氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的:研究氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响,探讨其抗肝纤维化的机理。方法:用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞,并以MTT比色法观察氧化苦参碱对肝星状细胞增殖的效应。结果:氧化苦参碱可影响肝星状细胞的增殖,氧化苦参碱浓度在0.5～16μg/ml时对肝星状细胞增殖有抑制作用(P<0.01)。结论:氧化苦参碱可抑制肝星状细胞增殖,有抗肝纤维化的作用。     

氧化苦参碱与国产α1 b-和α 2b-干扰素对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的抑制作用

目的研究氧化苦参碱与国产α 1b-和α 2b-干扰素对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的影响,为应用氧化苦参碱防治肝纤维化提供理论依据.方法分离、培养大鼠肝星状细胞,采用MTT法和3H-脯氨酸掺人法分别测定细胞增殖和胶原合成.结果氧化苦参碱在55ug～500ug/mL,两种α-干扰素在500U-10 000U/mL浓度范围内能呈剂量依赖性抑制星状细胞的增殖和胶原合成,提高药物浓度则形成作用平台.结论氧化苦参碱与α-干扰素在体外均具有抑制大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的作用,这对防治肝纤维化可能有一定的临床应用价值.     

氧化苦参碱与国产αlb—和α2b—干扰素对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的抑制作用

目的 研究氧化苦参碱与国产αlb-和α2b-干扰素对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的影响。为应用氧化苦参碱防治肝纤维化提供理论依据。方法 分离、培养大鼠肝星状细胞，采用MTT法和^3H-脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和胶原合成。结果 氧化苦参碱在5μg-500μg/mL，两种α-干扰素在500U-10000U/mL浓度范围内能呈剂量依赖性抑制星状细胞的增殖和胶原合成，提高药物浓度则形成作用平台。结论 氧化苦参碱与α-干扰素在体外均具有抑制大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的作用，这对防治肝纤维化可能有一定的临床应用价值。     

氧化苦参碱与国产α1b-和α2b-干扰素对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的抑制作用( 英文)

目的　研究氧化苦参碱与国产α 1b -和α 2b -干扰素对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的影响 ,为应用氧化苦参碱防治肝纤维化提供理论依据。方法　分离、培养大鼠肝星状细胞 ,采用MTT法和3 H -脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和胶原合成。结果　氧化苦参碱在 5 μg～ 5 0 0 μg/mL ,两种α -干扰素在 5 0 0U -10 0 0 0U/mL浓度范围内能呈剂量依赖性抑制星状细胞的增殖和胶原合成 ,提高药物浓度则形成作用平台。结论　氧化苦参碱与α -干扰素在体外均具有抑制大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的作用 ,这对防治肝纤维化可能有一定的临床应用价值     

氧化苦参碱对大鼠星状细胞增殖和胶原合成的抑制作用

研究氧化苦参碱对大鼠星状细胞增殖和胶原合成的影响 ,为应用氧化苦参碱防治肝纤维化提供理论依据。分离、培养大鼠星状细胞 ,采用ＭＴＴ法和3Ｈ 脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和胶原合成。结果表明 ,氧化苦参碱在 5μｇ～ 50 0 μｇ/ｍｌ浓度范围内能呈剂量依赖性抑制星状细胞的增殖和胶原合成 ,提高药物浓度则形成作用平台。氧化苦参碱在体外具有抑制大鼠星状细胞增殖和胶原合成的作用 ,这对防治肝纤维化可能有一定的临床应用价值。氧化苦参碱对大鼠星状细胞增殖和胶原合成的抑制作用@陈从新!230031$合肥解放军第一○五医院感染科 @刘…     

氧化苦参碱预防半乳糖胺诱导的大鼠肝纤维化的实验研究

目的　观察氧化苦参碱预防大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机制。方法　采用半乳糖胺诱导的大鼠肝纤维化模型 ,观察氧化苦参碱 ( 30mg/kg、90mg/kg)干预前后肝指数、血及肝组织生化、羟脯氨酸含量、TGFβ1mRNA表达水平、电镜及病理组织学改变。结果　氧化苦参碱预防组较模型组ALT、AST下降 ,肝组织羟脯氨酸含量及TGFβ1表达水平降低 (P <0 .0 1) ;预防组肝组织内SOD、GST PX较模型组升高 ,而MDA低于模型组 ;电镜显示肝细胞损伤减轻 ,病理组织学明显改善。免疫组化显示预防组desmin及α SMA的表达明显低于模型组。结论　氧化苦参碱对半乳糖胺诱导的肝纤维化有预防作用 ,其机制为通过抗脂质过氧化而保护肝细胞、抑制肝星状细胞活化 ,从而抑制纤维生成。     

