恒冷切片箱对固定后组织的冷冻切片技术

恒冷切片箱是冷冻切片机中最先进 ,最精密的一种。它用途广泛 ,日前常用于组织化学特别是酶组织化学、免疫组织化学、临床病理切片快速诊断、以及一些组织学教学标本的制作。以往一般都是用新鲜组织直接行冷冻切片 ,虽简易方便 ,速度快 ,但新鲜组织经冷冻 ,组织细胞内常形成冰晶 ,造成一定程度的损伤 ,影响结构的完整性 (图 1) ,尤其在免疫组织化学研究中 ,很容易使组织结构不清 ,抗原定位不精确 ,影响了观察和结果[1、2 ] ,笔者经过多年摸索和实践 ,采用组织先固定后行冷冻切片 ,并将固定组织经鸡蛋白甘油浸渍处理 ,克服了组织细胞冰晶的形…     

冷冻切片机的使用及消毒保养

快速冷冻切片法是一种在低温下借助OCT水包埋组织,短时间内达到一定硬度,在恒冷冷冻切片机内进行切片的方法。冷冻切片机已经得到广泛使用,为加强仪器管理,现就冷冻切片机的使用及消毒保养要点进行探讨,以便更好地为临床诊疗服务。     

如何提高冷冻切片的技术水平

冷冻切片是一种组织不经过脱水、透明处理,不需石蜡包埋的制片方法[1-3].冷冻切片分为直接冷冻切片法和明胶冷冻切片法[4].前者根据组织的制冷方法不同有半导体制冷切片法、甲醇制冷切片法、二氧化碳制冷切片法和低温恒冷箱冷冻切片法.目前,比较常用的方法是低温恒冷箱冷冻切片法.     

振动切片法在胎儿角膜组化研究中的应用及探讨

胎儿角膜即小又薄且透明 ,将之完全剥离进行切片的可行性很小 ,所以要在完整眼球上切片。根据组织化学研究的要求在制片过程中需要保护酶的活性 ,常规技术都是采取冷冻切片法进行切片。但用此法进行试验 ,切出的均为碎片。作者分析认为 ,可能是在液氮冷冻过程中眼球内容物冰晶化所致。后来我们进行了探索 ,采用振动切片法取得了较好的效果。1　材料方法1 .1　材料 :①ＸＹ 86型振动切片机 (浙江省象山科学精密仪器厂 ) ,本机专用于切制新鲜的或已固定的 ,但不经冰冻或包埋的动植物组织。②试剂 :纯丙酮 ,磷酸缓冲液 (ＰＢＳ ,ｐＨ7 6) ,置于…     

提高乳腺冷冻切片制作质量的体会

术中制作快速冷冻切片是目前术中诊断乳腺疾病的主要病理学检查方法之一.因乳腺标本中脂质含量高,制片难度较大.本文现将提高乳腺冷冻切片制作质量的体会介绍如下. 1减少冰晶的形成 冰晶的形成与结晶核的数目和晶体形成的速度有一定关系.利用较低的温度使组织迅速冷冻,结晶核形成快而多,使冰晶体积变小[1].乳腺组织中脂质和水分含量较多,为避免和减少冰晶形成(图1)我们建议:(1)采用急骤冷冻的方法使组织在低温下迅速冷冻.可将组织放在冻托上置入液氮中,10～20 s后取出,置于低温恒冷箱切片机中切片.     

γ-GT酶组织化学染色中低熔点石蜡切片代替冰冻切片的方法

酶组织化学染色的效果取决于标本组织中酶的含量和活性 ,标本组织的处理及制片过程对于酶的保存十分重要。常规石蜡切片因组织浸蜡温度高 ,易使酶变性 ,因此酶组织化学染色通常选用冰冻切片。寻找一种较理想的切片方法 ,是研究人员的迫切愿望和要求 ,我们在谷氨酰转肽酶 (γ -ＧＴ)染色中 ,摸索采用低熔点石蜡切片代替冰冻切片 ,取得了良好的效果 ,现介绍如下 :1　材料与方法正常兔肾新鲜标本 ,①冰冻切片 :取 1ｃｍ× 0 5ｃｍ×0 2ｃｍ组织 ,立即放入 - 2 0℃恒冷冰冻切片机 ,冷冻 10ｍｉｎ ,切片厚 8μｍ ,放 4℃冰箱备用 ;②低熔点石蜡…     

介绍一款国产冷冻切片机的使用和保养

<正>冷冻切片是临床病理检查中的常用方法,对临床上需要进行快速病理诊断,确定病变性质及手术范围至关重要[1]。随着精准医疗的发展,对术中及术后冷冻切片的质量要求越来越高,冷冻切片的应用也越来越普遍[2]。如何合理的选择、使用及维护冷冻切片机,延长冷冻切片机的使用寿命是病理工作者必需面对的问题。现结合西京医院免疫科于     

