再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群与红细胞免疫功能研究

再生障碍性贫血患者Ｔ淋巴细胞亚群与红细胞免疫功能研究王欣１张明珙１宋素芹１时庆２彭军１李杰１（山东医科大学附属医院１血液病研究室２低温医学研究室１材料与方法１．１研究对象再生障碍性贫血（ＡＡ）组２４例，男１５例，女９例，年龄１８～５２岁。根据１９８７...     

T细胞亚群在再生障碍性贫血的变化

目的探讨再生障碍性贫血（ＡＡ）患者中Ｔ细胞亚群的变化。方法应用免疫酶标技术对１０例再障Ｔ细胞亚群测定与２０例健康人Ｔ细胞亚群含量进行比较分析。结果再障中ＣＤ３、ＣＤ４降低，ＣＤ８增多，ＣＤ４／ＣＤ８比值降低（Ｐ＜０．０５）。结论提示再障患者免疫平衡失调，免疫功能降低。     

慢性再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

本文应用美国O(?)tho-mune公司的OKT系列单克隆抗体:T_4(T辅助细胞,T_H)和T_8(T抑制细胞,Ts或Lcu-2a)。采用SPA(金黄色葡萄球菌蛋白A)间接花环法,检测正常人和慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的外周血T淋巴细胞亚群,     

对再生障碍性贫血患者T细胞亚群变化的观察

近年来，由于抗T淋巴细胞单克隆抗体（MCAb）的问世，对再生障碍性贫血（再障）的免疫紊乱研究提供了有效的方法。我们应用OKT系列     

再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群的变化

本文应用T淋巴细胞单克隆抗体和间接免疫荧光技术检测了28例再生障碍性贫血患者和20名正常人外周血中T淋巴细胞及其亚群的变化。结果发现再障患者OKT3、OKT。正常，OKT8明显高于正常，OKT4／OKT8比值明显降低，其中5例(18%)再障患者OKT4/OKT8≤l。以上结果提示再障患者抑制性T细胞增高。这种免疫平衡失调而导致的造血抑制可能与再障发病密切相关。     

再生障碍性贫血患者T细胞亚群及HLA-DR抗原表达的意义

目的 :检测再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞亚群CD4 + 、CD8+ 及HLA DRT抗原的表达 ,探讨再生障碍性贫血发病的免疫机制 ,为再障的临床诊断和治疗提供理论依据。方法 :采用免疫组化斑点印迹技术进行检测 ,并用薄层扫描仪对所有班点印迹信号进行扫描。结果 :再障患者CD4 + 降低 ,CD8+ 升高 ,CD4 + /CD8+ 比值倒置 ,HLA DR表达增高。结论 :T淋巴细胞亚群比例失衡及HLA DR表达升高可能参与再障的发病过程     

再生障碍性贫血患者T细胞亚群检测的临床意义

目的 探析再生障碍性贫血患者T细胞亚群检测的临床意义.方法 方便选取该院2013年4月—2016年11月收治的38例再生障碍性贫血患者为观察组,同时选择38例健康体检者,作为对照组,均以APAAP法对两组T细胞亚群及HLA-DR抗原进行检测,分析CD3﹑CD4﹑CD8﹑HLA-DR水平.结果观察组CD4水平(25.24±7.83)%﹑CD8(35.22±6.33)%﹑CD4/CD8(0.73±0.42)﹑HLA-DR(24.62±11.61)%与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,CD4水平(38.38±8.12)%﹑CD4/CD8(1.65±0.34)%﹑CD8水平(24.15±5.24)﹑HLA-DR水平(10.28±4.23)与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 再生障碍性贫血患者发病和免疫功能异常关系密切,具有T淋巴细胞亚群失调的情况,因此,对于再生障碍性贫血患者检测T细胞亚群意义重大,对临床鉴别诊断及疗效观察均具有一定的临床指导价值.     

再生障碍性贫血患者T细胞亚群与抑制细胞的活性

以抗生物素蛋白-生物素-过氧化酶复合物检测18例再生障碍性贫血(再障)患者外周血T细胞亚群,其中10例同时检测抑制细胞活性。结果表明:再障患者CD_4~+细胞百分率降低,CD_8~+细胞百分率明显增高,CD_4~+/CD_8~+比值明显下降。7/10例STs,显示抑制率低于正常范围,CD_8~+细胞增高,STs示功能下降,两者呈直线负相关系。提示再障的发病机制可能与细胞毒性T细胞作用有关。     

