高效液相色谱法测定盐酸氟西汀胶囊含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定盐酸氟西汀胶囊的含量.方法:采用kromasil C18色谱柱(5μm,4.5mm×15mm)为分离柱;流动相为甲醇:0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(55:45);流速:1mL/min;检测波长:230nm;柱温:室温.结果:盐酸氟西汀在52.5mg/L～315mg/L浓度范围内线性良好(r=0.9994);方法平均回收率为99.66%(RSD=0.98%,n=5);5次测定的精密度0.16%～0.35%.结论:本方法操作简便、快速、准确、灵敏,适用于盐酸氟西汀胶囊的含量测定.     

RP-HPLC法测定马来酸氟吡汀胶囊的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定马来酸氟吡汀胶囊中马来酸氟吡汀含量的方法。方法采用phenomenexC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相组成为甲醇-水-甲酸(50∶50∶1),流速0.5mL.min-1,检测波长为347nm,进样量为20μL,。结果马来酸氟吡汀的浓度在36.36~84.84μg.mL-1范围内线性关系良好,相关系数r=1.0000。平均回收率为99.86%,RSD为0.74%。结论本法简便、快捷、准确,可用于马来酸氟吡汀胶囊中马来酸氟吡汀的含量测定。     

HPLC测定氟西汀血药浓度及其临床应用

目的建立并优化一种简单、快速、灵敏及高选择性测定氟西汀血药浓度的高效液相色谱法(HPLC),用于临床个体化给药监测。方法血浆样品用乙腈沉淀蛋白法处理。样品分离用Hypersil ODS2(5μm,4.6 mm×200 mm)色谱柱,流动相为乙腈-25 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH6.5)(34∶66),流速为1.2 ml/min;进样量为20μl,紫外检测波长227 nm。结果氟西汀的血浆浓度范围是0.5～50 ng/ml,r=0.996 9,低、中、高血浆质控样品日内RSD均小于8.06%,日间RSD均小于10.46%,方法平均回收率分别为91.7%,97.06%和100.75%。结论与已报道的氟西汀血药浓度测定方法相比,本方法血浆样品处理简单,重现性高,选择性好,更经济、污染少且能更好地保护色谱柱。     

反相高效液相色谱法测定体外人肝微粒体中氟西汀及其代谢产物去甲氟西汀

目的:建立同时测定体外肝微粒体中氟西汀及其代谢产物去甲氟西汀的反相高效液相色谱紫外检测法.方法:含微粒体蛋白和NADPH发生系统及氟西汀的孵育液加入冰乙腈酸终止反应后,再加入去甲替林作为内标并以 n-正己烷和乙腈的混合液进行萃取,然后以反相ODS柱分离,在226 nm处以紫外检测器进行检测.结果:孵育体系中没有明显的干扰峰出现,氟西汀和去甲氟西汀洗脱快,分离好,线性范围均为10-800μg/L,最低检测限均为5μg/L,相对回收率为94％-104％,变异系数少于9.1％.结论:本法快速,灵敏,回收率高,且萃取过程简单,可用于体外氟西汀的代谢研究.     

HPLC-荧光法同时测定人血浆中3种抗抑郁药的浓度

目的:建立以高效液相色谱-荧光法同时测定人血浆中文拉法辛、氟西汀、舍曲林浓度的方法。方法:以异丙嗪为内标,样品碱化后经液-液萃取,用Phenomenex-C18反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液(50mmol·L-1磷酸二氢钠用磷酸调节pH值至2.5)=35∶65,流速为1.2mL.min-1,柱温为40℃。荧光检测文拉法辛,激发波长为276nm,发射波长为598nm;紫外检测氟西汀和舍曲林,检测波长为200nm。结果:文拉法辛、氟西汀、舍曲林血药浓度分别在5～1000μg·L-1(r=0.9980)、40～1000μg·L-1(r=0.9990)、20～800μg·L-1(r=0.9980)范围内线性关系良好;日内、日间RSD均<10%,提取回收率均>70%,方法回收率均>90%。结论:本法简便、快速、灵敏、准确,可用于文拉法辛、氟西汀、舍曲林的治疗药物监测、中毒分析及药动学研究。     