氧化苦参碱预防肝纤维化的实验研究

目的　观察氧化苦参碱预防大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机制。方法　建立半乳糖胺和二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型 ,观察氧化苦参碱 (3 0mg/kg、90mg/kg)预防前后肝指数、血及肝组织生化、羟脯氨酸含量、TGFβ1mRNA表达、电镜及病理组织学改变。结果　氧化苦参碱预防组较模型组肝功能改善、肝组织羟脯氨酸含量及TGFβ1表达水平降低 (P <0 .0 1) ;预防组肝组织内SOD、GST PX较模型组升高 ,而MDA低于模型组 ;电镜显示肝细胞损伤减轻 ,病理组织学明显改善。结论　氧化苦参碱对半乳糖胺及二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化均有预防作用 ,其主要机制为抗脂质过氧化、保护肝细胞和抑制肝星状细胞活化 ,从而抑制纤维生成等     

氧化苦参碱对大鼠贮脂细胞增殖和胶原合成的抑制作用

目的 研究氧化苦参碱对大鼠贮脂细胞增殖和胶原合成的影响。为应用氧化苦参碱防治肝纤维化提供理论依据。方法 分离、培养大鼠贮脂细胞，采用甲基噻唑基四唑蓝（ＭＴＴ）法和＾３Ｈ－脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和交原合成。结果 氧化苦参碱在５ｕｇ～５００ｕｇ／ｍｌ浓度范围内能呈剂量依赖性抑制贮脂细胞的增殖和胶原合成，提高药物浓度则形成作用平台。结论 氧化苦参碱在体外具有抑制大鼠贮脂细胞增殖和胶原合成的作用。这对防治肝纤维化可能有一定的临床应用价值。     

剔毒护肝方药物血清对大鼠肝星状细胞产生Ⅰ型胶原及转化生长因子β1的影响

目的：根据剔毒护肝方抗肝纤维化的主要作用机理。方法：分离正常大鼠肝星状细胞、并传代培养。用剔毒护肝方给正常大鼠灌胃,制备药物血清,温育培养细胞。用^3H-TdR掺入法和MTT比色法观察细胞增殖,ELISA法测定上清液中Ⅰ型胶原含量,貂肺上皮细胞生长抑帛MTTI地检测培养上清液中的转化生长因子β1活性。结果：剔毒护肝方药物血清能显著4抑制肝星状细胞增殖,并能抑制肝星状细胞生成Ⅰ型胶原及产生转化生长因子β1。结论：剔毒护肝方能抑制肝星状细胞增殖和分泌转化生长因子β1,养活胶原生成,从而减弱肝星状细胞的自分泌放大效应。这可能是剔毒护肝方抗肝纤维化作用的主要机制之一。     

扶正化瘀方及其拆方对肝星状细胞活化的影响

目的:观察扶正化瘀方抗肝纤维化的不同药物配伍的药效作用。方法:分离培养大鼠肝星状细胞,将扶正化瘀方拆方为扶正、化瘀、丹参、虫草、丹参 虫草等组,制备其大鼠药物血清,温育星状细胞。~3H-TdR掺入法测定细胞增殖,ELISA法测定细胞上清Ⅰ型胶原含量,并测定细胞层总蛋白含量以校正胶原含量。RT-PCR法观察前胶原α_2(1)mRNA的表达。结果:全方组及各拆方组对星状细胞的增殖、胶原蛋白分泌及α_2(Ⅰ)前胶原mRNA表达均有不同程度的抑制作用。化瘀组对细胞增殖抑制作用最强,扶正组对胶原生成及基因表达抑制作用最强,而全方组介于两者之间。结论:扶正化瘀方及各拆方对星状细胞的活化功能有不同的作用影响,全方组有整体优势,其抗肝纤维化的主要作用机理可能在于抑制星状细胞的活化。     