用已固定组织制作冷冻切片体会

经福尔马林固定的组织不能直接做冷冻切片 ,为此作者经过反复试验 ,探索出一种利用液氮快速冷冻制作冷冻切片的方法 ,取得了满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法　　经常规福尔马林固定 1～ 2天的外检和动物标本 (骨和含钙组织除外 ) ;低温恒冷切片机、ＯＣＴ包埋剂、包埋托、涂有防脱片胶的载玻片、液氮一罐。将福尔马林固定的组织常规取材 ,用滤纸吸干周围水分 ,置包埋托上加ＯＣＴ包埋剂 ,入液氮 3～ 5ｍｉｎ后取出 ,置于冷冻切片机冷冻台上片刻 ,修切组织 ,切片 ,吹干 ,不需固定 ,直接ＨＥ染色。2　体会　　组织从液氮中取出不宜立即…     

全自动冷冻切片机的应用体会

冷冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度,然后进行切片的一种技术.随着临床的发展,手术中需要快速病理诊断的病例越来越多,冷冻切片技术对确定手术方案具有积极的临床意义[1].冷冻切片质量的优劣直接关系到病理诊断的准确率,做1张好的切片,除了技术过硬的技术员外,冷冻切片机也起着重要的作用[2,3].本文通过摸索实践,能够使各类组织的快速制片质量达到常规.现将南通市肿瘤医院病理科使用的德国Leica CM1950冷冻切片机应用体会介绍如下.     

微小组织冷冻切片方法的改进

快速冷冻切片是一种在术中做出病理诊断以便决定进一步治疗方案的快速诊断技术。然而在临床实践中 ,常因组织微小 ,制作不出良好的切片而难以作出病理诊断。我们在实践工作中摸索出一种快速简便的微小组织冷冻切片方法 ,介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　 (1)德国产Ｌｅｉｃａ恒冷切片机。 (2 )冷冻切片组织为我院活体组织检查中取出的微小组织 ,如纤支镜、胃镜、膀胱镜等活检组织 ,肝、肾、甲状腺和乳腺穿刺组织 ,脱落细胞收集物等。 (3)小滤纸片 ,将大滤纸用剪刀剪成 1ｃｍ× 1ｃｍ× 1ｃｍ大小 ,多片重叠成厚约 0 5～ 1ｃｍ ,放在组织…     

介绍一种快速冷冻切片方法

快速冷冻切片有利于临床医师在术中获取病理诊断,以便决定进一步的治疗方案。我们在实践中摸索出一种快速、简便、高质量的－２５℃直接骤冷冻切片法,现介绍如下。１　材料与方法１－１　材料　日本产樱花牌恒冷切片机,我院术中冷冻切片标本１５２例。１－２　方法　将取材后的新鲜组织直接放在组织托上,底部、周围及表面都不加ＯＣＴ等包埋剂（穿刺活检、胃镜等微小组织,可预先在组织托上加少许ＯＣＴ等包埋剂,冷冻,再加上微小组织）,迅速置于冷冻台上,于－２５℃恒温下骤冻１～２ｍｉｎ后切片,厚度３～５μｍ,将切片直接贴附于…     

冷冻切片快速免疫组化检测癌微小转移灶

在日常的术中快速病理诊断工作中,当淋巴结仅有小巢或单个癌细胞发生转移时,不容易与组织细胞等相区别。通常可加作组织化学如网状纤维和爱先蓝等染色,但这些方法既费时,灵敏度和特异性又都不高。为此,介绍一种在冷冻切片上利用微波炉进行免疫组化染色快速检测癌微小转移灶的方法。1　材料与方法1.1　材料　所有的免疫组化试剂均购自福州迈新公司,且都是即用型(便于操作和节省时间)。使用微波炉时均选在低火档。1.2　染色方法　(1)在低温冷冻切片机上作常规冰冻切片;(2)固定:在固定液(95%乙醇和乙醚按1∶1的体积比混合而成)中浸泡1ｍｉｎ;(3…     

应用恒温冷冻切片机制作最佳癌症组织切片的体会

胃癌、卵巢癌、膀胱癌等疾病被认为是多基因遗传病[1]。组织冰冻切片在临床肿瘤病理学快速诊断中占有重要的位置,它的优点是快速简便,准确高效。如利用组织冰冻切片做免疫组织化学染色、组织切片原位杂交等。本研究室采用德国LEICA CM1800恒温冷冻切片机制作膀胱癌、卵巢癌、胃癌组织及脑、肌肉、皮肤(正常对照)冰冻切片,取得了较好的效果,主要体会如下。1.组织冰冻切片的适宜温度不同的组织标本需要不同的切片温度,各种组织常用合适温度[2],其切片温度比我们实际操作的切片温度相对偏高,易使组织硬度不够,进刀慢,切片易粘刀,直接影响切…     

