有关。     

粉防己碱抑制内皮素诱导的牛脑微血管平滑肌细胞增殖

本实验主要观察了内皮素（ＥＴ）对培养的牛脑微血管平滑肌细胞增殖的影响。结果表明：ＥＴ在１０＾－１０￣１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ之间呈剂量依赖性地促进牛脑微血管平滑肌细胞的增殖；当用１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ ＥＴ与该平滑肌细胞共同孵育２４ｈ时刺激作用最强，增殖率达９８．１１％。粉防己碱在１０＾－６￣１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ时可剂量依赖性地拮抗ＥＴ诱导的牛脑微血管平滑肌细胞增殖，药物浓度在１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ时抑制     

三七花总皂苷对人主动脉血管平滑肌细胞增殖及细胞内钙离子浓度的影响

目的:观察三七花总皂苷(PNFS)对血管平滑肌细胞增殖及细胞内钙离子浓度的影响.方法:采用去甲肾上腺素诱导的人主动脉血管平滑肌细胞增殖和钙超载模型,应用CCK-8法观察血管平滑肌细胞增殖活力;钙荧光指示剂Fluo-3/AM检测细胞内钙浓度变化.观察不同剂量PNFS对两者的影响.结果:PNFS能够改善去甲肾上腺素诱导的人主动脉血管平滑肌细胞增殖,降低细胞内钙离子浓度,并呈一定的量效关系.结论:PNFS对去甲肾上腺素诱导的人主动脉血管平滑肌细胞增殖有抑制作用,这一作用可能与降低细胞内钙离子浓度有关.     

绿茶多酚抑制晚期糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的本研究观察绿茶多酚对晚期糖基化终产物(AGEs)刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)应用不同浓度的AGEs分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较,将不同剂量的绿茶多酚与AGEs共同作用并设立对照组进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果与对照组相比,晚期糖基化终产物对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用。在晚期糖基化终产物刺激下,绿茶多酚可明显抑制血管平滑肌细胞的生长。AGEs对p44/42 MAPK磷酸化蛋白表达有显著的增强作用,此作用可被绿茶多酚抑制。结论本研究提示绿茶多酚可抑制晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖及p44/p42 MAPK磷酸化蛋白的表达。     

丙丁酚对氧化型低密度脂蛋白和氧自由基促血管平滑肌细胞增殖的影响

用细胞计数和ＭＴＴ快速比色计量法观察到体外培训的牛主动脉平滑肌细胞分别与氧化型低密度脂蛋白和黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶共同培养后，前者明显增殖（Ｐ＜０．０１）。抗氧化剂丙丁酚（１００μｍｏｌ·Ｌ－１）能抑制氧化型低密度脂蛋白和黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶促平滑肌细胞增殖作用；一氧化氮合成酶抑制剂ＮＧ－硝基－Ｌ－精氨酸对两者促平滑肌细胞增殖的作用无影响，同时也不能阻断丙丁酚的抑制两者促细胞增殖作用。这一结果提示，丙丁酚能抑制氧化型低密度脂蛋白和外源性氧自由基促平滑肌细胞增殖，这一作用可能与血管平滑肌细胞中一氧化氮的合成及释放无关。     

丙丁酚对氧化型低密度脂蛋白和氧自由基促血管平滑肌细胞增…

用细胞计数和ＭＴＴ快速比色计量法观察到体外培训的牛主动脉平滑肌细胞分别与氧化型低密度脂蛋白和黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶共同培养后，前塥明显增殖（Ｐ〈０．０１）。抗氧化剂丙丁酚（１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）能抑制氧化型低密度脂蛋白和黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶促平滑肌细胞增殖作用，一氧化氮合成酶抑制剂Ｎ＾Ｇ－硝基－Ｌ－精氨本对两者促平滑肌细胞增殖的作用无影响，同时也不能阻断丙丁酚的抑制两者促细胞增殖作用，这一结果提     

胰岛素对牛主动脉平滑肌细胞脂质含量的影响

应用细胞培养技术对新生牛主动脉平滑肌细胞进行传代培养,取第4～6代平滑肌细胞作为受试对象研究不同浓度胰岛素对牛生动脉平论肌细胞内脂质含量的影响,采用Heider改良法（即酶-荧光法）测定平滑肌细胞内微量胆固醇。结果显示:胰岛素增加平滑肌细胞内胆固醇的含量,且胰岛素浓度与平滑肌细胞内胆固醇含量是正相关。上述结果提示:胰岛素可促进平滑肌细胞内脂质蓄积,从另一侧面加速动脉粥样硬化的发生与发展。     

胰岛素对牛主动脉平滑肌细胞前列环素生成的影响

应用细胞培养技术对新生牛主动脉平滑肌细胞进行传代培养,取第４～６代平滑肌细胞进行实验,研究不同时间、不同浓度胰岛素对平滑肌细胞前列环素（ｐｒｏｓｔａｃｙｃｌｉｎ,ＰＧＩ２）生成的影响。分别于加入胰岛素培养０、６、１２、２４ｈ收集细胞上清液,并将各孔细胞计数,采用放免法测定细胞上清液中６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α含量（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α是前列环素的稳定代谢产物）。结果显示：加入胰岛素培养１２ｈ与２４ｈ,胰岛素浓度与细胞上清液中６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α含量呈负相关（１２ｈ：ｒ＝－０．７９８,Ｐ＜０．００１;２４ｈ：ｒ＝－０．８６６,Ｐ＜０．００１）。上述结果提示：胰岛素可抑制平滑肌细胞产生前列环素     

金属硫蛋白对活性氧诱导的平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的；研究金属硫蛋白对活性氧诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：用氧化氢和甲萘醌分别作为内源性和外源性活性氧刺激平滑肌细胞增殖，应用细胞总蛋白定量，＾３Ｈ－ＴＲｄＲ参入，细胞周期时相测定等方法测定细胞增殖。结果；过氧化氢和甲萘醌可诱导培养的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖，使其蛋白总量增加，Ｓ期细胞比例增高，ＤＮＡ合成率增加。