益气活血方药抗大鼠肝纤维化作用的实验研究

目的:研究益气活血方药抗大鼠实验性肝纤维化的效应及作用机制。方法:60只雄性Wistar大鼠被分为6组(正常对照组、阴性药对照组、阳性药对照组、大剂量组、中剂量组、小剂量组),猪血清腹腔注射复制动物模型,用益气活血药物治疗7W后,处死动物,取材。Mallory染色,经图像分析仪处理,观察肝脏胶原纤维生成量。分离鼠肝星状细胞(HSC),体外培养,用内毒素(lipopolysaccharide,LPS)刺激其增殖,MTT法测定细胞增殖及含药血清对其增殖的抑制作用。结果:益气活血药物有明显的抗肝纤维化作用。小剂量组肝胶原纤维量明显低于阴性药对照组(P<0.01),与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。含药血清明显抑制LPS激活的体外培养的鼠HSC增殖(P<0.01)。结论:益气活血方药具有明显抗实验性肝纤维化的效应,其作用机制之一是抑制HSC的增殖。     

大鼠纤维化肝组织中PTEN的动态表达及其与肝星状细胞增殖和活化的关系

目的 探讨第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)在大鼠纤维化肝组织中的动态表达及其对在体肝星状细胞(HSC)活化、增殖的影响. 方法 采用胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型;应用免疫组织化学染色、Western blot和实时荧光定量PCR技术测定大鼠肝组织中PTEN的表达;应用免疫荧光双标记共聚焦激光扫描显微术测定大鼠肝组织中活化HSC的PTEN表达;采用免疫组织化学染色检测大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白的表达.结果 免疫组织化学染色显示正常大鼠肝组织中PTEN有广泛表达,主要表达于细胞质,随着肝纤维化的发展,PTEN表达逐渐减少(P<0.01),而α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞明显增多(P<0.01);造模1、2、3周及4周不同时间大鼠纤维化肝组织中PTEN的mRNA(分别为假手术组的0.66、0.53、0.44和0.37)及蛋白质表达(吸光度比值分别为1.20±0.13,1.07±0.16,0.88±0.08,0.73±0.07)均低于假手术组(P<0.01),并随着肝纤维化的进展逐渐降低(P<0.01);免疫荧光双标记共聚焦激光扫描显微术显示PTEN在活化HSC广泛表达,主要表达于细胞质,随着肝纤维化的进展,表达PTEN的活化HSC占总的活化HSC的比例逐渐减少(P<0.01). 结论 大鼠纤维化肝组织中PTEN的mRNA及蛋白质表达均下调;在体HSC的PTEN表达亦降低;肝组织中PTEN的动态表达与HSC的活化、增殖呈显著负相关.     

Study on the role of free fatty acids in proliferation of rat hepatic stellate cells (II)

AIM:To study the role of free fatty acids (arachidonic acid and linoleic acid) in proliferation of rat hepatic stellate cells (HSC).METHODS:HSC were isolated and cultured from liver of Wistar rats by in situ perfusion with pronase and collagenase, and density gradient centrifugation with Nycodenz.MTT colorimetric assay was detected for HSC proliferation.RESULTS:Arachidonic acid and linoleic acid had an effect on proliferation of HSC. 25mg/L of arachidonic acid promoted HSC proliferation (P < 0.01), but 50 and 100mg/L had an inhibitory effect on HSC (P < 0.01),and showed cytotoxity on HSC under inverted microscope; 6.25, 12.5, 25ug/ml of linoleic acid had no effect on HSC proliferation (P > 0.05), but with concentration increasing, 50 and 100mg/L of linoleic acid might promote HSC proliferation (P < 0.05 or 0.01 ).CONCLUSION:Arachidonic acid and linoleic acid may promote HSC proliferation, but increased concentration can have cytotoxity on HSC. Arachidonic acid and linoleic acid might be associated with fatty liver and hepatic fibrogenesis by lipid peroxidation.     

