自体表皮移植加碱性成纤维细胞生长因子治疗白癜风126例

目的　观察自体表皮移植加碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)治疗白癜风的疗效。方法　治疗组予白斑祛除后,创面涂布bFGF水溶液(100u/ml), 再行自体表皮移植;对照组予白斑祛除后单纯自体表皮移植。结果　治疗组有效率 96. 75%,对照组有效率 82. 99%,两组比较差异有非常显著性(χ2 =6. 57, P<0. 01)。结论　自体表皮移植加碱性成纤维细胞生长因子治疗白癜风的疗效明显高于单纯自体表皮移植。     

自体表皮移植术加碱性成纤维细胞生长因子治疗白癜风59例

笔者所在科室自1999年6月始采用自体表皮移植术加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF，商品名贝复济)治疗59例白癜风患者，取得明显疗效，现报告如下。     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用对自体表皮移植的影响

自体表皮移植作为一项超薄层植皮技术，早已广泛应用于皮肤外科，尤其在白癜风的治疗中取得了良好的效果，2001～2002年，我们外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子于植皮区，使所植自体表皮成活率较对照组有明显的差异，取得了较好的临床疗效，报告如下。     

自体表皮移植术加碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）治疗白癜风的疗效观察

为了探讨碱性成纤维细胞生长因子对白癜风的疗效,在自体表皮移植的同时加用bFGF观察15例白癜风患者的疗效。添加bFGF的皮片存活率为100%。且色素恢复较快,色斑扩大更为显著。未见明显副作用,为目前治疗白癜风的一种更安全有效的治疗途径。     

自体表皮移植术加碱性成纤维细胞生长因子治疗白癜风50例

白癜风是一种常见的皮肤病,目前对本病的治疗方法虽多,但疗效多不甚理想。近年来我科采用自体表皮移植术加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)治疗50例白癜风,取得满意疗效,现报道如下。一、临床资料全部病例均经白癜风专病门诊确诊为稳定期患者,其中男20例,女30例;男女之比为1∶1.5;年龄9~66岁,平均27.34岁;病程最短半年,最长20年,平均4.96年。其中局限型33例,节段型12例,散发型3例,肢端型2例;所有患者以往曾经多种外用及内服药治疗效果不佳,愿意接受手术治疗。其移植白斑区71处,面积最小的1cm×1cm,最大8cm×8cm,其移入直径0.8cm皮片271个,1.…     

系统性硬皮病成纤维细胞研究进展

成纤维细胞在硬皮病纤维化过程中具有重要作用。体外培养的系统硬皮病皮损成纤维细胞发生了基质合成和生长增殖的异常以及粘附力的改变。能够合成高产量胶原及其它基质的成纤维细胞亚群在硬皮病皮肤纤维化中可能起重要的作用。硬皮病皮损中表害细胞间粘着分子１型ＨＬＡ－Ⅱ类抗原的成纤维细胞数目增加可能与局部炎症或免疫反应有关。     

成纤维细胞生长因子对黑素细胞生长的影响

目的 探讨成纤维细胞生长因子（bFGF）对体外培养正常人黑素细胞增殖的影响,寻找快速体外培养正常人黑素细胞的方法。方法 分别用普通的合成培养基与添加一定浓度bFGF的合成培养基原代培养正常人黑素细胞,观察两种条件下细胞生长情况,并对培养的黑素细胞进行鉴定,对不同生长期黑素细胞的形态进行观察,测定不同浓度bFGF（0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8、2.1 μg/L）对黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性的影响。结果 采用培养基中加入一定浓度bFGF的方法成功培养出免疫组化染色阳性的纯化黑素细胞,该细胞不同生长期形态有一定差异。bFGF 处理组黑素细胞生长较快,培养基中加入0.3、0.6 μg/L bFGF时黑素细胞的增殖率显著高于对照组（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）,加入1.5、1.8 μg/L bFGF时酪氨酸酶活性显著高于对照组（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）。结论 在合成培养基中加入一定浓度的bFGF能缩短原代培养时间,短期内可获得大量生长活力好的纯化黑素细胞。一定浓度的bFGF能促进黑素细胞增殖和酪氨酸酶活性。     