再生障碍性贫血T细胞亚群检测的临床意义

目的探讨T淋巴细胞亚群在再生障碍性贫血中的检测意义。方法采用APAAP法,对32例再障患者进行检测。结果再障患者T细胞亚群比值失衡,主要表现为T4细胞减少,T8细胞增多,T4/T8比值倒置。外周血HLA-DR抗原表达率高于正常。结论本检测对再障的诊断、鉴别诊断及临床疗效观察具有一定的临床意义。     

再生障碍性贫血患者T细胞亚群临床检测的价值

目的:探索再生障碍性贫血患者T细胞亚群临床检查价值,为临床治疗再生障碍性贫血提供参考.方法:选取我院于2014年11月至2015年11月间收治的60例再生障碍性贫血患者作为临床研究对象,将其随机分为观察组和对照组,每组各30例,其中给予对照组患者临床常规治疗,在常规治疗的基础上给予观察组患者免疫抑制治疗,借助三色免疫荧光抗体标记法以及流式细胞术检测方法,对两组患者外周血、T淋巴细胞亚群以及CD4+/CD8+比值进行测定,参照对照组正常水平,将患者分为比值正常型与比值倒置型以及比值超高型三种免疫亚型,对比不同亚型间病情、疗效之间的差异.结果:经统计分析,再生障碍性贫血患者和正常人T细胞亚群表达对比中,其CD3+与CD8+的百分比均显著高于正常人(P<0.05),而CD4+/CD8+比值明显低于正常人(P<0.05),且均具有统计学意义.而CD4+的百分数则无明显差异(P>0.05),差异无统计学意义.患者个体之间的各项指标标准差均非常高,说明个体间离散程度大.此外,T细胞亚群CD4+/CD8+比值对比中,比值倒置型和比值超高型的分别低于正常范围和高于正常水平.结论:再生障碍性贫血患者其CD4+/CD8+比值均存在较为严重的失调,CD4+/CD8+比值异常升高或者降低同时存在,且免疫异常同再生障碍性贫血发病具有一定的联系,借助T细胞亚群的临床检查有助于制定科学、合理的治疗方法,提高临床治疗再生障碍性贫血疾病的效果.     

再生障碍性贫血与T细胞亚群及调节性T细胞的相关性分析

目的 对再生障碍性贫血患者的T细胞亚群与调节性T细胞进行分析,探讨再生障碍性贫血和T细胞亚群及调节性T细胞的关系。 方法 选择浙江省人民医院再生障碍性贫血患者30例为再生障碍性贫血组,30例健康者作为对照组,再生障碍性贫血组分为重型再生障碍性贫血组和非重型再生障碍性贫血组,比较各组患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和T细胞亚群的表达情况。 结果 再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low的表达低于对照组(P＜0.05),再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25+CD127high的表达高于对照组(P＜0.05)。再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD4+和CD4/CD8低于对照组(P＜0.05),再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD8+的表达高于对照组(P＜0.05)。重型再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low的表达低于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05),重型再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25+CD127high的表达高于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05)。重型再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD4+和CD4/CD8低于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05),重型再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD8+的表达高于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05)。 结论 再生障碍性贫血患者存在T细胞亚群和调节性T细胞的异常,再生障碍性贫血的发病和严重程度可能和T细胞亚群和调节性T细胞水平相关。      

再生障碍性贫血患者T细胞功能与数量

再生障碍性贫血的病因有多种学说,许多研究发现免疫的异常在再障的发病中起重要作用。为进一步探讨再障与免疫紊乱的关系,我们对再障患者T细胞功能与数量进行了研究。 为了解再障患者总T细胞的功能,作者用~3H-TdR掺入法比较了11例再障病人及12例正常人的淋巴细胞转化率,再障病人ConA刺激转化率为17860±13341cpm,与正常对照(16073±14205cpm)无统计学差异(t=0.293,P>0.05);再障病人PHA刺激的转化率为8448±10135cpm,与正常对照(10354±11741cpm)无统计学差异     

再生障碍性贫血患者淋巴细胞亚群及T细胞活化水平的分析

目的：观察再生障性贫血患者外周血的淋巴细胞亚群的变化和T细胞活化，探讨免疫机制在再障发病中的作用。方法：用流式细胞术直接免疫法检测48例再障患者外周血淋巴细胞亚群及T细胞的HLA-DR表达。结果：再障组患者的CD4^ 、CD8^ 细胞明显增高，D4^ /CD8^ 比值降低，CD8^ HLA-DR^ 细胞明显增加。结论：再障患者存在淋巴细胞亚群的失调及T细胞的异常活化。提示由T淋巴细胞介导的免疫异常对造血功能的押制在再障的发生中起重要作用。     