花生四烯酸和亚油酸对肝星状细胞增殖的影响

目的探讨花生四烯酸和亚油酸对大鼠肝星状细胞（ＨＳＣ）增殖的影响．方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞,并以ＭＴＴ比色法观察花生四烯酸和亚油酸对ＨＳＣ增殖效应．结果花生四烯酸和亚油酸可影响ＨＳＣ的增殖．花生四烯酸２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ有增殖作用（Ｐ＜００１）,而５０,１００ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖有抑制作用（Ｐ＜００１）,倒置显微镜观察可见ＨＳＣ增殖非常缓慢,ＨＳＣ细胞轮廓非常明显,胞质粗糙,内有颗粒沉积,１２５,６２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖无影响．亚油酸６２５,１２５,２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖无明显影响（Ｐ＞００５）,但随着浓度增大,５０,１００ｍｇ／Ｌ则促进ＨＳＣ增殖（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）．结论花生四烯酸和亚油酸在一定浓度下可促进肝星状细胞增殖,高浓度对ＨＳＣ有毒性作用,其可能通过脂质过氧化作用而与脂肪肝肝纤维化的发生有关     

大鼠急性CCl_4损伤肝库普弗细胞对肝星状细胞增殖和Ⅰ型胶原分泌的影响

通过细胞体外培养观察急性CCl4 肝损伤的大鼠肝库普弗细胞对正常肝星状细胞的激活作用。方法　以 5 0 ?l4 橄榄油一次灌胃复制大鼠急性肝损伤模型 ,分离模型大鼠肝库普弗细胞并原代培养 ,收集条件培养液 ,以其温育正常大鼠分离的原代培养肝星状细胞 ,二苯基四氮唑溴盐 (MTT)法测定细胞增殖 ,ELISA法测定Ⅰ型胶原分泌。结果　损伤肝库普弗细胞条件培养液可显著促进肝星状细胞的增殖及Ⅰ型胶原分泌 ,并具一定量效、时效关系 ;还可促进星状细胞表型向肌成纤维样细胞转化 ,而正常大鼠分离的肝库普弗细胞则无明显作用。结论　肝损伤时库普弗细胞对肝星状细胞的活化有多方面旁分泌激活作用     

龙血素B对肝星状细胞增殖及细胞外基质分泌的影响

目的观察龙血素B对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及细胞外基质分泌的影响。方法用不同浓度的龙血素B处理大鼠HSC;MTT法计算药物的抑制率;放射免疫法测定细胞上清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)。结果随药物浓度的升高,龙血素B对HSC-T6增殖的抑制作用逐渐增强,有明显的量效关系。细胞上清中HA、LN和Ⅳ-C的含量与对照组相比降低,其中龙血素B浓度为0.300μg/μL时降低最明显。结论龙血素B可抑制HSC-T6增殖,并不同程度抑制HA、LN和Ⅳ-C的分泌。     

Role of free fatty acids in proliferation of rat hepatic stellate cells(Ⅱ)

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＡｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅｒｏｌｅｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｉｎｆａｔｙａｃｉｄｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｔｒａｎｓｐｏｒｔｈａｖｅｂｅｅｎｄｉｓｃｕｓｅｄｉｎｔｅｎｓｉｖｅｌｙ，ｆｅｗｏｆｔｈａｔｏｆＨＳＣｗａｓｒｅｐｏｒｔｅ...     

脂质刺激的Kupffer细胞对肝星状细胞增殖的影响

目的 探讨甘油三酯和极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及其刺激的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞对大鼠肝星状细胞（ＨＳＣ）增殖的影响。方法 用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ和Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞,制备甘油三酯和ＶＬＤＬ刺激的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞培养的上清液（ＫＤＣＭ）,并以ＭＴＴ法观察甘油三酯和ＶＬＤＬ及ＫＣＣＭ对ＨＳＣ增殖效应。结果 甘油三酯和ＶＬＤＬ浓度分别在１２．５ｍｇ／Ｌ和２     

Effect of lipid on proliferation and activation of rat hepatic stellate cells (Ⅰ)

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＤｅｓｐｉｔｅｔｈｅｅａｒｌｙｃｏｎｔｒｏｖｅｒｓｙｏｖｅｒｔｈｅｐｒｉｍａｒｙｃｅｌｕｌａｒｓｏｕｒｃｅｏｆｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ,ｃｏｍｐｅｌｉｎｇｉｎｖｉｔｒｏ...