自体脂肪移植填充术治疗面部皮肤凹陷

目的观察自体脂肪颗粒移植充填面部皮肤凹陷的临床效果。方法用注射器抽吸自体脂肪颗粒,生理盐水漂洗后用针头稍粗的注射器注入面部皮肤凹陷处。结果本组51例共72个面部凹陷部位采用自体脂肪颗粒移植充填,27例随访超过6个月,注射脂肪术区皮肤凹陷均得到较明显的改善,效果满意。结论自体脂肪移植填充术治疗面部皮肤凹陷并发症少,效果满意。     

系统性硬皮病皮损成纤维细胞研究进展

成纤维细胞在硬皮病纤维化过程中具有重要作用。体外培养的系统性硬皮病皮损成纤维细胞发生了基质合成和生长增殖的异常以及粘附力的改变。能够合成高产量胶原及其它基质的成纤维细胞亚群在硬皮病皮肤纤维化中可能起重要的作用。硬皮病皮损中表达细胞间粘着分子Ⅰ型和HLA-Ⅱ类抗原的成纤维细胞数目增加可能与局部炎症或免疫反应有关。     

病理性瘢痕成纤维细胞的研究进展

成纤维细胞是瘢痕形成的效应细胞,瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕成纤维细胞存在着广泛的异质性。成纤维细胞原合成增加,降解减少导致病理性瘢痕中胶原过度积聚。成纤维细胞的增殖异常是病理性瘢痕过度增生和持续存在的主要原因。成纤维细胞对细胞因子等因素反应性有明显异常。肥厚性瘢痕的收缩性和成纤维细胞的异质性有直接关系。     

自体外周血干细胞移植治疗难治性天疱疮一例

目的 探讨自体外周血干细胞移植治疗天疱疮的可能性.病历资料男性患者,35岁,全身反复大疱4年余,根据临床表现、组织病理和免疫荧光检查确诊为天疱疮.经糖皮质激素和免疫抑制剂治疗效果不佳,2月前出现髓关节疼痛,经X线和CT检查诊断为股骨头无菌性坏死.采取环磷酞胺及粒细胞集落刺激因子作为动员剂,利妥昔单抗联合净化.用环磷酞胺联合抗胸腺细胞球蛋白、利妥昔单抗进行预处理,同时碱化和水化尿液,保护心、肝和肾功能.观察移植后临床表现、造血和免疫指标等的变化.结果 患者移植结束即停用糖皮质激素,3周后自觉双侧靛关节疼痛减轻,复查CT示股骨头缺血性改变减轻.移植6周后直接免疫荧光和间接免疫荧光检查转阴并持续阴性.经一年复诊,临床及免疫学检查均无复发迹象.结论 本研究结果提示自体外周血干细胞移植治疗天疙疮近期疗效显著,可能是治疗存在治疗抵抗的重症天疤疮潜在的“根治”方法,但其风险收益比尚需进一步评价.     

自体外周血纯化造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮

目的 探讨自体外周血纯化造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮(SLE)的疗效和安全性。方法 对9例SLE患者进行自体外周血纯化造血干细胞移植。采集的干细胞的计数为(2.37～9.9)×10⁸/kg。预处理方案是环磷酰胺50 mg·kg^-1·d^-1静脉滴注,连用4 d(造血干细胞回输前2～5d)。抗胸腺球蛋白抗体2.5 mg·kg^-1·d^-1静脉滴注,连用4d。同时碱化和水化尿液,保护心、肝和肾功能。从移植后临床表现、SLE相关的免疫学指标的变化,移植后造血重建情况,移植的并发症等方面进行评价。结果 9例患者均获得成功植入,外周血白细胞总数>1.0×10>/L的时间为移植后7～15 d,血小板>20×10⁹/L时间为移植后0～21d。所有患者均于移植后面部红斑等临床症状完全消失,大部分患者自身抗体转阴。9例患者均出现轻重不一的血清病样反应,1例出现严重的肾衰和心衰,3例有出血性膀胱炎,1例出现心因性精神障碍,1例发生会阴部念珠菌感染。结论 随访1年结果表明,自体外周血纯化造血干细胞移植治疗SLE的近期疗效显著,且相对安全。     