重型再生障碍性贫血患者外周血自然杀伤细胞亚群百分比及功能变化

目的 分析重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)前、后外周血自然杀伤(NK)细胞亚群占淋巴细胞百分比、功能变化及其与造血功能相关性,探讨NK细胞在SAA发病机制中的作用.方法 用流式细胞术检测2010年4月至2010年12月天津医科大学总医院收治的12例初治(初治组)、30例IST后恢复(恢复组)的SAA患者的外周血NK细胞(CD3-CD56+/CD16+)及其亚群[CD3-CD56brightCD16-(CD56bright)、CD3-CD56dimCD16+(CD56dim)、CD3-CD56-CD16+]占淋巴细胞百分比、活化性受体(NKG2D和NKp46)、穿孔素、颗粒酶β表达,并与13名健康对照(对照组)比较;分析上述变化与外周血中性粒细胞比例(ANC%)、淋巴细胞比例、网织红细胞计数及骨髓造血功能(增生程度、粒系百分比、红系百分比、巨核细胞数量、淋系百分比)的相关性.结果 (1)初治组NK细胞、CD56bright细胞百分比(10.30%±6.08%、0.11%)均显著低于恢复组(16.47%±8.29%、0.68%,P＜0.05)和对照组(19.45%±6.88%、0.53%,均P＜0.05);初治组CD56dim细胞百分比(9.62%±6.04%)明显低于对照组(18.21%±7.16%,P＜0.05);恢复组CD3-CD56-CD16+细胞百分比(0.79%)显著高于初治组及对照组(0.37%、0.41%,均P＜0.05).(2)初治组与恢复组NK细胞NKp46、穿孔素表达[初治组(88.23%、64.97%±21.61%),恢复组(82.97%、66.14%±20.73%)]显著高于对照组(40.99%、42.11%±27.25%,均P＜0.05).(3)NK、CD56bright及CD3-CD56-CD16+细胞的百分比与SAA患者ANC%呈正相关(r分别为0.423、0.609、0.468,均P＜0.05),与骨髓粒系百分比呈正相关(r分别为0.357、0.517、0.434,均P＜0.05);NK、CD56bright、CD56dim和CD3-CD56-CD16+细胞的百分比与SAA患者骨髓增生程度呈正相关(r分别为0.455、0.412、0.404、0.451,均P＜0.05),与骨髓淋系百分比呈负相关(r分别为-0.522、-0.435、-0.411、-0.547,均P＜0.05);NK细胞NKG2D、NKp46、穿孔素、颗粒酶β表达与各造血指标无相关性(均P＞0.05).结论 SAA患者外周血NK细胞、CD56bright、CD56dim亚群占淋巴细胞百分比降低及穿孔素途径增强可能引起免疫耐受被破坏、T细胞功能亢进而导致造血功能衰竭.

Abstract：

Objective To analyze the percentage and functional changes of natural killer(NK)cell subsets in peripheral blood of severe aplastic anemia(SAA)patients before and after immunosuppressive therapy(IST)so as to evaluate the relationships between these changes and hematopoietic functions and explore the role of NK cells in the pathogenesis of SAA.Methods By flow cytometry,the percentages of NK cells(CD3-CD56+/CD16+)and its subsets[CD3-CD56brightCD16-(CD56bright),CD3-CD56dimCD16+(CD56dim),CD3-CD56-CD16+]in peripheral blood lymphocytes were detected in 12 untreated patients,30 recovered patients and 13 normal controls respectively from April 2010 to December 2010 in our hospital.NK cells activating receptors(NKG2D and NKp46),pofforin and granzyme-β of patients and normal controls were also detected.The correlation between these changes and hematopoietic functions,including the percentages of neutrophil granulocyte(ANC%),lymphocyte and reticulocyte absolute value in peripheral blood,and hyperplasia degree,percentage of granulocytes,erythrocytes,lymphocytes and megakaryocytes absolute value in bone marrow were evaluated.Results (1)The percentages of NK cells (10.30% ± 6.08%)and CD56 bright cells(0.11%)in untreated patients were significantly lower than those of recovered patients(16.47% ± 8.29%,0.68%,both P ＜0.05)or normal controls(19.45% ±6.88%,0.53%,both P ＜0.05).The percentage of CD56dim cells in untreated patients was significantly lower than that of normal controls(9.62% ±6.04% vs 18.21% ±7.16%,P ＜0.05).The percentage of CD3 CD56 CD16 + cells was significantly higher in recovered patients than that of untreated patients or normal controls(0.79% vs 0.37%,0.41%,both P＜0.05).(2)The expression of NKp46 and pefforin of NK cells in untreated(88.23%,64.97% ± 21.61%)and recovered patients(82.97%,66.14% ±20.73%)were significantly higher than those of healthy controls(40.99%,42.11% ±27.25%,all P ＜0.05).(3)The percentage of NK CD56bright and CD3-CD56-CD16+ cells of patients was positively correlated with ANC%(r=0.423,0.609,0.468 respectively,all P＜0.05)and the percentage of granulocytes in bone marrow(r=0.357,0.517,0.434 respectively,all P＜0.05).The percentages of NK,CD56bight,CD56dim and CD3-CD56-CD16+ cells were positively correlated with the hyperplasic degree of bone marrow(r=0.455,0.412,0.404,0.451 respectively,all P＜0.05),but they were negatively correlated with the percentage of lymphocytes in bone marrow(r =-0.522,-0.435,-0.411,-0.547 respectively,all P ＜0.05).The expression of NKG2D,NKp46,pefforin and granzyme-β of NK cells had no correlation with hematopoiesis(all P＞0.05).Conclusion The lowered percentage of NK CD56bright,CD56dim cells and a higher expression of pefforin may cause the over-function of T lymphocytes and thus lead to hematopoietic failure in SAA.     