HPLC手性固定相法测定血浆中氟西汀对映体的浓度

目的:建立以高效液相色谱手性固定相法测定血浆中氟西汀对映体浓度的方法。方法:采用Chirobiotic V手性色谱柱,流动相为甲醇-冰醋酸-三乙胺(100∶0.04∶0.04),检测波长为226nm,流速为1mL·min-1,内标为氯氮平。结果:R-去甲氟西汀和S-去甲氟西汀对氟西汀对映体和内标的分离没有干扰。R-氟西汀、S-氟西汀检测浓度分别在8.1~432(r=0.9998)、10.8~432(r=0.9992)ng·mL-1范围内线性关系良好;其相对回收率分别为97.2%~101.9%和98.7%~102.2%,日内RSD分别为2.6%~5.3%和2.1%~6.7%,日间RSD分别为7.7%~8.9%和8.0%~10.6%。结论:本试验所建立的方法简便、可靠、灵敏度高,可用于血浆中R-氟西汀和S-氟西汀的血药浓度测定及对映体的药动学研究。     

氟西汀对阿尔茨海默病模型小鼠的神经元保护作用

目的:研究氟西汀对老年APP/PS1双重转基因阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响及对神经元的保护作用.方法:实验分为动物实验和细胞实验.动物实验中取APP/PS1双重转基因小鼠随机分为氟西汀组(n=8)和生理盐水组(n=8),另取C57同窝生同月龄正常小鼠10只为对照组.氟西汀组小鼠给予氟西汀(10 mg/kg)腹腔注射,生理盐水组及对照组注射等量生理盐水1次/d,持续8周.Morris水迷宫实验进行行为学检测.Tunel染色检测海马区神经元凋亡.细胞实验中将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)培养48 h后分为正常组、Aβ组、氟西汀组和氟西汀+Aβ组,后3组分别在含10μmol/L β-淀粉样蛋白、100 nmol/L氟西汀和100 nmol/L氟西汀+10μmol/L β-淀粉样蛋白的DMEM中继续培养48 h.行原位细胞凋亡染色检测各组细胞凋亡.结果:水迷宫定位航行实验中,氟西汀组小鼠较生理盐水组相比平均潜伏期明显缩短(P＜0.01);空间探索实验中跨越平台次数增加(P＜0.01);海马区凋亡神经元数量减少(P＜0.01).细胞实验中,氟西汀组和氟西汀+Aβ组与Aβ组相比,凋亡细胞数量明显减少(P＜0.01).结论:氟西汀对神经元细胞有保护作用,能减少神经元的凋亡,长期服用氟西汀能显著改善APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆力能力.     

HPLC测定盐酸氟西汀胶囊的含量

目的建立测定盐酸氟西汀胶囊含量的方法。方法采用高效液相色谱法,以辛烷基硅烷键合硅胶为固定相,1.0%三乙胺(用磷酸调pH6.0)-四氢呋喃-甲醇(40∶40∶20)为流动相,检测波长227nm,测定盐酸氟西汀的含量。结果盐酸氟西汀在70～130μg/ml浓度范围内有良好的线性关系(r=0.9997),回收率为98.85%(RSD=0.64%)。结论本法测定盐酸氟西汀胶囊的含量,结果准确,可行。     

反相高效液相色谱法测定长春西汀注射液的含量

目的建立测定长春西汀注射液中长春西汀含量的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-13 mmol/L碳酸铵水溶液-四氢呋喃(100∶16∶5),流速为1.0 mL/min,检测波长为274 nm。结果长春西汀检测质量浓度在0.2～1.0 g/L范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8);平均回收率为99.35%,RSD=0.76%(n=9)。结论该方法简便、准确、重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC测定人血清中氟西汀的浓度

建立了高效液相色谱法测定人血清中氟西汀的分析方法。用岛津LC-6A型高效液相色谱仪,色谱柱为ZorbaxODS(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为:甲醇-水-1 mol/L醋酸铵-5 mol/L氨水(850:150:10:3);检测波长为265 nm;流量为0.81 ml/min;柱温40℃;灵敏度0.005AUFS;纸速2 mm/min。线性范围为100～2500 ng/ml(r=0.9984),检测限为20 ng/ml。平均回收率为(96.21±2.93)％。日内平均相对偏差为3.1％(n=15),日间平均相对偏差为4.5％(n=5)。     

Single pump column switching technique employing a flow gradient and wavelength programmed fluorescence for simultaneous monitoring of serotonin,fluoxetine and norfluoxetine in rat brain microdialysate