自体颗粒脂肪移植术17例临床分析

目的 观察自体颗粒脂肪移植在局部皮肤软组织缺损或凹陷治疗中的应用。方法 对17例不同部位、不同原因所造成的皮肤软组织缺损或凹陷，采用自体颗粒脂肪移植，分1 ～ 5次注射，每次注射2 ~ 130 mL，两次间隔3 ～ 4个月。每次注射过度矫正30%，随访6 ～ 12个月观察疗效。结果 采用颗粒脂肪移植治疗面部、乳房、肢体皮下软组织的缺乏或继发性萎缩，术后颗粒脂肪虽有一定的吸收，但经多次注射治疗，结果医患双方均感满意。结论 自体颗粒脂肪移植手术后，无排异反应，是一种治疗皮肤软组织缺损或凹陷的有效手段。     

个体化培养自体黑素细胞移植治疗白癜风

目的 探讨使用个体化培养基进行自体黑素细胞培养移植治疗白癜风的疗效。方法 负压吸疱获取患者正常表皮片,制成细胞悬液,在Hu16黑素细胞选择性培养基中培养。检测黑素细胞分裂时间（DOT）和黑素含量,根据DOT的大小、黑素含量和细胞形态,调整血清、细胞因子浓度及补充内皮素-1,进行个体化黑素细胞培养。经2 ~ 5次传代后收集黑素细胞,白斑区用超脉冲CO2激光磨削后进行黑素细胞移植,随访观察复色效果。结果 共治疗155例稳定期白癜风患者的204处皮损,进行1次移植119例,进行2 ~ 4次移植36例。应用个体化黑素细胞培养后细胞扩增可达50 ~ 80倍。84.80%的皮损复色面积超过50%,其中52.94%的皮损复色面积超过90%,且复色均匀,未见瘢痕及其他不良反应。性别、年龄、病程长短和皮损面积大小对疗效没有影响。节段型白癜风移植疗效好于寻常型白癜风,两组有效率分别为93.62%和82.16%,痊愈率分别为65.96%和49.04%。手臂和腿部的皮损（不包括肘部和膝盖）移植后痊愈率达73.08%,疗效好于躯干、面颈;肢端皮损疗效最差,痊愈率仅为25.93%。结论 个体化培养技术能提高白癜风患者黑素细胞的培养成功率与细胞扩增倍数。体外培养的自体黑素细胞移植治疗稳定期白癜风疗效肯定,用少量供皮区即可治疗大面积皮损,值得临床应用。     

自体黑素细胞体外培养移植治疗白癜风

目的 探讨自体黑素细胞体外培养扩增和移植治疗白癜风的疗效.方法 用负压吸疱法在白癜风患者正常皮肤区吸疱取皮,用胰蛋白酶消化皮肤制成细胞悬液,在M2黑素细胞选择性培养基中培养,每周传代1次,经4～5次传代,以免疫荧光和多巴胺染色检测培养细胞的纯度和生物学特性.观察培养的自体黑素细胞移植到白癜风患者皮损区后色素生成效果.结果 黑素细胞能在培养基中选择性生长,经4～5周培养,获得纯的黑素细胞,无成纤维细胞和角质形成细胞污染.16例患者28个皮损区接受了移植治疗,病变皮肤面积从2cm²到200 cm²,1个月后移植区出现部分色素,呈淡红色.所有皮损区在移植后3～5个月均有色素再生,色素水平较周围正常皮肤略深或稍浅,6～8个月时色素恢复稳定,颜色与临近正常皮肤接近.87.5%皮损区色素再生面积超过50%.未见瘢痕和其他不良反应.结论 自体黑素细胞体外培养移植治疗白癜风具有效果好、安全、取较小表皮可以治疗较大面积皮损区的优点.     