病理组织漂烘仪在快速冷冻切片染色中的应用

正快速冷冻切片技术对手术中的快速病理诊断有很重要的意义,在病理科的日常工作中具有非常重要的地位,快速冷冻切片染色质量的优劣直接影响病理诊断的准确率~([1])。作者在日常工作中,将病理组织漂烘仪应用到快速冷冻切片染色技术中,收到了较好的效果,现介绍如下。1材料与方法1.1材料徕卡CM1900冷冻切片机,常州华利病理组织漂烘仪,苏木精(百博生物公司),1%盐酸水溶液,0.5%氨     

一种改良的石蜡切片显示琥珀酸脱氢酶的方法

目前恒冷箱切片装置虽已简化,价值较前便宜,但仍然属较昂贵的进口仪器,因而大大限制了一些脱氢酶组织化学方法的应用。为此,我们因工作需要摸索出用石蜡切片方法显示琥珀酸脱氢酶(SDH)的方法,现将此法介绍如下: 材料:选用成年杂种雄性小白鼠,取腓肠肌、小肠、睾丸、肝、肾等组织。     

在石蜡切片上显示水解酶的方法探讨

恒冷箱冰冻切片，冰冻替代法及冰冻干燥切片能显示组织中的水解酶，且各具优点与特色，但均需一定的设备，一定的条件，在基层或现场检测有关酶活性尚有困难。为了使石蜡切片显示水解酶达到令人满意的结果，我们对不同的固定液、不同处理方法进行了探讨，旨在推荐一个能被广泛采用的简便、稳定的制片方法。用大鼠或小鼠的肾脏组织为材料，按组织化学手册方法作了某些改良，以显示几种常用的水解酶并设有方法对照，结果见下表：     

一种新冰冻切片制片方法

冰冻切片制片技术的优劣不同程度地影响快速病理诊断水平。我们在工作中发现,切出的冰冻切片略微吹干后,经30s福尔马林处理及5s乙醇处理,再进行HE染色,其镜下观察效果与石蜡切片较为接近。 1 材料和方法 半导体冰冻切片机,HE染色液及福尔马林等。对下述三种方法制得的冰冻切片进行比较。 1.1 新鲜组织置冰冻切片机切片,贴于载玻     

旋转式切片机切火棉胶切片的方法

旋转式切片机主要用于石蜡切片,所以人们又称之为石蜡切片机。我们在实际教学和科研工作中,用旋转式切片机代替滑行式切片机切火棉胶切片,使用起来十分方便,效果也好。方法:1.用火棉胶包埋的一般组织材料,切片时同石蜡切片法一样,但得采用湿切的方法,每切一片时需用蘸有70%酒精的湿毛笔湿润一下刀口及材料切面。如果做连续切片,可以用吸水纸将一张张切片隔开,按顺序叠放在70%酒精中保存。2.用火棉胶包埋的含骨质等较硬的组织材料,则要采用拉切的办法,即将切刀一端顶起,材料在通过刀口时形成一定倾角滑过。3.在切几十个微米的厚片时,旋转式切片机微调装置上仅仅有25个刻度,即25微米,则可采用“顺-逆-顺”旋     

介绍一种冷冻切片快速染色方法

制作优质的冷冻切片,以缩短染色时间、提高染色细胞的核浆清晰度最为重要。我们试将苏木精。伊红按比例配成混合液使整个染色过程在1min内完成,且不必经过盐酸乙醇分化,染色鲜艳而稳定,现介绍如下。1材料和方法1．1染液配制（1）冷冻固定液：85％乙醇85ml,4％甲醛10ml,冰醋酸5ml。（2）苏木精伊红混合染色液：沉淀酸化伊红Y乙醇应用液1份,哈雷苏木精液3份混合供染色用。1．2切片制作取手术新鲜组织置恒冷式切片机载物台上,－20℃冷冻后6μm切片,玻片附贴切片后即刻用冷冻固定液固定10S,水稍洗,滴加苏木精伊红混合染色液至液体覆…     

细胞色素氧化酶的DAB法与Nadi反应的比较

细胞色素氧化酶存在于细胞线粒体的内膜上 ,是电子传递链中的酶 ,它的活性往往作为细胞内氧化代谢的指标 ,也是线粒体的标志酶之一[1] 。早期常用经典的Ｎａｄｉ反应即吲哚酚蓝法显示细胞色素氧化酶 ,现在广泛使用ＤＡＢ法。这两种方法的特异性如何 ,有何优劣 ,未见有详细的报道 ,因此 ,我们进行了两种方法的比较研究。1　材料和方法选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠 1只 ,用乙醚麻醉后断头处死 ,取心、肝、肾组织用液氮骤冷 ,做恒冷箱切片 ,切片厚 7μｍ ,分别进行Ｎａｄｉ反应和ＤＡＢ法显示细胞色素氧化酶 ,并做对照切片 ,同时做ＨＥ染色以观察组织…