A single pump column switching technique with multidimensional chromatography, flow gradient and wavelength programmed fluorescence detection was developed for simultaneous quantitation of serotonin, fluoxetine and norfluoxetine in rat brain microdialysate. The column switching was configured such that position I of the switching valve employed column 1 (50 mm length) and column II (250 mm length) in series. This configuration resulted in optimal resolution of serotonin from interfering neurochemicals from rat brain. After elution of serotonin at 13.2 min the valve was switched to position II in which the flow of the mobile phase was directed through column I only. Flow gradient programming was then used to ramp the flow rate from 0.1 to 0.4 ml min⁻¹ which resulted in optimal elution of fluoxetine and norfluoxetine. Strategic optimization of the single mobile phase enabled use of a single pump and detector making the analytical system simple and cost effective. Wavelength programmed fluorescence enabled sensitive detection of the analytes despite the difference in their fluorescence spectrum. The limit of detection for serotonin, norfluoxetine and fluoxetine were 10, 612 and 523 fmol, respectively. Rat brain microdialysate samples demonstrated selectivity for serotonin, fluoxetine and norfluoxetine. The method demonstrates application to the study of site specific neuropharmacokinetics and neuropharmacodynamics of fluoxetine in vivo.     

Determination of donepezil hydrochloride in human and rat plasma, blood and brain microdialysates by HPLC with a short C30 column

A simple and sensitive HPLC method with fluorescence (FL) detection for determination of donepezil (DP) in plasma and microdialysate samples was developed. A rapid isocratic separation of DP could be achieved by a short C30 column using mobile phases of 25 mM citric acid/50 mM Na2HPO4 (pH 6.0)-CH3CN (73:27%, v/v) containing 3.5 mM sodium 1-octanesulfonate for plasma and H2O-CH3CN-CH3OH (80:17:3%, v/v/v) containing 0.01% acetic acid for microdialysate. The eluate was monitored at 390 nm with an excitation at 325 nm. The detection limits (S/N = 3) of DP for human plasma, rat plasma and rat brain or blood microdialysates were 0.2, 1.0 and 2.1 ng/ml, respectively. Reproducible results could be obtained by using (+/-)-2-[(1-benzyl-piperidine-4-yl)ethyl]-5,6-dimethoxyindan-1-one hydrochloride as an internal standard (IS). The method was successfully applied for monitoring of DP levels in rat plasma, blood and brain microdialysates and patient plasma.     

高效液相色谱法测定小儿化痰止咳片中盐酸麻黄碱的含量

目的建立以高效液相色谱法测定小儿化痰止咳片中盐酸麻黄碱含量的方法。方法色谱柱为C18,流动相为0·01mol/L磷酸二氢钾-甲醇(76∶24),流速为1·0ml/min,柱温为室温,检测波长为210nm。结果盐酸麻黄碱进样量在0·05μg～0·50μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0·9998),平均加样回收率为100·54%(RSD=1·20%)。结论本方法简便、重现性好,可用于小儿化痰止咳片的质量控制。     

高效液相色谱法测定人血浆中阿糖胞苷的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中阿糖胞苷浓度的方法。方法:色谱柱为Zorbax C18,检测波长为280nm,流动相为0·01mol/L磷酸盐(pH=7·0)-乙腈(95∶5),流速为1·0ml/min。结果:阿糖胞苷血药浓度在0·05~20μg/ml(r=0·9999)范围内线性关系良好,最低检测浓度为2ng/ml,方法回收率为98·3%~103·2%,日内、日间相对标准差分别为2·8%、3·6%。结论:本方法简单、快速、准确,适用于阿糖胞苷临床血药浓度监测和药动学研究。     

高效液相色谱法测定心脉神胶囊中大黄素含量

目的建立测定心脉神胶囊中大黄素含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为Hypersil ODS柱（150mm×4．6mm,10μm）,流动相为甲醇-0．02mol／L磷酸（75：25）,检测波长438nm,流速1．2mL／min。结果大黄素质量浓度在0．0022～0．0110g／L范围内与峰面积值呈良好的线性关系,线性回归方程为A=33111090．9C＋396．4,r=0．9998,平均回收率为100．35％,RSD为0．96％。结论HPLC法适用于心脉神胶囊中大黄素的含量测定。     

Therapeutic drug monitoring of haloperidol, perphenazine, and zuclopenthixol in serum by a fully automated sequential solid phase extraction followed by high-performance liquid chromatography