白癜风负压吸疱自体表皮移植的影响因素

负压吸疱自体表皮移植是目前广泛使用的稳定期白癜风治疗方法之一,具有成功率高,并发症少的优点,其疗效受多种因素影响.主要包括:负压吸疱条件如吸疱部位、温度、压力、吸疱时间等;受皮区的磨削技术;术中、术后汴意事项;术前或术后选择联合的不同治疗方法.这些因素之间亦相互作用,影响皮片内黑素细胞的含量和成活率,进而影响皮肤移植区着色程度和色素扩展范围.     

培养的人皮肤成纤维细胞光老化模型中自噬水平的研究

目的 研究人皮肤成纤维细胞的光老化模型中细胞自噬功能的变化。方法 通过UVB多次照射培养的人皮肤成纤维细胞,制作光老化人皮肤成纤维细胞模型,同时设立不用UVB照射的对照组。用β-半乳糖苷酶法测定未照射的对照组及光老化组细胞的老化程度,并分别测定两组细胞的自噬体表达水平。结果 经UVB重复照射后的光老化人皮肤成纤维细胞大多变形、扭曲,部分细胞死亡。光老化组与对照组β-半乳糖苷酶表达阳性细胞的百分率分别为50.60% ± 5.04%、14.58% ± 2.69%,两组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。光老化组与正常对照组自噬体阳性细胞百分率分别为14.91% ± 4.59%、68.45% ± 8.25%,两组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。结论 人皮肤成纤维细胞光老化模型形态明显异常,生长基本停滞,老化程度明显高于正常细胞,而自噬水平则明显低于正常对照组细胞。     

以人羊膜为支架的表皮黑素细胞培养与生物活性鉴定

目的 从吸引疱疱顶微小皮片建立人表皮黑素细胞（MC）原代培养,以人羊膜为支架培养MC,观察羊膜对MC黏附、增殖和树突发育的影响。方法 用负压吸疱法分离疱顶微小皮片,多巴染色后对取自同一个体下腹部和前臂屈侧皮片的MC进行计数。皮片经胰酶消化后自基底面轻刮表皮细胞建立原代MC培养,将培养的第2 ~ 4代MC接种至新鲜或冻存羊膜上共孵育不同时间后,倒置显微镜下观察MC形态和树突发育。行石蜡包埋组织切片,HE染色后观察MC对羊膜的黏附。用MTT比色法测定接种在羊膜上的MC存活率。结果 前臂屈侧吸引疱疱顶皮片多巴染色阳性细胞个数为（1543.1 ± 113.3）个/mm2,腹部皮片为（857.4 ± 101.7）个/mm2。在4周内建立MC原代培养至少需要从2个疱顶（面积约25.1 mm2）的前臂皮片获取的表皮细胞。倒置显微镜下观察,与单纯接种细胞培养皿的MC比较,接种至新鲜或冻存羊膜上继续培养4、8、12 d的MC形态多为两极,树突细长延伸。HE染色示MC能黏附并均匀分布在羊膜的基底膜层表面。MTT法测定结果示,羊膜对MC的分裂增殖有抑制,但冻存羊膜与新鲜羊膜对MC增殖抑制差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 人前臂屈侧皮肤富含活性MC,是获取吸引疱疱顶微小皮片建立MC原代培养的较好部位。人羊膜支持MC黏附生长和树突发育,有望成为一种能荷载体外培养扩增MC的人源生物支架。     

人表皮黑素细胞体外培养的条件探讨及鉴定

目的:体外培养人包皮组织来源的黑素细胞并对其进行生物学鉴定.方法:包皮取自小儿,采用分离酶和胰蛋白酶两步消化法获得表皮细胞悬液,采用商品化培养基M254及其配套的黑素细胞生长添加因子(HMGS)培养出纯化的黑素细胞,用多巴染色及抗S-100免疫细胞化学染色的方法对培养出的黑素细胞进行鉴定.结果:培养出的黑素细胞体积大,胞浆丰富,有2-5个树突,呈克隆样生长,Dopa染色及S-100抗体染色阳性.结论:该种方法培养出的黑素细胞纯度高,增殖快,能有效避免成纤维细胞的污染.