再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白的变化及其临床意义

目的　探讨再生障碍性贫血 (再障 )患者T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白的变化及其临床意义。方法　对 2 2例再障患者 (再障组 )进行外周血T淋巴细胞亚群及其血清免疫球蛋白检测 ,并与 18例门诊健康体检者 (对照组 )进行比较。结果　再障组CD+ 4 、CD+ 4 /CD+ 8、IgG、IgA、IgM水平比对照组明显降低 (P均 <0 .0 1) ,但CD+ 8明显升高 (P <0 .0 1) ;大部分患者CD+ 3 正常。再障组治疗后 15例有效 ,其IgG、IgA、IgM、CD+ 4 、CD+ 4 /CD+ 8比值升高至正常或接近正常 ,CD+ 8明显降低至正常或接近正常 ,与治疗前相比差异有显著性 (P <0 .0 1或 0 .0 5 )。结论　再障患者发病与免疫功能异常密切相关 ,不仅存在细胞免疫功能的异常 ,也存在着体液免疫功能的异常。用免疫抑制剂治疗有效者 ,T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白水平可恢复正常或接近正常     

再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群表达特点

目的观察再生障碍性贫血(AA)患者的T淋巴细胞亚群表达特点,并分析T淋巴细胞亚群与外周血象的相关性。方法选择本院诊治AA患者51例作为研究对象,其中重型AA(SAA)20例,非重型AA(NSAA)31例,另外选择本院体检中心健康体检者51例作为对照组,采用流式细胞仪和血细胞分析仪分别检测所有受试者的T淋巴细胞亚群(CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+比值、NK细胞)和白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT),对检测结果进行统计学分析。结果多组间比较,各再障组患者CD4~+、CD4~+/CD8~+和NK细胞均低于对照组,差异有统计学意义[(F=6.91,P=0.011)、(F=7.83,P=0.003)、(F=7.24,P=0.008)],而CD8~+明显高于对照组,差异有统计学意义(F=5.29,P=0.031);SAA组患者CD4~+、CD4~+/CD8~+和NK细胞均明显低于NSAA组,差异有统计学意义[(q=11.310,P=0.002)、(q=8.121,P=0.005)、(q=19.145,P=0.000)],而CD8~+水平明显高于NSAA组,差异有统计学意义(q=7.210,P=0.008);NSAA组NK细胞水平明显低于AA组,差异有统计学意义(q=5.120,P=0.040)。CD4~+细胞与血象WBC呈正相关(r=0.719,P0.05),NK细胞与血象PLT呈正相关(r=0.784,P0.05),CD8~+细胞与血象Hb呈负相关(r=-0.745,P0.05)。结论 AA患者的免疫紊乱与疾病状态有一定的关系,联合监测免疫细胞可能有助于评估AA病情及预后。     

用单克隆抗体检测再生障碍性贫血患者末梢血T细胞亚群

再生障碍性贫血的发病机理与免疫损伤有密切关系。Asconson等发现部分患者骨髓中出现抑制性淋巴细胞,该细胞能抑制正常人粒细胞系统和红细胞系统的增殖。为探讨免疫紊乱与再生障碍性贫血的关系,我们采用抗人淋巴细胞单克隆抗体OKT系列,以间接免疫荧光法,检测28例再生障碍性贫血患者末梢血中的T细胞亚群,并与年龄、性别相似的正常人27例进行比较。