In Denmark, haloperidol, perphenazine, and zuclopenthixol are among the most frequently requested antipsychotics for therapeutic drug monitoring. With the number of requests made at the authors' laboratory, the only rational analysis is one that can measure all three drugs simultaneously. The authors therefore decided to develop an automated high-performance liquid chromatography (HPLC) method. Two milliliters serum, 2.0 mL 10 mmol/L sodium phosphate buffer (pH 5.5), and 150 microL internal standard (trifluoperazine) solution were pipetted into HPLC vials and extracted on an ASPEC XL equipped with 1 mL (50 mg) Isolute C2 (EC) extraction columns and acetonitrile-methanol-ammonium acetate buffer (60:34:6) as extracting solution. Three hundred fifty microliters was analyzed by HPLC; a 150 x 4.6-mm S5CN Spherisorb column with a mobile phase of 10 mmol/L ammonium acetate buffer-methanol (1:9), a flow rate of 0.6-1.7 mL/min, and ultraviolet detection at 256 and 245 nm were used. Reproducibility was 5-12% and the lower limit of quantitation was 10, 1, and 5 nmol/L (4, 0.4, and 2 ng/mL) for haloperidol, perphenazine, and zuclopenthixol, respectively. The method was found to be sufficiently selective and robust for routine analysis.     

高效液相色谱荧光法测定加替沙星注射液的含量

目的　建立高效液相色谱荧光法测定加替沙星注射液的含量方法。方法　CLC ODS柱 (15mm× 6.0mm ,5 μm ) ,流动相 :0 .0 5mol/L枸橼酸 乙腈 (80∶2 0 ) ,三乙胺调 pH3 .0 ,流速 1mL·min-1,Ex =3 60nm ,Em =465nm ,样品稀释 10 0 0倍 ,进样10 μL。 结果　加替沙星在 4～ 3 2ng范围内线性关系良好 ,回收率 (99.98± 0 .0 6) % ,日内、日间RSD <2 %。 结论　该法简便、快速、准确 ,可用于测定加替沙星注射液的含量。     

高效液相色谱法同时测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因含量的方法。方法:色谱柱phenomenexlunaC18,流动相为甲醇-水(24∶76),流速为1.0ml/min,柱温为室温,检测波长为215nm,灵敏度为0.01AUFS。结果:对乙酰氨基酚、咖啡因检测浓度分别在50～250μg/ml(r=0.9999)、5.0～25μg/ml(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.7%(RSD=1.8%)、101.4%(RSD=1.4%)。结论:本方法简便、快速、准确,可取代滴定法测定本品含量。     

高效液相色谱法测定肝泰胶囊中水飞蓟宾的含量

目的建立以高效液相色谱法测定肝泰胶囊中水飞蓟宾含量的方法。方法色谱柱为DiamonsilC18,流动相为磷酸二氢钾-甲醇(45∶55),流速为1·0ml/min,检测波长为288nm,内标为山奈酚,柱温为(25±2)℃,进样量为20μl。结果水飞蓟宾检测浓度在0·126～1·26mg/ml范围内线性关系良好(r=0·9998),平均加样回收率为102·9%(RSD=1·50%)。结论本方法简便、准确、重现性好,可用于本品的含量测定。     

柱前手性衍生化-HPLC法测定人血浆和尿液中D-谷氨酸和D-丝氨酸的浓度

目的:建立手性分离D-谷氨酸和D-丝氨酸的方法,测定人血浆和尿液中D-谷氨酸和D-丝氨酸的浓度。方法:12对极性氨基酸标准液混合后,加入衍生化试剂邻苯二甲醛、N-乙酰-L-半胱氨酸衍生化后,采用高效液相色谱法进样测定。色谱柱为大连依利特HypersilC18,流动相为甲醇-50mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH6.0),梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,柱温为室温,进样量为20μL,荧光检测波长为350nm(激发波长)、450nm(发射波长)。结果:D-谷氨酸、D-丝氨酸检测浓度分别在0.5～20、0.5～80nmol·L-1范围内线性关系良好,平均方法回收率分别为96.4%～103.6%、97.1%～100.5%,日内、日间RSD均<8%。测得正常人血浆中D-谷氨酸和D-丝氨酸平均含量分别为(2.43±0.37)、(1.07±0.11)nmol·mL-1,尿样中未能检测到2种D型氨基酸。结论:本研究建立的手性分离测定D-谷氨酸和D-丝氨酸的分析方法可行,可用于测定人血浆和尿液中二者的浓度。